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运动预处理对心肌SarcK_(ATP)通道亚基Kir6.2和sur2a蛋白表达的影响

中国运动医学杂志 2015年第9期34卷 881-885,909页

作者：王凯孙晋海曲阜师范大学体育科学学院曲阜273165 山东大学体育学院

目的:探讨运动预处理对心肌肌膜ATP敏感钾(Sarc KATP)通道亚基内向整流钾通道6.2(Kir6.2)和磺酰脲受体(sur2a)蛋白表达变化的影响。方法:48只SD大鼠分对照组(C组)、力竭运动组(EE组)、早期运动预处理组(EEP组)、早期运动预处理+力竭运动... 详细信息

目的:探讨运动预处理对心肌肌膜ATP敏感钾(Sarc KATP)通道亚基内向整流钾通道6.2(Kir6.2)和磺酰脲受体(sur2a)蛋白表达变化的影响。方法:48只SD大鼠分对照组(C组)、力竭运动组(EE组)、早期运动预处理组(EEP组)、早期运动预处理+力竭运动组(EEP+EE组)、晚期运动预处理组(LEP组)、晚期运动预处理+力竭运动组(LEP+EE组),每组8只。一次大强度间歇跑台运动建立运动预处理模型,大强度力竭跑台运动建立力竭运动模型。用免疫荧光组织化学方法观察Kir6.2和sur2a蛋白表达分布变化,用免疫印迹方法检测Kir6.2和sur2a蛋白表达。结果:与C组相比,EE组心肌Kir6.2和sur2a蛋白表达水平显著上升,EEP组心肌Kir6.2蛋白表达水平显著降低,LEP组心肌sur2a蛋白表达水平显著降低。与EE组相比较,EEP+EE和LEP+EE组心肌Kir6.2和sur2a蛋白表达水平显著降低。结论:运动预处理对心肌Sarc KATP通道Kir6.2和sur2a蛋白水平在早、晚期不同阶段的影响并不完全一致,而该通道Kir6.2和sur2a蛋白水平在运动预处理诱导减轻力竭运动所致大鼠运动性心肌损伤保护效应中的变化趋势是一致的。心肌Sarc KATP通道通过Kir6.2和sur2a蛋白水平变化参与了运动预处理诱导的减轻力竭运动所致大鼠运动性心肌损伤保护效应。

关键词：运动预处理心肌损伤 SarcKATP通道 Kir6.2 sur2a 力竭运动

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蛋白激酶C对运动预处理不同保护时期中心肌ATP敏感钾通道亚基kir6.2和sur2a表达影响的研究

蛋白激酶C对运动预处理不同保护时期中心肌ATP敏感钾通道亚基kir6...

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第十二届全国体育科学大会

作者：王凯贾莹莹韩孟纾曹艺丹江苏师范大学

研究目的:运动预处理(exercise preconditioning,EP)是一种通过大强度间歇运动诱导心肌产生保护效应的运动方式,EP心肌保护效应分为早期保护效应(EEP)和晚期保护效应(LEP)两种。本研究主要探讨在EP心肌保护效应不同保护时期中蛋白激酶C(... 详细信息

研究目的:运动预处理(exercise preconditioning,EP)是一种通过大强度间歇运动诱导心肌产生保护效应的运动方式,EP心肌保护效应分为早期保护效应(EEP)和晚期保护效应(LEP)两种。本研究主要探讨在EP心肌保护效应不同保护时期中蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)对心肌ATP敏感钾通道(ATP-sensitive potassium channels,KATP channels)亚基内向整流钾通道6.2(kir6.2)和磺酰脲受体2A(sur2a)表达调控的影响。研究方法:健康雄性SD大鼠48只,随机分为对照组(C组)、力竭运动组(EE组)、早期运动预处理组(EEP组)、PKC抑制剂+早期运动预处理组(CHE+EEP)、晚期运动预处理组(LEP组)和PKC抑制剂+晚期运动预处理组(CHE+LEP)。大强度跑台运动建立EP模型,力竭跑台运动致大鼠运动性心肌损伤。在建模结束后30min和24h之内,进行腹腔麻醉取材,同时使用PKC抑制剂白屈菜赤碱(CHE)阻断心肌KATP通道,揭示在EP心肌保护效应中PKC对kir6.2和sur2a表达调控的影响。用原位杂交方法观察kir6.2 mRNA和sur2a mRNA的分布变化,用实时荧光定量PCR方法检测kir6.2m RNA和sur2am RNA的表达变化,用免疫荧光组织化学方法观察kir6.2和sur2a蛋白表达分布变化,采用免疫印迹方法检测kir6.2和sur2a蛋白的表达变化。研究结果:3.1原位杂交及实时荧光定量PCR结果C组心肌kir6.2和sur2a原位杂交信号呈深棕褐色,于心肌细胞胞浆中颗粒状弥散分布。CHE+EEP组kir6.2原位杂交信号较EEP组减弱,CHE+EEP组sur2a原位杂交信号较EEP组无明显变化。CHE+LEP组kir6.2原位杂交信号较LEP组有减弱趋势,CHE+LEP组sur2a原位杂交信号较LEP组有增强趋势。和EEP组相比,CHE+EEP组kir6.2 mRNA表达水平明显下降(Psur2a mRNA表达水平呈下降趋势(P>0.05)。和LEP组相比,CHE+LEP组kir6.2m RNA表达水平呈下降趋势(P>0.05),CHE+LEP组sur2a mRNA表达水平呈升高趋势(P>0.05)。从Kir6.2mRNA和sur2am RNA表达变化趋势比较可以看出,与EEP组相比,CHE+EEP组Kir6.2m RNA表达变化趋势是下降的,而sur2am RNA表达变化趋势不明显。与LEP组相比,CHE+LEP组Kir6.2mRNA和sur2amRNA表达变化趋势是相反的,Kir6.2mRNA表达降低,而sur2am RNA表达升高。3.2免疫荧光组织化学及免疫印迹检测结果C组心肌kir6.2和sur2a免疫荧光染色分别呈亮绿色和亮红色,在心肌纵切面上,kir6.2和sur2a免疫荧光阳性产物呈规则的条纹状主要集中分布于心肌细胞表面。CHE+EEP组kir6.2免疫阳性反应较EEP组增强,CHE+EEP组sur2a免疫阳性反应较EEP组减弱。CHE+LEP组kir6.2免疫阳性反应较LEP组有减弱趋势,CHE+LEP组sur2a免疫阳性反应较LEP组增强。与EEP组相比,CHE+EEP组心肌kir6.2蛋白表达水平明显升高(Psur2a表达水平明显下降(P2蛋白表达水平降低,但不具有显著性差异(P>0.05),CHE+LEP组sur2a表达水平明显升高(P2和sur2a蛋白表达变化趋势比较可以看出,与EEP组相比,CHE+EEP组的Kir6.2和sur2a蛋白表达变化趋势是相反的,Kir6.2蛋白表达升高,而sur2a蛋白表达降低。与LEP组相比,CHE+LEP组Kir6.2和sur2a蛋白表达变化趋势也是相反的,不过,此时Kir6.2蛋白表达降低,而sur2a蛋白表达升高。研究结论:蛋白激酶C调控了运动预处理早、晚期保护效应中心肌ATP敏感钾通道亚基kir6.2和sur2a的表达,但是,在早期保护效应中,蛋白激酶C分别引起了kir6.2和sur2a表达的升高和降低,而在晚期保护效应中,蛋白激酶C分别引起了kir6.2和sur2a表达的降低和升高。在运动预处理早、晚期不同的心肌保护效应中,蛋白激酶C对kir6.2和sur2a表达调控影响是相反的,这提示,在运动预处理早、晚期保护效应中,蛋白激酶C对心肌ATP敏感钾通道亚基kir6.2和sur2a表达调控影响具有互补效应。

关键词：蛋白激酶C 运动预处理心肌ATP敏感钾通道 kir6.2 sur2a

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