检索结果-南通市图书馆

作者：李海营重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:子痫前期(preeclampsia,PE)是妊娠期间特有的且累及多系统的疾病,其发生于孕20周后,主要表现为新发的蛋白尿与高血压,据报道其发病率约为3-5%,对孕产妇及围产儿的生命安全造成极大的威胁。目前关于子痫前期的确切发病机制尚不明确... 详细信息

目的:子痫前期(preeclampsia,PE)是妊娠期间特有的且累及多系统的疾病,其发生于孕20周后,主要表现为新发的蛋白尿与高血压,据报道其发病率约为3-5%,对孕产妇及围产儿的生命安全造成极大的威胁。目前关于子痫前期的确切发病机制尚不明确,但已有研究表明,PE的发生与滋养细胞侵袭不足导致的胎盘缺血、氧化应激学说、血管内皮受损学说、炎症学说及母胎界面免疫失衡学说等有密不可分的关系。课题组前期通过cDNA表达谱芯片技术筛选发现核糖体蛋白S4,y连锁1基因(Ribosomal protein S4 y-linked 1,rps4y1)在子痫前期胎盘组织中mRNA的表达较正常妊娠晚期胎盘组织显著升高。rps4y1基因编码的蛋白是进化保守的核糖体蛋白S4E家族的一个成员,为构成细胞核糖体40s小亚基的蛋白之一,该基因功能异常在特纳综合征患者中扮演了重要作用。已有研究证实rps4y1蛋白表达在血管内皮细胞及滋养层细胞,并且主要定位于细胞质。而rps4y1在PE中的功能国内外尚无相关研究。我们课题组的研究目的:(1)检测早孕期绒毛、蜕膜组织、正常妊娠晚期胎盘和PE胎盘中rps4y1的定位和表达情况;(2)在人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)中探究rps4y1的表达及其对该细胞的生物学功能的影响;(3)缺氧/复氧(H/R)处理HUVEC细胞,模拟子痫前期胎盘组织中的氧化应激损伤,结合JAK2特异性抑制剂AG490,探究rps4y1基因在JAK2/STAT3信号通路中对血管内皮细胞生物学功能的调控和在PE发病中的可能相关分子机制,为子痫前期的病因机制及诊断提供理论依据和新思路。方法:(1)免疫组织化学法检测rps4y1蛋白在早孕期绒毛、蜕膜组织、正常妊娠晚期胎盘及PE患者胎盘组织中的表达和定位。(2)实时荧光定量PCR和Western blot研究正常妊娠晚期胎盘和重度PE患者胎盘组织中rps4y1蛋白的表达。(3)通过慢病毒转染,沉默HUVEC细胞中的rps4y1基因表达。(4)实时荧光定量PCR和Western blot检测干扰效率。(5)分别用细胞迁移实验、管腔成型实验、CCK-8法、流式细胞分析法检测干扰rps4y1表达对HUVECs的迁移、血管成型、增殖及凋亡的影响。(6)体外缺氧/复氧模型的建立,模拟PE氧化应激损伤,检测H/R损伤对HUVEC细胞的生物学功能的影响及对rps4y1表达的调控。(7)采用JAK2特异性抑制剂AG490,观察JAK2/STAT3信号通路在H/R条件下对HUVEC细胞的生物学功能的调控及其与rps4y1的关系,进一步明确rps4y1基因调控内皮细胞功能在PE发病中的作用及可能机制。结果:1.免疫组织化学结果显示,rps4y1在早孕期的绒毛、蜕膜组织、正常妊娠晚期胎盘组织及PE胎盘组织中均表达,且主要定位于血管内皮细胞及滋养细胞;2.在正常足月胎盘和子痫前期胎盘中均检测到rps4y1 mRNA的相对表达,相比正常对照组(0.89±0.05),PE组rps4y1 mRNA的相对表达量(1.54±0.04)显著上升(Prps4y1的蛋白量,PE胎盘组织中的rps4y1蛋白量显著上升,分析结果显示有统计学意义(P4.下调rps4y1的表达,可以促进HUVEC细胞的迁移和血管成型能力,而对细胞增殖和凋亡无明显影响。5.H/R处理可以导致HUVEC细胞的生物学功能下降,并且可增加HUVEC细胞中的rps4y1蛋白的表达。同时,H/R处理可抑制HUVEC细胞中的JAK2/STAT3细胞通路的激活。6.AG490对JAK2/STAT3信号通路有明显抑制效果,但对rps4y1的表达无明显印象,而下调rps4y1表达后,JAK2/STAT3磷酸化增强。结论:1.rps4y1在孕早期,主要定位于血管内皮细胞及滋养层细胞。2.较正常妊娠晚期胎盘组,rps4y1在子痫前期胎盘组织中表达明显升高。3.rps4y1表达升高可抑制HUVEC细胞的血管成型和细胞迁移功能。4.rps4y1可能是JAK2/STAT3信号同路的上游分子,受H/R的影响表达增加,通过抑制该信号通路的激活,调控HUVEC细胞的生物学功能,参与PE的发生发展过程。

关键词： rps4y1 HUVECs JAK2/STAT3信号通路子痫前期

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rps4y1蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义

引用

北京医学 2013年第6期35卷 461-463,I0004页

作者：谢棒祥谢琪朴正福陈德喜周建光首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所 100069 江苏省赣榆县第二人民医院军事医学科学院生物工程研究所

目的探讨rps4y1蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义。方法利用Real-timePCR、RT-PCR和免疫组织化学方法检测rps4y1在不同细胞系以及前列腺癌组织中的表达。结果 rps4y1的表达在C4-2中比LNCaP中下调(137.19±13.64)倍;rps4y1在LNCaP、C4-2... 详细信息

目的探讨rps4y1蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义。方法利用Real-timePCR、RT-PCR和免疫组织化学方法检测rps4y1在不同细胞系以及前列腺癌组织中的表达。结果 rps4y1的表达在C4-2中比LNCaP中下调(137.19±13.64)倍;rps4y1在LNCaP、C4-2、C4-2B中随着恶性程度的增加,其表达随之降低,在骨转移前列腺癌细胞系中未见表达,而脑转移的前列腺癌细胞系DU145中有较高表达,在MCF-7、HepG2、Hela、PC12、293T等细胞系中未检测到rps4y1的表达,特异性较好;rps4y1胞浆阳性,表达与恶性程度呈负相关,与表达谱结果一致。结论 rps4y1蛋白可作为前列腺癌进展诊断的候选分子标志物。

关键词：前列腺肿瘤 rps4y1 聚合酶链反应

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