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基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦部Cajal间质细胞自噬的影响

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针刺研究 2022年第12期47卷 1060-1067页

作者：张天华赵莎彤黎晓宇肖小娟肖乐魏星彭艳湖南中医药大学针灸推拿与康复学院长沙410208

目的:观察电针“足三里”“三阴交”“梁门”对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠血糖、胃排空及胃窦部Cajal间质细胞(ICC)自噬及磷酯酰肌醇-3激酶(pi3k)/蛋白激酶B(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路的影响,探讨电针改善DGP胃肠动力功能... 详细信息

目的:观察电针“足三里”“三阴交”“梁门”对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠血糖、胃排空及胃窦部Cajal间质细胞(ICC)自噬及磷酯酰肌醇-3激酶(pi3k)/蛋白激酶B(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路的影响,探讨电针改善DGP胃肠动力功能障碍的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、3-MA组和3-MA+电针组,每组9只。采用腹腔注射链脲佐菌素结合高脂高糖饲料喂养制备DGP大鼠模型。电针组予单侧“足三里”“三阴交”“梁门”电针治疗,每日1次;3-MA组予3-甲基腺嘌呤(3-MA)腹腔注射,浓度为10 mg/mL,剂量为30 mg·kg^(-1)·d^(-1);3-MA+电针组予3-MA腹腔注射联合电针治疗;每个疗程5 d,共治疗3个疗程。评定大鼠症状积分,测量血糖;酚红灌胃法检测大鼠胃排空率;Western blot法检测胃窦部ICC中微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62、pi3k、akt、磷酸化akt(p-akt)、mtor的蛋白表达水平;透射电镜观察胃窦部ICC内自噬体数量。结果:造模后,与空白组比较,模型组、电针组、3-MA组和3-MA+电针组症状积分及血糖水平均升高(Ppi3k蛋白表达降低(Ppi3k、akt、p-akt、mtor蛋白表达升高(Ppi3k蛋白表达升高(Ppi3k、akt、p-akt、mtor蛋白表达降低(Ppi3k、Ⅰ型pi3k、akt、p-akt、mtor蛋白表达降低(Ppi3k蛋白表达升高(Ppi3k、akt、p-akt、mtor蛋白表达均降低(Ppi3k蛋白表达降低(Ppi3k、akt、p-akt、mtor蛋白表达均升高(Ppi3k/akt/mtor通路调节胃窦部ICC自噬水平,从而改善DGP胃肠动力功能障碍。

关键词：电针糖尿病胃轻瘫 Cajal间质细胞自噬 PI3K/AKT/mTOR信号通路

西红康通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控糖尿病肾病足细胞自噬和上皮-间充质转化的机制

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中华中医药杂志 2023年第11期38卷 5243-5248页

作者：古丽孜拉·迪力木拉提玉山江·艾克木新疆医科大学第四临床医学院乌鲁木齐830000

目的:探讨西红康通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控糖尿病肾病(DN)足细胞自噬和上皮-间充质转化(EMT)的机制。方法:取47只SPF级SD大鼠,随机取7只作为空白对照组;剩余40只大鼠采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建DN大鼠足细胞动物模型,将建模... 详细信息

目的:探讨西红康通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控糖尿病肾病(DN)足细胞自噬和上皮-间充质转化(EMT)的机制。方法:取47只SPF级SD大鼠,随机取7只作为空白对照组;剩余40只大鼠采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建DN大鼠足细胞动物模型,将建模成功大鼠分为模型组、对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,各7只。低、中、高剂量组大鼠分别给予0.45、0.9、1.8g·kg^(-1)·d^(-1)西红康溶液灌胃,对照组大鼠给予140mg·kg^(-1)·d^(-1)二甲双胍溶液灌胃。各组均完成8周干预。PAS染色观察肾小球内细胞外基质增生,苏木精-伊红(HE)染色检测肾组织病理变化,检测空腹血糖、糖化血红蛋白、葡萄糖耐量;Western blot检测足细胞自噬、EMT、pi3k/akt/mtor通路相关蛋白表达。结果:对照组和低、中、高剂量组大鼠系膜基质评分、空腹血糖、葡萄糖耐量及HbA1c水平显著低于模型组(Ppi3k、p-akt、P-mtor蛋白表达上调(Ppi3k、p-akt、p-mtor蛋白表达下调(Ppi3k、p-akt、p-mtor蛋白表达呈下降趋势(PPI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

关键词：糖尿病肾病西红康自噬上皮-间充质转化 PI3K/AKT/mTOR信号通路

连翘苷调节相关信号通路对地塞米松诱导的成骨细胞自噬和凋亡的影响

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中国骨质疏松杂志 2023年第7期29卷 976-981页

作者：周凡高扬胡艳平向超熊和然周茹武汉市中医医院推拿科湖北武汉430000 武汉市中医医院脑病科湖北武汉430000

目的探讨连翘苷(phillyrin, PHN)调节磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/丝氨酸苏氨酸激酶(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路对地塞米松(dexamethasone, DEX)诱导的成骨细胞自噬和凋亡的影响。方法将MC3T3-E1细胞分为对照组(NOR组)、... 详细信息

目的探讨连翘苷(phillyrin, PHN)调节磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/丝氨酸苏氨酸激酶(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路对地塞米松(dexamethasone, DEX)诱导的成骨细胞自噬和凋亡的影响。方法将MC3T3-E1细胞分为对照组(NOR组)、DEX组(10μmol/L DEX处理MC3T3-E1细胞)、L-PHN组(5μmol/L PHN处理MC3T3-E1细胞)、M-PHN组(10μmol/L PHN处理MC3T3-E1细胞)、H-PHN组(20μmol/L PHN处理MC3T3-E1细胞)、ZSTk474组(用20μmol/L PHN和2μmol/L的PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂ZSTk474处理MC3T3-E1细胞);MTT法检测细胞毒性和细胞活力;流式细胞术检测MC3T3-E1细胞凋亡;透射电子显微镜(TEM)观察自噬小体;Western blot法检测MC3T3-E1细胞中自噬、凋亡和pi3k/akt/mtor通路相关蛋白表达;ALP活性及ALP染色检测MC3T3-E1细胞分化能力。结果 0~80μmol/L PHN对MC3T3-E1细胞无明显毒性影响。与NOR组相比,DEX组OD570值、Bcl-2蛋白水平、p-pi3k/pi3k、p-akt/akt、mtor蛋白水平、ALP活性、Beclin1、LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白水平以及自噬小体数目显著降低(P通路蛋白水平显著升高(Pk474消除了PHN对MC3T3-E1细胞的有利作用。结论 PHN可能通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路促进成骨细胞自噬,进而抑制其凋亡。

关键词：连翘苷 PI3K/AKT/mTOR信号通路地塞米松成骨细胞自噬凋亡

银杏叶提取物防治慢性阻塞性肺疾病的机制研究:基于PI3K/AKT/mTOR信号通路调控肺泡巨噬细胞自噬

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中国全科医学 2023年第3期26卷 293-303页

作者：郭栋伟张鹏飞任明君廖丽君黄茹妍罗湘蓉广西壮族自治区柳州市中医医院呼吸与危重症医学科 545000 广西中医药大学广西壮族自治区南宁市530200

背景银杏叶提取物(GBE)能抑制慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道及全身炎性反应,改善气道重塑,但其具体作用机制尚不清楚。目的探讨GBE通过磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶B(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路调控肺泡巨噬细胞... 详细信息

背景银杏叶提取物(GBE)能抑制慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道及全身炎性反应,改善气道重塑,但其具体作用机制尚不清楚。目的探讨GBE通过磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶B(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路调控肺泡巨噬细胞自噬防治COPD的作用机制。方法于2020年11月至2022年3月,选取90只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、COPD模型组、GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组,每组15只。正常对照组第1、14天向气管内注入0.9%氯化钠溶液,其余时间进行正常饲养。COPD模型组、GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组和Taselisib组采用香烟熏吸联合气管内注入脂多糖(LPS)的方法构建COPD大鼠模型。GBE组于实验的第15~28天腹腔注射舒血宁注射液,比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组于实验的第29~42天分别给予akt抑制剂比卡鲁胺、mtor抑制剂雷帕霉素、pi3k抑制剂Taselisib进行干预。HE染色观察各组大鼠肺泡病理改变及气道重塑情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肺泡灌洗液(BALF)与血清白介素6(IL-6)和白介素-8(IL-8)水平;显微镜下计数各组大鼠肺泡巨噬细胞数量;透射电镜观察各组大鼠肺泡巨噬细胞的超微结构;蛋白免疫印迹法(WB)检测各组大鼠肺泡巨噬细胞自噬相关蛋白表达水平并计算微管相关蛋白轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。结果造模结束后各组大鼠数量为:正常对照组12只、COPD模型组11只、GBE组12只、比卡鲁胺组12只、雷帕霉素组12只、Taselisib组11只。HE染色结果显示,GBE组与各抑制剂组大鼠肺泡损伤程度较COPD模型组减轻;GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组肺平均内衬间隔(MLI)与平均肺泡面积(MAA)小于COPD模型组,平均肺泡数(MAN)大于COPD模型组(Ppi3kp110α、akt、p-Ak、mtor、p-mtor表达水平高于其他各组,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值低于其他各组(Ppi3kp110α、akt、p-akt、mtor、p-mtor表达水平升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低(PPI3K/AKT/mTOR信号通路,维持COPD大鼠肺泡巨噬细胞的自噬功能,减轻巨噬细胞浸润,抑制炎性反应及肺泡破坏,改善气道重塑。

关键词：肺疾病,慢性阻塞性银杏叶提取物 PI3K/AKT/mTOR信号通路肺泡巨噬细胞自噬

基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨晚蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫大鼠Cajal间质细胞的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：张惠贞张红李伟赵凯邱雨迪北京中医药大学第三临床医学院北京中医药大学房山医院

目的：基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(pi3k/akt/mtor)信号通路探讨晚蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫(Diabetic Gastroparesis，DGP)大鼠治疗作用机制。方法：制备DGP大鼠模型，随机分为空白组、模型组、莫沙必利组(0.15 g·... 详细信息

目的：基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(pi3k/akt/mtor)信号通路探讨晚蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫(Diabetic Gastroparesis，DGP)大鼠治疗作用机制。方法：制备DGP大鼠模型，随机分为空白组、模型组、莫沙必利组(0.15 g·mL-1的枸橼酸莫沙必利混悬液)以及晚蚕沙提取物高、中、低剂量组(3.2、1.6、0.8 g·kg-1)，灌胃4周。检测大鼠胃排空率、随机血糖，HE染色观察胃窦部形态变化，免疫组化分析c-kit基因表达，TUNEL染色观察Cajal间质细胞凋亡，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测pi3k、p-pi3k、akt、p-akt、mtor及p-mtor的蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组胃排空率大幅降低(Pkit表达减少(Pkit表达明显升高(Pakt/akt、p-pi3k/pi3k及p-mtor/mtor蛋白表达均升高(Pakt/akt蛋白表达降低(Ppi3k/pi3k蛋白表达降低(Pmtor/mtor蛋白表达降低(Pakt/akt蛋白表达降低(Ppi3k/pi3k蛋白表达升高(PPI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

关键词：糖尿病胃轻瘫晚蚕沙提取物 Cajal间质细胞 PI3K/AKT/mTOR信号通路

五味子多糖调控PI3K/AKT/mTOR信号通路对哮喘小鼠气道重塑的影响

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中国病理生理杂志 2022年第7期38卷 1210-1218页

作者：梁坤耿鑫刘艳芬滕州市中心人民医院中药房山东枣庄277599 山东省济南市第四人民医院药学部药学部山东济南250031 滕州市中心人民医院儿科药房山东枣庄277599

目的:探讨五味子多糖(SCP)对哮喘小鼠气道重塑的作用,并分析其潜在机制。方法:将72只SPF级雌性BALB/c小鼠分为对照(control)组、模型组[即卵清蛋白(OVA)组]、LY294002(pi3k抑制剂)+OVA组、SCP+OVA组、SCP+LY294002+OVA组和SCP+740 Y-P(pi3k激活剂)组,每组12只。除control组外,其余各组小鼠均采用OVA联合氢氧化铝刺激建立哮喘模型。从第17天开始进行药物干预,每天1次,连续给药1周。末次攻击后24 h,使用小动物无创肺功能测定仪测量气道反应性;ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;HE、PAS和Masson染色评估肺部炎症、杯状细胞增生和胶原纤维沉积情况;免疫组织化学法检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;RT-qPCR检测肺组织I型胶原(Col I)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)的mRNA表达;Western blot检测肺组织PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达。结果:与control组相比,OVA组小鼠气道反应性,BALF中TNF-α和IL-6水平,肺组织炎症评分、杯状细胞增生和胶原纤维沉积,α-SMA阳性表达率,Col I和MMP-9 mRNA表达水平,以及p-pi3k/pi3k、p-akt/akt和p-mtor/mtor比值均显著升高,TIMP-1 mRNA水平显著降低(Ppi3k/pi3k、p-akt/akt和p-mtor/mtor比值均显著降低,TIMP-1 mRNA水平显著升高(PPI3K/AKT/mTOR信号通路减轻哮喘小鼠模型中的气道重塑。

关键词：五味子多糖哮喘气道重塑 PI3K/AKT/mTOR信号通路

黄芪甲苷对大鼠颈总动脉内膜增殖、炎症反应及PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响

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中国病理生理杂志 2023年第4期39卷 677-683页

作者：李友乾尉希清宋秉春张洪生张金国济宁医学院附属医院心内科心力衰竭病区山东济宁272029 济宁医学院附属医院心内科冠心病二病区山东济宁272029

目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶B(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路探究黄芪甲苷(ASIV)对球囊损伤后大鼠颈总动脉内膜增殖和炎症反应的作用机制。方法:选用SPF级健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠24只,12周龄,约280~... 详细信息

目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/蛋白激酶B(akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)信号通路探究黄芪甲苷(ASIV)对球囊损伤后大鼠颈总动脉内膜增殖和炎症反应的作用机制。方法:选用SPF级健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠24只,12周龄,约280~300 g,适应性喂养3 d,使用球囊损伤法建立大鼠颈总动脉球囊损血管模型,实验共分为4组,假手术(sham)组、模型(model)组、低剂量ASIV(L-ASIV)组和高剂量ASIV(H-ASIV)组,每组6只。L-ASIV给于60 mg·kg^(−1)·d^(−1)的ASIV,H-ASIV给于120 mg·kg^(−1)·d^(−1)的ASIV灌胃治疗,sham组及model组给予相同体积的1%羧甲基纤维素钠灌胃。4周后取大鼠损伤处颈总动脉做石蜡切片,光镜下观察血管腔形态,通过图像分析软件评估管腔面积和内膜增生程度、内膜中膜比值;检测血管组织中磷酸化pi3k(p-pi3k)、磷酸化akt(pakt)、磷酸化mtor(p-mtor)、增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)和P62的蛋白水平。结果:(1)与sham组相比,model组大鼠颈总动脉内膜显著增殖(Ppi3k、p-akt、p-mtor、PCNA、ICAM-1和P62蛋白水平显著升高(PPI3K/AKT/mTOR信号通路抑制血管平滑肌细胞自噬来发挥对球囊损伤后大鼠颈总动脉内膜增殖及炎症的抑制作用。

关键词：黄芪甲苷内膜增生球囊损伤自噬 PI3K/AKT/mTOR信号通路

基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨野黄芩苷联合虎杖苷抗慢性支气管炎的作用机制

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中国病理生理杂志 2023年第10期39卷 1780-1788页

作者：王祁赵博高璐李敏仪李瑶张萌萌卫培峰王斌李敏陕西中医药大学陕西西安712046 陕西中医药大学第二附属医院陕西西安712099

目的:探讨野黄芩苷联合虎杖苷对脂多糖(LPS)联合烟熏法诱导的大鼠肺组织和支气管损伤的影响及其机制。方法:雄性SD大鼠分为对照组、模型组、黄芩茎叶-虎杖水煎液(5 g/kg)组、野黄芩苷(40 mg/kg)组、虎杖苷(60 mg/kg)组、野黄芩苷+虎杖苷... 详细信息

目的:探讨野黄芩苷联合虎杖苷对脂多糖(LPS)联合烟熏法诱导的大鼠肺组织和支气管损伤的影响及其机制。方法:雄性SD大鼠分为对照组、模型组、黄芩茎叶-虎杖水煎液(5 g/kg)组、野黄芩苷(40 mg/kg)组、虎杖苷(60 mg/kg)组、野黄芩苷+虎杖苷(20 mg/kg+30 mg/kg、40 mg/kg+60 mg/kg和80 mg/kg+120 mg/kg)组和桂龙咳喘宁片(1 g/kg)组,每组10只。建立慢性支气管炎模型。ELISA法测定大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-17A、IL-10和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;通过试剂盒检测肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平;测定BALF中蛋白、白细胞及中性粒细胞含量;测定右肺组织湿/干(W/D)质量比值;HE染色观察肺组织和支气管病理变化,并对肺组织损伤评分;RT-qPCR检测磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)、蛋白激酶B(PkB/akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mtor)的mRNA表达;Western blot检测p-pi3k、pi3k、p-akt、akt、p-mtor和mtor的蛋白水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠支气管和血清中IL-1β、IL-6、IL-17A、TNF-α和MDA水平显著升高(Ppi3k、p-akt和p-mtor蛋白水平显著升高(Pkg+30 mg/kg、40 mg/kg+60 mg/kg和80 mg/kg+120 mg/kg)组IL-1β、IL-6、IL-17A、TNF-α和MDA水平均显著降低(Ppi3k、p-akt和p-mtor蛋白水平显著降低(PPI3K/AKT/mTOR信号通路的活化,降低氧化应激反应,抑制炎症因子IL-17A、TNF-α、IL-1β和IL-6有关。

关键词：野黄芩苷虎杖苷慢性支气管炎肺损伤 PI3K/AKT/mTOR信号通路

电针井穴对VD大鼠海马CA1区pi3k/akt/mtor通路及VEGF、bFGF的影响

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时珍国医国药 2022年第4期33卷 1015-1018页

作者：周婷王婧吉舒琳睿殷红彪程红亮石荣菊储浩然安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230001 安徽中医药大学安徽合肥230012

目的探讨电针井穴改善VD大鼠记忆及对VD大鼠海马CA1区PI3K/AKT/mTOR信号通路及对细胞生长因子VEGF、bFGF表达的调节作用。方法用4-VO(四血管阻断法)制备VD大鼠模型,将大鼠随机分为电针组(VD+Z组)、西药组(VD+Y组)、VD对照组(VD组)、假... 详细信息

目的探讨电针井穴改善VD大鼠记忆及对VD大鼠海马CA1区PI3K/AKT/mTOR信号通路及对细胞生长因子VEGF、bFGF表达的调节作用。方法用4-VO(四血管阻断法)制备VD大鼠模型,将大鼠随机分为电针组(VD+Z组)、西药组(VD+Y组)、VD对照组(VD组)、假手术组(BG组)。以水迷宫试验、神经行为学评分对全部治疗后大鼠的学习记忆能力进行评分;采用免疫组化、Western blot检测各组海马CA1区pi3k、akt、mtor、VEGF、bFGF的表达情况。结果与VD组相比,VD+Z组、VD+Y组的水迷宫实验逃避潜伏期、跨越平台、神经行为学评分显著好转(Ppi3k、akt、mtor、VEGF、bFGF的各项表达均显著升高(PPI3K/AKT/mTOR信号通路及VEGF、bFGF表达,促进血管再生,进而有效提高学习记忆功能以改善VD。

关键词：血管性痴呆井穴电针 PI3K/AKT/mTOR信号通路 VEGF bFGF