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脱氧雪腐镰刀菌烯醇与t⁃2毒素对热应激蛋鸡肠道屏障功能及内质网应激和炎症反应的影响

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动物营养学报 2023年第4期35卷 2296-2305页

作者：娄文芳邱文欣郭浩能石松明黄波郝澍游金明戴四发黎观红江西农业大学动物科学技术学院江西省动物营养重点实验室营养饲料开发工程研究中心南昌330045 九江学院药学与生命科学学院九江332005 江西利德菲生物药业有限公司九江330400 九江市博正生物科技产业研究院九江332005

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)与T-2毒素对热应激蛋鸡肠道屏障功能及内质网应激和炎症反应的影响。选择36周龄体重相近的京红1号蛋鸡96只,随机分成4组,每组8个重复,每个重复3只鸡。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,DON组、t-2组、DO... 详细信息

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)与T-2毒素对热应激蛋鸡肠道屏障功能及内质网应激和炎症反应的影响。选择36周龄体重相近的京红1号蛋鸡96只,随机分成4组,每组8个重复,每个重复3只鸡。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,DON组、t-2组、DON+t-2组分别在基础饲粮中添加3.00 mg/kg DON、0.50 mg/kg T-2毒素、1.50 mg/kg DON+0.25 mg/kg T-2毒素。预试期3 d,正试期28 d。试验期间白天平均温湿指数为84.87。结果表明:1)与CON组相比,t-2组十二指肠、空肠隐窝深度显著升高(Pt-2组空肠隐窝深度显著升高(Pt-2、DON+t-2组十二指肠绒毛高度/隐窝深度(V/C)值显著降低(Pt-2、DON+t-2组空肠V/C值显著降低(P2)与CON组相比,DON、t-2、DON+t-2组血清脂多糖(LPS)含量显著升高(Pt-2组血清二胺氧化酶(DAO)含量显著升高(Pt-2组回肠黏膜白细胞介素-6(IL-6)含量显著升高(Pt-2、DON+t-2组回肠黏膜闭锁蛋白(Occludin)mRNA相对表达量显著降低(Pt-2组回肠黏膜葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、X盒结合蛋白1(XBP1)mRNA相对表达量显著升高(PtF4)mRNA相对表达量显著升高(PT-2毒素可诱导蛋鸡小肠组织内质网应激和炎症反应,损伤黏膜形态结构和屏障功能,且两者存在一定的累加效应。

关键词：呕吐毒素 T-2毒素热应激蛋鸡肠道屏障功能内质网应激

T-2毒素对狂犬病病毒体外复制的抑制作用研究

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病毒学报 2022年第5期38卷 1060-1068页

作者：何晴刘铮然刘茜朱武洋包头医学院公共卫生学院包头014040 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫健委生物安全重点实验室北京102206

探索T-2毒素对狂犬病病毒CVS-11的体外抑制作用。通过CCK-8法确定T-2毒素在BHK-21细胞中的工作浓度,根据T-2毒素、狂犬病病毒CVS-11与BHK-21细胞的相互作用方式建立T-2毒素体外抗狂犬病病毒的作用模型。采用直接免疫荧光、细胞荧光转化... 详细信息

探索T-2毒素对狂犬病病毒CVS-11的体外抑制作用。通过CCK-8法确定T-2毒素在BHK-21细胞中的工作浓度,根据T-2毒素、狂犬病病毒CVS-11与BHK-21细胞的相互作用方式建立T-2毒素体外抗狂犬病病毒的作用模型。采用直接免疫荧光、细胞荧光转化灶、实时荧光定量PCR等方法明确T-2毒素对狂犬病病毒CVS-11的体外抑制作用。CCK-8实验结果显示,T-2毒素与BHK-21细胞相互作用3h和24h的最大工作浓度分别为40ng/mL和10ng/mL。体外抗病毒实验的作用模型结果显示,增加T-2毒素浓度,狂犬病病毒CVS-11的病毒滴度和N基因mRNA的表达量逐渐下降,5ng/mL的T-2毒素对狂犬病病毒CVS-11抑制率可达90%以上,40ng/mL的T-2毒素对狂犬病病毒CVS-11具有灭活作用,灭活抑制率达80%以上。T-2毒素对狂犬病病毒具有体外抑制作用,且这种抑制作用具有剂量依赖性。

关键词：狂犬病病毒CVS-11 T-2毒素抑制效应

拟枝孢镰刀菌Fspgp2基因负调控T-2毒素产量

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菌物学报 2023年

作者：王立雯林子涵王冰冰 Lee Yinwon 刘馨徐剑宏史建荣 Department of Agricultural Biotechnology Seoul National University 江苏大学食品与生物工程学院江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所南京大学金陵学院化学与生命科学学院

T-2毒素（t-2 toxin）是单端孢霉烯族毒素中细胞毒性最强的一种，广泛污染粮食作物，在世界多国的大麦、黑麦、燕麦、玉米等样品中均有污染报道，威胁粮食安全与人畜健康。目前T-2毒素标准物质主要是从产毒菌培养物中提取纯化获得，产... 详细信息

T-2毒素（t-2 toxin）是单端孢霉烯族毒素中细胞毒性最强的一种，广泛污染粮食作物，在世界多国的大麦、黑麦、燕麦、玉米等样品中均有污染报道，威胁粮食安全与人畜健康。目前T-2毒素标准物质主要是从产毒菌培养物中提取纯化获得，产率较低，主要依赖进口，货期长、价格昂贵。本研究筛选了一株产T-2毒素的拟枝孢镰刀菌Fsp1，通过基因敲除策略构建了T-2毒素负调控元件Fspgp2的敲除突变体，突变体的菌丝生长及产孢量与野生型菌株相比无显著差异，但其T-2毒素产量显著提高，在大米培养基中产量为421.98 mg/kg，为构建T-2毒素宏量制备纯化技术提供菌源基础，对于粮食中T-2毒素污染风险的持续监测和控制技术的研发意义重大。

关键词： T-2毒素基因敲除拟枝孢镰刀菌高产突变体

单宁酸对低剂量T-2毒素诱导小鼠结肠黏膜损伤与菌群失调的保护效应

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畜牧兽医学报 2023年第8期54卷 3582-3594页

作者：谢旖邹郦睿陶冉刘莎王江萍文利新邬静王吉益阳职业技术学院益阳413055 湖南农业大学动物医学院畜禽保健湖南省工程中心长沙410128 长沙绿叶生物科技有限公司长沙410100

旨在探究单宁酸(tannic acid,tA)对低剂量T-2毒素诱导小鼠结肠黏膜损伤与其菌群失调的保护机制。试验选取36只6周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组,每组12只小鼠,分别为Ctrl组(空白对照)、t2组(1 mg·kg^(-1) T-2毒素攻毒)和t2tA组(1 mg... 详细信息

旨在探究单宁酸(tannic acid,tA)对低剂量T-2毒素诱导小鼠结肠黏膜损伤与其菌群失调的保护机制。试验选取36只6周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组,每组12只小鼠,分别为Ctrl组(空白对照)、t2组(1 mg·kg^(-1) T-2毒素攻毒)和t2tA组(1 mg·kg^(-1)攻毒+100 mg·kg^(-1) tA干预),T-2毒素灌胃每周3次,tA灌胃每天1次,试验期10周。试验期结束后,取小鼠的结肠组织和结肠内容物。苏木精-伊红染色和阿利新蓝-过碘酸雪夫氏染色观察结肠形态结构的改变;免疫组化染色观察结肠组织中Occludin、Claudin1、ZO-1蛋白含量的变化;Rt-qPCR检测结肠组织中Occludin、Claudin1、Muc1、Muc2、Zo-1基因的表达量变化;Western blot检测结肠组织中Occludin、Claudin1蛋白的表达量变化;16S rRNA测序分析小鼠结肠菌群组成的差异。结果表明:1)低剂量T-2毒素不会引起小鼠结肠组织显著的形态学损伤和炎症反应。2)与Ctrl组相比,t2组小鼠结肠中杯状细胞的数量极显著减少(Pt2tA组显著增加了小鼠杯状细胞的数量(Ptrl组相比,t2组极显著降低了黏蛋白Muc1、紧密连接蛋白Occludin、Claudin1和Zo-1 mRNA的表达水平(Pt2tA组极显著增加了三者的表达水平(Ptrl组相比,t2组显著降低了小鼠Occludin蛋白的表达水平(Pt2tA组极显著增加了两者的表达水平。5)T-2毒素导致小鼠结肠菌群的多样性发生变化,tA的干预,可使t2组小鼠结肠中的有害菌Patescibacteria门、Saccharimonadales目、Candidatus-Saccharimonas属、unclassified_f__Ruminoccaceae属、臭气杆菌属以及嗜胆菌属丰度显著(PT-2毒素暴露会导致小鼠结肠黏膜屏障受损和结肠菌群失调,tA干预可以缓解T-2毒素引起的小鼠结肠黏膜损伤,调节结肠菌群结构,改善小鼠肠道健康。

关键词： T-2毒素单宁酸抗营养因子肠道屏障肠道菌群

T-2毒素抗人食管癌细胞EC1的活性及其机制

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中国药理学与毒理学杂志 2023年第11期37卷 833-840页

作者：马永成范霞霞苏楠河南省人民医院药学部郑州大学华中阜外医院药学部临床药理室河南郑州450003 河南牧业经济学院食品与生物工程学院河南郑州450011

目的研究T-2毒素的抗癌活性,并探讨其作用机制。方法人食管癌细胞EC109和EC1、人胃癌细胞MGC-803、人肺癌细胞H460及人正常胃黏膜细胞GES-1,各细胞分别分为细胞对照组(二甲亚砜,终浓度<0.01%)和T-2毒素0.375~100 nmol·L^(-1)组,处理细... 详细信息

目的研究T-2毒素的抗癌活性,并探讨其作用机制。方法人食管癌细胞EC109和EC1、人胃癌细胞MGC-803、人肺癌细胞H460及人正常胃黏膜细胞GES-1,各细胞分别分为细胞对照组(二甲亚砜,终浓度T-2毒素0.375~100 nmol·L^(-1)组,处理细胞24,48和72 h后,采用Mtt法检测细胞存活率。EC1细胞分为细胞对照组和T-2毒素5和10 nmol·L^(-1)组,实时无标记动态细胞分析技术(RtCA)进一步分析EC1细胞增殖和迁移;EC1细胞分为细胞对照组和T-2毒素5,10和20 nmol·L^(-1)组,T-2毒素处理48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期及活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP),Western印迹法检测细胞色素c、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)、剪切形式PARP、P21、γ-H2AX、P53、Bax和活化胱天蛋白酶3/7蛋白表达。结果T-2毒素作用EC109,EC1,MGC-803和H4604种人癌细胞72 h,IC50值分别为6.34,5.54,6.94和5.96 nmol·L^(-1),T-2毒素对正常胃黏膜细胞GES-1的IC50为16.4 nmol·L^(-1)。在0~25 nmol·L^(-1)浓度范围内,T-2毒素对EC1细胞增殖具有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖性(24 h,r=0.9204;48 h,r=0.9745;72 h,r=0.9772),此外T-2毒素亦可强烈抑制EC1细胞迁移;与细胞对照组相比,T-2毒素5,10和20 nmol·L^(-1)组EC1细胞凋亡率(PT-2毒素通过诱导细胞凋亡和周期阻滞抑制癌细胞生长,其机制与激活线粒体凋亡通路和上调周期抑制因子P21表达有关。

关键词： T-2毒素细胞凋亡细胞周期

拟枝孢镰孢Fspgp2基因负调控T-2毒素产量

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菌物学报 2024年第5期43卷 48-59页

作者：王立雯林子涵王冰冰 Lee Yinwon 刘馨徐剑宏史建荣江苏大学食品与生物工程学院江苏镇江212013 江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所江苏南京210014 南京大学金陵学院化学与生命科学学院江苏南京210089 首尔国立大学农业与生物技术学院韩国首尔08826

T-2毒素(t-2 toxin)是单端孢霉烯族毒素中细胞毒性最强的一种,广泛污染粮食作物,在世界多国的大麦、黑麦、燕麦、玉米等样品中均有污染报道,威胁粮食安全与人畜健康。目前T-2毒素标准物质主要是从产毒菌培养物中提取纯化获得,产率较低,... 详细信息

T-2毒素(t-2 toxin)是单端孢霉烯族毒素中细胞毒性最强的一种,广泛污染粮食作物,在世界多国的大麦、黑麦、燕麦、玉米等样品中均有污染报道,威胁粮食安全与人畜健康。目前T-2毒素标准物质主要是从产毒菌培养物中提取纯化获得,产率较低,主要依赖进口,货期长、价格昂贵。本研究筛选了一株产T-2毒素的拟枝孢镰孢Fsp1,通过基因敲除策略构建了T-2毒素负调控元件Fspgp2的敲除突变体,突变体的菌丝生长及产孢量与野生型菌株相比无显著差异,但其T-2毒素产量显著提高,在大米培养基中产量为421.98mg/kg,为构建T-2毒素宏量制备纯化技术提供菌源基础,对于粮食中T-2毒素污染风险的持续监测和控制技术的研发意义重大。

关键词： T-2毒素基因敲除拟枝孢镰孢高产突变体

复合吸附剂联合谷氨酰胺对夏季饲喂脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素蛋鸡生产性能、免疫功能、内质网应激和炎症反应的影响

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动物营养学报 2023年第8期35卷 5132-5141页

作者：娄文芳张志标付戴波郭浩能石松明游金明黎观红戴四发九江学院药学与生命科学学院九江332005 江西农业大学动物科学技术学院南昌330045 九江市农业科学院九江332000 江西利德菲生物药业有限公司九江330400 九江市博正生物科技产业研究院九江332005

本试验旨在研究复合吸附剂(CA)联合谷氨酰胺(Gln)对夏季饲喂脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和T-2毒素蛋鸡生产性能、免疫功能、内质网应激和炎症反应的影响。选择72周龄京红1号蛋鸡96只,随机分成4组,每组8个重复,每个重复3只。对照组饲喂基础... 详细信息

本试验旨在研究复合吸附剂(CA)联合谷氨酰胺(Gln)对夏季饲喂脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和T-2毒素蛋鸡生产性能、免疫功能、内质网应激和炎症反应的影响。选择72周龄京红1号蛋鸡96只,随机分成4组,每组8个重复,每个重复3只。对照组饲喂基础饲粮,DON+t-2组在基础饲粮中添加1.50 mg/kg DON+0.25 mg/kg T-2毒素,CA组在基础饲粮中添加1.50 mg/kg DON+0.25 mg/kg T-2毒素+0.50 g/kg复合吸附剂,CA+Gln组在基础饲粮中添加1.50 mg/kg DON+0.25 mg/kg T-2毒素+0.50 g/kg复合吸附剂+4.00 g/kg Gln。预试期3 d,正试期28 d。试验期每天09:00、14:00、19:00的平均温湿指数分别为83.43、88.08、86.70。结果表明:1)与对照组相比,DON+t-2组的平均日采食量和产蛋率显著或极显著下降(Pt-2组相比,CA组和CA+Gln组的产蛋率极显著升高(P2)与对照组相比,DON+t-2组的血清免疫球蛋白A(IgA)含量和回肠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量显著或极显著降低(Pt-2组相比,CA组和CA+Gln组的血清IgA含量极显著升高(Pt-2组的回肠黏膜白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tNF-α)含量极显著升高(Pt-2组相比,CA组和CA+Gln组的回肠黏膜IL-1β含量极显著降低(Pt-2组的回肠黏膜蛋白激酶受体样内质网激酶(PERK)、活化转录因子4(AtF4) mRNA相对表达量极显著升高(Pt-2组相比,CA组和CA+Gln组的回肠黏膜葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、肌醇需求酶1(IRE1)、PERK、AtF4、X盒结合蛋白1(XBP1) mRNA相对表达量极显著降低(PT-2毒素暴露对夏季蛋鸡生产性能、免疫机能、内质网应激和炎症反应带来的负面影响,两者联合可以作为一种有效脱毒剂添加到蛋鸡饲粮中。

关键词：蛋鸡呕吐毒素 T-2毒素复合吸附剂谷氨酰胺内质网应激

基于时间分辨荧光快速定量检测谷物中的T-2毒素

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中国粮油学报 2023年第1期38卷 22-28页

作者：叶金郑梦瑶马海华葛宏义王珂袁华山王平东肖理文刘洪美王松雪张元粮食信息处理与控制教育部重点实验室(河南工业大学) 郑州450001 河南省粮食光电探测与控制重点实验室郑州450001 河南工业大学信息科学与工程学院郑州450001 国家粮食和物资储备局科学研究院北京100037 南京中储粮粮油质监中心有限公司南京211151 南京微测生物科技有限公司南京210000

研制开发了一种基于时间分辨荧光纳米微球的T-2毒素快速定量检测卡,并对其在谷物中的检测性能进行了研究。本研究对标记工艺、划线工艺进行了探索,通过对微球偶联时间、封闭时间等优化,确认了最佳偶联时间为30 min,最佳封闭时间为60 min... 详细信息

研制开发了一种基于时间分辨荧光纳米微球的T-2毒素快速定量检测卡,并对其在谷物中的检测性能进行了研究。本研究对标记工艺、划线工艺进行了探索,通过对微球偶联时间、封闭时间等优化,确认了最佳偶联时间为30 min,最佳封闭时间为60 min;通过对NC膜的筛选、划线湿度的摸索,确认了最佳NC膜为140膜,最佳划线湿度为45%~55%。同时,对该T-2毒素快速定量检测卡进行了性能验证:该检测卡的检测限为0.480μg/kg,定量限为1.020μg/kg,添加回收定量范围为1~100μg/kg,准确度86.09%~119.57%,重复性在11.95%以内,交叉反应率T-2毒素进行快速定量测定。

关键词： T-2毒素时间分辨荧光免疫层析抗体检测卡快速定量检测

氧化锌纳米颗粒光催化降解T-2毒素性能分析

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食品科学 2024年

作者：娄秀萍黄晴雯郭文博刘晓瑾王欣艺聂冬霞韩铮上海海洋大学食品学院上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所

T-2毒素容易污染水环境、食品和动物饲料，对人类和动物健康以及绿色生态环境构成严重威胁。T-2毒素理化性质稳定，难以通过常规的脱除手段实现绿色有效去除，采用光催化技术实现T-2毒素的高效降解方法亟待开发。本研究采用绿色温和的... 详细信息

T-2毒素容易污染水环境、食品和动物饲料，对人类和动物健康以及绿色生态环境构成严重威胁。T-2毒素理化性质稳定，难以通过常规的脱除手段实现绿色有效去除，采用光催化技术实现T-2毒素的高效降解方法亟待开发。本研究采用绿色温和的溶剂水热法制备出结晶度高、分散性良好的0D氧化锌(ZnO)纳米颗粒光催化材料，并通过高分辨透射电子显微镜、瞬态光电流响应等表征手段对其性质以及光催化降解T-2毒素性能、影响因素和机理进行探究。结果表明：成功制备得到平均粒径约为43 nm的ZnO纳米颗粒经条件优化后可以在 240 min光催化降解去除超过95%的初始浓度5 μg/mL的T-2毒素，反应速率常数达0.0299 μg/mL·min-1，催化剂最佳剂量0.5 mg/mL，最佳适用体系的pH为5-9。光电表征确定了ZnO良好的光吸收和响应性能以及电荷分离性能，并确定羟自由基在t-2降解中起主导作用。本实验为相关领域绿色高效降解、转化和去除T-2毒素提供了有效理论参考和技术支持。

关键词： T-2毒素光催化降解氧化锌超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS)