检索结果-南通市图书馆

在胶质瘤中topk磷酸化STAT3促进其转录活性

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

在胶质瘤中TOPK磷酸化STAT3促进其转录活性

作者：袁征华中科技大学

学位级别：硕士

背景:胶质瘤是人颅内最常见的恶性肿瘤,近年来,虽然对胶质瘤的分子生物学特征方面有了较大进展,但在治疗方面仍未取得很大突破。寻找新的重要分子标志物对胶质瘤分子病理分型诊断、治疗及预后判断有深远的意义。本实验室前期研究发现:T... 详细信息

背景:胶质瘤是人颅内最常见的恶性肿瘤,近年来,虽然对胶质瘤的分子生物学特征方面有了较大进展,但在治疗方面仍未取得很大突破。寻找新的重要分子标志物对胶质瘤分子病理分型诊断、治疗及预后判断有深远的意义。本实验室前期研究发现:T细胞来源的蛋白激酶(topk)在胶质瘤中高表达,与胶质瘤分级呈正相关,患者的预后呈负相关;topk不仅促进胶质瘤细胞的生长,还直接磷酸化ULK1抑制自噬起始进而促进对替莫唑胺(TMZ)耐药。虽然关于topk在胶质瘤发生发展的作用有初步了解,但其详细作用机制特别是下游靶分子有待进一步深入研究。STAT3的Y705和S727的磷酸化修饰影响其在细胞内定位和转录活性,跟细胞的生长关系密切。研究发现STAT3信号通路异常激活促进胶质瘤细胞生长,但同样在胶质瘤细胞中异常活化的topk能否直接磷酸化修饰STAT3并调控其转录活性未见报道。目的:在胶质瘤细胞中,明确topk是否调控STAT3转录活性并阐明分子机制。方法:1、收集不同胶质瘤级别临床标本,用Western Blot方法检测topk和p STA T3(Y705和S727)的水平,分析topk与STAT3相关性。2、采用sh RNA沉默技术抑制胶质瘤细胞内topk表达,用Western Blot方法检测STAT3、p STAT3(Y705和S727)和STAT3下游效应分子BCL-2和BCL-XL。3、使用topk抑制剂OTS964处理细胞,用Western Blot方法检测STAT3、p STAT3(Y705和S727)。4、通过H is pull down实验、外源性和内源性Co-IP实验证明topk和STAT3是否存在相互作用。5、体外激酶实验和外源性IP实验证明了topk是否可以直接磷酸化修饰ST AT3。6、利用Net Phos 2.0网站预测STAT3潜在的磷酸化位点并体外合成相对应肽段,通过肽谱激酶实验检测topk磷酸化修饰STAT3的具体位点。7、采用定点突变技术构建STAT3被topk磷酸化修饰位点失活突变质粒(STAT3-S216A、STAT3-S521A和STAT3-S590A),与topk共转染至293T细胞,采用Flag抗体免疫沉淀F lag-STAT3蛋白,通过Western Blot方法检测p Ser和HA-topk信号。8、将空载、STAT3野生型、STAT3-S216A、STAT3-S521A和STAT3-S590A质粒以病毒包装形式感染胶质瘤细胞,建立稳定过表达细胞系,采用Western Blot方法检测BCL-2、BC L-XL的蛋白水平。9、构建STAT3-3A(S216A/S521A/S590A)和STAT3-3D(S216D/S521D/S590D)质粒,建立稳定表达细胞系,用Western Blot方法检测STAT3的靶基因BCL-2、BCL-XL的蛋白水平,采用MTT实验观察细胞增殖能力。结果:1、topk、pSTAT3(Y705和S727)在高级别胶质瘤临床样本中表达水平高,并且表达水平具有相关性。2、沉默topk或抑制topk活性,细胞内p STAT3(Y705和S727)水平降低,STAT3总蛋白水平下降不明显;沉默topk后,STAT3下游靶基因BCL-2和BCL-XL蛋白水平下调。3、His pull down实验、外源性和内源性Co-IP实验显示利用STAT3抗体免疫沉淀后的细胞裂解液可以检测到topk信号,同样富集topk后细胞裂解液可检测出STAT3信号。4、体外激酶实验中,ST AT3和topk同时存在的实验组、S2、S6和S7三个肽段(分别含有S216、S521和S590位点),可通过放射自显影技术检测出磷酸化信号。5、细胞外源性IP实验无EGF刺激时,转染STAT3实验组中STAT3丝氨酸磷酸化水平无明显变化;在EGF刺激后,相比于单转STAT3组,共转实验组中STAT3丝氨酸磷酸化水平升高。与转染STAT3组相比,STAT3-S216A、STAT3-S521A、STAT3-S590A三个磷酸化失活突变体组的STAT3丝氨酸磷酸化水平明显下降。6、在过表达STAT3-S216A、ST AT3-S521A和STAT3-S590A的细胞内发现BCL-2和BCL-XL蛋白水平显著下降。7、过表达STAT3-S216A/S521A/S590A细胞内的BCL-2蛋白水平无明显变化,BCL-XL蛋白水平上调。而过表达STAT3-3D质粒细胞内的BCL-XL和BCL-2蛋白水平无明显变化。MTT实验中四个过表达细胞系的细胞增殖能力之间无显著差异。结论:1、topk是STAT3上游蛋白激酶,磷酸化STAT3 S216、S521和S590位点。2、STAT3被topk磷酸化后促进其转录活性。3、STAT3 S21

关键词：胶质瘤磷酸化修饰 topk STAT3 OTS964

SGK3/topk信号轴促进CKD-AVF静脉流出道新生内膜增生的作用研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

SGK3/TOPK信号轴促进CKD-AVF静脉流出道新生内膜增生的作用研究

作者：廖倩倩华中科技大学

学位级别：硕士

目的:成熟的动静脉瘘(Arteriovenous Fistula,AVF)是终末期肾功能衰竭(End Stage Renal Disease,ESRD)血液透析(Hemodialysis,HD)患者的生命线。新生内膜增生(Neointimal Hyperplasia,NH)是动静脉瘘血管狭窄的主要原因。迄今为止,临床上缺乏有效的药物治疗NH,进一步深入探究NH的发病机制可能会引入新的治疗靶点。据文献报道,内瘘静脉平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cell,VSMCs)异常增殖迁移至内膜会促进新生内膜的形成,而VSMCs的表型转化是AVF术后VSMCs增殖和迁移的关键起始性步骤。慢性肾脏病(Chronic Kidney Disease,CKD)会促进VSMCs的去分化,然而影响这种转变的潜在机制尚不清楚。血清糖皮质激素诱导激酶3(Serum and Glucocorticoid-inducible Kinase 3,SGK3)表达下调可导致多种细胞增殖受到抑制,例如小鼠心肌细胞、C2C12成肌细胞等。下调SGK3高度同源的亚型蛋白SGK1能够减少血管新生内膜的形成。T型淋巴因子激活的杀伤细胞来源的蛋白激酶(T-lymphokine-activated killer-cell-Originated Protein Kinase,topk)是一种在增殖活跃细胞中表达的丝-苏氨酸蛋白激酶,可促进多种肿瘤细胞增殖、迁移。组蛋白3(Histone3,H3)是topk的下游靶标之一可被其磷酸化。磷酸化H3(Phospho-Histone3,p H3)是细胞有丝分裂的标志物。因此SGK3、topk可能通过调节VSMCs的的有丝分裂从而促进VSMCs增殖、迁移。但SGK3是否参与调节VSMCs中topk的表达及功能以及SGK3、topk对动静脉瘘静脉流出道NH的影响尚未可知。本研究拟探讨SGK3调控topk的具体机制及其在CKD-AVF血管狭窄中的作用。方法:1.将8周龄雄性C57BL/6小鼠分为:假手术+AVF组;CKD+AVF组;假手术+AVF+HI-topk-032注射6周组;CKD+AVF+HI-topk-032注射6周组(在AVF术前2周及术后4周每周给小鼠间断腹腔注射HI-topk-032四次);假手术+AVF+HI-topk-032注射4周组;CKD+AVF+HI-topk-032注射4周组(在AVF术后4周每周给小鼠间断腹腔注射HI-topk-032四次)。HI-topk-032注射4周组是从AVF手术同周开始注射HI-topk-032,由于大部分小鼠的AVF需要在手术后4周左右成熟,故选择4周这个时间节点,作为治疗组观察给药的效果。6周组是在AVF术前2W给药持续到术后4周,目的是想探究这种预防性给药的效果是否更优于术后的治疗组。采用左侧5/6肾脏切除术构建CKD小鼠模型,从小鼠眶静脉中取血标本检测血肌酐及尿素氮。右侧颈总动脉及颈外静脉端端吻合构建AVF小鼠模型,并分别于AVF术前2周及术后4周腹腔注射HI-topk-032(10mg/kg),AVF术后4周取小鼠AVF静脉流出道行伊红(Hematoxylin-eosin Staining,HE)、免疫荧光(Immunity Fluorescence,IF)、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)染色检测SGK3、topk、增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antige,PCNA)、平滑肌肌动蛋白α(Alpha Smooth Muscle Actin,α-SMA)表达。2.临床上收集10例拟行冠脉搭桥术患者的健康大隐静脉,排除大隐静脉曲张的患者,作为对照组。另外收集10例ESRD且需要维持性血液透析,已行AVF手术并出现AVF失功患者的AVF静脉流出道血管组织作为实验组,排除血管条件差、糖尿病、动脉粥样硬化或合并其他严重疾病的患者。将收集到的人体AVF及其静脉流出道的血管组织进行SGK3、topk的IHC染色。3.采用20%的CKD 5期非透析患者的血清体外培养人VSMCs 48h。运用SGK3抑制剂SGK3-PROTAC1、SGK3激活型质粒SGK3-S486D、topk抑制剂OTS964、topk激活型质粒T9E、血小板衍生生长因子-BB(Platelet Derived Growth Factor-BB,PDGF-BB)分别处理培养小鼠VSMCs,通过免疫印迹、实时定量PCR、细胞活性检测(Cell Counting Kit-8,CCK8)、伤口划痕实验检测SGK3、topk、p-topk、PCNA、p H3、血管细胞黏附分子1(Vascular Cell Adhesion Molecu

关键词：慢性肾脏病新生内膜增生动静脉瘘血管狭窄 topk SGK3

三阴乳腺癌新辅助化疗的预后与Ki-67、topk的表达情况相关性研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

现代生物医学进展 2022年第8期22卷 1514-1518页

作者：徐帅张振张喜平白雪峰白海珍内蒙古自治区人民医院急诊医学科内蒙古呼和浩特010017 内蒙古医科大学附属医院甲乳外科内蒙古呼和浩特010020 内蒙古自治区人民医院甲乳疝外科内蒙古呼和浩特010017

目的:研究三阴乳腺癌(TNBC)新辅助化疗(NACT)的预后与Ki-67、topk的表达情况的相关性。方法:回顾性收集2014年3月至2016年6月期间我院收治并行NACT的TNBC患者90例作为研究对象,免疫组化法检测肿瘤组织中Ki-67和topk的表达,分析两者的表... 详细信息

目的:研究三阴乳腺癌(TNBC)新辅助化疗(NACT)的预后与Ki-67、topk的表达情况的相关性。方法:回顾性收集2014年3月至2016年6月期间我院收治并行NACT的TNBC患者90例作为研究对象,免疫组化法检测肿瘤组织中Ki-67和topk的表达,分析两者的表达与患者临床资料的关系,应用COX回归模型进行生存分析,分析影响TNBC患者预后的独立危险因素。结果:在治疗情况方面,91.11%(82/90)的患者接受了≥4个周期的NACT治疗,84.44%(76/90)的患者接受了手术治疗,术后p CR为22.22%(20/90),ORR为75.56%(68/90)。为期5年的随访中,90例患者中共死亡8例(死于TNBC者6例,其他原因2例),失访2例;治疗后Ki-67和topk的阳性率均显著低于治疗前(Ptopk阳性和阴性表达病例在不同TNM分期、淋巴结是否转移上具有显著性差异(Ptopk阳性表达患者的无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)显著短于阴性表达者(Ptopk阳性表达均为影响TNBC患者预后的独立危险因素。结论:Ki-67和topk在TNBC组织中的表达与患者的病理学特征及预后密切相关,是影响预后的独立危险因素。

关键词：三阴乳腺癌新辅助化疗 Ki-67 topk

topk inhibits autophagy by phosphorylating ULK1 to promote chemoresistance in glioma cells

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

TOPK inhibits autophagy by phosphorylating ULK1 to promote c...

topk磷酸化c-Jun促进表皮生长因子受体阳性肺癌对蛋白酪氨酸激酶抑制剂的耐药

中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2...

作者： Hui Lu Changshu Ke Xiaofang Ni Juanjuan Xiao Ruijuan Xiu Qin Tian Huaxiong Pan Ling Zou Fei Wang Tengfei Ma Ping Yuan Lin Liu Jianmin Zhang Wei Jia Qiuhong Duan Feng Zhu Department of Biochemistry and Molecular Biology School of Basic MedicineHuazhong University of Science and Technology Department of Pathology Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and Technology Department of Pathology Union HospitalHuazhong University of Science and Technology

TMZ(temozolomide) treatment,as first-line chemotherapy in GBM(glioblastma),faced with drug *** studies emphasize that TMZ resistance is associated with autophagy,but the mechanism remained particularly ***1,as a serine-threonine protein kinase,is the upper-most protein of ULK1 complex and is emerging as a crucial node in autophagy ***,the regulation of ULK1 is not fully ***(T-LAK cell-originated protein kinase) is a member of MAPKK protein family,which is highly expressed in many malignant tumors and can be used as a molecular marker for the diagnosis and prognosis of *** this study,we identified topk,an oncokinase,as a novel upstream kinase to phosphorylate ULK1,and topk could inhibit autophagy in glioma *** found that topk could directly bind with and phosphorylate ULK1 at Ser495,Ser469,and Ser533 in vitro and ex *** phosphorylation of ULK1 at Ser495,Ser469,and Ser533 by topk decreased the activity and stability of ***,as the decrease of ULK1 activity will reduce the occurrence of autophagy,we would like to check the induction of *** demonstrated that topk could inhibit the induction and progression of autophagy in glioma ***,topk inhibition increased the sensitivity of glioma cells to *** discovery sheds light on the problem of TMZ-resistance in GBM treatment.

关键词： topk ULK1 autophagy temozolomide chemoresistance

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

TOPK磷酸化c-Jun促进表皮生长因子受体阳性肺癌对蛋白酪氨酸激酶...

Targeting a Novel COX2/MET/topk Signaling Axis Overcomes Gefitinib Resistance in NSCLC

第十四届全国肿瘤生物治疗大会

作者：李惟捷许淑娣李圣青杨安钢贾林涛第四军医大学附属西京医院呼吸内科第四军医大学基础部免疫学教研室第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室

表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)介导的信号通路在肺癌发生和发展中居于重要地位。以表皮生长因子受体为靶点的蛋白酪氨酸激酶抑制剂(TKI)已在非小细胞肺癌(NSCLC)临床治疗中成功应用。然而,针对这类分子靶向药物的耐药极大降低了其疗... 详细信息

表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)介导的信号通路在肺癌发生和发展中居于重要地位。以表皮生长因子受体为靶点的蛋白酪氨酸激酶抑制剂(TKI)已在非小细胞肺癌(NSCLC)临床治疗中成功应用。然而,针对这类分子靶向药物的耐药极大降低了其疗效,其具体分子机制尚不清楚。我们的研究结果发现,人淋巴因子激活性杀伤性T细胞蛋白激酶(topk)在非小细胞肺癌中表达升高,尤其是,在TKI耐药肺癌细胞中topk发生过度活化。我们通过免疫共沉淀、体外激酶活性测定和蛋白质结构预测等实验方法,证实topk能够直接结合并磷酸化转录因子AP-1的组成蛋白c-Jun,从而激活AP-1靶基因CCND1和CDC2的转录和表达,促进细胞周期进展,最终降低肺癌对EGFR-TKI的敏感性,甚至导致耐药。topk沉默则可以增加EGFR-TKIs耐药肺癌细胞对于吉非替尼等TKI类药物的敏感性,并增加肺腺癌裸鼠移植瘤模型中吉非替尼的疗效。这一研究揭示了肺癌对EGFR-TKIs耐药的新机制,表明topk不仅可以作为肺癌耐药的预测标志物,也有望成为一个新的治疗靶标:以topk为靶标的治疗策略与EGFR-TKIs联合可能会提高肺癌的治疗效果。

关键词：表皮生长因子受体(EGFR) 蛋白酪氨酸激酶抑制剂(TKI) topk c-Jun

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

Targeting a Novel COX2/MET/TOPK Signaling Axis Overcomes Gef...

中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2...

作者： Xiao Juanjuan Wang Fei Zhao Xia Duan Qiuhong Zhu Feng Department of Biochemistry and Molecular Biology School of Basic MedicineHuazhong University of Science and Technology Department of Pathology Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and Technology

MET overactivation is one of crucial bypass resistance mechanism in EGFR-mutant NSCLC *** the regulation mechanisms of MET are not wholly clear,it is necessary to further explore more information and then overcome to EGFRTKI ***,we found that COX2 and topk were highly expressed in the MET amplification-induced gefitinib resistance HCC827 cells(HCC827 GR).The progression-free survival(PFS) of COX2,MET and topk positive patients was shorter than that of negative ***,COX2 could modulate MET transcription through AP-1 and TXA2 as a key mediator participated in *** expression of topk had positive correlation with that of MET in EGFR-mutated NSCLC *** phosphorylated topk at Tyr74 site in vitro and ex vivo,and with positive feedback topk could phosphorylate MET at three new sites: Ser990,Ser1152 and ***,overexpression of COX2 or topk in HCC827 cells promoted gefitinib resistance,and on the contrary gene silencing of COX2 or topk in HCC828 GR cells reversed resistance to *** last,combination of FDA-approved celecoxib(the COX2 inhibitor),pantoprazole(the topk inhibitor) and gefitinib could inhibit the anchorage-independent growth ability of HCC827 GR cells and induce cell ***,our work suggests that the COX2-MET-topk signaling axis promotes gefitinib resistance and combination of the FDA-approved drugs would provide a low-cost and practical strategy to overcome gefitinib resistance.

关键词： COX2 MET topk gefitinib resistance NSCLC

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

移动对象环境下的topk差值聚合查询策略

计算机研究与发展 2006年第Z3期43卷 102-107页

作者：关晶王斌李柰罗旭王国仁信俊昌东北大学信息科学与工程学院沈阳110004 东北大学信息科学与工程学院沈阳110004 东北大学信息科学与工程学院沈阳110004 沈阳师范大学计算机中心沈阳110004 东北大学信息科学与工程学院沈阳110004 东北大学信息科学与工程学院沈阳110004

聚合查询(GNN)在空间数据库以及网络环境中是一个相对比较新的操作.与传统的只有一个查询结点的kNN查询相比,GNN具有多个查询结点,由于查询点的数目以及它们在数据库空间中分布的任意性,使得GNN查询比只有一个查询点的kNN查询复杂得多.... 详细信息

聚合查询(GNN)在空间数据库以及网络环境中是一个相对比较新的操作.与传统的只有一个查询结点的kNN查询相比,GNN具有多个查询结点,由于查询点的数目以及它们在数据库空间中分布的任意性,使得GNN查询比只有一个查询点的kNN查询复杂得多.提出了一种基于2个查询点的差值聚合查询,在GNN查询方法中提出的将多个查询点分布于一个MBR的算法并不适用于此类差值查询.基于单查询点的YPK-CNN,利用双曲线性质把查询空间分成几大部分,在此基础上计算出双曲线的渐近线以简化删减条件,直接删减掉不符合条件的搜索空间.实验结果显示,针对这种特定的差值聚合查询,所提出的基于双曲线渐近线过滤策略的查询算法要比基本查询算法在查询响应时间和访问结点次数方面更高效.

关键词： topk 最近邻居查询聚合查询 GRID索引结构

topk在Apoptin诱导肿瘤凋亡效应中的作用研究

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

TOPK在Apoptin诱导肿瘤凋亡效应中的作用研究

作者：刘妮妮华中科技大学

学位级别：硕士

目的:探讨肿瘤细胞中topk对Apoptin诱导肿瘤细胞凋亡效应的影响;明确topk对Apoptin的磷酸化作用,并初步判断其磷酸化位点。方法:1.采用质粒大提的方法,制备慢病毒包装所需质粒、pcDNA3.1、pcDNA3.1-HA-topk真核表达质粒;采用原核细胞诱... 详细信息

目的:探讨肿瘤细胞中topk对Apoptin诱导肿瘤细胞凋亡效应的影响;明确topk对Apoptin的磷酸化作用,并初步判断其磷酸化位点。方法:1.采用质粒大提的方法,制备慢病毒包装所需质粒、pcDNA3.1、pcDNA3.1-HA-topk真核表达质粒;采用原核细胞诱导表达的方法,制备纯化的PTD4-apoptin(简称P4A)蛋白。2.培养多种人肿瘤细胞,Western Blot检测topk表达水平,选择topk表达水平不同的HCT116、SGC7901和HepG2细胞进行后续实验。将P4A蛋白与上述细胞孵育,采用下列方法检测肿瘤细胞对P4A的敏感性:MTT检测P4A蛋白对细胞增殖活性的影响;Western Blot检测凋亡相关蛋白c-caspase3的表达。3.在topk高表达的HCT116、SGC7901细胞中,采用慢病毒介导的sh RNA沉默技术,建立topk沉默细胞系。Western Blot检测topk表达水平鉴定沉默效果。将P4A蛋白与上述细胞孵育,通过与sh Mock组对比,研究沉默topk表达对P4A蛋白诱导HCT116、SGC7901细胞凋亡的影响。4.在topk低表达的HepG2细胞,通过脂质体转染的方法实现topk过表达。Western Blot检测topk表达水平鉴定转染效果。将P4A蛋白与上述细胞孵育,检测过表达topk对P4A蛋白诱导HepG2细胞凋亡的影响。5.采用活化的topk为激酶、纯化的P4A蛋白为底物,开展体外激酶实验,研究topk对Apoptin蛋白的磷酸化作用。利用Net Phos2.0软件分析Apoptin序列中Ser、Thr位点,筛选出分值较高者的位点,合成肽段。采用活化的topk和肽段,开展体外激酶实验,研究topk对不同肽段的磷酸化作用,初步确定Apoptin序列上topk的磷酸化修饰位点。结果:1.将慢病毒包装所需质粒转染到293T细胞中,成功获得慢病毒。提取pcDNA3.1、pc NDA3.1-HA-topk真核表达质粒;采用原核细胞诱导表达的方法,制备纯化的PTD4-apoptin(简称P4A)蛋白。*** Blot检测,topk在HCT116、SGC7901细胞呈高表达;在Hela细胞中呈中等程度表达;在MKN45、HepG2细胞中呈低表达。孵育P4A蛋白后,HCT116、SGC7901、HepG2细胞的增殖活性较未处理组相比显著下降,凋亡相关蛋白c-caspase3的表达水平也显著升高。说明P4A蛋白诱导上述细胞发生凋亡。*** Blot结果表明,在结肠癌细胞HCT116以及胃癌细胞SGC7901中topk基因沉默细胞系建立成功。孵育P4A蛋白后,MTT结果显示sh topk组细胞增殖活性要明显高于sh Mock组;两种细胞的sh topk组的c-caspase3的表达水平较sh Mock组相比都有明显的降低。说明沉默topk的表达,P4A蛋白对SGC7901、HCT116细胞的凋亡诱导效应降低。4.在topk低表达的HepG2细胞中,转染pcDNA3.1-HA-topk质粒,topk的表达水平明显升高,表明转染成功。与未孵育P4A蛋白组相比,孵育P4A蛋白组细胞的增殖活性显著降低,而其c-caspase3的表达水平显著升高,说明P4A蛋白能够诱导HepG2细胞发生凋亡。但是转染topk表达组细胞在孵育P4A蛋白后,细胞增殖抑制率以及c-caspase3的表达水平要明显高于单独孵育P4A蛋白组。说明上调topk的表达,P4A蛋白对HepG2细胞的凋亡诱导效应升高。5.体外激酶实验证明topk可以直接磷酸化P4A蛋白,可能磷酸化的位点有Ser89、Ser93、Thr8、Thr20、Thr27、Thr56、Thr108、Thr114。结论:在topk高表达的HCT116、SGC7901细胞中,沉默topk的表达,P4A蛋白的凋亡诱导效应降低;在topk低表达的HepG2细胞中,上调topk的表达,P4A蛋白的凋亡诱导效应升高。体外激酶实验证明:活化的topk可以直接磷酸化P4A,可能磷酸化的位点有Ser89、Ser93、Thr8、Thr20、Thr27、Thr56、Thr108、Thr114。

关键词： topk Apoptin 肿瘤凋亡磷酸化

topk和TLR2在恶性淋巴瘤组织中的表达及意义

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

TOPK和TLR2在恶性淋巴瘤组织中的表达及意义

作者：谭美英南华大学

学位级别：硕士

目的：检测topk与TLR2蛋白在恶性淋巴瘤及淋巴结反应性增生临床标本中的表达，探讨topk和TLR2在EBV相关淋巴瘤发生中的意义。材料与方法：利用三种淋巴瘤组织芯片检测topk、TLR2蛋白的表达和EBV的感染，合计171例。收集淋巴瘤组织蜡块11... 详细信息

目的：检测topk与TLR2蛋白在恶性淋巴瘤及淋巴结反应性增生临床标本中的表达，探讨topk和TLR2在EBV相关淋巴瘤发生中的意义。材料与方法：利用三种淋巴瘤组织芯片检测topk、TLR2蛋白的表达和EBV的感染，合计171例。收集淋巴瘤组织蜡块113例和淋巴结反应性增生组织蜡块44例，采用免疫组织化学染色方法（SP法）检测topk和TLR2蛋白在淋巴瘤及淋巴结反应性增生组织中的表达;采用原位分子杂交检测淋巴瘤组织中EBER的表达。分析topk和TLR2的表达与EBV感染及淋巴瘤临床病理参数的关系。结果：***蛋白在淋巴瘤及淋巴结反应性增生组织中的表达1.1淋巴瘤组织芯片中topk的表达及与临床病理特征的关系topk蛋白阳性着色定位于细胞质或/和细胞核中。在90例淋巴瘤组织芯片中topk蛋白的阳性表达率为64.4%（58/90），其中霍奇金、非霍奇金、B细胞、T细胞性淋巴瘤的阳性表达率分别为50.0%（5/10）、66.3%（53/80）、69.4%（50/72）和37.5%（3/8）;霍奇金与非霍奇金淋巴瘤、 B细胞与T细胞性淋巴瘤相比，差异均无显著性意义（p＞0.05）。topk蛋白阳性表达与患者性别、年龄、部位无相关性(p＞0.05)。1.2淋巴瘤及淋巴结反应性增生组织石蜡标本中topk的表达及与临床病理特征的关系在113例淋巴瘤组织石蜡标本中topk蛋白的阳性表达率为38.1%（43/113），其中B细胞、T细胞和霍奇金淋巴瘤中topk蛋白的阳性表达率分别为40.0%（24/60）、42.2%（19/45）、0%（0/8），topk蛋白在反应性增生淋巴结组织石蜡标本中的阳性表达率为18.2%（8/44）。topk蛋白在淋巴瘤和反应性增生淋巴结组织中的表达，差异有显著性意义(p＜0.05)。B细胞与T细胞性淋巴瘤比较，topk蛋白表达的差异无显著性意义(p＞0.05)。topk蛋白阳性表达与患者性别、年龄、部位无相关性(p＞0.05)。***2蛋白在淋巴瘤及淋巴结反应性增生组织中的表达2.1淋巴瘤组织芯片中TLR2蛋白的表达TLR2蛋白在38例非霍奇金淋巴瘤组织芯片中的表达均呈阴性。2.2淋巴瘤及淋巴结反应性增生组织石蜡标本中TLR2蛋白的表达及与临床病理特征的关系TLR2阳性着色定位于细胞膜或/和细胞质。在111例淋巴瘤组织中TLR2蛋白的阳性表达率为12.6%(14/111)，其中B细胞、T细胞、霍奇金淋巴瘤中TLR2蛋白的阳性表达率分别为0%（0/60）、30.2%（13/43）和12.5%（1/8），TLR2蛋白在淋巴结反应性增生组织中的阳性表达率为27.5%（11/40）。TLR2蛋白在淋巴瘤和反应性增生淋巴结组织中的表达，差异有显著性意义(p＜0.05)。霍奇金与非霍奇金淋巴瘤比较，TLR2蛋白表达的差异无显著性意义(p＞0.05)。TLR2蛋白在60例B细胞性淋巴瘤中的表达均呈阴性。TLR2蛋白阳性表达与患者性别、年龄、部位无相关性(p＞0.05)。***在淋巴瘤组织中的表达3.1淋巴瘤组织芯片中EBER的表达及与临床病理特征的关系EBER阳性着色定位于细胞核。在43例非霍奇金淋巴瘤组织芯片中EBER阳性表达率为48.8%（21/43），其中B细胞和T细胞性淋巴瘤的阳性表达率分别为47.4%（18/38），60.0%（3/5）。B细胞与T细胞性淋巴瘤相比，差异无显著性意义（p＞0.05）。淋巴瘤组织芯片中的EBER阳性表达与患者性别、年龄、部位无相关性(p＞0.05)。3.2淋巴瘤石蜡组织标本中EBER的表达及与临床病理特征的关系在111例淋巴瘤石蜡标本中EBER的阳性表达率为33.3%（37/111），其中霍奇金、非霍奇金、T细胞与B细胞淋巴瘤组织中的EBER阳性表达率分别为50%（4/8）、32.0%（33/103）、55.8%（24/43）、15.0%（9/60）。霍奇金与非霍奇金淋巴瘤组织中的EBER阳性表达率的差异无显著性意义(p＞0.05)。EBER在T细胞与B细胞性淋巴瘤组织中的阳性表达率的差异有显著性意义(p＜0.01)。EBER阳性表达与患者性别、年龄、部位无相关性(p＞0.05)。结论：1、topk蛋白在淋巴瘤组织中表达上调。2、TLR2蛋白在淋巴瘤组织中表达下调。

关键词：淋巴瘤 topk TLR2 EBER