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中国病理生理杂志 2021年第5期37卷 834-840页

作者：张书娅邵钟铭伍彩霞刘晓晓邹园揭伟郭峻莉海南医学院第一附属医院海南省热带心血管病研究重点实验室海南医学院急救与创伤研究教育部重点实验室海南海口571199 广东医科大学基础医学院病理学系广东湛江524023

目的:探讨糖尿病状态下rho家族gtp酶3(Rnd3)表达改变对骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)一般生物学特性的影响。方法:高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素建立野生型及Rnd3基因敲除杂合子(Rnd3^(+/-))SD大鼠糖尿病模型。建模成功后,分离、培养各组... 详细信息

目的:探讨糖尿病状态下rho家族gtp酶3(Rnd3)表达改变对骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)一般生物学特性的影响。方法:高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素建立野生型及Rnd3基因敲除杂合子(Rnd3^(+/-))SD大鼠糖尿病模型。建模成功后,分离、培养各组大鼠骨髓源性EPCs并鉴定。CCK-8法测定细胞活力,Western blot检测各组EPCs中凋亡相关蛋白caspase-3和Bcl-2的表达,Transwell实验测定迁移能力,ELISA检测各组细胞分泌的血管内皮生长因子(VEGF)的水平,Matrigel成管实验检测EPCs管样结构形成能力。结果:高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素成功复制SD大鼠糖尿病模型。成功分离大鼠骨髓源性EPCs。糖尿病状态降低了EPCs的活力、迁移和旁分泌VEGF的能力,抑制了EPCs的Matrigel内成管能力,上述情况在Rnd3敲除后更明显。Rnd3敲除后Bcl-2水平下降而caspase-3表达上调。结论:Rnd3表达的维持对骨髓源性EPCs的增殖、迁移和血管生成等一般生物学特性具有正性调节作用。Rnd3表达不足加剧了糖尿病对EPCs一般生物学功能的损伤。

关键词：内皮祖细胞糖尿病 rho家族gtp酶3 细胞活力细胞迁移血管新生

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Rnd3与Eps8蛋白在子宫腺肌病中的表达及意义

Rnd3与Eps8蛋白在子宫腺肌病中的表达及意义

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作者：王丹四川医科大学

学位级别：硕士

目的:本实验是通过检测细胞迁移的相关因子rho家族gtp酶3(Rnd3)和表皮生长因子受体通路底物8(Eps8)在子宫腺肌病(adenomyosis,AM)中的表达情况,探讨这两者在子宫腺肌病的发生发展过程中的作用及其相互关系,以期为研究子宫腺肌病的病因... 详细信息

目的:本实验是通过检测细胞迁移的相关因子rho家族gtp酶3(Rnd3)和表皮生长因子受体通路底物8(Eps8)在子宫腺肌病(adenomyosis,AM)中的表达情况,探讨这两者在子宫腺肌病的发生发展过程中的作用及其相互关系,以期为研究子宫腺肌病的病因机制及临床诊治提供实验依据和新思路。方法:1.研究对象及实验分组:本研究的实验组织为子宫切除术后的离体子宫标本,子宫腺肌病样本共32例,实验中设置异位病灶区内膜组织为异位组、取其非异位区子宫内膜组织设为在位组,子宫标本来自于四川省泸州医学院附属医院妇产科;并收集同院同时期仅为子宫肌瘤的32例术后标本设为对照组,其取材来源于无肌瘤区域的子宫内膜组织。以上两类疾病的实验标本均获得两位病理医师镜下确诊。2.检测指标及其方法:为保证实验效果,参选本实验的所有患者对象在行子宫切除术前至少半年内未服用激素和接受对抗子宫腺肌病的药物治疗。符合入选条件的组织标本采用免疫组化方法检测Rnd3蛋白与Eps8在三组子宫内膜组织中的表达水平,实验图像采用Image Pro 6.0专业图像分析系统检测Rnd3蛋白与Eps8阳性表达的细胞的平均光密度值(mean optical density,MOD),分析两者在三组内膜腺上皮细胞中的表达水平的差异及其相关性。3.统计学相关分析:本实验所得数据应用统计软件包SPSS17.0进行相关统计分析处理,设定P3蛋白在三组内膜中的表达结果为:Rnd3蛋白在异位组的表达水平明显低于对照组及在位组,两者比较的差异均有统计学意义(P3在在位组及对照组的表达无明显差异,其结果无统计学意义(P>0.05)。2、Eps8在三组内膜中的表达结果为:Eps8在异位组的表达明显高于对照组,有显著差别,其差异有统计学意义(P0.05)。3、Eps8和Rnd3的相关性:Eps8与Rnd3在异位组的表达呈负相关(r=-0.517,P=0.0023>0.05)。结论:1、在异位组和在位组中Rnd3表达的明显下调及Eps8表达的明显上调,提示Rnd3和Eps8的表达异常可能是促成子宫腺肌病患者子宫内膜细胞迁移并在异位内膜不断增殖的重要原因之一,是参与AM发病并最终促使AM形成的重要原因之一。2、三组内膜组织中,异位组中Rnd3的表达最低,Eps8的表达最高,这进一步表明Rnd3与Eps8的这种相互拮抗或负反馈调节作用在异位内膜组织中表现得更为明显,提示二者在内膜细胞中表达异常导致的相互作用失衡可能是异位内膜细胞能适应异位区环境并在其中生长,从而进一步促进AM发生发展的关键因素之一。3、Rnd3和Eps8在异位和在位内膜组织中的表达均呈负相关,提示二者存在相互拮抗或负反馈调节关系。

关键词：子宫腺肌病增殖细胞迁移 rho家族gtp酶3 表皮生长因子受体通路底物8

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沉默RND3表达对氧糖缺失/复氧复糖损伤海马神经细胞炎症反应和细胞凋亡的影响

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昆明医科大学学报 2021年第10期42卷 14-21页

作者：李俊杰蒋海燕白文娅霍思颖孙志生邵建林昆明医科大学第一附属医院麻醉科云南昆明650032 蒙自市人民医院麻醉科云南蒙自661100

目的探讨沉默rho家族gtp酶3(RND3)表达对氧糖缺失/复氧复糖(OGD/R)损伤海马神经细胞炎症反应和细胞凋亡的影响。方法使用包有沉默RND3表达的短发夹RNA(shRND3)及其阴性对照(shRND3-NC)序列的慢病毒载体分别对海马神经细胞进行转染。转... 详细信息

目的探讨沉默rho家族gtp酶3(RND3)表达对氧糖缺失/复氧复糖(OGD/R)损伤海马神经细胞炎症反应和细胞凋亡的影响。方法使用包有沉默RND3表达的短发夹RNA(shRND3)及其阴性对照(shRND3-NC)序列的慢病毒载体分别对海马神经细胞进行转染。转染成功后对细胞进行2 h的缺氧缺糖培养再行复氧复糖建立OGD/R模型。CCK-8法检测细胞活力,RT-qPCR检测RND3及炎症和凋亡相关分子的mRNA表达,Elisa检测细胞上清液中炎症因子的浓度,Western Blot检测RND3和凋亡蛋白以及胞核内NF-κB的蛋白表达,Annexin V-FITC/PI染色和流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果与正常细胞相比,OGD/R损伤后细胞活力降低(P3和Bax)表达升高(P3阴性组相比,沉默RND3后,细胞活力增加(P3和Bax)表达降低(P3表达通过抑制炎症反应和细胞凋亡减轻海马神经细胞的OGD/R损伤,沉默RND3抑制炎症反应的机制可能与抑制NF-κB通路有关。

关键词： rho家族gtp酶3 氧糖缺失/复氧复糖炎症反应细胞凋亡 NF-κB通路

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