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基于pi3k/akt通路研究鼻咽解毒胶囊对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响

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中国中药杂志 2025年

作者：蔺婷陶阳阳唐迎港袁菊杜慧平邓林宇周芳亮何迎春湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南中医药大学湖南省中医药防治眼耳鼻咽喉疾病与视功能保护工程技术研究中心湖南中医药大学中医学院湖南中医药大学医学院湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学中西医结合院湖南中医药大学针灸推拿学院

为探讨鼻咽解毒胶囊对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制，采用鼻咽癌CNE1、CNE2细胞，体外实验分为对照组（30%空白血清培养基），鼻咽解毒胶囊低（10%含药血清+20%空白血清培养基）、中（20%含药血清+10%空白血清培养基）、高（... 详细信息

为探讨鼻咽解毒胶囊对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制，采用鼻咽癌CNE1、CNE2细胞，体外实验分为对照组（30%空白血清培养基），鼻咽解毒胶囊低（10%含药血清+20%空白血清培养基）、中（20%含药血清+10%空白血清培养基）、高（30%含药血清培养基）浓度组，干预24 h后，通过细胞增殖与活性检测（CCk-8法）、克隆形成实验和EdU染色法检测鼻咽解毒胶囊对CNE1、CNE2细胞增殖的影响；流式细胞术检测鼻咽解毒胶囊对CNE1、CNE2细胞凋亡的作用；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测鼻咽解毒胶囊对CNE1、CNE2细胞X-连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）、生存素（survivin）、增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达变化，以及pi3k/akt通路相关蛋白的变化。结果显示，与对照组相比，鼻咽解毒胶囊中、高浓度组能够浓度依赖性地降低CNE1、CNE2细胞存活率（Ppi3k、p-akt蛋白表达量均显著下调（Ppi3k和akt蛋白的总表达变化差异无统计学意义。综上所述，鼻咽解毒胶囊能够抑制鼻咽癌细胞的增殖并诱导其凋亡，可能通过下调pi3k/akt信号通路实现其作用。

关键词：鼻咽解毒胶囊鼻咽癌细胞凋亡细胞增殖 pi3k/akt通路

药食同源养荣汤通过pi3k/akt通路治疗血虚大鼠

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中国兽医学报 2025年第1期 129-137页

作者：明彦君高姗姗张甜郝健翔张进张希春陈书明山西农业大学动物医学学院山西中医药大学中药与食品工程学院

旨在基于网络药理学探讨药食同源养荣汤(Dietary Yangrong Decoction, DYRT)治疗血虚证的分子机制，并研究其血药效应物质成分。通过网络药理学方法预测DYRT治疗血虚证的分子机制。采用环磷酰胺和乙酰苯肼联用法构建大鼠血虚模型，分为... 详细信息

旨在基于网络药理学探讨药食同源养荣汤(Dietary Yangrong Decoction, DYRT)治疗血虚证的分子机制，并研究其血药效应物质成分。通过网络药理学方法预测DYRT治疗血虚证的分子机制。采用环磷酰胺和乙酰苯肼联用法构建大鼠血虚模型，分为空白对照组、模型组、门氏养荣汤组(阳性对照组，Men’s Yangrong Decoction, MYRT)和DYRT组。利用液相色谱-质谱法(HPLC-MS)分析血药效应成分，采用全自动生化分析仪检测外周血象，ELISA法检测血清中造血调控因子的含量，RT-PCR法检测肾脏促红细胞生成素(EPO)及骨髓胞内磷脂酰肌醇激酶(pi3k)、蛋白激酶(akt)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的相对表达量。结果显示，DYRT含有57个活性成分和128个治疗血虚证的潜在靶点，GO富集分析得到1 835个条目，kEGG富集分析得到79条通路；通过HPLC-MS鉴定出DYRT与MYRT含有12种相同的血药效应成分。动物试验结果表明，与模型组相比，DYRT组大鼠的红细胞数、血小板数和血红蛋白含量均显著升高，白细胞数显著降低(P3、IL-6和GM-CSF的含量显著升高，TNF-α含量显著降低(Ppi3k、akt及GM-CSF mRNA的相对表达量显著升高(Ppi3k/akt通路，使机体恢复造血功能，改善血虚状态。

关键词：药食同源养荣汤血虚证造血调控因子 pi3k/akt通路血药效应成分

pi3k/akt通路在醛糖还原酶促进肾小球系膜细胞纤连蛋白表达中的作用

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中华病理学杂志 2017年第5期46卷 336-337页

作者：黄平吴倩谢青梅易韦贵州省人民医院病理科贵阳550002

肾脏纤维化是多种慢性肾脏疾病进展到终末期肾的病理基础,最终导致正常肾脏结构和功能永久性丧失.肾脏纤维化最重要的是细胞外基质（ECM）的过表达和沉积,产生ECM的细胞活化是肾纤维化形成的关键,研究发现大鼠肾小球肾炎及肾脏纤维化过... 详细信息

肾脏纤维化是多种慢性肾脏疾病进展到终末期肾的病理基础,最终导致正常肾脏结构和功能永久性丧失.肾脏纤维化最重要的是细胞外基质（ECM）的过表达和沉积,产生ECM的细胞活化是肾纤维化形成的关键,研究发现大鼠肾小球肾炎及肾脏纤维化过程中的系膜细胞（MsC）通过分泌多种炎症因子及ECM,参与发病过程.而纤连蛋白作为ECM中的重要成分,在肾脏纤维化过程中起重要作用[1].醛糖还原酶（AR）与糖尿病肾脏病变、视网膜病变、神经病变和白内障等糖尿病慢性并发症密切相关,许多证据表明,在非高糖条件下,AR对肾脏纤维化也起着一定作用[2].我们研究人系膜细胞（HMC）在转染pCDNA3-AR、AR-干扰RNA（AR-RNAi）干扰AR基因及使用pi3k/akt信号通路特异性抑制剂LY294002后,观察HMC内纤连蛋白、AR、磷酸化akt表达的变化,探讨pi3k/akt信号通路在这个过程中所起的作用,进一步增加对肾脏纤维化发生发展过程的认识.

关键词：肾小球系膜细胞 pi3k/akt通路醛糖还原酶 pi3k/akt信号通路蛋白表达肾脏纤维化糖尿病慢性并发症 LY294002

pi3k/akt通路在UC-MSCs移植治疗新生大鼠HIBD中的作用机制

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四川大学学报（医学版） 2015年第6期46卷 832-836页

作者：张德双白小红姚裕家母得志陈娟四川大学华西第二医院新生儿科成都610041 泸州医学院附属医院新生儿科泸州646000

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(pi3k/akt)通路在脐带间充质干细胞(UC-MSCs)移植治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中的机制。方法 10日龄SD大鼠分为假手术组、移植组(MSCs组)、抑制剂组(LY组)及HIBD组,制作HIBD动物模型,5-溴脱... 详细信息

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(pi3k/akt)通路在脐带间充质干细胞(UC-MSCs)移植治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中的机制。方法 10日龄SD大鼠分为假手术组、移植组(MSCs组)、抑制剂组(LY组)及HIBD组,制作HIBD动物模型,5-溴脱氧嘧啶尿苷标记UC-MSCs后侧脑室移植,移植后24h、48h,TUNEL、Western blot分别检测细胞凋亡及caspase3、磷酸化akt(P-akt)蛋白表达。结果移植后24h、48h,MSCs组细胞凋亡数及caspase3蛋白表达量较LY组及HIBD组减少(Pakt表达较LY组及HIBD组增加(P3表达下调,P-akt表达上调,pi3k/akt信号通路可能为其重要机制。

关键词： pi3k/akt通路脐带间充质干细胞移植缺氧缺血性脑损伤机制

pi3k/akt通路在低氧诱导脂肪干细胞增殖和向内皮细胞分化中的作用

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中国组织工程研究 2020年第19期24卷 3004-3009页

作者：殷令妮陈德宣上海健康医学院附属嘉定区中心医院老年病科

背景:大量研究证明低氧可以促进干细胞的增殖和分化,但目前尚不清楚其通过何种途径发挥作用。目的:观察低氧对脂肪干细胞增殖和向内皮细胞分化的影响,并探讨pi3k/akt通路在此过程中的作用。方法:取培养至第3代的Wistar大鼠脂肪干细胞,... 详细信息

背景:大量研究证明低氧可以促进干细胞的增殖和分化,但目前尚不清楚其通过何种途径发挥作用。目的:观察低氧对脂肪干细胞增殖和向内皮细胞分化的影响,并探讨pi3k/akt通路在此过程中的作用。方法:取培养至第3代的Wistar大鼠脂肪干细胞,分为常氧组、低氧组、低氧+LY294002组,3组均在体积分数为20%O 2培养箱中培养24 h,然后低氧组转移至体积分数为2%O 2培养箱中进行培养,常氧组继续在体积分数为20%O 2培养箱中培养,低氧+LY294002组在低氧培养环境下的细胞培养基中加入终浓度为25 mmol/L的pi3k/akt通路抑制剂LY294002。培养24 h后,Western blot检测p-akt的表达明确pi3k/akt通路的激活情况;CCk-8法检测各组脂肪干细胞的增殖情况;各组脂肪干细胞加入血管内皮细胞诱导培养基进行诱导分化10 d,分别通过qRT-PCR及抗CD31免疫荧光染色检测各组脂肪干细胞分化为内皮细胞的情况。结果与结论:①第3代脂肪干细胞呈现出典型的梭形结构,流式细胞仪检测结果显示CD34和CD45表达阴性,CD105表达阳性,并可向成骨及成脂细胞方向分化;②低氧培养条件下p-akt的表达明显升高,加入LY294002后p-akt的表达受到明显抑制;③低氧组细胞增殖率明显高于常氧组和低氧+LY294002组(P31的表达明显高于常氧组和低氧+LY294002组(P31的表达低于低氧组(Ppi3k/akt通路在低氧诱导的脂肪干细胞增殖及向内皮细胞分化过程中发挥重要作用。

关键词：脂肪干细胞低氧细胞增殖细胞分化 pi3k/akt通路

pi3k/akt通路与骨质疏松症的关系及中医药干预的研究进展

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中国骨质疏松杂志 2021年第6期27卷 922-926页

作者：林德民谢兴文李宁徐世红李鼎鹏柳博姜朝阳赵建伟甘肃中医药大学甘肃兰州730000 西北民族大学附属医院甘肃兰州730000 甘肃省第二人民医院甘肃兰州7300004 甘肃中医药大学附属医院甘肃兰州730000 甘肃省中医院甘肃兰州730000

骨质疏松症是一种由多种信号通路共同介导和影响的临床骨科常见的代谢性疾病,因其并发症常严重影响患者正常生活质量,并造成较大的经济损失而被广泛研究及报道。中医药治疗方案与pi3k/akt通路因其能直接或间接影响骨骼组成细胞中的成骨... 详细信息

骨质疏松症是一种由多种信号通路共同介导和影响的临床骨科常见的代谢性疾病,因其并发症常严重影响患者正常生活质量,并造成较大的经济损失而被广泛研究及报道。中医药治疗方案与pi3k/akt通路因其能直接或间接影响骨骼组成细胞中的成骨细胞与破骨细胞共同介导的“骨平衡”,在骨质疏松症治疗中产生显著效果而被越来越多学者深入的研究。近年来,大量动物实验及分子研究分析指出,中医药治疗方案、pi3k/akt通路与骨质疏松症之间具有较大的相关性,国内外学者也对中医药手段直接或间接激活pi3k/akt通路治疗骨质疏松症的相关机制进行了多维度、深层次的研究。虽然目前对于中医药治疗方案、pi3k/akt通路与骨质疏松症之间的相关性研究不断深入,但在其分子机制研究等方面仍存在欠缺。本文将通过对中医药治疗方案、pi3k/akt通路与骨质疏松症的相关性研究进行综述,旨在为中医药干预骨质疏松症提供新的思路。

关键词：骨质疏松 pi3k/akt通路中医药

pi3k/akt通路在糖尿病视网膜病变中的调控作用

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国际眼科杂志 2024年第9期24卷 1426-1431页

作者：李宝花亢泽峰侯昕玥王健全宋曼李丹玉刘梦雨晏鑫中国中医科学院眼科医院中国北京市100040 中国福建省福州市中医院中医眼科 350001

糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病的主要并发症之一,以神经退行性病变和微血管病变为其主要特征。目前,DR的治疗主要关注于晚期并发症的处理,没有达到理想的临床疗效。证据表明,pi3k/akt通路作为细胞周期过程中重要的胞内信号通路之一,参与... 详细信息

糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病的主要并发症之一,以神经退行性病变和微血管病变为其主要特征。目前,DR的治疗主要关注于晚期并发症的处理,没有达到理想的临床疗效。证据表明,pi3k/akt通路作为细胞周期过程中重要的胞内信号通路之一,参与了DR发病的全过程。文章主要从pi3k/akt信号通路的结构组成、激活和阻止途径、传导路径、调控机制和生物学功能等方面,综述其在DR中的作用,并探讨靶向pi3k/akt通路治疗DR的潜力。

关键词： pi3k/akt通路糖尿病视网膜病变神经退行性病变微血管病变

pi3k/akt通路在大戟大枣汤抗不同分子表型乳腺癌中的调控作用

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中国比较医学杂志 2024年第3期34卷 27-35页

作者：马立威姚宏玉陈哲倪世宇陈颂李京刘吉成齐齐哈尔医学院医药科学研究院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院公共卫生学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔医学院附属第五医院黑龙江大庆163001 齐齐哈尔医学院附属第三医院黑龙江齐齐哈尔161099

目的探讨pi3k/akt通路在大戟大枣汤(decoction of Euphorbia fischeriana *** jujuba,DEFSJ)抗雌激素受体(ER)阴性(-)和ER阳性(+)乳腺癌中的调控作用,为乳腺癌的针对性治疗提供参考。方法制备DEFSJ提取液,采用UHPLC-Triple Quad仪进行质控分析。DEFSJ含药血清(containing serum,CS)依照体外血清药理学方法进行获取,乳腺癌(ER-)MDA-MB-453和(ER+)MCF-7细胞分别用不同浓度DEFSJ-CS干预48 h。流式细胞术检测细胞周期分布,DNA ladder实验评估细胞凋亡程度,Western blot法检测pi3k/akt通路相关蛋白表达,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测FoxO3a、FoxO1a及Bim mRNA表达;激光共聚焦显微镜观察FoxO3a蛋白核转位。结果UPLC对5批DEFSJ提取物进行了分析,结果表明制备工艺可行,质量可控,保证了药理学实验结果的准确性。体外实验中发现,DEFSJ-CS能阻断细胞在G2/M期(Ppi3k、p-akt、p-FoxO3a及p-FoxO1a蛋白表达降低(Ppi3k/akt通路参与了大戟大枣汤抗乳腺癌作用的调控,作用效果因乳腺癌表型差异而不同。

关键词：狼毒大戟 MDA-MB-453细胞 MCF-7细胞 pi3k/akt通路

pi3k/akt通路对人RPE细胞EMT的影响

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PI3K/AKT通路对人RPE细胞EMT的影响

作者：叶巍第二军医大学

学位级别：硕士

视网膜脱离(Retinal detachment,RD)是一种非常严重的致盲性疾病,视网膜脱离主要病理表现为视网膜神经上皮层和色素上皮层的分离。主要诱因为全层视网膜裂孔、玻璃体视网膜牵拉和视网膜渗出液所致。近年来,随着玻璃体切割等手术方式的... 详细信息

视网膜脱离(Retinal detachment,RD)是一种非常严重的致盲性疾病,视网膜脱离主要病理表现为视网膜神经上皮层和色素上皮层的分离。主要诱因为全层视网膜裂孔、玻璃体视网膜牵拉和视网膜渗出液所致。近年来,随着玻璃体切割等手术方式的不断创新应用,视网膜脱离手术的治愈率有一定提高。但是,目前视网膜手术多数达到了解剖复位的同时术后视力不佳,术后复发率也较高。如何提高视网膜脱离患者术后视力,降低术后复发率是亟待解决的问题。视网膜脱离发病与增殖性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreo retinopathy,PVR)密切相关。研究表明与PVR发生密切相关的重要原因之一就是视网膜色素上皮细胞(r etinal pigment epithelial,RPE)的上皮间充质化(epithelial mesenchymal transition,E MT)[1-2]。上皮细胞上皮-间质转化是指上皮细胞获得间质细胞的特征,是PVR发生的细胞学基础。RPE细胞的上皮间充质化与多种细胞因子分泌和通路激活相关,其中磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(phosphatedylinositol 3 kinase/serine—threoninekinase,pi3k/akt)信号转导通路是介导RPE细胞向EMT转化的重要通路[3]。转化生长因子-β2(transforming growth factor-beta2,TGF-β2)在视网膜脱离患者玻璃体腔中被广泛发现。TGF-β2诱导RPE细胞向EMT转化已被证实,这也是PVR形成的重要原因。而TGF-β2如何诱导RPE细胞向EMT转化仍不清楚,其转化与多条通路密切相关,pi3k/akt使其中重要的通路之一[4-7]。越来越多的研究表明,机械应力(mechanical stress,MS)在细胞增殖、分化、凋亡、基因表达以及组织生长、功能整合等生理过程和某些病理生理过程中起着重要的作用。这与离开原位的RPE细胞异常增生、移行诱发EMT过程,产生增生膜收缩对视网膜造成持续性机械应力牵拉,诱发PVR过程相一致。但是,机械应力过度导致视网膜细胞激活的细胞内信号调控机制目前尚未阐明[8]。Flexcell细胞组织力学培养系统不仅能对各种2D、3D细胞组织提供拉应力、压应力、切应力刺激加载,而且还可以提供拉应力和切应力混合力同时加载;不仅能对细胞组织进行机械力加载刺激,而且还能进行三维培养、人工生物组织构建、动力模拟;不仅能单轴向牵张拉伸,而且还可以双轴向牵张拉伸;不仅可以根据实验需要调节受力大小,而且还可以模拟不同受力时间[9]。因此,Flexcell机械过度应力刺激体外培养的RPE细胞为模型,更加精确、更加符合诱发RPE细胞EMT过程,形成纤维性增生膜对视网膜产生持续性机械牵拉力,产生PVR的病理生理过程[10]。本课题分别利用机械牵拉和TGF-β2分别诱导RPE细胞,观察其中pi3k/akt通路相关蛋白:pi3k、Ppi3k、akt、Pakt表达变化,同时检测EMT相关蛋白:vimentin、α-SMA相关变化,探究其相互关系。第一部分机械应力牵拉对人RPE细胞pi3k/akt通路的影响目的:视网膜脱离发生机制尚不明确,本文旨在研究机械应力牵拉后视网膜色素上皮细胞上清中IL-8分泌量的变化以及人其对RPE细胞pi3k/akt通路变化影响。方法:培养人RPE细胞,应用Flex-cell细胞应力加载系统牵拉人RPE细胞不同时间(0 h、1 h、3 h、6 h、9 h)建立不同牵拉时间的模型。分别标记为对照组、牵拉1 h组、牵拉3 h组、牵拉6 h组、牵拉9 h组。随后用ELISA方法检测人RPE细胞不同实验组上清中IL-8分泌量的变化。细胞免疫荧光和Western blot方法观察pi3k、Ppi3k、T-akt、P-akt的表达。结果:随着牵拉时间的延长,ELISA方法检测人RPE细胞不同实验组上清中IL-8分泌量逐渐增加[924.79±5.92 pg/m L、947.73±5.34 pg/m L、974.53±5.74 pg/m L、979.57±1.12pg/m L、1019.22±4.25 pg/m L],差异有统计学意义(F=166,pakt蛋白表达增加[0.61±0.02、0.97±0.05、0.99±0.04、1.21±0.11、1.20±0.07],差异有统计学意义(F=41.24,pakt表达未见明显变化。结论:机械应力牵拉人RPE细胞时,细胞上清中IL-8分泌量逐渐增加同时RPE细胞内pi3k/akt通路明显

关键词：机械应力视网膜色素上皮细胞 pi3k/akt通路上皮-间质转化