检索结果-南通市图书馆

Chinese Journal of Cancer Research 2014年第5期26卷 564-572页

作者： Yunlang Cai Xiaoqiang Tan Jun Liu Yang Shen Di Wu mulan Ren Peilin Huang Dandan Yu Department of Obstetrics & Gynecology Zhongda HospitalSoutheast University medical College Southeast University

The activation of the pi3k/akt/m tor pathway plays a key role in ovarian cancer tumorigenesis, progression and chemotherapy resistance. This study aimed to explore the possible mechanism that pi-103, a dual inhibitor of phosphatidylinositide 3-kinase and m tor, enhances the sensitivity of SkOV3/DDP ovarian cancer cell line to cisplatin chemotherapy. The results showed that pi-103 could significantly increase the sensitivity of SkVO3/DDP cells to cisplatin through inhibiting the activation of pi3k/akt/m tor signaling pathway and inducing cell cycle arrest and apoptosis.

关键词： pi3k/akt/m tor cisplatin ovarian cancer

AZT联合As2O3抑制肝癌HepG2细胞增殖、侵袭与浸润的机制研究

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

AZT联合As2O3抑制肝癌HepG2细胞增殖、侵袭与浸润的机制研究

作者：赵川甘肃中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨叠氮胸苷(Zidovudine,AZT)协同三氧化二砷(Arsenic trioxide,AsO)抑制肝癌Hep G2细胞增殖过程中,对肝癌pi3k/akt/m tor信号通路、EmT相关因子的影响以及Egr-1在AsO协同AZT抗肝癌侵袭和浸润中扮演的角色,为进一步深入研究作理... 详细信息

目的:探讨叠氮胸苷(Zidovudine,AZT)协同三氧化二砷(Arsenic trioxide,AsO)抑制肝癌Hep G2细胞增殖过程中,对肝癌pi3k/akt/m tor信号通路、EmT相关因子的影响以及Egr-1在AsO协同AZT抗肝癌侵袭和浸润中扮演的角色,为进一步深入研究作理论支持。方法:(1)AZT(0,5,10,20,40μmol/L)单独处理肝癌Hep G2细胞72h,采用荧光定量PCR法(q-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测pi3k,akt以及m tor m RNA和蛋白的表达水平。(2)实验分为空白组,AsO(2μmol/L)组,AZT(20μmol/L)组以及AsO(2μmol/L)联合AZT(20μmol/L)组。各组肝癌Hep G2细胞处理72小时后,采用q-PCR和Western blot分别检测EmT的关键因子E-cadherin、Snail以及VIm基因和蛋白的表达水平。电转染Egr-1 si RNA并加药物干预,采用细胞划痕实验和Transwell实验检测Egr-1对肝癌Hep G2细胞侵袭和浸润产生的影响。结果:(1)通过q-PCR和Western blot检测发现,AZT干预后,和空白组相比,pi3k,akt以及m tor基因和蛋白的表达水平明显降低(Pm基因和蛋白表达水平明显下调,AsO联合AZT药物作用效果明显高于AZT与AsO单独处理组(Ppi3k/akt/m tor通路,协同AsO抑制肝癌增殖。(2)AsO联合AZT抑制肝癌细胞EmT的进程,可能与促进E-cadherin、抑制Snail与VIm的表达有关。(3)AsO联合AZT抑制肝癌细胞的迁移和侵袭,可能与影响Egr-1的表达有关。

关键词： As2O3 AZT 肝癌 pi3k/akt/m tor EmT Egr-1

4-苯基丁酸钠抑制内质网应激调节机械损伤后的PC12细胞的自噬的机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

4-苯基丁酸钠抑制内质网应激调节机械损伤后的PC12细胞的自噬的机...

作者：郑声雄福建医科大学

学位级别：硕士

目的:探索经β-NGF诱导后的PC12细胞机械损伤后内质网应激与pi3k/akt/m tor信号通路介导自噬之间的关系。研究内容:脊髓损伤一般会带来严重的功能障碍,而且目前没有特别有效的治疗方法。随着自噬的发现以及对于自噬在脊髓损伤的机制研... 详细信息

目的:探索经β-NGF诱导后的PC12细胞机械损伤后内质网应激与pi3k/akt/m tor信号通路介导自噬之间的关系。研究内容:脊髓损伤一般会带来严重的功能障碍,而且目前没有特别有效的治疗方法。随着自噬的发现以及对于自噬在脊髓损伤的机制研究深入,包括在体内体外进行相关机制研究发现脊髓损伤早期,增强自噬有利于脊髓细胞存活,减少凋亡。在对自噬研究,由巨自噬深入到细胞内细胞器的参与的自噬,内质网是细胞内合成及加工蛋白的细胞器,在外在损伤因素下,会出现蛋白异常导致内质网应激出现,内质网应激发现与多种神经退变性疾病有关,内质网应激与自噬之间有复杂的联系。本研究通过建立体外经β-NGF诱导后的PC12细胞损伤模型来探索内质网应激与自噬信号通路之间联系以及使用内质网应激抑制剂4-PBA对于自噬的影响。方法:1、PC12细胞常规培养与传代,后加入重组人β神经生长因子（β-NGF）进行诱导分化,常规培养至第5-7天,利用TUBB3及神经元特异抗体NSE免疫荧光鉴定。2、按照阙海萍方法建立体外机械损伤模型。在损伤后各个的时间点（0h、1h、4h、8h、24h）提取细胞蛋白。通过western blot方法检测自噬相关蛋白LC3及pi3k/akt/m tor的信号通路上相关蛋白、内质网应激相关蛋白（HSPA5/GRP78）的表达情况。3、分别使用LY294002及4-PBA预处理已经分化后的PC12细胞1h,建立机械损伤模型,分成6个组（sham组、SCI组、LY294002组、LY294002+SCI组、4-PBA组、4-PBA+SCI组）,在损伤后4h提取胞浆蛋白,检测自噬蛋白LC3及pi3k/akt/m tor的信号通路蛋白的变化。结果:1、经β-NGF诱导的PC12细胞,普通倒置显微镜观察,可见PC12细胞有突触形成,免疫荧光鉴定结果显示,大部分诱导分化后的PC12细胞能够被NSE及TUBB3标记染色。2、损伤后诱导自噬及内质网应激:WB结果显示自噬标志蛋白LC3II/I在4小时明显增加（P＜0.05）,内质网应激相关蛋白HSPA5/GRP78在4小时后逐渐增加（P＜0.05）。3、pi3k/akt/m tor信号通路的变化:WB结果显示,经β-NGF诱导的PC12细胞损伤后1h,p-akt水平开始增加,4h达到峰值（p＜0.05）,下游p-m tor水平在损伤后1h后开始增加,4h达到峰值（p＜0.05）。予LY294002（pi3k抑制剂）处理,下游p-akt及p-m tor水平受到抑制,LC3II/I明显增加,提示自噬水平明显增强（p＜0.05）。4、内质网应激与pi3k信号通路介导的自噬:给予4-PBA,抑制内质网应激后,下游p-akt及p-m tor水平受到抑制,LC3II/I明显增加,自噬水平明显增强（p＜0.05）,获得效果与pi3k抑制剂LY294002处理后效果相似。结论:1、经β-NGF诱导的PC12细胞在机械损伤后能够通过pi3k/akt/m tor信号通路介导自噬,能够诱导内质网应激的发生;2、4-PBA抑制内质网应激后,能够抑制pi3k信号通路下游蛋白akt/m tor的磷酸化水平,来增强自噬水平,有利于减少细胞凋亡。

关键词： PC12 自噬内质网应激 pi3k/akt/m tor

补肾活血方通过pi3k/akt/mtor信号通路调控自噬与凋亡对老年性聋的保护作用

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

补肾活血方通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控自噬与凋亡对老年性聋...

作者：张梦娴河南中医药大学

学位级别：硕士

第一部分补肾活血方对老年性聋小鼠耳肾功能的保护机制研究目的:研究补肾活血方(BSHXF)对衰老小鼠耳肾功能的保护作用,探讨其作用机制及耳肾相关理论的现代科学依据。方法:1.取32只7月龄C57BL/6J雄鼠随机分为4组(n=8),分别为衰老组、补... 详细信息

第一部分补肾活血方对老年性聋小鼠耳肾功能的保护机制研究目的:研究补肾活血方(BSHXF)对衰老小鼠耳肾功能的保护作用,探讨其作用机制及耳肾相关理论的现代科学依据。方法:1.取32只7月龄C57BL/6J雄鼠随机分为4组(n=8),分别为衰老组、补肾活血方低、中、高剂量组,另8只2月龄同品系小鼠作为青年对照组。2.采用听性脑干诱发电位(ABR)检测给药前后各组小鼠听阈。3.全自动生化分析仪检测血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)等肾功能水平。***染色观察耳蜗和肾脏组织结构的改变。5.免疫组织化学法观察肾脏组织中LC3、Beclin1和Caspase3蛋白的表达。***染色观察耳肾组织细胞凋亡情况。7.免疫印迹法检测耳蜗组织中Beclin1、P62和Caspase3的表达。结果:1.各组小鼠听功能的变化:治疗前,与对照组相比,其余4组小鼠听阈在8、16、24、32kHz升高(P32kHz听阈升高最明显。治疗后,与对照组相比,衰老组小鼠听阈在8、16、24、32k Hz均明显升高(Pk Hz频率听阈改善最明显。2.生化分析结果显示:与对照组相比,衰老组小鼠血清BUN、Scr水平显著升高(P3、Beclin1表达较少,凋亡蛋白Caspase3大量表达,差异具有统计学意义(P3、Beclin1表达增多,Caspase3表达减少,差异具有统计学意义(P3表达较少;与对照组相比,衰老组耳蜗组织自噬相关蛋白Beclin1表达较少,P62表达较多,凋亡因子Caspase3大量表达,具有统计学差异(P3表达减少,差异具有统计学意义(P3、beclin1,下调P62,增强自噬功能,同时,下调凋亡蛋白Caspase3的表达,抑制细胞凋亡,发挥对耳肾功能的保护作用。第二部分补肾活血方通过pi3k/akt/mtor信号通路调节自噬与凋亡对老年性聋的保护作用目的:探讨补肾活血方(BSHXF)通过pi3k/akt/mtor信号通路调节自噬与凋亡减轻衰老小鼠听力损伤的作用机制。方法:1.32只7月龄C57BL/6J雄鼠随机分为4组(n=8):衰老组、补肾活血方组(BSHXF)、pi3k抑制剂组(LY294002)、补肾活血方(BSHXF)+pi3k抑制剂组。灌胃补肾活血混悬液(25.6g/kg.d),腹腔注射pi3k抑制剂LY294002(1.5㎎/㎏),干预12周。8只2月龄同品系小鼠为青年对照组。2.检测血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(mDA)含量变化。3.免疫荧光染色耳蜗基底膜铺片观察耳蜗毛细胞的形态及数量变化。4.免疫组织化学法检测耳蜗组织中自噬相关蛋白Beclin1、LC3和凋亡蛋白Caspase3的表达。5.免疫印迹法检测耳蜗组织中P-pi3k/pi3k、P-akt/akt、P-mtor/mtor的表达。结果:1.血清SOD、mDA含量的检测:与青年对照组相比,衰老组小鼠的mDA升高,SOD活性较低(Ppi3k抑制剂组、pi3k抑制剂组mDA降低,SOD升高(P<0.05)。以BSHXF+

关键词：衰老补肾活血方自噬凋亡耳肾相关补肾活血方 pi3k/akt/m tor 自噬凋亡老年性聋

二茂铁衍生物对急性T淋巴细胞白血病的作用及机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

二茂铁衍生物对急性T淋巴细胞白血病的作用及机制研究

作者：曾了华侨大学

学位级别：硕士

背景急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是一种具有侵袭性以及高度异质性的血液恶性肿瘤疾病,与其他急性淋巴细胞白血病相比,T-ALL具有预后差、复发率高等特点。目前主要的治疗方案仍为联合化疗,但由于传... 详细信息

背景急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是一种具有侵袭性以及高度异质性的血液恶性肿瘤疾病,与其他急性淋巴细胞白血病相比,T-ALL具有预后差、复发率高等特点。目前主要的治疗方案仍为联合化疗,但由于传统的化疗药物毒副作用大,因此急需开发出低毒、高效且具有选择性的药物。目的本研究旨在筛选出活性较强的新型二茂铁衍生物,探究其在体外对T-ALL细胞增殖能力的影响以及相应的作用机制,为临床上抗T-ALL新型药物的开发提供前期理论和实践基础。方法采用CCk-8法检测新型二茂铁衍生物F1和F3对Jurkat细胞和正常细胞增殖的影响,计算IC值;pi单染法检测F1和F3对细胞周期的影响;荧光倒置显微镜观察Hoechst 33258染色后F1和F3处理的Jurkat细胞形态学变化;流式细胞术检测F1和F3对Jurkat细胞凋亡率、线粒体膜电位的影响;DCFH-DA探针法检测胞内活性氧水平的变化;Western Blot法检测F1和F3对周期相关蛋白CDk6、Cyclin D1、P21、P27及凋亡有关蛋白Bcl-2、Bax、Cyto c、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3、PARP的表达量影响;Western Blot法检测F1和F3对Jurkat细胞pi3k/akt/mtor信号途径蛋白akt、mtor、GSk-3β、p70 S6k以及对应的磷酸化蛋白p-akt(Ser473)、p-akt(Thr308)、p-mtor(Ser2448)、p-GSk-3β(Ser9)、p-p70 S6k(Ser389)表达量的影响。结果1、通过CCk-8法筛选出活性较好的新型二茂铁衍生物F1和F3,并得出F1和F3在处理Jurkat细胞48 h后对应的IC值分别为18.17±1.23和27.73±0.97μm。除此之外,与阳性药相比F1和F3对正常细胞(Normal human T和HEk293)的毒性较低,具有一定的选择性。2、流式细胞仪检测结果显示F1和F3均能够将Jurkat细胞阻滞在G0/G1期,同时出现Sub-G1凋亡峰,并呈浓度依赖关系;且Western Blot法检测结果发现CDk6和Cyclin D1蛋白的表达量随着化合物F1和F3浓度的增加而呈下降趋势,P27和P21蛋白的表达则相反。3、经Hoechst 33258染色后发现凋亡细胞由于核固缩而导致核染色质凝集;Annexin V/pi结果表明F1和F3处理后的Jurkat细胞凋亡率增大;JC-1探针检测结果显示F1和F3作用后的Jurkat细胞线粒体膜电位呈下降趋势;进一步检测Jurkat胞内活性氧得出随着F1和F3浓度逐渐增加,活性氧水平逐渐上升;Western Blot法检测相关凋亡蛋白发现,F1和F3能使Jurkat细胞中Bcl-2蛋白的表达量呈浓度依赖性地降低,而Bax、Cyto c、Cleaved Caspase-9和Cleaved Caspase-3蛋白表达量呈相反趋势,PARP蛋白特异性水解产物增加。4、Western Blot法检测结果表明,当化合物F1和F3浓度增加时,p-akt(Ser473)、p-akt(Thr308)、p-GSk-3β(Ser9)、p-mtor(Ser2448)、p-p70 S6k(Ser389)磷酸化蛋白表达量下降,而akt、GSk-3β、mtor和p70 S6k总蛋白表达量无明显变化。结论1、新型二茂铁衍生物F1和F3可以选择性抑制Jurkat细胞增殖,并且呈浓度依赖关系;2、新型二茂铁衍生物F1和F3通过下调Cyclin D1、CDk6蛋白水平和上调P27、P21蛋白水平来阻滞Jurkat细胞停留在G0/G1期;3、新型二茂铁衍生物F1和F3从蛋白水平下调Bcl-2表达,上调Bax表达,调节Bcl-2/Bax比率使线粒体膜电位明显下降,激活Caspase蛋白家族,促使PARP发生剪切,增加胞内活性氧水平,通过活性氧介导的内源性线粒体途径使Jurkat细胞发生凋亡;4、新型二茂铁衍生物F1和F3通过抑制pi3k/akt/mtor信号途径发挥阻滞Jurkat细胞周期、诱导Jurkat细胞凋亡的作用。综上所述,本文首次对新型二茂铁衍生物F1和F3的体外抗T-ALL作用进行了筛选,并对其作用机制进行了考察,为该类化合物抗T-ALL或其它肿瘤疾病的进一步研究提供了前期理论和实践基础。

关键词： T-ALL 二茂铁衍生物细胞凋亡细胞周期 pi3k/akt/m tor