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FokI rs2228570和Tmprss6 rs855791多态性与儿童牛奶蛋白过敏的相关性

中国当代儿科杂志 2018年第8期20卷 641-646页

作者：张也郭勇马健吕栩再罗先琼广州医科大学附属广东省妇幼保健院广东广州511400

目的探讨维生素D受体(VDR)基因FokI rs2228570及Tmprss6 rs855791基因多态性与儿童牛奶蛋白过敏(CMPA)的关系。方法应用实时荧光定量PCR检测100例CMPA儿童及100例健康儿童(对照组)VDR基因FokI rs2228570和Tmprss6 rs855791单核苷酸多态... 详细信息

目的探讨维生素D受体(VDR)基因FokI rs2228570及Tmprss6 rs855791基因多态性与儿童牛奶蛋白过敏(CMPA)的关系。方法应用实时荧光定量PCR检测100例CMPA儿童及100例健康儿童(对照组)VDR基因FokI rs2228570和Tmprss6 rs855791单核苷酸多态性。使用多因素logistic回归模型评估CMPA发生的危险因素。结果 CMPA组与对照组Tmprss6 rs855791基因型CC、CT、TT分布频率差异有统计学意义(P=0.008),CMPA组的TT基因型占优势。多因素logistic回归分析提示rs855791 TT基因型的儿童发生CMPA的风险增加(OR=3.473,P=0.011)。而VDR基因FokI rs2228570基因型分布在两组儿童间的差异无统计学意义(P=0.686)。结论 Tmprss6 rs855791多态性与儿童CMPA的发生有关联,TT基因型可能为儿童CMPA的易感基因型,而VDR基因FokI rs2228570多态性与儿童CMPA无关联。

关键词：牛奶蛋白过敏 FokI rs2228570 Tmprss6 rs855791 单核苷酸多态性儿童

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Tmprss6基因对小鼠放射性肠损伤的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2021年第9期41卷 1175-1182页

作者：毛久昂翁震钮晓音何杨王振欣苏州大学附属第一医院肿瘤科苏州215006 苏州大学血液和血管疾病诊疗药物技术教育部工程研究中心苏州215123 上海交通大学医学院上海市免疫学研究所上海200025 江苏省血液研究所苏州大学附属第一医院苏州215006

目的·观察Tmprss6基因对小鼠放射性肠损伤的影响。方法·将7~8周龄雄性野生型(WT)小鼠和Tmprss6基因敲除(Tmprss6^(−/−))小鼠各自随机分成未辐照组以及辐照后6 h、24 h、3.5 d和7 d组。其中,辐照组采用11.5 Gy X射线全腹部照射,建立放... 详细信息

目的·观察Tmprss6基因对小鼠放射性肠损伤的影响。方法·将7~8周龄雄性野生型(WT)小鼠和Tmprss6基因敲除(Tmprss6^(−/−))小鼠各自随机分成未辐照组以及辐照后6 h、24 h、3.5 d和7 d组。其中,辐照组采用11.5 Gy X射线全腹部照射,建立放射肠损伤模型。通过TUNEL染色观察辐照后6、24 h不同肠段隐窝细胞凋亡情况;通过苏木精-伊红染色观察辐照后3.5 d不同肠段病理损伤情况;测量不同肠段辐照前和辐照后3.5、7 d的铁含量,以及抗氧化指标包括超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)和丙二醛(malondialdehyde,MDA),并对铁含量与各项抗氧化指标进行相关性分析。结果·在辐照后3.5 d,Tmprss6^(−/−)和WT小鼠十二指肠绒毛长度均缩短,平均每毫米横截面隐窝计数均减少;Tmprss6^(−/−)小鼠的十二指肠绒毛长度和隐窝计数低于WT小鼠(均P6、24 h,Tmprss6^(−/−)小鼠十二指肠段每隐窝TUNEL染色阳性细胞数相较于WT小鼠均显著增多(均PTmprss6^(−/−)小鼠绒毛长度和隐窝计数显著增加,TUNEL染色阳性细胞数显著减少(均PTmprss6^(−/−)小鼠十二指肠部位铁含量在辐照后7 d,相较于辐照前均显著升高(均PTmprss6^(−/−)小鼠辐照前后的十二指肠铁含量均显著高于同时间点的WT小鼠(均PTmprss6^(−/−)小鼠辐照后回肠段铁含量较辐照前均升高,其中WT小鼠辐照后3.5 d与辐照前的差异有统计学意义,Tmprss6^(−/−)小鼠辐照后7 d与辐照前的差异有统计学意义(均PTmprss6^(−/−)小鼠十二指肠部位SOD、GSH、T-AOC含量均较WT小鼠低,而MDA含量较高;但只有在辐照后3.5 d的差异具有统计学意义(均PTmprss6^(−/−)小鼠回肠部位SOD、GSH、T-AOC含量较WT小鼠高,而MDA含量则较低;但T-AOC、GSH、MDA含量在辐照后3.5 d的差异才具有统计学意义(均P639,r=−0.710,均P658,r=−0.726,均PTmprss6^(−/−)小鼠十二指肠段MDA、SOD和T-AOC水平与其铁含量相关(r=−0.606,r=0.771,r=−0.712,均PTmprss6基因敲除小鼠表现为十二指肠铁累积和辐照诱导的氧化应激加剧;Tmprss6基因缺失在十二指肠放射损伤中具有增敏作用。

关键词： Tmprss6 放射性肠损伤铁代谢氧化应激

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山西省吕梁地区孕妇人群Tmprss6基因多态性与血清铁蛋白和可溶性转铁蛋白受体水平的相关性

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卫生研究 2018年第6期47卷 883-889页

作者：朴玮包怡华张霆王珍黄建霍军生吕岩玉王理王俊中国疾病预防控制中心营养与健康所国家卫生健康委员会微量元素营养重点实验室北京100050 首都儿科研究所深圳市慢性病防治中心

目的分析Tmprss6基因多态性与孕妇人群血清铁蛋白(SF)和可溶性转铁蛋白受体(s TfR)之间的关系。方法采用整群随机抽样的方法,于2014年在山西吕梁地区选取孕期妇女807名。使用免疫比浊法检测研究对象的SF和s TfR的浓度,并分别按照SF 4. ... 详细信息

目的分析Tmprss6基因多态性与孕妇人群血清铁蛋白(SF)和可溶性转铁蛋白受体(s TfR)之间的关系。方法采用整群随机抽样的方法,于2014年在山西吕梁地区选取孕期妇女807名。使用免疫比浊法检测研究对象的SF和s TfR的浓度,并分别按照SF 4. 4 mg/L的标准对研究对象进行铁缺乏(ID)的判定。使用Sequenom MassArray系统对样本的rs11704654、rs1421312、rs2111833、rs2235321、rs2543519、rs4820268和rs855791位点进行分型检测。结果rs2111833的各基因型之间Ln SF水平的差异有统计学意义(F=3. 57,P=0. 0287),其中T等位基因携带者人群的Ln SF水平低于CC纯合子携带者人群(t=2. 03,P=0. 0429); rs855791的A等位基因携带者Ln SF水平低于GG纯合子携带者人群(t=1. 97,P=0. 0490)。rs11704654中T等位基因携带者人群SF 6,P=0. 0330); rs2111833中T等位基因携带者人群SF 6431,P=0. 0312);rs855791中GG纯合子携带者人群SF 63)。三个位点经过Logistic分析,并用年龄和孕周进行调整后,rs11704654(T)和rs855791(A)与SF 654的T等位基因携带者人群Ln s TfR水平高于CC纯合子携带者人群(t=-2. 012,P=0. 024); rs2543519的G等位基因携带者人群Ln s TfR水平高于AA纯合子携带者人群(t=-1. 954,P=0. 011)。结论在孕妇人群中,Tmprss6基因的多态性与SF和s TfR水平存在关联。

关键词： Tmprss6 单核苷酸多态性血清铁蛋白可溶性转铁蛋白受体铁缺乏

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肠道铁水平在放射性肠损伤中的作用及去铁铵对结肠癌细胞的放疗增敏机制初探

肠道铁水平在放射性肠损伤中的作用及去铁铵对结肠癌细胞的放疗增...

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作者：毛久昂苏州大学

学位级别：硕士

第一部分Tmprss6基因敲除在放射性肠损伤中的作用研究目的:研究Tmprss6基因对小鼠放射性肠损伤的影响并探索可能的机制。方法:7-8周龄雄性野生型（WT）小鼠和Tmprss6基因敲除（KO）小鼠随机分成非辐照组和辐照组,其中辐照组采用11.5 Gy... 详细信息

第一部分Tmprss6基因敲除在放射性肠损伤中的作用研究目的:研究Tmprss6基因对小鼠放射性肠损伤的影响并探索可能的机制。方法:7-8周龄雄性野生型（WT）小鼠和Tmprss6基因敲除（KO）小鼠随机分成非辐照组和辐照组,其中辐照组采用11.5 GyX射线全腹部照射建立放射肠损伤模型。H＆E染色和TUNEL染色分别观察不同肠段病理损伤和凋亡情况。测量不同肠段辐照前后铁、SOD、GSH、T-AOC和MDA含量,并进行相关性分析。结果:Tmprss6-/-小鼠相较于WT小鼠全腹辐照后十二指肠部位损伤和凋亡加重,表现为Tmprss6-/-小鼠的十二指肠绒毛长度和隐窝计数显著下降,TUNEL+细胞数显著增加,差异有统计学意义。WT和Tmprss6-/-小鼠十二指肠部位铁含量在辐照后3.5天和7天相较于辐照前呈现持续升高的趋势;并且Tmprss6-/-组辐照后3.5天和7天相较于WT组均有显著的升高。另外,在辐照后的3.5天和7天,Tmprss6-/-小鼠十二指肠部位SOD、GSH、T-AOC相较于WT组均显著下降,而MDA则显著升高。相关性分析结果提示,KO组十二指肠MDA、SOD和T-AOC水平与其铁含量显著相关。结论:小肠铁水平与辐照诱导的氧化应激具有显著相关性;Tmprss6基因敲除小鼠表现为十二指肠铁累积和辐照诱导的氧化应激加剧,Tmprss6基因缺失在十二指肠放射损伤中具有增敏作用。第二部分铁在放射性肠损伤中的作用及其机制研究目的:研究柠檬酸铁铵（FAC）在电离辐射诱导的小肠上皮细胞（HIECs）损伤中的作用及其机制;通过建立低铁饮食小鼠的放射肠损伤模型,评价肠道低铁水平对放射性肠损伤的保护作用,并进一步探讨其作用机制。方法:将HIECs分别进行梯度浓度的FAC单独处理、不同剂量X射线电离辐射（IR）单独处理、FAC（200nM）和 IR（12Gy）共处理、FAC（200nM）和 IR（12 Gy）及铁死亡抑制剂Liproxstatin-1（Lip-1,200 nM）或铁螯合剂去铁铵（DFO,5 μM）共处理。CCK-8检测处理后0-48 h HIECs细胞增殖活力。C11-BODIPY荧光探针流式检测细胞脂质ROS。分离并培养小鼠肠道类器官,给予FAC（200μM）、IR（12 Gy）、DFO（5 μM）单独或共同处理,评估隐窝生长情况。4周龄小鼠接受缺铁或铁充足饲料饮食3-4周后,分别随机分成辐照组和非辐照组。辐照组采用11.5 Gy X射线全腹部照射（TAI）,建立正常饮食和低铁饮食小鼠的放射肠损伤模型并观察记录各组小鼠体重变化。Western blot检测小鼠小肠组织二价金属离子转运体（DMT1）和铁蛋白重链（FTH）蛋白表达水平。实时定量PCR检测铁调素基因（HAMP）mRNA和前列腺素内过氧化物合酶2（Ptsg2）mRNA表达水平。H＆E组织切片染色评估小肠组织病理损伤情况。检测各组小鼠小肠组织SOD、GSH、MDA水平用于评估小肠组织抗氧化能力。免疫组织化学染色检测小肠组织Ki67蛋白用于评估小肠隐窝细胞增殖活力。TUNEL法免疫荧光染色检测小肠肠隐窝细胞凋亡情况。结果:FAC或IR单独处理对HIECs增殖活力影响较小,且仅仅轻度诱导脂质ROS。FAC和IR共处理显著降低了 HIECs增殖活力,诱导脂质ROS大量累积,并且以上作用可以被Lip-1和DFO抑制。FAC在体外增强了小肠隐窝类器官放射敏感性,显著抑制辐射后隐窝生长,该效应可以被DFO逆转。TAI后一周内小鼠血清铁无显著变化,小鼠小肠组织DMT1蛋白表达增加;FTH在TAI后第3天下降,并在第7天恢复;TAI后第1天和第3天,铁调素基因的表达显着增加,并在第7天下降至正常水平。放射性肠损伤小鼠模型中观察到,与正常饮食组小鼠比较,低铁饮食小鼠TAI后体重损失减少、小肠组织病理损伤减轻,小肠SOD及GSH水平增加,而MDA含量和Ptgst2 mRNA表达减少。Ki67蛋白免疫组化和TUNEL荧光染色实验显示,低铁饮食可以改善辐照后小肠隐窝细胞增殖活力,有效抑制小肠隐窝细胞辐照后凋亡。结论:FAC可以协同IR诱导HIECs脂质过氧化铁死亡。肠道低铁水平可以改善电离辐射后小肠组织抗氧化能力,增强小肠隐窝细胞增殖活力并抑制其凋亡。第三部分去铁铵对结肠癌细胞株的放疗增敏作用及机制初探目的:评价去铁铵（Deferoxamine,DFO）对结肠癌细胞株SW480和HT29放射增敏的作用效果,并对其机制进行初步探索。方法:通过CCK-8法检测细胞增殖活力,观察不同浓度或剂量的DFO（5、10、20、50、100μM）和电离辐射（IR,4、8、12 Gy）对人结肠癌细胞株SW480及HT29的杀伤效应,并确定最终适用的DFO浓度和IR剂量。将细胞分为未处理对照组（NC）、DFO（10μM）处理组、IR（4Gy）处理组,以及DFO（10 μM）和IR（4 Gy）共

关键词：放射性肠损伤 Tmprss6 铁代谢去铁铵结肠癌放疗增敏 EMT

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