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香蕉磷脂酶A2基因的生物信息学及表达分析

分子植物育种 2023年

作者：王敏廖玲燕蔡文刘云芬梁园丽殷菲胧帅良南昌师范学院化学与食品科学学院贺州学院食品与生物工程学院广西康养食品科学与技术重点实验室大连工业大学食品学院

为探究香蕉磷脂酶A2 (Phospholipase A2， PLA2)的生物学功能，本研究从香蕉中克隆到一个PLA2基因，并对其进行生物信息学分析、不同组织和炭疽菌胁迫处理下的基因差异表达分析。结果表明：香蕉PLA2蛋白(NCBI登录号: LOC103983580)含有... 详细信息

为探究香蕉磷脂酶A2 (Phospholipase A2， PLA2)的生物学功能，本研究从香蕉中克隆到一个PLA2基因，并对其进行生物信息学分析、不同组织和炭疽菌胁迫处理下的基因差异表达分析。结果表明：香蕉PLA2蛋白(NCBI登录号: LOC103983580)含有759个氨基酸，分子量为8.3 kD，理论等电点为5.48。亚细胞定位和亲水性分析研究表明，MaPLA2蛋白是一个定位于细胞核且稳定的亲水蛋白。对MaPLA2基因在不同组织的表达水平进行分析，发现MaPLA2基因在不同组织中都有表达但表达水平有明显差异，其在成熟果肉和果皮中表达水平最高，在茎、芽和未成熟的果皮果肉表达水平较低。对MaPLA2基因在炭疽菌胁迫下基因表达水平进行分析，发现在贮藏期间炭疽菌处理可以上调MaPLA2基因的表达，推测MaPLA2在香蕉果实成熟、衰老和响应炭疽病胁迫过程中可能发挥重要作用。本研究为探究MaPLA2在香蕉成熟、衰老和胁迫响应的作用及其调控机制研究提供一定的参考。

关键词：香蕉 PLA2 炭疽病基因表达

羊水栓塞妊娠大鼠血清中PLA2和PAF的水平变化研究

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现代生物医学进展 2022年第6期22卷 1038-1042页

作者：孙一郭婷郑雪绒刘莎莎贺蓓西安医学院第二附属医院妇产科陕西西安710038 长安医院妇产科陕西西安710016

目的:探讨羊水栓塞妊娠大鼠血清中PLA2和PAF的水平变化。方法:30只健康妊娠大鼠均分为生理盐水组(A组)、羊水组(B组)及羊水胎粪混合组(C组)。将健康妊娠大鼠麻醉,麻醉效果生成后,全部切除大鼠子宫后关腹,分离出左颈总动脉,并将二通道生... 详细信息

目的:探讨羊水栓塞妊娠大鼠血清中PLA2和PAF的水平变化。方法:30只健康妊娠大鼠均分为生理盐水组(A组)、羊水组(B组)及羊水胎粪混合组(C组)。将健康妊娠大鼠麻醉,麻醉效果生成后,全部切除大鼠子宫后关腹,分离出左颈总动脉,并将二通道生理记录仪与其连接,连续监测血液动力学指标,随后将生理盐水、羊水和羊水胎粪混合液腹腔静脉注射于大鼠,1小时后取大鼠肺组织,用HE、APK染色结合CK16免疫组织化学法来检测模型是否制作成功。实验前后1小时两个取血点时,在制备好的羊水栓塞模型大鼠左颈动脉插管处各取1 m L血。采取酶联免疫检测法,测定血清、羊水及羊水胎粪混合液中PLA2、PAF的含量。获得的数据用SPSS 20.0软件进行处理,采用配对t检验、协方差分析及相关回归分析对血清PLA2、PAF的浓度进行分析。结果:B组和C组的3个血液动力学指标(动脉收缩压、舒张压及平均动脉压)均显著低于A组(P0.05)。同时,A组、B组与C组之间在心率改变方面无显著性差异(P>0.05)。HE染色中,B组与C组大鼠的肺间质显著变宽,且有充血、水肿及炎性细胞浸润,而A组无此现象。AMP染色中,B组和C组大鼠的肺小管中可见被染成蓝色的不定形物质和桃红色的角化鳞状上皮,而A组无此现象。CK16染色中,B组和C组大鼠的肺小管中,可以看到被染成黄色的颗粒和鳞状上皮,而A组无此现象。实验1小时后所取血液中,B组和C组的PLA2与PAF的含量显著高于A组(PPLA2和PAF,且羊水胎粪混合液中二者的含量均高。实验1小时前所取的血液中,PLA2和PAF浓度无相关性(P=0.762,R=0.012),而实验1小时后所取血液中,PLA2和PAF浓度呈正相关关系(P=0.002,R=0.437)。结论:羊水栓塞妊娠模型大鼠羊水和胎粪中均有PLA2和PAF,且实验1小时后所取血液中,PLA2和PAF含量在B组和C组中显著高于A组,说明羊水和胎粪中含有使PLA2、PAF水平增高的刺激因子。

关键词：羊水栓塞 PLA2 PAF 外周血液动力学免疫组织化学染色

PLA2G7: a new player in shaping energy metabolism and lifespan

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Signal Transduction and Targeted Therapy 2022年第7期7卷 2128-2129页

作者： Lena Susanna Candels Svea Becker Christian Trautwein Department of Medicine III University Hospital RWTH AachenAachenGermany

In a recent study published in science,Spadaro and colleagues described the downregulation of PLA2G7 through sustained calory restriction as a crucial factor for lowering inflammatory mechanisms and contributing to longevity.PLA2G7’s identification as a critical regulatory gene is important to better understand the role of adipose tissue metabolism in regulating immune-metabolic effects.These data show that long-term calorie restriction(CR)improves health and extends life expectancy.1 Chronic 40%CR increases susceptibility to infections in mice,shortening their lifespan.In contrast,the Comprehensive Assessment of Long-Term Effects of Reducing Intake of Energy(CALERIE)analysis found that moderate CR in humans over 24 months did not reduce immune functions.14%sustained CR was associated with improved adipose tissue metabolism,decreased inflammation,and reduced thymic lipoatrophy.Spadaro et al.discovered that low platelet activating factor acetyl hydrolase(PLA2G7)correlates with immune-metabolic consequences of CR and contributes to decreased inflammation and a longer lifespan in healthy mid-aged adults.1 PLA2G7 is a lipoprotein-associated calcium-independent phospholipase A2 involved in phospholipid catabolism during inflammatory and oxidative stress responses.

关键词： metabolism sustained PLA2

The Role of HBx Gene Mutations in PLA2R Positive Hepatitis-B-associated Membranous Nephropathy

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Biomedical and Environmental Sciences 2020年第4期33卷 269-272页

作者： DONG Hui XU Yan XU Ting SUN Jing Yi BU Quan Dong WANG Yan Fei CHE Lin ZHAO Long JIANG Wei Department of Nephrology The Affiliated Hospital of Qingdao UniversityQingdao 266003ShandongChina Department of Geratology The No.971 Hospital of PLAQingdao 266071ShandongChina

China is a higher-intermediate hepatitis B virus(HBV)endemicity country,and HBV is among the most important infectious diseases[1,2].Hepatitis-Bassociated glomerulonephritis(HBV-GN)is also one of the main forms of secondary kidney diseases seen in China[3].The main pathological type is hepatitis-Bassociated membranous nephropathy(HBV-MN).In the recent years,it has been found that human renal podocyte membrane M-type phospholipase 2 receptor(PLA2R)is the main autoantigen in idiopathic membranous nephropathy(IMN)[4].At present,it is found that PLA2 R and its antibodies are.

关键词： PLA2 diseases membranous

脑血管病变患者血清Hcy、PLA2与其病情进展及神经功能的相关性分析

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中国医学创新 2022年第11期19卷 54-57页

作者：张丹霓吴学良陈志钦广东省普宁市人民医院广东普宁515300

目的:探究与分析脑血管病变患者血清Hcy、PLA2与其病情进展及神经功能的相关性。方法:选取2020年9月-2021年7月普宁市人民医院的90例脑血管病变患者为观察组,同时期30名同龄体检健康者为对照组。比较两组的血清Hcy、PLA2水平及阳性率,... 详细信息

目的:探究与分析脑血管病变患者血清Hcy、PLA2与其病情进展及神经功能的相关性。方法:选取2020年9月-2021年7月普宁市人民医院的90例脑血管病变患者为观察组,同时期30名同龄体检健康者为对照组。比较两组的血清Hcy、PLA2水平及阳性率,并比较观察组中不同病情进展情况(GCS评分)及神经功能缺损程度(NIHSS评分)者的检测结果,采用Pearson相关性分析血清Hcy、PLA2与脑血管病变患者病情进展及神经功能的关系。结果:观察组的血清Hcy、PLA2水平及阳性率均显著高于对照组,观察组中不同GCS评分及NIHSS评分者的血清Hcy、PLA2水平及阳性率比较,差异均有统计学意义(PPLA2与GCS评分均呈负相关,与NIHSS评分均呈正相关(PPLA2呈高表达状态,且其与病情进展及神经功能密切相关,因此在脑血管病变患者中的检测价值较高。

关键词：脑血管病变 Hcy PLA2 病情进展神经功能

刺血疗法联合蛇伤外敷散对蝮蛇咬伤大鼠HAase、pla_2的影响研究

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时珍国医国药 2019年第1期30卷 241-244页

作者：陈平颜纯钏董德刚严张仁张艳晖王秀琴李强陈琦王万春江西中医药大学南昌330004 江西省中西医结合医院南昌330003 江西中医药大学附属医院南昌330006

目的观察八风穴位刺血疗法联合蛇伤外敷散对蝮蛇咬伤大鼠血清HAase、pla_2的水平及症状积分的干预作用。方法将40只大鼠随机分成刺血加中药组、中药组、对照组、模型组。通过在大鼠左下肢皮下注射蝮蛇毒的方法造模,刺血加中药组、中药... 详细信息

目的观察八风穴位刺血疗法联合蛇伤外敷散对蝮蛇咬伤大鼠血清HAase、pla_2的水平及症状积分的干预作用。方法将40只大鼠随机分成刺血加中药组、中药组、对照组、模型组。通过在大鼠左下肢皮下注射蝮蛇毒的方法造模,刺血加中药组、中药组、对照组三组干预治疗后,从大鼠的球后静脉采血,通过ELISA法检测各组大鼠血清HAase、pla_2的水平和观察各组症状积分。结果造模后各组HAase、pla_2含量及症状积分显著超过造模前(Ppla_2含量显著降低(Ppla_2含量及症状积分降低效果最佳,与中药组比较,差异有统计学意义(Ppla_2含量及症状积分。

关键词：穴位刺血疗法蛇伤外敷散蝮蛇咬伤 HAase PLA2

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PLA2在橘小实蝇免疫和生殖中的功能研究

PLA2在橘小实蝇免疫和生殖中的功能研究

作者：李秋佳华中农业大学

学位级别：硕士

橘小实蝇Bactrocera dorsaliss（Hendel）是一种危害广泛的果蔬害虫,每年在我国乃至全球都造成了较大的经济损失。磷脂酶A2（PLA2）作为一类可以在sn-2位水解细胞膜磷脂的酶,其水解产物包含多种游离脂肪酸和溶血磷脂。PLA2酶可参与脂类... 详细信息

橘小实蝇Bactrocera dorsaliss（Hendel）是一种危害广泛的果蔬害虫,每年在我国乃至全球都造成了较大的经济损失。磷脂酶A2（PLA2）作为一类可以在sn-2位水解细胞膜磷脂的酶,其水解产物包含多种游离脂肪酸和溶血磷脂。PLA2酶可参与脂类消化代谢、细胞膜重塑、细胞内信号转导等多个生理过程。近年来PLA2也被报道在免疫和生殖两大系统发挥重要作用,然而在昆虫中,PLA2是否参与到体液免疫和生殖中目前还没有相关文献报道。本研究主要采用RNAi的方法沉默橘小实蝇体内PLA2基因,分析橘小实蝇体液免疫反应及生殖能力的变化,阐述PLA2的作用机制,以期为橘小实蝇的科学综合防治提供新的思路和新的作用标靶。1.橘小实蝇PLA2基因表达模式根据实验室已有的橘小实蝇转录组文库,我们获得了在橘小实蝇成虫阶段高表达的PLA2基因全长,编码区与其它昆虫PLA2的序列同源性均较高。不同龄期的相对表达量分析结果表明:PLA2在橘小实蝇卵期和成虫期表达显著高于其他龄期。成虫不同组织中的表达量结果则显示:PLA2在成虫脂肪体和精巢中的表达量高于其他组织。2.PLA2调节橘小实蝇体液免疫反应三种不同的病原菌单增李斯特菌（Listeria monocytogenes）、金黄葡萄球菌（Staphylococcus aureus）和大肠杆菌（Escherichia coli）刺激橘小实蝇后,结果显示,病原菌刺激均可以增高橘小实蝇体内PLA2的表达量,且均在脂肪体中增高幅度最大。沉默PLA2基因显著降低体液免疫通路基因的表达量,包括Toll通路中的My D88和defensin以及Imd通路中的relish和diptericin基因的表达量均出现了显著的下调。橘小实蝇干扰处理后再进行病原菌刺激,结果显示;注射L.monocytogenes和S.aureus后,ds-egfp组My D88和defensin表达量显著高于CK组,而ds-PLA2组中My D88表达量比ds-egfp组中分别减少了47%和57%,defensin表达量相对于ds-egfp组则下调了66%和58%。感染L.monocytogenes和E.coli后24小时,我们检测了Imd通路中relish和diptericin基因表达水平,在ds-egfp组中两个检测基因的表达水平都显著高于CK组。而相较于ds-egfp组,ds-PLA2组中relish和diptericin基因的表达水平均出现了下调。注射L.monocytogenes后,ds-PLA2组中relish和diptericin比ds-egfp组分别发生了60%和44%的下调。而注射E.coli后,ds-PLA2组中relish和diptericin比ds-egfp组分别发生了71%和54%的下调。同时,我们发现注射L.monocytogenes后,ds-PLA2组橘小实蝇MTD减少,死亡率增多。这些结果表明,PLA2基因参与调节橘小实蝇体液免疫反应。为进一步探究PLA2在橘小实蝇体液免疫反应中作用机制,我们用尼罗红染色法观察检测了橘小实蝇脂肪体细胞的形态。PLA2基因沉默后,脂肪体细胞中油脂滴显著减少,脂肪体细胞形态发生显著变化。这表明,PLA2可能通过影响脂肪体细胞中脂类的含量来调节昆虫体液免疫反应。3.PLA2影响橘小实蝇雄虫生殖能力我们检测了橘小实蝇雄虫羽化后体内PLA2的表达谱,结果显示,PLA2表达量在雄虫性成熟前有一个急速增高期。同时,我们采用了两次注射法RNAi成功地在橘小实蝇雄虫交配前始终抑制PLA2的表达量。处理过的雄虫与正常处女雌虫交配后,其子代卵的孵化率、单雌子代幼虫数、卵到蛹的存活率显著降低。为探究其作用机理,我们对雄虫精子进行了荧光染色,测定精子活力。结果显示,PLA2沉默后雄虫体内精子总数没有显著变化,但精子存活率显著降低。对照组中活精子占总精子数的70.1%,而沉默PLA2后活精子仅占41.5%,下降了40.8%。这表明PLA2可通过调节橘小实蝇雄虫精子的存活率来影响雄虫的生殖能力。以上结果表明,PLA2可调节橘小实蝇脂肪体细胞内脂类含量和雄虫精子的存活率,从而调节体液免疫和雄虫的生殖能力,在橘小实蝇免疫和生殖中发挥重要作用。

关键词：橘小实蝇 PLA2 体液免疫雄虫生殖能力

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酶改性磷脂的制备及其乳化性能研究

酶改性磷脂的制备及其乳化性能研究

作者：闫俊辉华中农业大学

学位级别：硕士

磷脂是一类含有磷酸的脂类,是天然的表面活性剂,具有乳化、润湿、粘度调节、防止抗性淀粉生成和促进营养物质吸收等多种功能,广泛用于饲料、食品、医药、化工、皮革、纺织、化妆品等多个领域。磷脂虽然是良好的天然表面活性剂,但因其亲... 详细信息

磷脂是一类含有磷酸的脂类,是天然的表面活性剂,具有乳化、润湿、粘度调节、防止抗性淀粉生成和促进营养物质吸收等多种功能,广泛用于饲料、食品、医药、化工、皮革、纺织、化妆品等多个领域。磷脂虽然是良好的天然表面活性剂,但因其亲水性较差,乳化能力不够理想,应用范围受到很大限制。深度开发应用磷脂,除了要降低磷脂产品的生产成本,还需要进一步研发高亲水性高乳化能力的磷脂产品,这也是此领域备受关注的热点。磷脂改性就是对普通磷脂用物理、化学或酶法进行性能优化,改性磷脂在乳化性,稳定性等方面均优于普通磷脂,其中酶改性磷脂因其属于生物体内天然存在的物质,所以使用安全性高,应用范围更广,而且制造过程温和,不产生有害物质,生产成本低,因而更具有技术和商业优势。本文旨在研究大豆浓缩磷脂制备酶改性大豆浓缩磷脂的技术,利用自制的pla,水解除去磷脂分子上的脂肪酸,得到酶解磷脂(即酶改性磷脂)。研究结果可为酶改性磷脂的工业化生产工艺的制定提供依据。主要研究内容和结果如下:使用单因素方法优化了反应条件。将初始pH、底物浓度、温度、酶添加量、CaCl浓度和时间等独立变量作为反应变量,通过测定转化率高低对反应进行优化,获得转化率61.33±1.24%的酶改性磷脂制备方案。使用气相色谱(火焰离子检测器)法分析大豆浓缩磷脂酶解前后的脂肪酸种类和含量的变化。样本中检测到16种脂肪酸代谢物,结果表明酶解后不饱和脂肪酸含量明显增加,其中亚油酸(c18:2n6c)增加了137.32 mg/g Lecithin,亚麻酸(c18:3n3)增加29.31 mg/g Lecithin。油酸(c18:1n9c)增加29.21 mg/g Lecithin,而己酸(c06:0)、辛酸(c08:0)等饱和脂肪酸在酶解前后含量无明显变化。使用液质联用仪定量测定了大豆浓缩磷脂酶解前后磷脂种类和含量的变化。共检测了7种脂类,其中甘油二酯、单半乳糖二酰甘油和双半乳糖二酰甘油在整个酶解过程中含量没有发生明显变化。酶解后磷脂酰胆碱降低了102.72μmol/g Lecithin,磷脂酰乙醇胺的含量降低了148.27μmol/g Lecithin,对应的酶解产物溶血磷脂酰胆碱增加了97.60μmol/g Lecithin和溶血磷脂酰乙醇胺的含量增加了135.59μmol/g Lecithin。游离脂肪酸与磷脂种类和含量变化的分析表明,自制的pla主要水解磷脂的sn-2位脂肪酸,酶活力高且专一性强。酶改性磷脂较普通磷脂中不饱和脂肪酸含量降低,稳定性增强。本文还初步研究了游离脂肪酸、温度、p H、无机盐对不同转化率酶改性磷脂的乳化性能影响,结果表明:在磷脂产品中少量的游离脂肪酸对磷脂乳液的乳化能力没有不利的影响;CaCl浓度越高,乳化能力越差;Na Cl对于磷脂乳液乳化能力的影响不显著;酸性和高温环境不利于磷脂乳液的稳定。酶改性磷脂的乳化能力均优于普通磷脂,且酶改性程度越高乳化能力越好。

关键词： PLA2 普通磷脂酶改性磷脂游离脂肪酸乳化性

Design and Synthesis of Novel Pyrazole-based Lp-PLA2 Inhibitors

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Chinese Journal of Chemistry 2011年第10期29卷 2039-2048页

作者：王毅徐为人邵华谢亚非王建武 School of Chemistry and Chemical Engineering Shandong University Jinan Shandong 250100 China Tianjin Key Laboratory of Molecular Design and Drug Discovery Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Tianjin 300193 China

一系列新奇基于 pyrazole 的联系脂蛋白的 phospholipase A2 (Lp-PLA2 ) 禁止者被设计了并且由经由 10 步的许多 acetophenones 的 synthetized 会聚的途径。合成途径小心地被优化，并且一条失败的其他的线路也被讨论。在里面 vitro 生... 详细信息

一系列新奇基于 pyrazole 的联系脂蛋白的 phospholipase A2 (Lp-PLA2 ) 禁止者被设计了并且由经由 10 步的许多 acetophenones 的 synthetized 会聚的途径。合成途径小心地被优化，并且一条失败的其他的线路也被讨论。在里面 vitro 生物活动表明所有综合混合物是有是的复合 13b 的有势力 Lp-PLA2 禁止者大多数有势力一个(Lp-PLA2， IC50=1.5 nmol/L ) 。

关键词： PLA2 合成方法抑制剂吡唑设计磷脂酶A2 生物活性 IC50