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P-Rex2a干扰pten-long对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

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临床和实验医学杂志 2022年第24期21卷 2581-2587页

作者：诸灵汤文俊赵志东上海市第八人民医院普外科上海200030

目的探讨P-Rex2a干扰pten-long对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法回顾性选取2018年1月至12月在上海市第八人民医院行胃癌根治术患者的胃癌组织和癌旁组织(距离癌组织5 cm)病理标本30例;收集胃癌细胞系BGC-823、AGS、MGC-803和SGC-7901... 详细信息

目的探讨P-Rex2a干扰pten-long对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法回顾性选取2018年1月至12月在上海市第八人民医院行胃癌根治术患者的胃癌组织和癌旁组织(距离癌组织5 cm)病理标本30例;收集胃癌细胞系BGC-823、AGS、MGC-803和SGC-7901,采用qRT-PCR检测胃癌和癌旁组织和细胞中pten-long mRNA的表达;将SGC-7901细胞处于对数生长期时进行实验,实验分为对照组(SGC-7901细胞未转染慢病毒)、NC组(SGC-7901细胞转染空白质粒)、pten-long-RFP组(将pten-long-RFP转染到的SGC-7901细胞)、si-NC组(转染siP-Rex2a NC)、siP-Rex2a组(siRNA干扰技术对Rex2a进行沉默)和siP-Rex2a+pten-long组(将pten-long-RFP和siP-Rex2a共同转染到的SGC-7901细胞)。采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫共沉淀(Co-IP)检测P-Rex2a与pten-long相互作用,蛋白质印迹法检测SGC-7901细胞中PI3K活性相关蛋白;构建P-Rex2a干扰表达载体,检测siP-Rex2a对细胞增殖和凋亡的影响。结果胃癌组织中pten-long mRNA水平显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(Ppten-long-RFP组中的胃癌细胞SGC-7901增殖明显降低,凋亡能力显著升高,差异均有统计学意义(Ppten-long可以相互作用,P-Rex2a过表达可以增强P-Rex2a与pten-long的结合;当P-Rex2a蛋白水平随着时间增加时,pten-long的蛋白水平逐渐降低。培养后48~96 h,与对照组和si-NC组相比,siP-Rex2a组中的胃癌细胞SGC-7901增殖明显降低,差异均有统计学意义(Ppten-long组中培养后48~96 h的细胞增殖率显著降低,差异均有统计学意义(Ppten-long组中的细胞凋亡率显著升高,差异均有统计学意义(Ppten-long参与胃癌的发生和发展,干扰P-Rex2a可以促进pten-long表达从而抑制胃癌细胞SGC-7901增殖,促进其凋亡,有望成为胃癌潜在治疗的新靶标。

关键词：胃癌 P-Rex2a pten-long 细胞增殖细胞凋亡

慢病毒介导pten-long过表达抑制人脑胶质瘤U251细胞裸鼠移植瘤的生长

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中国组织工程研究 2019年第11期23卷 1743-1748页

作者：耿连婷李春晖单小松郑亚北曾昭穆郑克彬河北大学河北省保定市071000 河北大学附属医院神经外科河北省保定市071000

背景:第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosohataseandtensinhomolguedeletedon chromosome10,pten)的翻译变体(pten-long)是新发现的一种肿瘤抑制基因,与多种肿瘤的发展密切相关。目的:探讨pten-long对人脑胶质瘤U251细胞裸鼠异体移植瘤生长的抑制作用及相关分子机制。方法:(1)人脑胶质瘤细胞U251购自国家实验细胞资源共享服务平台北京总部,实验将未感染慢病毒的U251为对照组,感染LV-EGFP的U251为空载组,感染LV-pten-long-EGFP的U251为过表达组,用荧光显微镜、Western blot检测转染效率;(2)实验将购自北京华阜康生物科技股份有限公司的BALB/c-nu雄性裸鼠随机分为3组,将3组细胞分别接种于裸鼠背部皮下,观察裸鼠一般状况及肿瘤生长趋势,分析各组裸鼠皮下肿瘤的体积及质量变化,免疫组织化学染色法检测肿瘤中pten-long,p-Akt及NF-κB p65蛋白表达变化情况。结果与结论:(1)一般状况:pten-long过表达后可抑制裸鼠皮下胶质瘤细胞的增殖,与对照组及空载组相比,过表达组裸鼠肿瘤体积及质量减少(P pten-long表达量增加(Ppten-long可抑制人脑胶质瘤U251细胞裸鼠异体移植瘤的生长,机制可能与下调PI3K-AKT-NF-κB信号通路有关。

关键词：胶质瘤 U251细胞慢病毒 pten-long p-Akt NF-κB p65 裸鼠动物模型皮下接种神经胶质瘤模型,动物慢病毒感染组织工程

pten-long对人脑胶质瘤U251细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

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实用医学杂志 2019年第11期35卷 1757-1762页

作者：耿连婷郑克彬李春晖张新婷曾昭穆张欣河北大学附属医院神经外科河北保定071000 石家庄市第四医院医疗美容科石家庄050000 河北大学医学院河北保定071000

目的探索pten-long对U251细胞增殖、侵袭及凋亡的影响及相关机制。方法将携带pten-long基因的重组慢病毒载体转染U251细胞。未感染慢病毒的细胞为对照组(U251),感染LV-EGFP的细胞为空载组(U251-EGFP),感染LV-pten-long-EGFP的细胞为过... 详细信息

目的探索pten-long对U251细胞增殖、侵袭及凋亡的影响及相关机制。方法将携带pten-long基因的重组慢病毒载体转染U251细胞。未感染慢病毒的细胞为对照组(U251),感染LV-EGFP的细胞为空载组(U251-EGFP),感染LV-pten-long-EGFP的细胞为过表达组(U251-pten-long-EGFP)。通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,并应用RT-PCR、Western blot法检测LV-pten-long-EGFP转染效率。通过RT-PCR、Western blot法检测各组细胞PI3K-AKT-NF-κB信号通路表达情况;CCK8法检测各组细胞增殖能力;流式细胞分析术检测各组细胞周期变化;划痕实验检测各组细胞迁移能力;Transwell小室法检测各组细胞侵袭能力。结果 LV-pten-long-EGFP转染U251细胞后,经荧光显微镜、RT-PCR和Western blot证实转染成功(P pten-long下调PI3K-AKT-NF-κB信号通路。过表达组增殖、迁移、侵袭能力受抑制(P ptenlong可能通过抑制PI3K-AKT-NF-κB信号通路,抑制U251细胞增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡。

关键词：胶质瘤 pten-long U251 增殖迁移侵袭 PI3K-AKT-NF-κB

AAV介导的pten-long蛋白表达对脑胶质瘤的抑制作用

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AAV介导的PTEN-Long蛋白表达对脑胶质瘤的抑制作用

作者：林遥河南大学

学位级别：硕士

pten是一个广为人知的明星分子,它与抑癌基因TP53一样是一个肿瘤抑制因子。pten是一种磷酸酶,具有脂质磷酸酶和蛋白磷酸酶的双重特性,其脂质磷酸酶活性能够抑制肿瘤发生发展,得到了人们的深入研究。pten主要参与PI3K/Akt/mTOR信号通路,... 详细信息

pten是一个广为人知的明星分子,它与抑癌基因TP53一样是一个肿瘤抑制因子。pten是一种磷酸酶,具有脂质磷酸酶和蛋白磷酸酶的双重特性,其脂质磷酸酶活性能够抑制肿瘤发生发展,得到了人们的深入研究。pten主要参与PI3K/Akt/mTOR信号通路,其脂质磷酸酶活性可以使PIP3去磷酸化成PIP2,从而减少AKT的活化来阻断该信号通路,抑制肿瘤细胞的恶性增殖。随着研究的深入发展,人们发现了许多区别于经典pten的翻译变异体,并命名为pten-L,pten-M,pten-N,pten-O等,这些区别于经典pten分子的翻译变异体,都是从pten的起始密码子ATG上游的某个非经典起始密码子开始起始翻译的,它们翻译出来的产物都比经典的pten分子要长,其中pten-L（pten-long）分子不但拥有与pten相似的抑癌功能而且还具有分泌的特性,受到了人们的关注。pten-long可分泌出细胞进入血液、再循环到远端的组织器官后还可以再次进入细胞,这一特性使其具有类似于远程调控作用于肿瘤细胞的作用。理论上,我们可以利用人源的pten-long蛋白直接进行静脉给药,并且能够进入几乎所有的目标细胞,对于肿瘤的治疗具有独特优势。由PI3K、Akt、mTOR三个主要因子组成的PI3K/Akt/mTOR信号通路,能够调节细胞的增殖、分化、黏附和运动的作用。有关研究表明在胶质瘤干细胞（GSCs）中,该条信号通路的活性显著增高,这是GSCs维持自我更新能力和促进其迁移侵袭的关键,而对于神经胶质瘤治疗的前提是治疗药物能够穿过血脑屏障。基因治疗的载体在基因治疗过程中起着至关重要的作用,其中腺相关病毒（Adeno-associatedvirus,AAV）载体具有低致病性、对宿主抗原性弱、长期稳定表达、广泛的细胞和组织亲嗜性等优点,是目前发展较快,也是比较有希望用于临床基因治疗的载体之一,已被广泛应用于临床研究。根据AAV的不同血清型的组织亲嗜性,其中AAV2对中枢神经系统具有组织亲嗜性,能够携带目的基因进入颅内。鉴于此,我们利用AAV2携带pten-long基因,构建重组的AAV2病毒,用于脑胶质瘤治疗的研究,以期对恶性神经胶质瘤的临床治疗提供参考。本文利用AAV2-pten-long重组病毒载体,在细胞水平和个体水平上,研究pten-long的抗肿瘤效果,分析重组AAV病毒对神经胶质瘤的抑制作用,探讨其在神经胶质瘤的临床治疗方面的潜在价值。首先在分子水平上克隆目的基因,成功构建真核表达载体后包装AAV病毒。在pten表达缺陷的U87MG,LNZ-308和A172神经胶质瘤细胞系上过表达pten-long,在蛋白水平上利用WB检测AKT、mTOR等pten下游分子是否有活性变化;进而在细胞水平上检测pten-long对U87MG细胞的迁移、侵袭、周期、凋亡、增殖及成瘤能力的影响。然后在个体水平上分析pten-long的抗肿瘤效果,建立裸鼠的皮下及颅内荷瘤模型,通过腹腔、尾静脉注射AAV病毒,观察肿瘤的大小,检测pten-long对胶质瘤的抑制作用。综上所述,我们成功包装出了过表达pten-long的AAV2病毒;利用包装出来的rAAV2去感染U87MG、A172和LNZ-308细胞且均能过表达pten-long,在细胞水平上过表达pten-long以后抑制了肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭,促进了肿瘤细胞的凋亡。在个体水平上注射rAAV2也同样能够显著地抑制肿瘤的生长。并且rAAV2能够携带pten-long穿过血脑屏障,并抑制神经胶质瘤U87MG的生长,迁移和侵袭

关键词： pten-long AAV2 神经胶质瘤基因治疗

pten-long对胶质瘤细胞生物学活性的影响

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PTEN-Long对胶质瘤细胞生物学活性的影响

作者：耿连婷河北大学

学位级别：硕士

目的:pten-long是第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(phosohatase and tensin homolgue deleted on chromosome 10,pten)的翻译变体,探索pten-long对胶质瘤细胞U251增殖、迁移、侵袭的影响及相关分子机制,并分析pten-long在体内水平对胶质细胞瘤的影响。方法:1.将携带pten-long基因的重组慢病毒载体转染人胶质瘤细胞U251,未感染慢病毒的细胞为对照组(U251);感染LV-EGFP的细胞为空载组(U251-EGFP);感染LV-pten-long-EGFP的细胞为过表达组(U251-pten-long-EGFP)。通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,并应用RT-PCR、Western blot法检测转染效率。2.应用CCK8法检测pten-long过表达后对各组细胞增殖能力的影响。通过流式细胞分析术检测各组的细胞周期差异。3.通过划痕实验检测pten-long过表达后对各组细胞迁移能力的影响,并通过Transwell小室法检测各组细胞的侵袭能力。4.通过RT-PCR、Western blot法检测pten-long过表达后对PI3K-AKT-NF-kB信号通路中相关分子表达水平的影响。5.在裸鼠皮下注射各组细胞种植异体移植胶质瘤,观察裸鼠一般状况及皮下肿瘤生长趋势。记录并分析各组裸鼠皮下肿瘤的体积及重量,通过免疫组织化学染色法检测各组皮下肿瘤中pten-long、p-Akt、NF-κB p65蛋白表达情况。结果:1.LV-pten-long-EGFP转染人胶质瘤细胞U251后,经荧光显微镜、RT-PCR(F=65.42,P﹤0.01)和Western blot法(F=103.23,P﹤0.01)证实转染效率符合要求,PTNE-long在细胞中稳定表达。2.pten-long过表达组(U251-pten-long-EGFP)与对照组(U251)及空载组(U251-EGFP)相比较,其细胞增殖(F=18.42,P﹤0.01;F=79.92,P﹤0.01;F=306.47,P﹤0.01)、迁移(F=128.42,P﹤0.01;F=90.41,P﹤0.01)、侵袭(F=632.01,P﹤0.01)能力受抑制。过表达组的细胞周期被阻滞在G0/G1期(F=26.32,P﹤0.01)。3.pten-long过表达后可能通过下调PI3K-AKT-NF-kB信号通路发挥肿瘤抑制作用。pten-long过表达组与对照组及空载组相比较,RT-PCR实验结果显示过表达组的NF-κB p65(F=53.32,P﹤0.01)、bcl-xl(F=933.88,P﹤0.01)表达水平降低,IκBα(F=26.61,P﹤0.01)表达水平增加;Western blot实验结果显示过表达组的p-Akt(F=56.19,P﹤0.01)、NF-κB p65(F=43.65,P﹤0.01)、p-NF-κB p65(F=114.68,P﹤0.01)、bcl-xl(F=19.26,P﹤0.01)表达水平降低,IκBα(F=45.23,P﹤0.01)表达水平增加。4.pten-long过表达后,裸鼠皮下U251细胞增殖能力被抑制,其机制可能与下调PI3K-AKT-NF-kB信号通路有关。与对照组及空载组相比较,过表达组裸鼠一般情况稍好,皮下肿瘤体积(F=369.1,Ppten-long(F=25.33,Ppten-long过表达后在体外细胞水平可以抑制人胶质瘤细胞U251增殖、迁移及侵袭,并将细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡。2.pten-long过表达后在体内水平可以抑制裸鼠皮下异体移植胶质细胞瘤的生长。3.pten-long可以发挥肿瘤抑制作用,其机制可能与下调PI3K-AKT-NF-kB信号通路有关,pten-long有可能成为胶质瘤基因治疗的新靶点,为基因治疗提供新方向。

关键词： pten-long U251 胶质瘤增殖迁移侵袭 PI3K-AKT-NF-kB 裸鼠

pten-long蛋白抑制PI3K/AKT通路促进非小细胞肺癌细胞凋亡的研究

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PTEN-Long蛋白抑制PI3K/AKT通路促进非小细胞肺癌细胞凋亡的研究

作者：折涛宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的探究不同浓度pten-long蛋白对非小细胞肺癌细胞（A549）、人肺癌细胞（H1299）的影响。方法利用GenBank数据库,获取pten-long DNA序列并设计引物。以HEK293T细胞提取的RNA为模版,扩增pten-long基因。构建pc DNA3.1-pten-L真核重组... 详细信息

目的探究不同浓度pten-long蛋白对非小细胞肺癌细胞（A549）、人肺癌细胞（H1299）的影响。方法利用GenBank数据库,获取pten-long DNA序列并设计引物。以HEK293T细胞提取的RNA为模版,扩增pten-long基因。构建pc DNA3.1-pten-L真核重组质粒后转染293T细胞,待pten-long蛋白表达后,裂解细胞纯化得到pten-long蛋白。利用流式细胞技术、TUNEL染色法检测不同浓度pten-long蛋白（10、50、100 n M）对非小细胞肺癌细胞（A549）、人肺癌细胞（H1299）的凋亡差异。通过Western blot法检测不同浓度pten-long蛋白对PI3K/AKT信号通路中相关分子表达水平的影响。结果1.本实验中构建的pcDNA3.1-pten-L真核重组质粒转染HEK293T细胞后,pten-long蛋白成功表达。用亲和层析方法纯化后得到纯度合格的pten-long蛋白。2.流式细胞技术、TUNEL染色法显示在A549、H1299两种细胞系中不同浓度pten-long蛋白处理组均可促进的非小细胞肺癌细胞凋亡（P＜0.05）,且浓度越高细胞凋亡比例越高。3.Western blot法检测显示pten-long蛋白可使非小细胞肺癌细胞p-PI3K/PI3K比值和pAKT/AKT比值显著降低（p＜0.01）。结论pten-long蛋白在体外水平可通过PI3K/AKT信号通路促进非小细胞肺癌细胞凋亡,且呈剂量依赖性。

关键词： pten-long A549 H1299 非小细胞肺癌凋亡

分泌型蛋白pten-long对神经胶质瘤细胞系U87MG增殖和迁移的影响

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分泌型蛋白PTEN-Long对神经胶质瘤细胞系U87MG增殖和迁移的影响

作者：王亚辉河南大学

学位级别：硕士

背景pten(Phosphatase and TENsin homolog deleted on chromosome 10)人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因,位于10q23.3,转录产物为515 kb m RNA,属于PTP(protein tyrosine phosphatases)基因家族成员。自1997年pten蛋白作为抑癌因子被发现以来,受到世界各地研究者的广泛关注,在目前已有的研究中,pten作为一个双重特性的磷酸酶,同时具有脂质和蛋白磷酸酶特性。它的脂质磷酸酶活性能够将PI3K信号通路中的PIP3水解成为PIP2,从而阻断该信号通路,降低下游AKT的活化,减少了细胞的恶性增生。另外,pten还具有蛋白磷酸酶活性,它主要作用于底物蛋白的丝、苏氨酸及酪氨酸位点。在大多数癌细胞中,许多关键基因产物磷酸化水平都是不正常的,pten能够去磷酸化这些蛋白而显示抑癌作用。目前,pten作为研究比较火热的一个抑癌基因,许多生物学功能还不是了解的特别清楚,例如:pten除了起磷酸酶作用外,一部分研究表明,pten在细胞核内似乎有维持染色体稳定的功能。另外,pten-long作为pten的一个翻译变异体,选择pten起始翻译位点前519位的CTG作为起始位点开始翻译,形成了比经典pten多173个氨基酸的蛋白,该蛋白可被细胞分泌出细胞膜,穿梭进入并作用于临近细胞。这使得它不同于经典pten,吸引了许多临床研究工作者的兴趣。pten-long同经典pten一样具有脂质磷酸酶活性,能够抑制PI3K信号通路,经过分泌和穿梭后,实现远距离调控临近细胞的生长、凋亡等活动。在已有的研究中,pten的缺失与异常往往与肿瘤的发生发展有密切的关系,许多文献和报道表明pten在多种散发性癌症和两种常染色体显性遗传的错构瘤综合征中突变。传统意义上的治疗致力于完全恢复pten基因的表达,但这通常很难实现的。现在我们可以利用pten-long出入细胞膜的功能,同时采用一些靶向治疗手段,将pten-long精准定位并有效作用于癌细胞,这将是未来临床治疗的一个方向。目的本课题通过研究分泌型蛋白pten-long表达载体的构建和大量表达的方法,系统验证了pten-long对癌细胞的抑制作用,这对于我们深入认识pten及pten-long表达的调控新机制有益,而且该研究在肿瘤临床治疗方面具有潜在的应用市场。方法构建表达pten-long的载体,大量表达并纯化该蛋白。同时,包装pten过表达以及空载体对照慢病毒。利用包装好的pten过表达和空载体对照慢病毒常规方法感染U87细胞,形成pten稳定过表达以及对照的U87细胞系,并用Western blot验证阳性细胞株。利用获得的pten过表达U87稳定细胞株作为阳性对照,在pten缺陷表达的野生型U87中直接加入纯化好的pten-long蛋白,验证其细胞生物学功能。结果1.成功构建pten-long原核载体,蛋白诱导表达目前正在优化表达条件。2.成功构建pten-long真核表达载体并成功表达及纯化。3.在pten天然缺失的U87细胞中,加入pten-long处理之后,同经典pten作用相似,观察到pten-long对于细胞增殖生长以及迁移侵袭都有抑制作用。结论1.成功构建pten-long载体,与6×His融合蛋白能够成功表达并进行蛋白纯化。2.pten-long同pten作用相同,能够抑制肿瘤细胞生长、迁移和侵袭。

关键词： pten pten-long 表达纯化神经胶质瘤细胞增殖迁移侵袭

pten-long在非小细胞肺癌中的表达及其意义

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PTEN-Long在非小细胞肺癌中的表达及其意义

作者：李炜宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的通过检测非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系、NSCLC患者组织和血浆中pten-long（pten-L）的表达水平,探究NSCLC组与正常组pten-L的表达差异。方法将人支气管上皮样细胞（正常肺组织细胞,16HBE）和NSCLC细胞系作为细胞样本,使用Western ... 详细信息

目的通过检测非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系、NSCLC患者组织和血浆中pten-long（pten-L）的表达水平,探究NSCLC组与正常组pten-L的表达差异。方法将人支气管上皮样细胞（正常肺组织细胞,16HBE）和NSCLC细胞系作为细胞样本,使用Western blot和荧光定量PCR分别检测细胞中pten-L蛋白及mRNA的表达差异;从宁夏医科大学总医院普胸外科NSCLC患者（术后病理确认）提取NSCLC组织、正常肺组织和NSCLC血浆,从健康志愿者中提取正常血浆,使用Western blot和荧光定量PCR分别检测组织和血浆中pten-L蛋白及mRNA的表达水平;将实验数据进行统计学分析,探究NSCLC组与正常组pten-L的表达差异。结果 1.不同NSCLC细胞内pten-L蛋白表达量均低于16HBE,NSCLC细胞 A594、H1299、H226、H460、SPC-A1 内 pten-L mRNA 的表达分别是16HBE细胞的0.22、0.30、0.84、0.53、0.66倍,差异均有统计学意义（P＜0.05）,不同NSCLC细胞中,pten-L表达显著降低。2.NSCLC组织内pten-L蛋白表达量低于正常肺组织,NSCLC组织中pten-L mRNA表达是正常肺组织的0.45倍,差异有统计学意义（P＜0.05）;NSCLC血浆中pten-L mRNA表达是正常血浆的0.40倍,差异有统计学意义（P＜0.05）;NSCLC组织中,pten-L表达显著降低。结论 pten-L作为抑癌因子,在NSCLC中的表达存在差异,在NSCLC中的表达降低明显。

关键词：非小细胞肺癌非小细胞肺癌细胞系 pten-long

pten-long对肝癌细胞的抑制作用研究

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浙江医学 2019年第15期41卷 1575-1578,1583页

作者：张谢谭麟林剑毛琦淇李宏宁波市医疗中心李惠利医院药剂科 315040 宁波市医疗中心李惠利医院普外科 315040 宁波市第一医院普外科宁波大学医学院附属医院普外科

目的探讨第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(pten)基因编码pten的一种变形体pten-long对肝癌细胞的抑制作用。方法细胞质粒转染法转染pten-long于人肾上皮293T细胞,其溶解产物通过疏水作用和离子交换作用分离纯化pten-long蛋白;采... 详细信息

目的探讨第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(pten)基因编码pten的一种变形体pten-long对肝癌细胞的抑制作用。方法细胞质粒转染法转染pten-long于人肾上皮293T细胞,其溶解产物通过疏水作用和离子交换作用分离纯化pten-long蛋白;采用Western blot法检测分离纯化的pten-long蛋白;以不同浓度pten-long蛋白干预肝癌HepG2、HUH6、FOCUS细胞,并采用MTS法检测细胞存活情况。将40只129S1/SvImJ小鼠按随机数字表法分为pten-long组(腹腔注射0.2ml pten-long,剂量4mg/kg体重,1次/d)和对照组(腹腔注射0.2ml 0.9%氯化钠注射液,1次/d),每组20只。小鼠大腿根部接种肝癌HepG2(两组分别各10只)或HUH6(两组分别各10只)细胞混合液,游标卡尺测量计算肿瘤体积。结果分离纯化后pten-long蛋白纯度较高,约80%。与空白对照组比较,5nmol/L浓度以上的pten-long对肝癌HepG2、HUH6细胞有明显的抑制作用,差异均有统计学意义(均Ppten-long对肝癌FOCUS细胞无明显抑制作用,差异均无统计学意义(均P>0.05)。异种移植试验显示,与对照组相比,pten-long组小鼠肿瘤体积明显较小(Ppten-long对肝癌细胞起抑制作用,这或为肝癌分子靶向治疗提供新思路。

关键词：肝癌 pten-long 抑制