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间充质干细胞对脐血CIK/NK细胞CD69表达及培养体系中T调节细胞量比的影响

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中国实验血液学杂志 2009年第5期17卷 1301-1306页

作者：黎阳魏菁吴燕峰王潇娉黄科林永潮黄绍良方建培中山大学附属第二医院儿科广州510120 中山大学附属第二医院医学研究中心广州510120 中山大学附属第二医院干细胞研究中心广州510120

本研究通过transwell细胞隔离培养体系探讨骨髓源间充质干细胞(MSC)对脐血(CB)来源细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)/自然杀伤细胞(NK)CD69的表达以及对培养体系中CD4+CD25+t调节(treg)细胞量比的影响。利用聚碳酯膜孔径0.4μm的transwell隔... 详细信息

本研究通过transwell细胞隔离培养体系探讨骨髓源间充质干细胞(MSC)对脐血(CB)来源细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)/自然杀伤细胞(NK)CD69的表达以及对培养体系中CD4+CD25+t调节(treg)细胞量比的影响。利用聚碳酯膜孔径0.4μm的transwell隔离细胞培养系统将实验组分为隔离培养(transwell)组和直接混合(mix-ture)培养组;将MSC和CIK/NK细胞按1:20、1:50和1:100的比例分别在transwell组和mixture组中进行隔离和直接混合培养,每组6个重复孔;培养48小时后通过流式细胞术检测各组CIK/NK细胞上CD69的表达以及培养体系中CD4+CD25+细胞量比的变化。结果显示:加入MSC的实验各组CB-CIK细胞和NK细胞上表达的CD69比例均显著低于对照组(p值均transwell组中的CIK和NK细胞上表达的CD69,在MSC的高浓度组(1:20组)均显著低于低浓度组(1:50组和1:100组),其中CIK细胞组间的p值分别为0.046、0.020;NK细胞组间的p值均为0.000。mixture组中不同比例组间CIK细胞上表达的CD69无显著性差异,而NK细胞上CD69的表达在MSC的高浓度组(1:20组)均显著低于低浓度组(1:50组和1:100组)。加入MSC的CB-CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+细胞的量比不论在transwell还是mixture组中均显著高于对照组(p值均transwell组中,CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+细胞的量比在1:20组、1:50组均显著高于1:100组;在mixture各组中,CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+T调节细胞的量比均有显著性差异。MSC的高浓度组(1:20组),CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+细胞量比在mixture组显著高于transwell组;而在MSC的低浓度组(1:50组和1:100组),2组体系中的CD4+CD25+细胞量比无显著性差异。结论:MSC能以直接接触或间接作用的方式抑制异基因CIK/NK细胞的活化,这可能与MSC能上调培养体系中的CD4+CD25+treg细胞量比有关,且这种作用与MSC的数量呈浓度依赖关系。

关键词：骨髓源间充质干细胞细胞因子诱导杀伤细胞 NK细胞 CD69 T调节细胞

氨茶碱、地塞米松对哮喘患者CD4^+ CD25^+ T调节细胞抑制功能的影响

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重庆医学 2010年第1期39卷 43-45,47页

作者：张妍周文英邬伟明黄瑾中山大学附属第五医院呼吸科广东珠海519000 中山大学医学院中山大学附属第五医院中心实验室广东珠海519000

目的探讨哮喘患者CD4+ CD25+ T调节细胞的作用是否存在缺陷及药物(地塞米松、小剂量氨茶碱)对其作用的影响,为有效控制哮喘提供依据。方法分离哮喘患者及健康对照者外周血CD4+ CD25+ T调节细胞及CD4+CD25-t淋巴细胞并培养,设CD4+ CD25+ ... 详细信息

目的探讨哮喘患者CD4+ CD25+ T调节细胞的作用是否存在缺陷及药物(地塞米松、小剂量氨茶碱)对其作用的影响,为有效控制哮喘提供依据。方法分离哮喘患者及健康对照者外周血CD4+ CD25+ T调节细胞及CD4+CD25-t淋巴细胞并培养,设CD4+ CD25+ T调节细胞组、CD4+CD25-t淋巴细胞组及CD4+ CD25+ T调节细胞联合CD4+CD25-t淋巴细胞组,第3组又分为氨茶碱干预组、地塞米松干预组及空白对照组,72h后取培养上清液用ELISA法检测IFN-γ、IL-5、IL-13水平。结果健康对照者CD4+ CD25+ T调节细胞可抑制IFN-γ、IL-5及IL-13的生成(PT调节细胞后,健康对照者CD4+ CD25+ T调节细胞抑制IFN-γ(PT调节细胞抑制IL-5(PT调节细胞在抑制th2型细胞因子产生方面存在部分功能缺陷;地塞米松可增强健康者和哮喘者CD4+ CD25+ T调节细胞抑制th2型细胞因子的能力;氨茶碱可增强健康者CD4+ CD25+ T调节细胞抑制th2型细胞因子的能力,部分增强哮喘者CD4+ CD25+ T调节细胞的该抑制能力。

关键词：支气管哮喘 CD4+ CD25+ T调节细胞 th1/th2细胞因子地塞米松氨茶碱

CD4~＋CD25~＋FoxP3~＋免疫调节细胞在不同免疫应答状态乙型肝炎疫苗接种者中的表达(英文)

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中南大学学报（医学版） 2011年第11期36卷 1046-1051,1020页

作者：李金成谭德明刘洪波李科成中南大学湘雅医院感染科长沙410008 邵阳医学高等专科学校内科学教研室湖南邵阳422000 珠海市妇幼保健院检验中心珠海519001

目的:通过对乙型肝炎病毒疫苗接种后不同免疫应答人群CD4+CD25+T调节细胞(t regulatorycells,tregs)及FoxP3 mRNA的表达及细胞因子分泌的检测,探讨乙型肝炎病毒疫苗接种后免疫应答与免疫调节细胞和细胞因子之间的内在联系。方法:采集不... 详细信息

目的:通过对乙型肝炎病毒疫苗接种后不同免疫应答人群CD4+CD25+T调节细胞(t regulatorycells,tregs)及FoxP3 mRNA的表达及细胞因子分泌的检测,探讨乙型肝炎病毒疫苗接种后免疫应答与免疫调节细胞和细胞因子之间的内在联系。方法:采集不同反应人群(应答组18例,无应答组22例,对照组10例)全血,流式细胞术对外周血单核细胞的表面标志物CD4和CD25进行检测;实时荧光定量PCR检测人外周血单个核细胞FoxP3 mRNA的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测外周血单个核细胞经植物血凝素(phytohe-magglutinin,PHA)和乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)刺激后IL-4,IL-12,IL-18,IFN-γ的产生水平。结果:无应答组外周血CD4+CD25+tregs占CD4+t细胞的百分比明显高于应答组(P细胞经PHA和HBsAg刺激后,无应答组的IFN-γ浓度明显低于应答组和对照组(P细胞经PHA和HBsAg刺激后,IL-18,IL-4和IL-12的浓度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CD4+CD25+FoxP3+tregs在一定程度上参与了乙型肝炎疫苗接种应答的负性调控;乙型肝炎病毒疫苗接种后无应答可能与IFN-γ分泌不足有关。

关键词：乙型肝炎疫苗 T调节细胞抗原 CD4 CD25 FoxP3 疫苗应答

特异性免疫治疗对变应性鼻炎患者的远期疗效及外周血T调节细胞的影响

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医学综述 2016年第10期22卷 2021-2023,2029页

作者：袁萍绵阳市第三人民医院耳鼻咽喉科四川绵阳621000

目的探讨特异性免疫治疗对变应性鼻炎(AR)患者的远期疗效及外周血T调节细胞的影响。方法选取2011年5月至2012年8月于绵阳市第三人民医院耳鼻咽喉科确诊为AR患者96例,按照随机数字表法分为观察组(51例)和对照组(45例);另选择同期在医院... 详细信息

目的探讨特异性免疫治疗对变应性鼻炎(AR)患者的远期疗效及外周血T调节细胞的影响。方法选取2011年5月至2012年8月于绵阳市第三人民医院耳鼻咽喉科确诊为AR患者96例,按照随机数字表法分为观察组(51例)和对照组(45例);另选择同期在医院体检的健康人群50例作为健康组。观察组采用特异性免疫治疗,每周就诊1次,注射时间间隔30 min,每次注射一针,起始剂量20 U,剂量累计逐渐增加,15周后达到维持剂量;对照组采用常规药物治疗。分别于治疗前、治疗后15周及3年后进行疗效、生活质量评价,并观察外周血T调节细胞变化。结果两组患者治疗前、治疗15周后、治疗3年后症状改善程度评分均呈下降趋势[观察组:(8.9±1.2)分、(4.8±0.9)分、(2.5±1.2)分;对照组:(9.0±1.8)分、(4.5±0.8)分、(2.9±1.4)分],治疗15周以前对照组下降速度更快,治疗15周至治疗3年间观察组下降速度更快,差异有统计学意义(P0.05)、3年后观察组总有效率高于对照组[98.0%(50/51)比86.7%(39/45)],差异有统计学意义(Pt细胞比例观察组为(6.24±1.65)%,对照组为(6.28±1.46)%,治疗3年后观察组为(7.66±2.46)%,对照组为(6.32±1.56)%,治疗前两组患者在外周血CD4+CD25+t细胞比例显著低于健康组[(8.44±2.15)%],差异有统计学意义(Pt细胞比例较治疗前显著提高,观察组和对照组患者CD4+CD25+t细胞比例显著低于健康组,差异有统计学意义(P0.05)。外周血CD4+CD25hit细胞比例与健康组及治疗前后比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 AR患者特异性免疫治疗后,症状显著改善,疗效确切,生活质量明显提高,与CD4+CD25+T调节细胞功能改善有关。

关键词：变应性鼻炎特异性免疫治疗远期疗效 T调节细胞

CtLA4在T调节细胞诱导异种抗原免疫耐受中的机制研究

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激光生物学报 2016年第4期25卷 342-349页

作者：马小倩王佳王维细胞移植与基因治疗研究中心中南大学湘雅三医院湖南长沙410013

目的:通过靶向CtLA4 siRNA探讨CtLA4在T调节细胞诱导异种抗原免疫耐受中是否发挥功能及其作用机制。方法:体外扩增培养利用磁珠分选出的T调节细胞,AO/PI染色计算活率并通过细胞计数作出生长曲线,流式细胞仪检测扩增后细胞表型;采用Alex... 详细信息

目的:通过靶向CtLA4 siRNA探讨CtLA4在T调节细胞诱导异种抗原免疫耐受中是否发挥功能及其作用机制。方法:体外扩增培养利用磁珠分选出的T调节细胞,AO/PI染色计算活率并通过细胞计数作出生长曲线,流式细胞仪检测扩增后细胞表型;采用Alex488染料标记siRNA,通过流式细胞仪检测siRNA的转染效率;实时定量PCR检测靶向CtLA4 siRNA的沉默效率;流式细胞术检测CtLA4在蛋白水平的变化;混合淋巴实验检测CtLA4表达下调后,T调节细胞的功能变化。结果:经过4周体外扩增,T调节细胞能够增长约1 200倍,并具有高活率和高纯度;siRNA的转染效率为61.8%±4.5%;Realtime PCR和流式细胞术检测CtLA4在mRNA水平和蛋白水平均有不同程度下降,其结果与对照组相比差异显著(Pt效应细胞在受到异种抗原刺激时会发生增殖,treg细胞能够抑制这种增殖,但是CtLA4表达下调后明显减弱了T调节细胞的抑制能力。进一步,在DC细胞参与的混合淋巴实验中发现treg能够通过DC抑制t效应细胞对异种抗原的应答,而si CtLA4-treg不能通过DC抑制t效应细胞增殖。结论:CtLA4在treg介导的异种免疫应答中发挥着重要作用,这种作用方式可能是通过直接作用于t效应细胞或者间接通过DC细胞作用于t效应细胞发挥作用。靶向CtLA4 siRNA能够下调treg细胞CtLA4的表达,影响treg细胞抑制异种抗原引起t效应细胞应答的能力。

关键词：细胞毒性t淋巴细胞相关抗原4 小分子RNA T调节细胞异种抗原免疫应答

支气管哮喘患者Rho激酶信号通道与T调节细胞的相关性

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国际呼吸杂志 2014年第17期34卷 1321-1323页

作者：彭甘霖吴尚洁中南大学湘雅二医院呼吸内科长沙410011

支气管哮喘（简称哮喘）被认为是一种气道慢性非特异性炎症性疾病，许多细胞因子和炎症介质参与了这个病理生理过程。目前研究显示，Rho激酶信号通道及T调节细胞在哮喘的发病机制中起重要作用，而他汀类药物也具有抑制促炎性细胞因子和... 详细信息

支气管哮喘（简称哮喘）被认为是一种气道慢性非特异性炎症性疾病，许多细胞因子和炎症介质参与了这个病理生理过程。目前研究显示，Rho激酶信号通道及T调节细胞在哮喘的发病机制中起重要作用，而他汀类药物也具有抑制促炎性细胞因子和细胞因子的分泌，增加调节性t细胞数量和功能等作用。本文就哮喘中Rho激酶信号转导通路与调节t细胞的相关性进行简要综述。

关键词： Rho激酶 T调节细胞支气管哮喘

骨髓增生异常综合征CD4～+CD25～（high）T调节细胞、NKt细胞分析

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骨髓增生异常综合征CD4～+CD25～（high）T调节细胞、NKT细胞分析

作者：胡芃四川大学

学位级别：硕士

目的：对骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes，MDS)患者、MDS转化为急性髓细胞白血病(acute myelogenous leukemia，AML)患者及正常对照者的外周血淋巴细胞中CD4 CD25t细胞、NKt细胞及NK细胞水平进行测定，以此分析CD4 CD25... 详细信息

目的：对骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes，MDS)患者、MDS转化为急性髓细胞白血病(acute myelogenous leukemia，AML)患者及正常对照者的外周血淋巴细胞中CD4 CD25t细胞、NKt细胞及NK细胞水平进行测定，以此分析CD4 CD25t细胞、NKt细胞与MDS发病与进展的关系，初步探讨CD4 CD25t细胞、NKt细胞在MDS发生发展中的作用。方法：采用免疫荧光标记和双色流式细胞术检测30例确诊MDS及MDS转化AML患者外周血、及20例健康自愿者外周血CD4 CD25、CD4 CD25t细胞、NKt细胞、NK细胞占淋巴细胞比例。同时分析上述细胞之间关系及与疾病分型、预后危险级别的关系。结果：MDS及MDS患者组CD4 CD25t细胞水平及CD4 CD25t细胞／CD4比例显著高于健康对照组;NKt细胞数量显著低于正常组;NK细胞低于正常组，但差异没有统计学意义;CD3和CD4细胞显著低于正常组。在MDS及MDS患者组中危组患者CD4 CD25t细胞水平及CD4 CD25t细胞／CD4比例显著低于AML组;中危组患者CD4 CD25t细胞／CD4比例显著低于高危组;NKt细胞随危险程度升高而增加，但差异没有统计学意义。患者组不同疾病分型间比较，AML患者组CD4CD25t细胞／CD4比例显著高于RCMD患者和RAEB患者;CD4CD25t细胞水平、NK细胞和NKt细胞水平没有显著差异。骨髓原始细胞≥5％组较＜5％组的CD4CD25t细胞／CD4+比例显著升高;CD4CD25t细胞水平、NK细胞和NKt细胞水平没有显著差异。CD4 CD25t细胞有随NKt细胞增加而升高的趋势，NKt细胞与NK细胞显著正相关;CD4CD25t细胞／CD4比例与患者骨髓原始细胞数量呈显著直线相关。结论： 1，MDS及MDS转化AML患者CD3细胞、CD4细胞、NKt细胞水平显著降低，存在抗肿瘤免疫缺陷，该缺陷与CD4CD25细胞密切相关。 2，MDS及MDS转化AML患者CD4 CD25T调节细胞显著升高;CD4 CD25／CD4比例与骨髓原始细胞显著直线相关，随患者预后危险度的增加而增加。提示CD4 CD25T调节细胞与MDS的发生、发展及向白血病转化过程密切相关。 3，MDS及MDS转化AML患者NKt细胞显著低于正常，并随预后危险级别升高而升高，但差异没有统计学意义;患者CD4 CD25细胞有随NKt细胞增加的趋势，NK细胞与NKt细胞数量呈正相关;提示NKt细胞作为CD4 CD25细胞的辅助细胞参与了MDS的发生、发展及向白血病转化的过程。

关键词：骨髓增生异常综合征 CD4+CD25high细胞 T调节细胞 NKt细胞流式细胞术

急性期哮喘患儿th17细胞与T调节细胞平衡的临床研究

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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河北联合大学学报（医学版） 2013年第4期15卷 463-464页

作者：闫晓燕高晓增逯春洁韩秀红冯玉钰王彬张俊玲河北联合大学附属医院儿科河北唐山063000 河北联合大学附属医院麻醉科河北唐山063000

全球哮喘防治创议（GINA）使得绝大多数哮喘患者的情况得以很好的控制,但仍有部分患者的症状恶化,究其根本原因就是哮喘的发病机制仍然不明确,早期的研究多集中在th1/th2失衡这一理论的问题,但随着研究的不断深入,th17细胞与T调节细胞... 详细信息

全球哮喘防治创议（GINA）使得绝大多数哮喘患者的情况得以很好的控制,但仍有部分患者的症状恶化,究其根本原因就是哮喘的发病机制仍然不明确,早期的研究多集中在th1/th2失衡这一理论的问题,但随着研究的不断深入,th17细胞与T调节细胞相继进入了研究的视野,这两类细胞可以解释一些th1/th2失衡理论所不能解释的问题,

关键词： th17细胞 T调节细胞哮喘

外周血HLA-B27、T调节细胞及CD_5^+B细胞在强直性脊柱炎过程中的意义

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中国医药指南 2013年第26期11卷 327-328页

作者：王见涛林旭红王亚强白万昀河南大学淮河医院检验科河南开封475000

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD4+CD25+CD127+细胞(treg细胞)、CD5+CD19+细胞(CD5+B细胞)、人类白细胞抗原B27(HLA-B27)、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)变化特点及其临床意义。方法应用流式细胞术分析85例AS患者及36例健康... 详细信息

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD4+CD25+CD127+细胞(treg细胞)、CD5+CD19+细胞(CD5+B细胞)、人类白细胞抗原B27(HLA-B27)、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)变化特点及其临床意义。方法应用流式细胞术分析85例AS患者及36例健康对照者HLA-B27、treg细胞、CD5+B细胞百分率,全自动生化分析仪测CRP、魏氏法测ESR。结果约94%AS患者HLA-B27阳性。活动期AS患者treg细胞百分率低于健康对照组、CD5+B细胞百分率高于健康对照组;ESR、CRP均明显高于对照组。结论 HLA-B27阳性表达与AS高度相关,treg细胞百分率降低、CD5+B细胞百分率升高可能是AS活动的原因。

关键词： HLA-B27 T调节细胞 CD5+B 细胞强直性脊柱炎