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五倍子酸通过TGF-β/Smads信号通路对人瘢痕成纤维细胞生长抑制效应的初步研究

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中华皮肤科杂志 2023年第12期56卷 1138-1145页

作者：乔嘉熙陈瑶杜坤陈柳青陈金波魏力武汉市第一医院皮肤科武汉430000 武汉市第一医院设备科武汉430000 武汉市第一医院武汉430000 长江航运总医院皮肤科武汉430000

目的研究五倍子酸对瘢痕疙瘩成纤维细胞的形态、增殖、细胞周期、胶原收缩程度及对转化生长因子β(tgf-β)/Sma和Mad相关蛋白(smads)信号通路的影响,探讨五倍子酸治疗瘢痕疙瘩的作用及机制。方法2022年8-12月在武汉市第一医院皮肤外科... 详细信息

目的研究五倍子酸对瘢痕疙瘩成纤维细胞的形态、增殖、细胞周期、胶原收缩程度及对转化生长因子β(tgf-β)/Sma和Mad相关蛋白(smads)信号通路的影响,探讨五倍子酸治疗瘢痕疙瘩的作用及机制。方法2022年8-12月在武汉市第一医院皮肤外科获取术中切除的经临床及病理确诊的瘢痕疙瘩组织标本3份,采用组织块培养法进行原代成纤维细胞培养,取第3~8代细胞进行实验。设置低、中、高剂量五倍子酸组(分别用0.025、0.05、0.1 mg/ml五倍子酸干预细胞)及对照组(仅用含10%胎牛血清的DMEM培养细胞)。培养24、48、72 h后,细胞计数(CCK8)法检测各组细胞增殖活性,三维培养观察胶原收缩情况。按上述分组培养细胞24 h后,在微分干涉倒置荧光显微镜下拍照并使用流式细胞仪分析各组细胞周期变化。使用0.1 mg/ml五倍子酸干预细胞作为实验组(高剂量五倍子酸组),与对照组细胞分别培养24 h后,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定两组tgf-β1、2、3浓度变化,实时荧光定量PCR检测tgf-β1、2、3,Smad2、3、4及α平滑肌肌动蛋白(SMA)mRNA相对表达水平。统计学分析采用t检验、单因素方差分析及两因素方差分析,两两多重比较采用LSD-t检验。结果与对照组相比,随五倍子酸剂量增加,镜下瘢痕疙瘩成纤维细胞形态发生改变,逐渐出现胞体缩小、细胞间距变大、萎缩、凋亡细胞增多现象。CCK8结果显示,随五倍子酸剂量增加及作用时间延长,细胞增殖活力变化显著(F组别=78.31,Ptgf-β1浓度[(758.58±31.42)pg/ml]显著低于对照组[(1081.30±44.72)pg/ml,t=11.81,Ptgf-β2浓度[(71.05±7.40)pg/ml]与对照组[(76.43±6.51)pg/ml]相比差异无统计学意义(t=1.09,P=0.317),而tgf-β3浓度[(5.70±3.87)pg/ml]高于对照组[(0.00±0.00)pg/ml,t=2.94,P=0.026]。实时荧光定量PCR显示,与对照组相比,高剂量五倍子酸组tgf-β1、Smad2、Smad3、Smad4、α-SMA mRNA表达量均较低(均Ptgf-β3 mRNA表达量较高(t=6.78,P=0.002),而tgf-β2 mRNA表达量无明显变化(t=0.05,P=0.962)。结论五倍子酸可通过改变瘢痕疙瘩成纤维细胞周期,抑制其增殖,促进其凋亡,改变细胞形态,从而减少瘢痕形成及挛缩,其机制可能与抑制TGF-β/Smads信号通路有关。

关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞细胞增殖细胞凋亡转化生长因子β Smad蛋白质类五倍子酸 TGF-β/Smads信号通路

TGF-β/Smads信号通路介导脯氨酸促进浅色黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白沉积

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水生生物学报 2022年第11期46卷 1649-1657页

作者：荣华李德强马敏伟豆腾飞史庆超孔令富毕保良宁丽军华南农业大学海洋学院广州510642 云南农业大学动物科学技术学院昆明650201 内江师范学院长江上游鱼类资源保护与利用四川省重点实验室内江641112

为了进一步验证转化生长因子(tgf-β)/smads信号通路在脯氨酸(Pro)促进鱼鳔胶原蛋白沉积中的作用,研究利用tgf-β/smads通路抑制剂干扰,分析干扰前后鱼鳔中胶原蛋白含量及相关基因转录水平的变化。根据前期实验获得的Pro最佳添加量,制... 详细信息

为了进一步验证转化生长因子(tgf-β)/smads信号通路在脯氨酸(Pro)促进鱼鳔胶原蛋白沉积中的作用,研究利用tgf-β/smads通路抑制剂干扰,分析干扰前后鱼鳔中胶原蛋白含量及相关基因转录水平的变化。根据前期实验获得的Pro最佳添加量,制定饲料配方,饲喂浅色黄姑鱼1月后,通过腹腔注射氧化苦参碱(Oxymatrine)为期1个月。在实验结束后,测量各项指标,评估干扰前后, Pro促进鱼鳔胶原蛋白沉积的效果及变化。实验结果表明:Pro能显著上调tgf-β/smads通路中相关基因的表达,并促进鱼鳔胶原蛋白沉积,Oxymatrine干扰显著下调了tgf-β/smads通路中相关基因(Col1α1、Col1α2、tgf-β和Smad2)表达,同时导致鱼鳔中胶原蛋白沉积下降。由此推断Pro通过激活tgf-β/smads通路促进鱼鳔中胶原蛋白沉积,而Oxymatrine干扰抑制了tgf-β/smads通路,导致Smad2与Col1α2启动子结合受阻,进而下调了Col1α2基因的转录,从而降低鱼鳔中胶原蛋白的沉积。综上表明, TGF-β/Smads信号通路在Pro促进浅色黄姑鱼鱼鳔胶原蛋白沉积过程中起着重要调控作用,其中Col1α1、Col1α2、tgf-β和Smad2扮演着重要角色,研究结果可为鱼类胶原蛋白代谢的营养调控提供新思路和新方法。

关键词：脯氨酸 TGF-β/Smads信号通路鱼鳔胶原蛋白浅色黄姑鱼

基于TGF-β/Smads信号通路探究养心通脉方调控慢性心力衰竭血瘀证大鼠的作用机制

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湖南中医药大学学报 2023年第8期43卷 1353-1360页

作者：肖清玄郭志华罗佳敏陈宇霞张书萌于子璇陈伶利李杰湖南中医药大学湖南长沙410208

目的基于转化生长因子-β(tansforming growth factor-β,tgf-β)/smads信号通路探讨养心通脉方对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)血瘀证大鼠心肌纤维化和炎症损伤的影响。方法通过随机数字表法将45只SD雄性大鼠分为造模组(27... 详细信息

目的基于转化生长因子-β(tansforming growth factor-β,tgf-β)/smads信号通路探讨养心通脉方对慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)血瘀证大鼠心肌纤维化和炎症损伤的影响。方法通过随机数字表法将45只SD雄性大鼠分为造模组(27只)、正常组(12只)和假手术组(6只),适应性喂养1周后行冠脉结扎术造模,术后10 min行心电图检测,6周后检测超声心动图、血清N端前脑钠肽(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-pro BNP)含量和血液流变学相关指标。成模后,运用随机数字表法从造模组中取18只大鼠均分为中药组、西医组和模型组,中药组予养心通脉方溶液12 g/kg灌胃,西药组予以缬沙坦溶液0.8 g/kg灌胃,正常组、假手术组和模型组予等量蒸馏水,每日1次,持续4周。药物干预结束后,超声心动图检测心功能指标,HE染色和Masson染色观察大鼠心肌组织病理改变及纤维化程度,ELISA法检测大鼠血清NT-pro BNP和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)含量,Western blot法检测大鼠心肌组织TGF-β/Smads信号通路相关蛋白表达。结果与正常组比较,造模组大鼠心电图出现明显的ST段上抬,大鼠血清NT-pro BNP含量显著升高(Ptgf-β1、Smad 2、Smad 3蛋白表达明显升高(Ptgf-β1、Smad2、Smad3蛋白表达减少(PTGF-β/Smads信号通路,调控机体炎症损伤和纤维化机制。

关键词： TGF-β/Smads信号通路慢性心力衰竭血瘀证养心通脉方炎症损伤心肌纤维化

Kindlin-2介导TGF-β/Smads信号通路在糖尿病肾病模型小鼠肾小管间质纤维化的作用研究

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浙江中西医结合杂志 2023年第8期33卷 698-703页

作者：任凌燕施占琴杨勇朱鸣浙江省湖州市第一人民医院肾内科湖州313000

目的探讨Kindlin-2介导转化生长因子-β(tgf-β)/smads信号通路在糖尿病肾病模型小鼠肾小管间质纤维化中的作用。方法将9周龄雄性db/db糖尿病与db/m小鼠分为糖尿病肾病组与正常对照组,每组10只,12周后记录各组小鼠一般状态、尿液、体质... 详细信息

目的探讨Kindlin-2介导转化生长因子-β(tgf-β)/smads信号通路在糖尿病肾病模型小鼠肾小管间质纤维化中的作用。方法将9周龄雄性db/db糖尿病与db/m小鼠分为糖尿病肾病组与正常对照组,每组10只,12周后记录各组小鼠一般状态、尿液、体质量和血生化指标,行过碘酸雪夫反应(PAS)染色和马松三色(Masson)染色观察肾脏病理病变情况,免疫组织化学技术检测肾小管间质Kindlin-2、tgf-β1、磷酸化Smad3(p-Smad3)、Smad3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)原位表达,实时荧光定量(RT-qPCR)技术检测肾脏组织Kindlin-2、tgf-β1、p-Smad3、Smad3、α-SMA、E-cadherin mRNA水平。结果与正常对照组比较,糖尿病肾病组小鼠24小时尿蛋白定量[(239.88±44.31)mg/24 h比(20.16±6.03)mg/24 h]、体质量[(46.13±2.49)g比(23.47±2.19)g]、肾脏指数[(40.05±4.82)mg/g比(21.62±1.63)mg/g]、血糖[(49.86±7.51)mmol/L比(8.71±1.57)mmol/L]、血清尿素氮[(9.78±3.45)μmol/L比(6.02±1.65)μmol/L]、血清肌酐[(43.81±6.54)μmol/L比(29.53±3.19)μmol/L]、血清总胆固醇[(4.52±0.85)mmol/L比(2.62±0.38)mmol/L]及血清三酰甘油[(2.20±0.49)mmol/L比(0.91±0.25)mmol/L]水平明显增加(Ptgf-β1[(2.66±0.55)比(0.90±0.19)]、p-Smad3[(1.26±0.27)比(0.49±0.12)]、Smad3[(1.60±0.38)比(0.85±0.13)]、α-SMA[(2.12±0.44)比(0.85±0.13)]mRNA水平明显增加(Ptgf-β1、p-Smad3、Smad3、α-SMA原位阳性表达强度明显增强,E-cadherin原位表达强度显著降低。Kindlin-2 mRNA的水平与tgf-β1 mRNA水平(r=0.823,PTGF-β/Smads信号通路加速糖尿病肾小管间质纤维化。

关键词：小鼠 Kindlin-2 TGF-β/Smads信号通路糖尿病肾病肾小管间质纤维化

中药及复方调控TGF-β/Smads信号通路治疗盆腔炎性疾病的研究进展

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中医药临床杂志 2023年第10期35卷 2052-2057页

作者：张怡章宪慧王丽丽王蓉水蓉枝李新梅王新斌甘肃中医药大学甘肃兰州730000

盆腔炎性疾病(pelvic inflammatory disease, PID)是临床常见的一种妇科感染性疾病,其后遗症严重影响着女性生殖健康。西医治疗此病虽可有效降低短期发病率,但有易复发、易耐药等弊端,而中医药具有标本兼治、不良反应小等独特优势,且随... 详细信息

盆腔炎性疾病(pelvic inflammatory disease, PID)是临床常见的一种妇科感染性疾病,其后遗症严重影响着女性生殖健康。西医治疗此病虽可有效降低短期发病率,但有易复发、易耐药等弊端,而中医药具有标本兼治、不良反应小等独特优势,且随着研究的不断深入,中医药治疗PID受到了女性患者的广泛认可。TGF-β/Smads信号通路与此病密切相关,在促进组织纤维化及加速炎症反应方面起着重要作用,作者查阅国内外文献后发现TGF-β/Smads信号通路治疗PID已成为新的热点,但缺乏系统针对性地阐述,故作者通过整理中药及中药单体、中药复方参与下的TGF-β/Smads信号通路进行总结研究,以期为中医药防治PID提供参考依据及思路。

关键词：盆腔炎性疾病 TGF-β/Smads信号通路中医药研究进展

中医药影响TGF-β/Smads信号通路防治冠心病研究进展

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中国中医急症 2023年第11期32卷 2056-2059页

作者：荆晓朔林轶唐金保汪顺伟李亮资源湖南省衡阳市第四人民医院湖南衡阳421001 湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南省衡阳市中医医院湖南衡阳421009

冠心病(CHD)是由冠状动脉粥样硬化引起的心脏病,其发病机制复杂,现阶段中医药在防治CHD方面有着独特的优势。本文就近年来中医药干预TGF-β/Smads信号通路及对CHD的防治作用进行综述,发现目前中医药可通过多途径、多靶点治疗CHD且疗效良... 详细信息

冠心病(CHD)是由冠状动脉粥样硬化引起的心脏病,其发病机制复杂,现阶段中医药在防治CHD方面有着独特的优势。本文就近年来中医药干预TGF-β/Smads信号通路及对CHD的防治作用进行综述,发现目前中医药可通过多途径、多靶点治疗CHD且疗效良好,提出中医药可通过调控TGF-β/Smads信号通路防治CHD,其机制与改善动脉粥样硬化、调节心肌纤维化等相关;进一步为中医药在CHD方面的实验研究和临床治疗提供新方向。

关键词：冠心病心肌纤维化动脉粥样硬化 TGF-β/Smads信号通路中医药综述

基于TGF-β/Smads信号通路研究欣胃颗粒防治胃癌前病变的机制

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辽宁中医杂志 2022年第3期49卷 77-80,224-225页

作者：梁国英奚玉杰孙志文刘金凤李贺薇黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040

目的研究欣胃颗粒对胃癌前病变(precahcerous lesion of gastric carcinoma,PLGC)患者胃黏膜中转化生长因子β(transforming growth factor-β,tgf-β)/smads信号通路相关蛋白tgf-β1、转化生长因子-Ⅱ型受体(transforming growth factor-βⅡreceptor,TβR-Ⅱ)、Smad4、Smad7表达水平的影响,为治疗PLGC提供中医诊疗思路和有效方案。方法将符合纳入标准的气阴两虚、夹瘀夹毒型PLGC患者60例设为疗前组,并将其随机分为欣胃颗粒组和胃复春组,分别给予口服欣胃颗粒和胃复春片,连续服用12周,另设10例浅表性胃炎患者为空白组作为对照且未予药物治疗。采用免疫组化法检测患者服药前后胃黏膜病理组织学变化和Real-time PCR方法检测各组胃黏膜组织中tgf-β1、TβR-Ⅱ、Smad4、Smad7的mRNA及蛋白表达情况。结果与空白组相比,疗前组患者tgf-β1、TβR-Ⅱ、Smad7表达升高,Smad4表达降低(Ptgf-β1、TβR-Ⅱ、Smad7的表达,上调Smad4的表达。两组相比,欣胃颗粒组下调tgf-β1、TβR-Ⅱ、Smad7表达水平的作用明显(Ptgf-β/smads通路传导,下调tgf-β1、TβR-Ⅱ、Smad7的表达,同时上调Smad4的表达有关。

关键词：胃癌前病变 TGF-β/Smads信号通路欣胃颗粒

基于TGF-β/Smads信号通路探讨胃痞消逆转GPL大鼠胃黏膜EMT效应机制

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中药新药与临床药理 2017年第4期28卷 424-429页

作者：蔡甜甜潘华峰张成哲曾晓会赵自明陈晓东李思怡刘伟广州中医药大学广东广州510405 广东省中医药工程技术研究院广东广州510095

目的观察健脾化瘀解毒中药复方胃痞消对胃癌前病变(GPL)大鼠TGF-β/Smads信号通路的调控效应,探讨胃痞消逆转GPL大鼠胃黏膜上皮-间质转化(EMT)的效应机制。方法采用N-甲基-N,-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)为造模剂结合饥饱失常多因素造模方法... 详细信息

目的观察健脾化瘀解毒中药复方胃痞消对胃癌前病变(GPL)大鼠TGF-β/Smads信号通路的调控效应,探讨胃痞消逆转GPL大鼠胃黏膜上皮-间质转化(EMT)的效应机制。方法采用N-甲基-N,-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)为造模剂结合饥饱失常多因素造模方法复制GPL大鼠模型,连续26周,于16周时开始连续灌胃给药10周,分组如下:正常组,模型组,胃复春组(0.2 g·kg^(-1)),胃痞消高、低剂量(15,7.5 g·kg^(-1))组。观察大鼠胃黏膜组织病理学(HE染色)变化及超微结构;Western Blot法检测尾型同源基因家族2(CDX2)、转化生长因子二型受体(tgf-βRI)I、Rho相关激酶(RhoA)、p-Smad2、p-Smad3、神经钙黏蛋白(N-cad)、β-连环蛋白(β-catenin)表达。结果与正常组比较,模型组GPL大鼠胃黏膜CDX2、RhoA、p-Smad2、p-Smad3和N-cad蛋白表达均显著升高(Ptgf-βRⅡ、p-Smad2、p-Smad3和RhoA表达均显著降低(PTGF-β/Smads信号通路,进而活化诱导tgf-βRⅡ、p-Smad2、p-Smad3和RhoA表达下调,调控GPL大鼠胃黏膜EMT,延缓GPL向肿瘤的进展。

关键词：胃癌前病变胃痞消 TGF-β/Smads信号通路上皮-间质转化

基于TGF-β/Smads信号通路探讨肾康注射液对输尿管结扎模型小鼠的作用

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中华中医药杂志 2021年第5期36卷 2629-2634页

作者：邹俊驹周晓韬陈鲜王丽马跃荣成都中医药大学基础医学院成都611137 成都中医药大学附属医院病理科成都610075

目的:通过观察肾康注射液对输尿管结扎(UUO)模型小鼠E3泛素连接酶Smurf2介导TGF-β/Smads信号通路的影响,探索其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:将50只C57BL/6J小鼠随机分成5组,即假手术组、UUO模型组、肾康注射液高剂量组、肾康注射... 详细信息

目的:通过观察肾康注射液对输尿管结扎(UUO)模型小鼠E3泛素连接酶Smurf2介导TGF-β/Smads信号通路的影响,探索其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:将50只C57BL/6J小鼠随机分成5组,即假手术组、UUO模型组、肾康注射液高剂量组、肾康注射液中剂量组、肾康注射液低剂量组,每组10只。通过左侧输尿管结扎手术制备UUO动物模型,观察血清中肌酐和尿素氮、肾脏组织形态、Smurf2及tgf-β信号通路相关蛋白的表达情况。结果:肾康注射液可减轻UUO引起肾功能的异常,并可通过减少肾小管的扩张、胶原蛋白沉积和肾小管间质腔扩张来改善肾小管间质损伤和纤维化;此外,肾康注射液通过促进Smad7与E3泛素链接酶Smurf2的表达,使tgf-β1的Ⅰ型受体、P-Smad2/3泛素化降解。结论:肾康注射液可以通过泛素化的方式调节UUO模型小鼠中的tgf-β/Smad信号通路,减轻肾间质纤维化。

关键词：肾纤维化上皮-间充质转化肾康注射液 TGF-β/Smads信号通路 E3泛素连接酶Smurf2