检索结果-南通市图书馆

检索条件"主题词=RhoA-ROCK信号通路"

共 12 条记录，以下是11-20 订阅

全选清除本页清除全部题录导出标记到"检索档案"

详细简洁

排序：

内源性H2S抗缺血性脑损伤的rhoa-rock通路抑制机制及其介导的杜鹃花总黄酮的舒张脑血管作用

内源性H2S抗缺血性脑损伤的RhoA-ROCK通路抑制机制及其介导的杜鹃...

引用

作者：郭芳芳安徽医科大学

学位级别：硕士

中风仍然是全球卫生负担,约有1370万人患有中风及其并发症,如运动功能下降和神经行为变化,中风可分为缺血性中风和出血性中风,后者则不太常见。缺血性中风由脑动脉内形成的血块引起,可导致脑梗死和神经缺陷。虽然再灌注可以增加缺血区... 详细信息

中风仍然是全球卫生负担,约有1370万人患有中风及其并发症,如运动功能下降和神经行为变化,中风可分为缺血性中风和出血性中风,后者则不太常见。缺血性中风由脑动脉内形成的血块引起,可导致脑梗死和神经缺陷。虽然再灌注可以增加缺血区的血液供应,但会促进氧化应激和炎症的发生,导致神经元细胞进一步恶化死亡,这种现象被称为缺血/再灌注损伤(Ischemia/Reperfusion,I/R)。已有充分证据证明,炎症反应和缺血后发生的氧化应激反应受rhoa(Ras同源基因家族,成员A)的调节。rhoa及其下游效应子rock(Rho依赖性卷曲螺旋激酶)的激活可以诱导LIM激酶(LIMK)和肌动蛋白解聚因子cofilin(CFL)的磷酸化,从而加剧神经炎症和细胞毒性。对于脑I/R损伤,脑血管直径的变化是至关重要的,因为它可以通过血管平滑肌的收缩和舒张供给脑组织所需要的血流量和氧气。而在血管中,硫化氢(Hydrogen sulfide,HS)可以调节血管张力,抑制增殖,对血管平滑肌细胞(VSMC)的凋亡和自噬产生双向作用,是体内重要的气体信号分子。其主要是由胱硫醚-γ-裂解酶(L-cystathionine-γ-lyase,CSE),胱硫醚-β-合成酶(L-cystathionine-?-synthetase,CBS)和3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,3-MST)催化生成。此外,许多血管重塑相关疾病的发展,包括高血压、动脉粥样硬化和肺动脉高压,已被证明与HS生成受损有关。但是内源性HS是否通过rhoa-rock信号通路发挥作用呢?尚未见这方面的详细报道。随着对中药的不断研究,发现中药的作用越来越广泛。研究表明杜鹃花总黄酮(Total flavones of Rhododendra,TFR)具有保护脑损伤,舒张血管等作用,但其舒张血管作用的机制并不清楚。因此,本课题通过建立脑缺血再灌注模型观察体内HS对脑损伤的保护作用以及与rhoa-rock信号通路的关系。并且在体外观察了内源性HS在基底动脉血管舒张中的作用以及与rhoa-rock信号通路的关系,同时探讨了TFR舒张血管作用与内源性HS的关系。目的1.研究CSE产生的HS增加脑血流和抗缺血性脑损伤作用与rhoa-rock信号通路的关系。2.研究内皮源性HS介导的脑血管舒张反应与rhoa-rock信号通路的关系。3.研究TFR舒张脑血管作用与HS通路的关系。方法1.采用双侧颈总动脉结扎法构建小鼠脑缺血再灌注模型,分别于缺血前,缺血后以及再灌注20 min内采用激光散斑血流仪监测脑血流量的变化。实验分组:WT鼠分为假手术组、模型组、L-Cys组、Na HS组、PPG组、以及PPG和L-Cys合用组,敲除鼠分为假手术组,模型组,L-Cys组。2.采用病理切片染色法观察脑缺血再灌注后L-Cys和Na HS对脑组织海马区病理形态学变化的影响。3.采用亚甲蓝法测定脑缺血再灌注损伤后血清中硫化氢含量。4.采用试剂盒检测脑缺血再灌注损伤后血清中乳酸脱氢酶含量。5.采用酶联免疫法检测脑缺血再灌注损伤后脑组织中神经元特异性烯醇化酶含量,rhoa和rock活性。6.采用Western Blot法测定脑缺血再灌注损伤后脑组织中rock蛋白的表达。7.采用离体血管环实验观察大鼠脑基底动脉在不同抑制剂预处理下对ACh和TFR的舒张作用。结果1.脑血流量检测结果显示,在WT小鼠中,与假手术组相比,模型组在脑I/R后20 min内血流量均有明显减少。与模型组相比,底物L-Cys组和Na HS组小鼠脑血流量分别在再灌注5 min和10 min时就有明显的恢复,在20 min时基本恢复到假手术组水平。CSE抑制剂PPG对脑血流没有明显的影响,但可显著地减弱L-Cys对血流量的恢复作用。而在rock敲除鼠中,与模型组相比,L-Cys组小鼠再灌注后20 min内并没有恢复到缺血前水平。结果提示L-Cys可通过CSE促进脑I/R损伤小鼠脑血流量的恢复,且与rock的存在密切相关。2.病理切片染色观察脑部海马区的病理形态变化实验结果表明,在WT小鼠中,假手术组海马区的神经元细胞体积较大且为圆形,具有明显的核仁。细胞排列成多层,整齐而致密。然而,模型组海马区神经元或锥体细胞呈三角形或不规则形状,细胞皱缩,具有看不见的核仁和无序排列。与模型组相比,Na HS组和L-Cys组可以明显改善病理损伤,大多数神经细胞恢复正常,只有少数神经细胞皱缩,神经元坏死得到改善,正常细胞数量增加。PPG组损伤并没有改善,但PPG可以降低L-Cys的保护作用。而在rock敲除鼠中,与模型组相比,L-Cys没有改善病理区的损伤。结果表明L-Cys可通过CSE对小鼠脑组织中海马区神经元的I/R损伤产生保护作用

关键词：硫化氢血管直径胱硫氨酸-γ-裂解酶脑缺血再灌注 rhoa-rock信号通路

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

内皮源性CSE产生的H2S介导杜鹃花总黄酮抑制神经细胞中rhoa-rock通路保护脑缺血缺氧性损伤的实验研究

内皮源性CSE产生的H2S介导杜鹃花总黄酮抑制神经细胞中RhoA-ROCK...

引用

作者：盛菊安徽医科大学

学位级别：硕士

大脑是一种对缺氧极其敏感的器官,在缺血的情况下会发生一系列的继发反应,导致脑组织受损及大脑功能的损害,而缺血后的血流再恢复会进一步加重炎症反应从而加剧脑损伤,也被称作脑缺血再灌注损伤（ischemia/reperfusion,I/R）。因此,探... 详细信息

大脑是一种对缺氧极其敏感的器官,在缺血的情况下会发生一系列的继发反应,导致脑组织受损及大脑功能的损害,而缺血后的血流再恢复会进一步加重炎症反应从而加剧脑损伤,也被称作脑缺血再灌注损伤（ischemia/reperfusion,I/R）。因此,探索潜在的脑缺血再灌注损伤治疗药物尤为重要。我们发现从杜鹃花科植物中获取的杜鹃花总黄酮（total flavones of rhododendra,TFR）对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其主要成分包括槲皮素、金丝桃苷等黄酮类物质,有一定的药用价值。内源性硫化氢（hydrogen sulfide,HS）是一种细胞内信号分子,能自由的穿过细胞膜,在血管中主要是通过脑血管内皮细胞内的CSE催化L-半胱氨酸形成,具有抗炎、抗氧化应激、促进毛细血管生成和血管舒张的重要功能。Rho A-rock信号通路在机体内主要负责细胞的生长、增殖、迁移和分化等重要的信号转导过程,是参与出血性中风脑损伤的重要病理因素。我们以前的研究表明TFR可通过促进HS生成来抑制Rho A-rock通路,但其确切机制仍不清楚。因此,本课题使用CSE基因全敲除小鼠（CSE KO）和rock基因半敲除小鼠（rockHK）,从体内和体外两个方面分别探讨TFR保护脑缺血再灌注损伤作用的促进CSE产生HS抑制rock机制。目的:1.探讨血管内皮源性CSE产生的HS对TFR保护小鼠脑缺血再灌注损伤时的作用,以及与Rho A-rock通路的关系。2.观察rock杂合敲除以及rock抑制剂（KD025）对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。3.研究内皮细胞中CSE产生的HS对神经细胞缺氧性损伤的保护作用,以及与Rho A-rock通路的关系。方法:1.采用中动脉线栓阻塞方法构建小鼠脑缺血再灌注损伤模型（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）1.1实验分组:野生型CSE小鼠（wide type,WT）和敲除型CSE小鼠（knock out,KO）随机分为9组,每组10只。分别为:Sham WT组、MCAO WT组、TFR40mg/kg WT组、TFR80mg/kg WT组、TFR120mg/kg WT组、Na HS4.8mg/kg WT组,Sham KO组、MCAO KO组、TFR120mg/kg KO组。1.2实验分组:野生型rock小鼠（wide type,WT）和杂合敲除型rock小鼠（heterozygote knockout,HK）随机分为8组,每组10只。分别为:Sham WT组、Sham+KD025 WT组、MCAO WT组、MCAO+KD025 WT组、TFR120mg/kg WT组,Sham HK组、MCAO HK组、TFR120mg/kg HK组。1.3采用中动脉线栓阻塞方法构建小鼠脑缺血再灌注损伤（Ischemia/Reperfusion,I/R）模型,缺血2小时恢复再灌注24小时。1.4采用激光散斑成像技术（laser speckle imaging,LSI）监测小鼠缺血前,缺血20min后,再灌注20min后脑血流量的变化。1.5根据Zea-Longa的神经功能评分来检测小鼠的神经功能缺陷。1.6采用TTC染色法测定小鼠的脑梗死面积。1.7使用试剂盒检测血清中乳酸脱氢酶（LDH）和神经特异性烯醇化酶（NSE）的水平。1.8使用试剂盒亚甲基蓝法检测脑血管中HS的含量。1.9使用ELISA试剂盒检测Rho A、rock和rock的活性2.0 Western blot法检测脑海马组织中Rho A、rock和rock蛋白的表达。2.用SD大鼠在新生后24 h内乳鼠原代培养海马神经元细胞,用SD大鼠原代培养脑血管内皮细胞,待免疫荧光法进行细胞鉴定后,再用Transwell共培养技术,将二种细胞进行共培养。2.1实验分组:NC+EC分为:Control、H/R、H/R+TFR（810 mg/L）、H/R+Na HS（200μmol/L）,NC+EC分为:Control、H/R、H/R+TFR（810 mg/L）、H/R+Na HS（200μmol/L）。2.2除对照组细胞外,其他细胞至三气培养箱（94%N-5%CO-1%O）缺氧10小时后再复氧14小时。2.3使用cck-8试剂盒检测大鼠海马神经细胞活力。2.4采用流式细胞仪和细胞核染色法,测定了大鼠海马神经细胞的凋亡。2.5使用试剂盒测定了大鼠海马神经细胞内乳酸脱氢酶（LDH）和神经特异性烯醇化酶（NSE）的水平。2.6使用试剂盒亚甲基蓝法检测大鼠海马神经元细胞中HS的含量。2.7使用ELISA试剂盒检测大鼠海马神经细胞中Rho A和rock的活性。2.8 Western blot法检测大鼠海马神经细胞中Rho A和rock蛋白的表达。结果:1.脑

关键词：内源性硫化氢脑缺血再灌注损伤 rhoa-rock信号通路大鼠海马神经元细胞大鼠脑血管内皮细胞

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

全选清除本页清除全部题录导出标记到“检索档案”

共2页 << < 1 2 > >> 跳转到页

回到顶部

执行限定条件

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：