间充质干细胞对脐血CIK/NK细胞CD69表达及培养体系中T调节细胞量比的影响

作     者：黎阳 魏菁 吴燕峰 王潇娉 黄科 林永潮 黄绍良 方建培 LI Yang;WEI Jing;WU Yan-Feng;WANG Xiao-Ping;HUANG Ke;LIN Yong-Chao;HUANG Shao-Liang;FANG Jian-Pei

作者机构：中山大学附属第二医院儿科广州510120 中山大学附属第二医院医学研究中心广州510120 中山大学附属第二医院干细胞研究中心广州510120 

出 版 物：《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期：2009年第17卷第5期

页      面：1301-1306页

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号30500469) 广州科学仪器协作共用网基金资助项目(编号2006034) 中山大学北校区学生科研基金资助项目(编号2006031) 

主　　题：骨髓源间充质干细胞 细胞因子诱导杀伤细胞 NK细胞 CD69 T调节细胞 

摘      要：本研究通过Transwell细胞隔离培养体系探讨骨髓源间充质干细胞(MSC)对脐血(CB)来源细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)/自然杀伤细胞(NK)CD69的表达以及对培养体系中CD4+CD25+T调节(Treg)细胞量比的影响。利用聚碳酯膜孔径0.4μm的Transwell隔离细胞培养系统将实验组分为隔离培养(Transwell)组和直接混合(mix-ture)培养组;将MSC和CIK/NK细胞按1:20、1:50和1:100的比例分别在Transwell组和mixture组中进行隔离和直接混合培养,每组6个重复孔;培养48小时后通过流式细胞术检测各组CIK/NK细胞上CD69的表达以及培养体系中CD4+CD25+细胞量比的变化。结果显示:加入MSC的实验各组CB-CIK细胞和NK细胞上表达的CD69比例均显著低于对照组(p值均0.001).Transwell组中的CIK和NK细胞上表达的CD69,在MSC的高浓度组(1:20组)均显著低于低浓度组(1:50组和1:100组),其中CIK细胞组间的p值分别为0.046、0.020;NK细胞组间的p值均为0.000。mixture组中不同比例组间CIK细胞上表达的CD69无显著性差异,而NK细胞上CD69的表达在MSC的高浓度组(1:20组)均显著低于低浓度组(1:50组和1:100组)。加入MSC的CB-CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+细胞的量比不论在Transwell还是mixture组中均显著高于对照组(p值均0.01);在Transwell组中,CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+细胞的量比在1:20组、1:50组均显著高于1:100组;在mixture各组中,CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+T调节细胞的量比均有显著性差异。MSC的高浓度组(1:20组),CIK/NK细胞体系中的CD4+CD25+细胞量比在mixture组显著高于Transwell组;而在MSC的低浓度组(1:50组和1:100组),2组体系中的CD4+CD25+细胞量比无显著性差异。结论:MSC能以直接接触或间接作用的方式抑制异基因CIK/NK细胞的活化,这可能与MSC能上调培养体系中的CD4+CD25+Treg细胞量比有关,且这种作用与MSC的数量呈浓度依赖关系。