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Chinese Medical sciences Journal 2012年第1期27卷 7-10页

作者： Xiao-liang Xing Long-ze sha Yuan Yao Yan shen Li-wen Wu Qi Xu National Laboratory of Medical Molecular Biology Institute of Basic Medical Sciences Chinese Academy of Medical Sciences ＆ Peking Union Medical College Beijing 100005 China Department of Neurology Peking Union Medical College Hospital Chinese Academy of Medical Sciences ＆ Peking Union Medical College Beijing 100730 China

Objective To determine the spatio-temporal expression of p70s6k activation in hippocampus in mesial temporal lobe epilepsy. Methods Temporal lobe epilepsy model was established by stereotaxically unilateral and intrahip-pocampal injection of kainite acid (kA) in adult male C57BL/6 mice. Latent and chronic epileptogenesis were represented by mice 5 days after kA injection (n=5) and mice 5 weeks after kA injection (n=8), respectively. Control mice (n=5) were injected with saline. Immunohistochemical assays were performed on brain sections of the mice. Results Hippocampus both ipsilateral and contralateral to the kA injection displayed significantly up-regulated ps6 immunoreactivity in dispersed granule cells in 5-day and 5-week model mice. Conclusion The activation of p70s6k is mainly located in the dentate gyrus in kA-induced mouse model of temporal lobe epilepsy, indicating that the activation may be related with the disperse degree and hypertrophy of granule cells.

关键词： mesial temporal lobe epilepsy p70s6k kainate acid immunoreactivity

High expression of ErbB2 contributes to cholangiocarcinoma cell invasion and proliferation through AkT/p70s6k

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World Journal of Gastroenterology 2010年第32期16卷 4047-4054页

作者： Warapen Treekitkarnmongkol Tuangporn suthiphongchai Department of Biochemistry Faculty of ScienceMahidol UniversityBangkok 10400Thailand

AIM:To compare the impact of ErbB2 on cell invasion and proliferation in cholangiocarcinoma(CCA) cell ***:Level of endogenous ErbB2 expression in three CCA cell lines,namely HuCCA-1,kkU-100 and kkU-M213,was determined by real-time reversetranscriptase polymerase chain *** ErbB2 inhibitory methods,a small molecule ErbB2 kinase inhibitor(AG825) and siRNA,were used to disrupt ErbB2 function in the cell *** cell invasion,motility and proliferation under ErbB2-disrupted conditions were detected using Transwell and 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)2,5-diphenyltetrazolium bromide *** addition,ErbB2 downstream effectors were investigated by Western blotting ***:suppression of ErbB2 activity,using a specific kinase inhibitor(AG825),reduced invasion,motility and proliferation of all three CCA cell *** ability of this drug to inhibit neoplastic properties(invasion,motility and proliferation) increased concomitantly with the level of ErbB2 ***,knockdown of ErbB2 level by siRNA inhibited cell invasion and proliferation of kkU-M213,a high-ErbB2-expressing cell,better than those of the lower-ErbB2-expressing cells,HuCCA-1 and ***,both inhibitory methods indicated that there is more ErbB2-dependency for malignancy of the high-ErbB2-expressing cell,kkU-M213,than for that of low-ErbB2-expressing *** addition,interrupting ErbB2 activity decreased phosphorylation of AkT and p70s6k,but not extracellular signal-regulated kinase 1/2,in the high-ErbB2-expressing CCA cell ***:Our data indicated that high ErbB2 expression enhances CCA invasion,motility and proliferation via the AkT/p70s6k pathway,which suggests the possibility of targeting these molecules for CCA therapy.

关键词： AkT Cholangiocarcinoma ErbB2 Invasion p70s6k Cell proliferation

秦皮素通过下调p70s6k抑制人黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭研究

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中草药 2021年第20期52卷 6254-6260页

作者：兰楠吕志阳周雨晴韩延南王明心彭忠禄樊竑冶中国药科大学生命科学与技术学院江苏南京210009 湘南学院药学院湖南郴州423099

目的研究秦皮素对人黑色素瘤A375细胞的增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法 A375细胞给予秦皮素和核糖体s6蛋白激酶(ribosome s6 protein kinase,p70s6k)抑制剂pF-4708671进行干预,采用细胞计数法考察秦皮素和pF-4708671对A375... 详细信息

目的研究秦皮素对人黑色素瘤A375细胞的增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法 A375细胞给予秦皮素和核糖体s6蛋白激酶(ribosome s6 protein kinase,p70s6k)抑制剂pF-4708671进行干预,采用细胞计数法考察秦皮素和pF-4708671对A375细胞增殖能力的影响;采用Western blotting法检测秦皮素和pF-4708671对m TORC1/p70s6k/s6通路关键蛋白及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达的影响;采用细胞划痕实验和Transwell实验考察秦皮素和pF-4708671对A375细胞迁移和侵袭的影响。结果秦皮素与pF-4708671均可显著抑制A375细胞的增殖、迁移和侵袭(ppF-4708671均显著抑制p70s6k/s6通路活性,下调间质细胞标志蛋白和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMp)表达水平(pp70s6k抑制A375细胞的增殖、迁移与侵袭。

关键词：秦皮素黑色素瘤 A375细胞 p70s6k 增殖迁移侵袭

白藜芦醇对高脂所致心肌细胞氧化应激损伤的保护作用及其与AMpk/mTORC1/p70s6k信号通路的相关性

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中国药理学通报 2019年第7期35卷 995-1000页

作者：张景怡鲍翠玉李晶湖北科技学院药学院湖北咸宁437100 湖北科技学院糖尿病心脑血管病变湖北省重点实验室湖北咸宁437100

目的探讨白藜芦醇对脂毒性心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法棕榈酸(palmitic acid,pA)刺激H9c2细胞,白藜芦醇预处理后,MTT检测细胞增殖情况;免疫荧光及流式细胞法检测活性氧(reactive oxygen species,ROs)水平;用试剂盒检测丙二醛(... 详细信息

目的探讨白藜芦醇对脂毒性心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法棕榈酸(palmitic acid,pA)刺激H9c2细胞,白藜芦醇预处理后,MTT检测细胞增殖情况;免疫荧光及流式细胞法检测活性氧(reactive oxygen species,ROs)水平;用试剂盒检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,sOD)水平;免疫印迹法检测AMpk/m TORC1/p70s6k通路蛋白以及凋亡蛋白表达水平。结果 MTT结果示,pA(0. 4 mmol·L-1)刺激24、48 h时,心肌细胞存活率出现明显下降;免疫荧光法及流式细胞法显示,与对照组相比,pA(0. 4 mmol·L-1)刺激24 h时,ROs及MDA水平明显升高,sOD活性明显降低;免疫印迹法显示,与对照组相比,pA(0. 4 mmol·L-1)刺激24 h时,p-AMpk蛋白及Bcl-2蛋白表达降低,p-mTORC1、p-p70s6k、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达增高。白藜芦醇预处理,可以明显逆转上述变化。结论白藜芦醇可以明显抵抗高脂所致的心肌细胞氧化应激损伤,可能与AMpk/m TORC1/p70s6k信号通路调控相关。

关键词：白芦藜醇高脂心肌细胞 AMpk mTORC1 p70s6k

p70s6k在Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌中的表达及临床意义

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临床与实验病理学杂志 2016年第4期32卷 392-395页

作者：方伟建龚伟朱忆凌毛卫波黄渊陈国荣温州医科大学附属第五医院暨丽水市中心医院病理科丽水323000 温州医科大学附属第一医院病理科温州325000

目的检测p70s6k在Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌(renal cell carcinoma associated with Xp11.2 translocation/TFE3 gene fusion,TFE3 RCC)中的表达,探讨其在TFE3 RCC发生、发展中的作用及临床意义。方法采用免疫组化法检测23例确诊的TFE3 RCC、14例肾透明细胞癌(clear cell RCC,CCRCC)和6例乳头状肾细胞癌(papillary RCC,pRCC)组织中p70s6k的表达,观察其表达与三种RCC的关系,同时观察p70s6k表达与TFE3 RCC发生、发展和相关临床病理参数的关系。结果 p70s6k在TFE3 RCC组织中的表达(91.3%)明显高于其在CCRCC组织(64.2%)和pRCC组织中的表达(66.6%),差异有显著性(pp70s6k在TFE3 RCC组织中阳性表达水平的H-score评分值(88.2±9.8)亦显著高于其在CCRCC组织(54.4±7.6)和pRCC组织(43.7±6.2)中阳性表达水平的H-score评分值,差异具有显著性(pp70s6k表达与TFE3 RCC患者年龄、有无淋巴结转移和脉管瘤栓有关,与患者性别、肿瘤直径等临床病理参数无关。结论与CCRCC和pRCC组织相比,TFE3 RCC组织中p70s6k表达显著增高,有助于TFE3 RCC的鉴别诊断。p70s6k在TFE3 RCC组织中高表达,同时提示mTOR信号通道在TFE3 RCC的发生、发展中可能起重要作用。为TFE3 RCC的靶向治疗寻找潜在药物靶点提供一定的理论基础。

关键词：肾肿瘤肾细胞癌 p70s6k mTOR TFE3

p70s6k在小鼠受精卵第一次有丝分裂周期中的表达

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生殖与避孕 2006年第4期26卷 250-253页

作者：李延笑韩晓曦孙炳奇于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001

目的:研究p70s6k在小鼠受精卵第一次有丝分裂周期中的表达。方法:采用Westernblot和RT-pCR方法,检测在小鼠受精卵第一次有丝分裂的G1、s、G2以及M期中p70s6k在mRNA水平以及蛋白水平的表达。结果:在mRNA水平,p70s6k的表达在各期无明显变... 详细信息

目的:研究p70s6k在小鼠受精卵第一次有丝分裂周期中的表达。方法:采用Westernblot和RT-pCR方法,检测在小鼠受精卵第一次有丝分裂的G1、s、G2以及M期中p70s6k在mRNA水平以及蛋白水平的表达。结果:在mRNA水平,p70s6k的表达在各期无明显变化,在蛋白水平,磷酸化状态的p70s6k在s期升高,表明从s期p70s6k的活性升高。结论:p70s6k在小鼠卵子受精后磷酸化程度增加,因而有可能参与了小鼠受精卵的早期发育。

关键词： p70s6k 受精卵有丝分裂周期

自噬信号因子p70s6k参与Cox7a2调控睾酮生成机制研究

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中华男科学杂志 2011年第4期17卷 291-295页

作者：陈亮贾金铭钟伟张艳蕾吕健王洪武周正王明晓辛钟成郭应禄国家安全生产监管总局煤炭总医院北京100028 中国中医科学院广安门医院北京100054 北京大学第一医院北京100034

目的:研究Cox7a2对TM3 Leydig细胞睾酮生成的影响以及涉及其中的自噬调控信号的作用。方法:构建Cox7a2荧光表达载体,转染TM3 Leydig细胞。ELIsA测定睾酮水平,Western印迹检测Cox7a2对睾酮合成快速调节蛋白stAR表达和自噬调控因子p70s6k... 详细信息

目的:研究Cox7a2对TM3 Leydig细胞睾酮生成的影响以及涉及其中的自噬调控信号的作用。方法:构建Cox7a2荧光表达载体,转染TM3 Leydig细胞。ELIsA测定睾酮水平,Western印迹检测Cox7a2对睾酮合成快速调节蛋白stAR表达和自噬调控因子p70s6k磷酸化水平的影响。结果:在TM3 Leydig细胞中,LH刺激能增加促进stAR蛋白表达,增加睾酮合成水平。Cox7a2在TM3小鼠睾丸Leydig细胞中抑制p70s6k磷酸化水平,降低stAR蛋白的表达,进而抑制LH诱导的睾酮合成。结论:Cox7a2通过抑制快速调节蛋白stAR的表达减少LH诱导的睾酮分泌,这至少和Cox7a2抑制自噬调控因子p70s6k有关。

关键词： Cox7a2睾酮类固醇合成快速调节蛋白 p70s6k 自噬

非瑟酮调节LkB1-AMpk-mTOR-p70s6k通路改善大鼠少弱精子症

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中国药理学通报 2024年第7期40卷 1296-1301页

作者：陈利帮沈炳香何春远赵为陈常伟王桐生皖西卫生职业学院临床系安徽六安237000 安徽医科大学附属六安医院药学部安徽六安237005 安徽医科大学公共卫生学院安徽合肥230032 安徽中医药大学中西医结合学院生理与药理学系安徽合肥230013

目的研究非瑟酮对少弱精子大鼠的睾丸及精子保护作用,并探究其机制。方法构建大鼠少弱精子模型,将大鼠随机分为空白组、模型组、非瑟酮低、中、高剂量治疗组、LkB1激动剂组,每组各10只。ELIsA法检测各组卵泡刺激素(follicle-stimulating... 详细信息

目的研究非瑟酮对少弱精子大鼠的睾丸及精子保护作用,并探究其机制。方法构建大鼠少弱精子模型,将大鼠随机分为空白组、模型组、非瑟酮低、中、高剂量治疗组、LkB1激动剂组,每组各10只。ELIsA法检测各组卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FsH)、黄体生成素(luteinising hormone,LH)、睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)、催乳素(prolactin,pRL)水平;流式细胞术检测精子细胞凋亡;HE染色检测大鼠睾丸组织损伤;透射电镜检测精子细胞超微结构;qRT-pCR和Western blot检测LkB1、AMpk、mTOR、p70s6k mRNA和蛋白表达。结果与空白组相比,模型组和LkB1激动剂组FsH、LH、pRL、T等激素水平明显降低,精子细胞出现凋亡,睾丸损伤严重,LkB1、p-AMpk/AMpk表达明显上调,mTOR、p-p70s6k/p70s6k表达下调(psH、LH、pRL、T等激素水平明显上升,LkB1、p-AMpk/AMpk明显下调,mTOR、p-p70s6k/p70s6k明显上调(pkB1-AMpk-mTOR-p70s6k信号通路有关。

关键词：非瑟酮少弱精症 AMpk mTOR p70s6k LkB1

mTOR/p70s6k参与巨核细胞多倍体化调控

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第1期28卷 21-24页

作者：于卉影马东初蔺迪孙英慧陶顺艳沈阳军区总医院医学实验科辽宁沈阳110016

目的:研究巨核细胞多倍体细胞周期调控的机制。方法:Western blot分析多倍体细胞模型中mTOR/p70s6k通路信号分子表达和磷酸化修饰位点的变化,流式细胞仪双荧光分析s6k1不同结构域磷酸化位点修饰与细胞周期各时相的关系。结果:诺考达唑... 详细信息

目的:研究巨核细胞多倍体细胞周期调控的机制。方法:Western blot分析多倍体细胞模型中mTOR/p70s6k通路信号分子表达和磷酸化修饰位点的变化,流式细胞仪双荧光分析s6k1不同结构域磷酸化位点修饰与细胞周期各时相的关系。结果:诺考达唑诱导的Dami细胞可作为相对同步化的多倍体细胞周期模型,mTOR表达增加及第2448位丝氨酸位点磷酸化,发生在G1期进入s期,s6k1的第421位苏氨酸/第424位丝氨酸位点磷酸化发生在G2/M期。结论:mTOR/s6k1通路参与巨核细胞多倍体细胞周期的调控。

关键词：多倍体 mTOR p70s6k

沉默p70s6k表达可提高食管鳞癌细胞对雷帕霉素的敏感性

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中华肿瘤杂志 2015年第12期37卷 885-889页

作者：刘明月鲁照明郑妍崔瑶王嘉帧侯桂琴河南省人民医院肿瘤科郑州450003 郑州大学药学院临床药学系

目的探讨不同分化程度的食管鳞癌细胞对雷帕霉素的敏感性差异以及以p70s6k—siRNA干扰p70s6k表达后食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素敏感性的变化。方法以细胞计数盒8（CCk-8）法检测雷帕霉素对不同分化程度食管鳞癌细胞（EC9706、TE-1、Ec... 详细信息

目的探讨不同分化程度的食管鳞癌细胞对雷帕霉素的敏感性差异以及以p70s6k—siRNA干扰p70s6k表达后食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素敏感性的变化。方法以细胞计数盒8（CCk-8）法检测雷帕霉素对不同分化程度食管鳞癌细胞（EC9706、TE-1、Eca109、kYsE790、kYsE450）增殖的影响，并根据检测结果，选取对雷帕霉素不敏感的EC9706细胞株转染p70s6k—siRNA。采用CCk-8法、流式细胞术和裸鼠成瘤实验，检测转染前后EC9706细胞对雷帕霉素敏感性的变化。结果CCk-8法检测结果显示，5株食管鳞癌细胞对低浓度雷帕霉素（≤100nmol／L）均敏感，而低分化细胞株TE-1和EC9706对高浓度雷帕霉素却易产生耐药性。经50、100、200、500和1000nmol／L雷帕霉素＋p70s6k—siRNA处理后，EC9706细胞的增殖率分别为（48．67±1.68）％、（15．45±1．54）％、（14．00±0．91）％、（10．97±0．72）％和（2．70±0．32）％，均分别明显低于50、100、200、500和1000nmol／L雷帕霉素＋对照siRNA处理组[（74．53±1．71）％、（68．27±1．35）％、（71．74±2．44）％、（76．23±1．02）％和（80．21±2．77）％，均p〈0．05]。流式细胞仪检测结果显示，p70s6k—siRNA组、雷帕霉素组和pTOs6k-siRNA＋雷帕霉素组EC9706细胞中G1期细胞的比例分别为（53．82±1．78）％、（57．87±4．01）％和（73．73±3．68）％，均明显高于对照组[（46．09±2．31）％，均p〈0．05]。裸鼠体内实验的结果显示，转染p70s6k-siRNA后，雷帕霉素对裸鼠体内移植瘤生长的抑制作用也增强，抑瘤率高达96．5％。结论不同分化程度的食管鳞癌细胞对雷帕霉素的敏感性不同，p70s6k-siRNA在体内外均能提高食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素的敏感性。

关键词：食管肿瘤癌鳞状细胞雷帕霉素 p70s6k siRNA干扰裸鼠