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抑制rab27a能够抑制三阴乳腺癌细胞的增殖、侵袭和粘附

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南方医科大学学报 2023年第4期43卷 560-567页

作者：王丽严志锐夏耀雄云南省肿瘤医院//昆明医科大学第三附属医院放射治疗科云南昆明650118

目的抑制在外泌体分泌过程中发挥核心作用的rab27蛋白家族的表达,以探究其对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞生物学功能的影响。方法利用荧光定量PCR和蛋白印迹法对比3株三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-468、Hs578T和正常乳腺上皮细胞系M... 详细信息

目的抑制在外泌体分泌过程中发挥核心作用的rab27蛋白家族的表达,以探究其对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞生物学功能的影响。方法利用荧光定量PCR和蛋白印迹法对比3株三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-468、Hs578T和正常乳腺上皮细胞系MCF10A的rab27家族基因和蛋白表达以及外泌体的分泌情况;使用siRNA干扰技术分别抑制3株三阴性乳腺癌细胞中rab27a和rab27b的表达,并采用荧光定量PCR和蛋白印迹法检测抑制效率,随后使用蛋白印迹法检测这3株三阴性乳腺癌细胞rab27a和rab27b分别被抑制后外泌体的分泌情况。用细胞增殖、细胞侵袭和细胞粘附实验评价rab27a和rab27b分别被抑制后对这3株三阴性乳腺癌细胞生物学功能造成的影响。结果三阴性乳腺癌细胞和正常乳腺上皮细胞相比外泌体分泌更加旺盛(Prab27a和rab27b的表达在基因和蛋白水平上均显著上升(Prab27a的表达后,外泌体分泌显著下调(Prab27b的表达对外泌体分泌无显著影响。并且外泌体分泌显著下调后,与外泌体分泌未受到显著影响的三阴性乳腺癌细胞相比,癌细胞增殖能力、细胞侵袭能力和细胞粘附能力均显著下调(Prab27a,抑制rab27a能够抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖、侵袭和粘附。

关键词： rab27a rab27b 外泌体三阴性乳腺癌细胞生物学功能

rab27a调控结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

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中国比较医学杂志 2022年

作者：李庆艳杨静文关娜云超胡琰琰肖文华锦州医科大学研究生学院中国人民解放军总医院第四医学中心肿瘤内科

目的探讨rab27a对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法分别将rab27a干扰质粒及过表达质粒转染结肠癌细胞系SW480细胞和RKO细胞，并通过Western blot及qPCR检测转染细胞中rab27a的表达水平。利用CCK-8实验和软琼脂克隆形成实验，... 详细信息

目的探讨rab27a对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法分别将rab27a干扰质粒及过表达质粒转染结肠癌细胞系SW480细胞和RKO细胞，并通过Western blot及qPCR检测转染细胞中rab27a的表达水平。利用CCK-8实验和软琼脂克隆形成实验，检测敲低或过表达rab27a对结肠癌细胞增殖的影响，并通过Transwell实验检测rab27a对结肠癌细胞迁移与侵袭的调控作用。结果 CCK-8实验结果显示rab27a敲低组的SW480细胞，其增殖速度显著低于对照组的SW480细胞（Prab27a的RKO细胞，其增殖速度显著提高（Prab27a敲低后，SW480细胞的克隆面积显著变小（Prab27a的RKO细胞，其细胞克隆显著大于对照组（Prab27a敲低组的SW480细胞，其细胞迁移与侵袭能力都显著降低（Prab27a的RKO细胞，其细胞迁移与侵袭能力都显著增强（Prab27a是结肠癌细胞增殖、迁移与侵袭的重要调控基因，有望成为结肠癌临床治疗的潜在靶点。

关键词：结肠癌 rab27a 增殖迁移侵袭

rab27a与E-cadherin在复发性流产中的表达及关系研究

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中国妇产科临床杂志 2022年第1期23卷 49-52页

作者：关英霞蒋蕾尹洁马静史丽河北医科大学第四医院石家庄050011 石家庄市妇幼保健院

目的通过检测复发性流产患者蜕膜组织中rab27a和E-cadherin的表达水平及对二者做相关性分析,探讨rab27a和E-cadherin在复发性流产中的临床意义。方法选取2017年12月至2019年12月于河北医科大学第四医院妇产科因复发性流产行清宫术的患... 详细信息

目的通过检测复发性流产患者蜕膜组织中rab27a和E-cadherin的表达水平及对二者做相关性分析,探讨rab27a和E-cadherin在复发性流产中的临床意义。方法选取2017年12月至2019年12月于河北医科大学第四医院妇产科因复发性流产行清宫术的患者66例为实验组,同期因意外妊娠要求终止的50例为对照组,术后取蜕膜组织作为检测标本。利用免疫组化(immunohistochemistry)方法分别检测蜕膜组织中rab27a和E-cadherin表达水平,并对两者表达水平做相关性分析。结果(1)复发性流产与年龄、体重指数、痛经、妊娠时间及辅助生殖相关,差异有统计学意义(P0.05);(2)rab27a在实验组较对照组表达增高,两组比较差异有统计学意义(Prab27a与E-cadherin在复发性流产蜕膜组织中表达水平呈负相关。结论rab27a在复发性流产蜕膜组织中呈现高表达,E-cadherin呈现低表达,两者表达呈负相关。rab27a可能通过降低E-cadherin的表达从而参与复发性流产的致病过程。

关键词： rab27a E-cadherin 复发性流产免疫组化

rab27a对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其机制研究

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Rab27A对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其机制研究

作者：李庆艳锦州医科大学

学位级别：硕士

目的rab27a是rab27蛋白家族的一个亚型,属于rab蛋白家族,是一种小分子GTP结合蛋白。据研究报道,rab27a在人类多种肿瘤的发生发展中扮演着不可或缺的作用。目前关于rab27a在结肠癌进展中的作用的研究报道相对较少,本实验通过构建rab27a... 详细信息

目的rab27a是rab27蛋白家族的一个亚型,属于rab蛋白家族,是一种小分子GTP结合蛋白。据研究报道,rab27a在人类多种肿瘤的发生发展中扮演着不可或缺的作用。目前关于rab27a在结肠癌进展中的作用的研究报道相对较少,本实验通过构建rab27a干扰及过表达结肠癌细胞模型及相关信号通路蛋白的检测,探讨rab27a干扰及过表达对结肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭等恶性生物学行为的影响及其相关机制。方法人结肠癌细胞系SW480、RKO、LOVO、HT-29、HCT116细胞在37℃、5%CO条件下进行常规培养。从以上5个细胞系中筛选出rab27a表达量最高的SW480细胞及表达量最低的RKO细胞作为研究对象。分别提取干扰、过表达质粒及对应对照质粒,使用RT-q PCR及Western blot方法从三个干扰质粒中筛选出干扰效果最好的质粒。用脂质体转染法分别在人结肠癌细胞系SW480和RKO中干扰和上调rab27a的表达。干扰实验组分为2组:对照(Con sh RNA)组、干扰质粒(rab27a sh RNA)组;过表达实验组分为2组:空载体(Con Vector)组、过表达质粒(Flag-rab27a)组。利用G418对转染后细胞进行抗性筛选,通过Western blot、RT-q PCR验证细胞转染效果。CCK-8、软琼脂集落形成实验检测rab27a干扰及过表达对结肠癌细胞体外增殖能力的影响;Transwell迁移和侵袭实验检测rab27a干扰及过表达对结肠癌细胞体外迁移和侵袭能力的影响;Western blot法检测rab27a干扰及过表达对结肠癌细胞MAPK/ERK、p38 MAPK、PI3K/AKT、Ras/Raf、m TOR、EGFR等通路关键蛋白的表达水平及磷酸化水平的影响。结果rab27a在5种结肠癌细胞中均有表达,Western blot结果显示,rab27a在SW480细胞中的表达水平最高,在RKO细胞中的表达水平最低。细胞转染后,SW480细胞的rab27a m RNA相对表达量为0.741±0.026,明显低于其对照细胞(1.003±0.088),差异具有统计学意义(Prab27a m RNA相对表达量为16.471±0.653,显著高于其对照组细胞(1.000±0.027),差异具有统计学意义(Prab27a后显著降低了癌细胞的增殖能力(Prab27a后显著增强了癌细胞的增殖能力(Prab27a干扰组细胞的迁移数量为46±6.245,显著低于对照组(105.333±4.509),差异具有统计学意义(Prab27a过表达组细胞的迁移数量为67±3,显著高于对照组(14.667±2.082),差异具有统计学意义(Prab27a干扰组细胞的侵袭数量为51±14.107,显著低于对照组(130±5.568),差异具有统计学意义(Prab27a过表达组细胞的侵袭数量为55±6.083,显著高于对照组(23±5.568),差异具有统计学意义(Prab27a的RKO细胞的p-AKT、AKT的蛋白相对表达量分别为1.457±0.201和1.696±0.120,显著高于对照组(0.820±0.313和1.287±0.157),差异具有统计学意义(Prab27a后的SW480细胞的p-AKT、AKT的蛋白相对表达量分别为0.247±0.142和0.528±0.840,显著低于对照组(0.542±0.110和0.837±0.143),差异具有统计学意义(Prab27a的RKO细胞的MAPK/ERK、p38 MAPK、Ras/Raf、m TOR、EGFR通路相关蛋白的相对表达量分别为0.135/0.087、0.381、0.020/0.005、0.393/0.364、0.597,与对照组无显著差异(0.127/0.083、0.290、0.027/0.005、0.357/0.448、0.566)。干扰rab27a的SW480细胞的MAPK/ERK、p38 MAPK、Ras-Raf、m TOR、EGFR通路相关蛋白的相对表达量分别为0.332/0.281、0.036、0.058/0.004、0.244/0.604、0.635,与对照组无显著差异(0.292/0.278、0.057、0.092/0.030、0.134/0.541、0.692)。结论成功构建rab27a稳定干扰及过表达结肠癌细胞株,过表达rab27a能够在体外促进结肠癌细胞发生增殖、迁移和侵袭,并且可以上调蛋白信号通路中AKT的

关键词： rab27a 结肠癌增殖侵袭信号通路

前扣带回皮层rab27a介导外泌体释放参与慢性内脏痛敏的机制研究

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前扣带回皮层Rab27a介导外泌体释放参与慢性内脏痛敏的机制研究

作者：李佳慧苏州大学

学位级别：硕士

研究目的:肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)是一种常见的慢性功能性胃肠道疾病,以腹痛、腹胀和排便习惯改变为主要临床表现,无胃肠道结构和生化指标的异常。IBS患者约占世界人口的11%,因其发病机制复杂多样,目前临床上缺乏... 详细信息

研究目的:肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)是一种常见的慢性功能性胃肠道疾病,以腹痛、腹胀和排便习惯改变为主要临床表现,无胃肠道结构和生化指标的异常。IBS患者约占世界人口的11%,因其发病机制复杂多样,目前临床上缺乏有效的治疗手段。慢性内脏痛是其常见的症状之一,严重影响人们的生活质量。鉴于IBS的临床负担,探讨慢性内脏痛的发病机制具有重要意义。外泌体是大多数细胞都能分泌的大小为30～150 nm的微囊泡,参与慢性疼痛的发生发展。本实验旨在探讨前扣带回皮层(Anterior cingulate cortex,ACC)rab27a(Ras-related protein rab-27a)介导外泌体释放在新生期母爱剥夺(Neonatal maternal deprivation,NMD)小鼠慢性内脏痛中的作用机制。实验方法:1.动物模型建立:正常孕鼠生育后,从第二天将母鼠和子鼠定时定点每天分离3 h,连续14天,以此诱导新生期母爱剥夺(NMD)模型。分离结束后,幼鼠放回母鼠身边。2.行为学检测:使用热刺痛仪检测小鼠热刺激缩足反应潜伏期(Paw withdrawal latency,PWL),通过尼龙纤维丝针(Von frey filaments,VFF)的方法检测小鼠机械性缩足反射频率(Paw withdrawal frequency,PWF),通过结直肠扩张(Colorectal distention,CRD)的方法检测小鼠结直肠疼痛阈值,使用小鼠转棒仪(Rotarod)检测小鼠的运动功能状态。3.外泌体的鉴定与定量:运用超速离心法提取外泌体,运用电镜观察外泌体形态学结构,运用BCA试剂盒量化外泌体的蛋白浓度,运用Western blotting技术检测ACC区外泌体特异性蛋白标记物(CD9、CD63和CD81)的表达情况。4.分子表达检测:运用RT-qPCR和Western blotting方法检测ACC中rab27a在mRNA和蛋白水平上的表达情况,运用免疫荧光技术检测ACC中rab27a的细胞定位分布。5.细胞转染实验:运用细胞转染实验筛选敲降rab27a分子表达效果最好的siRNA。6.ACC核团内微量注射:ACC内微量注射外泌体抑制剂GW4869或溶剂Vehicle检测小鼠疼痛行为。ACC内微量注射siRNA-rab27a或siRNA-NC检测小鼠疼痛行为以及ACC内rab27a的蛋白表达水平。实验结果:1.与CON小鼠相比,NMD小鼠ACC区外泌体的数量显著增多。2.分离提取NMD小鼠ACC区外泌体,将其脑立体定位注射至CON小鼠ACC区,可以诱导小鼠产生内脏痛敏。3.与CON小鼠相比,NMD小鼠ACC区rab27a的mRNA和蛋白表达水平均显著升高。rab27a主要表达于神经元中,几乎不表达于星形胶质细胞和小胶质细胞。与CON小鼠相比,NMD小鼠ACC内rab27a 阳性神经元比例显著升高。rab27a主要表达于兴奋性神经元中。与CON小鼠相比,NMD小鼠ACC内rab27a 阳性兴奋性神经元比例显著升高。4.ACC内微量注射外泌体抑制剂GW4869后,能够显著缓解NMD小鼠的内脏痛敏。ACC内微量注射siRNA-rab27a可显著减少ACC区外泌体的释放量,缓解NMD小鼠的内脏痛敏。研究结论:本实验结果初步表明,NMD小鼠ACC区神经元rab27a的表达上调,介导ACC区外泌体的释放量增多,从而诱导NMD小鼠产生内脏痛敏。上述实验结果表明调控外泌体释放可能是治疗慢性内脏痛的一个新靶点。

关键词：肠易激综合征慢性内脏痛前扣带回皮层 rab27a 外泌体

外泌体rab27a在新型冠状病毒肺炎导致的细胞因子风暴中的作用

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外泌体Rab27a在新型冠状病毒肺炎导致的细胞因子风暴中的作用

作者：王小亚贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:探索新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease 2019,COVID-19)患者血清外泌体rab27a对炎症因子及病毒载量的调控作用,并分析血清外泌体蛋白质组学的变化,为探索COVID-19的发生、发展机制及发现新的生物学标志物提供新思路。方法:本... 详细信息

目的:探索新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease 2019,COVID-19)患者血清外泌体rab27a对炎症因子及病毒载量的调控作用,并分析血清外泌体蛋白质组学的变化,为探索COVID-19的发生、发展机制及发现新的生物学标志物提供新思路。方法:本研究纳入健康志愿者20例(H组)、新冠肺炎患者非重症组20例(M组,包括轻型、普通型)、新冠肺炎患者重症组20例(C组,包括重型、危重型)。本研究采用了蛋白免疫印迹(Western blot,WB)测定各组血清外泌体中的rab27a、CD63、TSG101表达水平;用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组血清中的C反应蛋白(C reaction protein,CRP)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-2Rα(Interleukin-2Rα,IL-2Rα)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、降钙素原(Procalcitonin,PCT)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、铁蛋白(Ferritin)表达情况;采用透射电镜及纳米示踪分析技术(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA)检测外泌体形态及浓度。我们收集试者住院期间新冠核酸检测CT值、血常规、血脂数据等进行相关性分析。将H组3例、M组3例、C组3例的血清外泌体采用标记液相色谱-串联质谱分析技术(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS/MS)定量分析血清外泌体蛋白质组学的变化,进行差异蛋白筛选及差异蛋白基因本体论(Geneontology,GO)富集分析、KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)富集分析、蛋白互作(Protein-protein interaction PPI)分析。结果:研究结果显示,新冠肺炎患者住院天数中位数C组较M组高4.0天,但差异无统计学意义(P>0.05)。CRP在C组中其中位数最高且为H组的4.7倍,H组较M组、C组均有显著性差异(Prab27a的表达H组>M组>C组,且差异具有统计学意义(Prab27a呈正相关(Prab27a均为显著的正相关(P277种蛋白质,以差异倍数大于1.5倍且rab27a下调可能促进炎症因子的分泌增加,引发细胞因子风暴,与第7天新冠病毒载量及COVID-19病情严重程度相关;且可能成为COVID-19的新的标志物。3.COVID-19患者血清外泌体蛋白质组学分析发现49个差异蛋白,并通过蛋白网络互作关系发现rab27a通过CORO1A调控APOB、APOA2、APOE、CRP等4个关键节点蛋白,CORO1A可能成为COVID-19的潜在治疗靶点。

关键词：外泌体 rab27a 新型冠状病毒细胞因子风暴蛋白质组学

rab27a对人乳腺癌细胞生物学特性的影响

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中国癌症杂志 2007年第4期17卷 294-298页

作者：王劲松王福宾狄根红侯意枫李大强王磊张强鸽李文凤吴炅陆劲松沈镇宙朱学良邵志敏复旦大学附属肿瘤医院乳腺外科中国科学院上海分院细胞研究所上海200030

背景与目的:rab蛋白属Ras超家族中有超过60个成员的最大的一个亚家族。rab27a是这一家族中唯一一个明确涉及到人类遗传性疾病的成员。本研究探讨rab27a对人乳腺癌细胞生物学特性的影响及其机制。方法:构建含有rab27a开放阅读框的真核表... 详细信息

背景与目的:rab蛋白属Ras超家族中有超过60个成员的最大的一个亚家族。rab27a是这一家族中唯一一个明确涉及到人类遗传性疾病的成员。本研究探讨rab27a对人乳腺癌细胞生物学特性的影响及其机制。方法:构建含有rab27a开放阅读框的真核表达质粒,通过脂质体转染的方法将其导入乳腺癌细胞MDA-MB-231,同时采用RNA干扰的方法下调rab27a的表达。测定rab27a上调及下调表达后乳腺癌细胞生长曲线、细胞周期分布、凋亡细胞比例、体外侵袭等生物学特性的变化,并采用RT-PCR方法来探讨rab27a发挥作用的分子机制。结果:①rab27a的表达水平随乳腺癌细胞侵袭转移能力的增强而增高。②上调rab27a表达后导致乳腺癌细胞生长加速、S期细胞比例增多、凋亡细胞比例下降、体外侵袭能力增强。③CyclinD1、MMP-7和MMP-9基因表达水平与rab27a表达呈正相关,而p16的表达与rab27a的表达呈负相关。结论:rab27a通过调节Cyclin D1、MMP-7、MMP-9和p16基因的表达,从而在乳腺癌细胞增殖、细胞周期分布、凋亡和侵袭中发挥作用。

关键词：乳腺癌凋亡肿瘤侵袭 rab27a

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rab27a基因在胃肠肿瘤中的作用

Rab27A基因在胃肠肿瘤中的作用

作者：王倩中国人民解放军医学院

学位级别：硕士

研究目的:研究rab27a过表达对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。研究方法:以先前的实验研究为基础,我们以rab27a低表达的胃癌细胞系BGC823为研究模型构建了 rab27a过表达稳定细胞株BGC823/rab27a,同时以BGC823/Vector为实验组。通过MTT实... 详细信息

研究目的:研究rab27a过表达对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。研究方法:以先前的实验研究为基础,我们以rab27a低表达的胃癌细胞系BGC823为研究模型构建了 rab27a过表达稳定细胞株BGC823/rab27a,同时以BGC823/Vector为实验组。通过MTT实验、软琼脂集落形成实验以及Transwell迁移和侵袭实验观察过表达rab27a后BGC823细胞增殖,迁移及侵袭等恶性生物学行为的改变。研究结果:过表达rab27a后BGC823/rab27a细胞的迁移(P0.05)。研究结论:rab27a在胃癌细胞发生发展过程中可能作为抑癌基因样发挥作用,主要抑制胃癌细胞迁移和侵袭,这一结果将为胃癌的临床治疗提供了新的理论依据和潜在的治疗靶点。研究目的:旨在明确结肠癌细胞中rab27a通过调控exosome及可溶性生物活性因子的分泌对NK细胞活性的影响。研究方法:在前期研究的基础上,我们用ELISA与BCA法比较了rab27a高低表达结肠癌细胞株(SW480、RKO)exosome的分泌量;用MTT法比较了两种细胞株的增殖能力;用CCK-8法比较了 NK细胞对这两种细胞株的杀伤活性。并进一步用CCK-8法研究结肠癌细胞株来源exosome和可溶性分子对NK细胞杀伤活性的影响。研究结果:我们的研究结果显示,RKO分泌的exosome量与细胞增殖速度均较SW480低,而NK细胞对RKO的杀伤活性较SW480高。当分别加入RKO来源exosome与可溶性分子后,NK细胞对RKO的杀伤活性降低。研究结论:结肠癌细胞株来源exosome与可溶性分子对NK细胞杀伤活性起抑制作用。

关键词： rab27a 胃癌增殖迁移侵袭 exosome 杀伤活性结肠癌增殖速度可溶性分子

慢病毒载体介导rab27a基因过表达对人HepG2肝癌细胞增殖的影响

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中国生物工程杂志 2014年第9期34卷 16-23页

作者：刘雪杰林巍然唐立春孙薇魏汉东姜颖安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心北京102206

目的:构建rab27a基因慢病毒表达载体,并研究rab27a对人HepG2肝癌细胞增殖能力的影响。方法:以pEGFP-C1-rab27a质粒为模板,PCR扩增出融合绿色荧光蛋白的rab27a基因全长,酶切后插入穿梭载体pENTR/U6,再应用Gateway技术,基因重组到表达载体... 详细信息

目的:构建rab27a基因慢病毒表达载体,并研究rab27a对人HepG2肝癌细胞增殖能力的影响。方法:以pEGFP-C1-rab27a质粒为模板,PCR扩增出融合绿色荧光蛋白的rab27a基因全长,酶切后插入穿梭载体pENTR/U6,再应用Gateway技术,基因重组到表达载体pHAGEEF1α-puro-DEST上,构建得到重组慢病毒表达载体pHAGE-GFP-rab27a-puro。测序鉴定序列正确后,将其与包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2.G共转HEK-293T细胞进行慢病毒包装。收集并浓缩培养上清以获得慢病毒颗粒感染HepG2细胞。荧光显微镜下观察HEK-293T细胞和慢病毒感染HepG2细胞绿色荧光强度;Western blot检测稳定感染HepG2细胞株rab27a蛋白表达水平;CCK8和平皿克隆形成实验检测稳定过表达rab27a的HepG2细胞增殖活力的变化;流式细胞术检测稳定过表达rab27a的HepG2细胞周期分布情况。结果:经双酶切及测序结果证实重组慢病毒表达载体构建正确;浓缩后病毒滴度较高;重组慢病毒感染HepG2细胞后,细胞外源rab27a的蛋白表达水平显著上调,HepG2细胞的增殖活力和克隆形成能力受到明显抑制(Prab27a基因重组慢病毒表达载体构建成功,外源过表达rab27a基因可显著抑制HepG2细胞增殖能力。rab27a在肝细胞癌发生发展和迁移中扮演了重要角色。

关键词： rab27a 慢病毒肝细胞癌细胞增殖