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基于肠道菌群及tlr4/myd88/nf-κb通路研究逍遥散对代谢相关脂肪性肝病大鼠的改善作用及机制

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药物评价研究 2024年第11期 2533-2547页

作者：刘希敏刘秋卉卢冬雪南京中医药大学附属常州市中医医院南京中医药大学常州市武进中医医院

目的研究逍遥散对高脂饮食诱导的大鼠代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）的保护作用及机制。方法 SD大鼠随机分为5组：对照组、模型组、盐酸吡格列酮(PH，阳性药，5 mg·kg-1)和逍遥散低、高剂量(19、38 g·kg-1)组。对照组喂食基础日粮，而... 详细信息

目的研究逍遥散对高脂饮食诱导的大鼠代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）的保护作用及机制。方法 SD大鼠随机分为5组：对照组、模型组、盐酸吡格列酮(PH，阳性药，5 mg·kg-1)和逍遥散低、高剂量(19、38 g·kg-1)组。对照组喂食基础日粮，而其余组喂食高脂肪和高果糖日粮12周，从第13周开始ig给药，每天1次持续4周。试剂盒法检测血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、内毒素（LPS）水平，肝组织白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β、肿瘤坏死因子-α（Tnf-α）水平；HE染色观察肝脏、结肠、空肠和回肠组织病理损伤并评分，油红O染色观察肝脏脂质累积；检测24 h尿液99mTc-喷替酸（DTPA）排泄评价肠黏膜屏障完整性；Western blotting法检测结肠组织toll样受体2（tlr2）、toll样受体4（tlr4）、髓样分化因子88（myd88）、核因子-κb（nf-κb）、闭锁小带蛋白-1（ZO-1）、封闭蛋白1（Claudin-1）、紧密连接蛋白-1（Occuludin-1）、质膜囊泡相关蛋白1（PV-1）蛋白表达；免疫组化分析结肠和肝组织tlr4、myd88、nf-κb蛋白表达；免疫荧光检测ZO-1、Claudin-1、E-钙黏蛋白（E-cadherin）蛋白表达。通过16S rRNA基因测序确定肠道菌群种类变化和结构。结果与模型组相比，逍遥散和PH组血清中TG、TC、LDL-C、ALT、AST和LPS水平显著降低（Pnf-α水平显著降低（Pblotting结果显示，逍遥散和PH组tlr2、tlr4、myd88、nf-κb蛋白表达显著降低（Ptlr4/myd88/nf-κb通路等相关。

关键词：逍遥散代谢相关脂肪性肝病肠道菌群肠黏膜屏障 tlr4/myd88/nf-κb通路高脂饮食

桉柠蒎肠溶软胶囊基于AQP5-tlr4/myd88/nf-κb通路缓解小鼠分泌性中耳炎研究

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药物评价研究 2024年第8期47卷 1820-1826页

作者：何碧瑶杨俊杰党龙姣孙萌萌刘佳宇辛文妤滨州医学院药学院山东烟台264003 烟台大学药学院山东烟台264005

目的基于水通道蛋白5(AQP5)-Toll样受体4(tlr4)/髓样分化因子88(myd88)/核转录因子κb(nf-κb)通路探讨桉柠蒎肠溶软胶囊对小鼠分泌性中耳炎(OME)模型的治疗作用及机制。方法昆明小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组和桉柠蒎肠溶软... 详细信息

目的基于水通道蛋白5(AQP5)-Toll样受体4(tlr4)/髓样分化因子88(myd88)/核转录因子κb(nf-κb)通路探讨桉柠蒎肠溶软胶囊对小鼠分泌性中耳炎(OME)模型的治疗作用及机制。方法昆明小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组和桉柠蒎肠溶软胶囊低、中、高剂量(55、110、220 mg·kg^(-1))组。采用经鼓膜注入脂多糖(LPS)的方法建立小鼠OME模型,显微镜观察各组小鼠鼓膜结构变化,苏木精-伊红(HE)染色法评估中耳组织病理学改变,ELISA法检测中耳灌洗液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tnf-α)水平,Western blotting检测中耳黏膜组织AQP5及tlr4/myd88/nf-κb信号通路相关蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组小鼠鼓室积脓,鼓室黏膜增厚,有明显的炎症细胞浸润,中耳灌洗液中IL-6、Tnf-α水平显著升高(Ptlr4、myd88、p-Iκbα、p-p65蛋白表达显著升高(Pnf-α水平(Ptlr4、myd88、p-Iκbα、p-p65蛋白表达(Ptlr4/myd88/nf-κb信号通路的激活,减轻LPS诱导的OME。

关键词：桉柠蒎肠溶软胶囊分泌性中耳炎脂多糖水通道蛋白5 tlr4/myd88/nf-κb通路

miR-223-3p调节tlr4/myd88/nf-κb通路影响脂多糖诱导的肺癌A549细胞炎症反应

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现代肿瘤医学 2024年第3期32卷 437-442页

作者：王现生于红艳郭小燕侯峰岩河北工程大学附属医院呼吸科河北邯郸056000 河北工程大学附属医院肿瘤科河北邯郸056000

目的:探讨miR-223-3p对脂多糖诱导的肺癌A549细胞炎症反应的影响。方法:实验分成2部分,每个部分分为2组,共4组:miRNA阴性对照(mimic NC)+LPS组,miR-223-3p模拟物(miR-223-3p mimic)+LPS组;miR-223-3p mimic+bAY11-7082+LPS组,miR-223-3p mimic+等量溶剂(vehicle)+LPS组。随后利用Western blot实验检测每组tlr4/myd88/nf-κb表达水平,酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测促炎细胞因子水平,CCK-8法检测细胞活力。结果:与mimic NC+LPS组相比,miR-223-3p mimic+LPS组的tlr4/myd88/nf-κb蛋白表达水平低,促炎细胞因子分泌少以及细胞活力高。与miR-223-3p mimic+bAY11-7082+LPS组相比,miR-223-3p mimic+vehicle+LPS组的tlr4/myd88/nf-κb蛋白表达水平低,促炎细胞因子分泌少以及细胞活力高。结论:miR-223-3p可以通过抑制tlr4/My D88/nf-κb促进A549细胞增殖、抑制促炎细胞因子的分泌,从而抑制肺癌中炎症的发生,本研究为今后临床上肺癌的治疗及药物开发提供了新策略。

关键词：肺癌脂多糖 miR-223-3p tlr4/myd88/nf-κb通路

基于tlr4/myd88/nf-κb通路研究降脂通脉饮对高脂血症模型大鼠的影响

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河南中医 2024年第3期44卷 361-366页

作者：郭锦荣朱立新彭垒张鞠华周芬敏陆瑞峰上海健康医学院附属周浦医院上海201318

目的:基于Toll样受体4(Toll-like receptor 4,tlr4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,myd88)/核转录因子-κb (nuclear transcription factor-κb,nf-κb)通路探讨降脂通脉饮对高脂血症模型大鼠的影响。方法:从15只SD大鼠中随机选取3只作为空白组,其余大鼠给予高脂饲料2周建立高脂血症模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、降脂通脉饮低剂量组(1.56 mg·kg^(-1))、降脂通脉饮中剂量组(3.125 mg·kg^(-1))、降脂通脉饮高剂量组(6.25 mg·kg^(-1)),每组各3只,给予相应剂量药物8周,每日1次,空白组和模型组给予生理盐水灌胃。全自动生化仪检测大鼠血清血脂水平,包括总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C);ELISA检测血清炎症因子含量,包括肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,Tnf-α)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ);Western blot和qPCR检测颈动脉组织tlr4、myd88、nf-κb蛋白和基因表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平升高(P0.05)。与空白组比较,模型组大鼠血清MCP-1、Tnf-α、IFN-γ含量升高(Pnf-α、IFN-γ含量降低(Pnf-α、IFN-γ含量降低(Ptlr4 mRNA、myd88 mRNA、nf-κb mRNA表达水平升高(Ptlr4 mRNA、myd88 mRNA、nf-κb mRNA表达水平降低(Ptlr4、myd88、nf-κb蛋白表达水平升高(Ptlr4、myd88、nf-κb蛋白表达水平降低(Ptlr4/myd88/nf-κb通路,从而减轻炎症反应有关。

关键词：高脂血症降脂通脉饮血脂 tlr4/myd88/nf-κb通路炎症大鼠

芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织tlr4/myd88/nf-κb通路分子表达的影响

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中药药理与临床 2019年第5期35卷 101-106页

作者：程建超张星星童佳兵朱洁高雅婷陈杨李泽庚安徽中医药大学合肥230038 安徽省中医药科学院中医呼吸病防治研究所合肥230031 安徽省教育厅中医药防治肺系重大疾病重点实验室合肥230031

目的:研究芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织tlr4/myd88/nf-κb通路相关分子表达的影响。方法:基于前期研究基础,采用LLC细胞构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成功后随机分为模型组、顺铂组、芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg、芪玉... 详细信息

目的:研究芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织tlr4/myd88/nf-κb通路相关分子表达的影响。方法:基于前期研究基础,采用LLC细胞构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成功后随机分为模型组、顺铂组、芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg、芪玉三龙汤80.5 g/kg+顺铂3.67 mg/kg组,每组20只移植瘤小鼠。灌胃相应药物或生理盐水,联合组灌胃及腹腔注射给予,连续治疗21天,剥离瘤组织,称取瘤质量,计算抑瘤率。HE常规染色,光镜下观察肿瘤组织病理形态学。RT-qPCR、Western blot法检测各组小鼠肿瘤组织中tlr4/myd88/nf-κb通路相关基因和蛋白表达水平。结果:芪玉三龙汤具有移植瘤抑制作用,量效关系明显,与顺铂联用具有明显协同作用。光镜下观察模型组肿瘤细胞排列紊乱,周围未见坏死肿瘤细胞,而芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg组可见不同程度的坏死肿瘤细胞,其中以80.5 g/kg组最为明显。同时该复方能够下调tlr4/myd88/nf-κb通路中tlr4、myd88、IRAK、TRAF6、nf-κb及Iκb基因和蛋白的表达水平,量效关系明显,且与顺铂联用具有明显协同作用。结论:结合前期研究基础,芪玉三龙汤的抑瘤作用可能与其调控tlr4/myd88/nf-κb信号通路,改善免疫功能有关。

关键词：芪玉三龙汤肺癌移植瘤小鼠免疫功能 tlr4/myd88/nf-κb通路

热毒宁注射液对LPS诱导ALI/ARDS小鼠tlr4/myd88/nf⁃κb通路的影响

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中成药 2023年第5期45卷 1625-1629页

作者：游丽娇袁林杨小芳耿欢马宇慧孟佳磊雷鸣上海中医药大学附属第七人民医院上海200137

目的探讨热毒宁注射液对LPS诱导急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)小鼠肺损伤的保护作用及对tlr4/myd88/nf-κb通路的影响。方法将小鼠随机分为对照组、模型组、热毒宁注射液组、地塞米松(阳性药)组,每组6只,气管注射LPS溶液制备... 详细信息

目的探讨热毒宁注射液对LPS诱导急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)小鼠肺损伤的保护作用及对tlr4/myd88/nf-κb通路的影响。方法将小鼠随机分为对照组、模型组、热毒宁注射液组、地塞米松(阳性药)组,每组6只,气管注射LPS溶液制备ALI/ARDS模型,造模后3 h给予各组相应药物,连续干预7 d后,检测小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性及血清肿瘤坏死因子-α(Tnf-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)水平,HE染色观察肺组织病理改变,Western blot法检测肺组织tlr4、myd88、IKKα、nf-κb p65、p-nf-κb p65蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠肺湿/干重比、肺组织MPO活性、血清炎性因子水平和肺组织tlr4、myd88、IKKα、nf-κb p65、p-nf-κb p65蛋白表达均升高(Ptlr4、myd88、IKKα、nf-κb p65、p-nf-κb p65蛋白表达均降低(Ptlr4/myd88/nf-κb通路改善LPS诱导的ALI/ARDS小鼠炎症损伤。

关键词：热毒宁注射液急性肺损伤/急性窘迫呼吸综合征(ALI/ARDS) 炎性因子 tlr4/myd88/nf-κb通路

基于tlr4/myd88/nf-κb通路探讨金双歧对慢性肾脏病大鼠肠黏膜屏障的影响

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中国现代医学杂志 2023年第9期33卷 32-40页

作者：黄梅陈鸿禧谭玲玲马欣西南医科大学附属医院临床技能中心四川泸州646000 成都医学院第一附属医院肾脏病科四川成都610500 达州市中心医院肾病内科四川达州635000

目的探讨金双歧对慢性肾脏病大鼠肠黏膜屏障的作用及机制。方法30只大鼠随机分为对照组、模型组和金双歧组,每组10只。模型组和金双歧组以阿霉素、腺嘌呤复制慢性肾脏病模型。模型复制成功后,金双歧组采用金双歧治疗4周。测定各组大鼠的... 详细信息

目的探讨金双歧对慢性肾脏病大鼠肠黏膜屏障的作用及机制。方法30只大鼠随机分为对照组、模型组和金双歧组,每组10只。模型组和金双歧组以阿霉素、腺嘌呤复制慢性肾脏病模型。模型复制成功后,金双歧组采用金双歧治疗4周。测定各组大鼠的24 h尿蛋白及血肌酐、尿素氮、D-乳酸、内毒素、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(Tnf-α)水平。HE染色观察各组大鼠的肾脏、结肠病理变化,Masson染色观察各组大鼠肾脏纤维化改变,透射电镜观察各组大鼠结肠黏膜超微结构,免疫荧光法检测各组大鼠结肠Occludin蛋白表达,Westernblotting检测各组大鼠结肠Toll样受体4(tlr4)、髓样分化因子88(myd88)、核因子κb P65(nf-κb P65)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组大鼠结肠tlr4、myd88、nf-κb P65 mRNA表达。结果与对照组比较,模型组、金双歧组大鼠的肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白、肾间质损伤评分均升高(P0.05)。与对照组比较,模型组、金双歧组大鼠的结肠黏膜病理损伤评分升高(Pnf-α水平均升高(Ptlr4、myd88、nf-κb P65蛋白及mRNA表达均升高(Ptlr4/myd88/nf-κb通路活化,改善慢性肾脏病所致肠黏膜屏障结构及功能障碍,减轻系统炎症反应。

关键词：慢性肾脏病金双歧肠黏膜屏障 tlr4/myd88/nf-κb通路

苜蓿素对哮喘小鼠肺泡巨噬细胞tlr4/myd88/nf-κb通路的抑制作用

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中成药 2017年第3期39卷 450-454页

作者：殷玉婷刘丽丽刘利艳江西中医药大学药学院江西南昌330004 江西中医药大学科技学院江西南昌330004 江西省肿瘤医院药剂科江西南昌330029

目的观察苜蓿素对低剂量脂多糖(LPS)诱导的哮喘小鼠气道炎症的抑制作用。方法采用低剂量LPS+卵白蛋白(OVA)建立bALb/c小鼠哮喘气道炎症反应模型,随机分为哮喘模型组、苜蓿素组、地塞米松(阳性药)组,另设空白对照组。ELISA法对小鼠支气... 详细信息

目的观察苜蓿素对低剂量脂多糖(LPS)诱导的哮喘小鼠气道炎症的抑制作用。方法采用低剂量LPS+卵白蛋白(OVA)建立bALb/c小鼠哮喘气道炎症反应模型,随机分为哮喘模型组、苜蓿素组、地塞米松(阳性药)组,另设空白对照组。ELISA法对小鼠支气管肺泡灌洗液(bALF)炎症介质NO、肿瘤坏死因子α(Tnf-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平进行检测;HE染色观察小鼠肺组织病理情况;RT-PCR法和Western blot法对小鼠肺泡巨噬细胞的Toll样受体4(tlr4)、髓样分化因子88(My D88)、核因子κb p65(nf-κb p65)mRNA及蛋白表达进行检测。结果苜蓿素可显著降低哮喘小鼠bALF液中NO、Tnf-α、IL-1β水平,有效改善哮喘小鼠肺部炎症,显著下调肺泡巨噬细胞的tlr4、My D88、nf-κb p65 mRNA和蛋白相对表达量。结论苜蓿素对哮喘小鼠气道炎症有抑制作用,其机制可能与干预tlr4/My D88/nf-κb通路有关。

关键词：苜蓿素哮喘气道炎症抗炎肺泡巨噬细胞 tlr4/myd88/nf-κb通路

氟西汀预处理抑制tlr4/myd88/nf-κb通路减轻老年小鼠术后认知功能障碍

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氟西汀预处理抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减轻老年小鼠术后认知功...

作者：林道艺福建医科大学

学位级别：硕士

第一部分:氟西汀预处理对老年小鼠脾切除术后神经炎症及认知功能的影响目的:探究氟西汀预处理能否改善老年小鼠脾切除术后神经炎症及认知功能障碍。方法:将18月龄的老年雄性C57bL/6J小鼠随机分为4组:对照+生理盐水预处理组(C+S组),对照... 详细信息

第一部分:氟西汀预处理对老年小鼠脾切除术后神经炎症及认知功能的影响目的:探究氟西汀预处理能否改善老年小鼠脾切除术后神经炎症及认知功能障碍。方法:将18月龄的老年雄性C57bL/6J小鼠随机分为4组:对照+生理盐水预处理组(C+S组),对照+氟西汀预处理组(C+F组),手术+生理盐水预处理组(S+S组),手术+氟西汀预处理组(S+F组)。接受氟西汀预处理的小鼠于术前7天连续每日腹腔注射10 mg/kg氟西汀,生理盐水组按相同方法给予等量生理盐水。手术组小鼠接受脾切除术,对照组小鼠不做处理。各组小鼠于术后1、3、7天水迷宫测试实验结束后立即处死并取出海马进行生化分析,使用RT-qPCR法和ELISA法分别检测海马炎症因子Tnf-α、IL-6、IL-1β的mRNA和蛋白表达水平;免疫荧光法检测小胶质细胞标志物IbA-1分布及表达情况;尼氏染色观察海马神经元存活情况;Western blot检测海马凋亡相关蛋白bcl-2、bax、cleaved caspase3表达水平;最后使用NeuN与TUNEL双重荧光标记法观察海马神经元的凋亡情况。结果:1.水迷宫实验结果显示,各组老年小鼠术前逃避潜伏期及全程的游泳速度差异无统计学意义(P>0.05);与C+S组相比,S+S组小鼠术后1、3、7天的平台穿越次数及目标象限停留时间减少,差异具有统计学意义(Pnf-α、IL-6、IL-1β的mRNA水平及蛋白表达均出现升高(Pnf-α、IL-6、IL-1β的mRNA水平及蛋白表达均降低(PbA-1阳性细胞胞体变圆,突起回缩,呈活化状态,且数量增多(PbA-1阳性细胞活化状态受抑制且数量减少(Pblot结果显示,与C+S组相比,S+S组小鼠术后1天海马促凋亡蛋白bax、cleaved caspase3表达增多、抗凋亡蛋白bcl-2表达减少(Pbax、cleavedcaspase3表达减少、抗凋亡蛋白bcl-2表达增多(Ptlr4/myd88/nf-κb通路的关系目的:探究tlr4/myd88/nf-κb信号通路在氟西汀预处理改善老年小鼠术后神经炎症及认知功能障碍中所起的作用。方法:使用Autodock软件分析tlr4与氟西汀分子间对接的强度,随即将18月龄的老年雄性C57bL/6J小鼠随机分为下列组别:对照+生理盐水预处理组(C+S组),手术+生理盐水预处理组(S+S组),手术+氟西汀预处理组(S+F组),手术+生理盐水预处理+LPS侧脑室注射组(S+S+LPS组),手术+氟西汀预处理+LPS侧脑室注射组(S+F+LPS组),手术+氟西汀预处理组+溶剂侧脑室注射(S+F+VEH组)。氟西汀、生理盐水给药方法及手术、对照的处理方式同第一部分,接受侧脑室注射的小鼠于术前7天接受LPS或等量溶剂的右侧脑室单次注射。各组小鼠于术后1、3、7天水迷宫测试期实验结束后立即处死并取出海马进行生化分析,使用ELISA法检测海马Tnf-α、IL-6、IL-1β表达水平;免疫荧光法观察小胶质细胞标志物IbA-1与tlr4共定位情况;Western blot检测海马IbA-1、tlr4、myd88、nf-κb p65 及 p-p65 表达水平;最后使用 NeuN 与 TUNEL双重荧光标记法观察海马神经元的凋亡情况。结果:1.使用Autodock软件模拟tlr4与氟西汀分子间对接,发现二者可紧密结合;免疫荧光结果显示,与C+S组相比,S+S组小鼠术后IbA-1与tlr4在海马区域高度重合,且IbA-1+tlr4+双阳性细胞数增多(P

关键词：小胶质细胞神经炎症术后认知功能障碍 5-羟色胺再摄取抑制剂术后认知功能障碍神经炎症小胶质细胞 5-羟色胺再摄取抑制剂 tlr4/myd88/nf-κb通路