检索结果-南通市图书馆

桂花Ofnced3调控转基因烟草叶片类胡萝卜素和叶绿素的合成

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

园艺学报 2023年第6期50卷 1284-1294页

作者：杜艳霞王艺光肖政董彬方遒钟诗蔚杨丽媛赵宏波浙江农林大学风景园林与建筑学院浙江省园林植物种质创新与利用重点实验室南方园林植物种质创新与利用国家林业和草原局重点实验室杭州311300

从桂花(Osmanthus fragrans)‘堰虹桂’转录组数据库中筛选获得Ofnced3基因序列。氨基酸序列分析发现Ofnced3具有nced家族特有的2个保守结构域MIAHPKxDP和HDFAITE以及4个保守的组氨酸残基。进化树分析发现Ofnced3与番茄Slnced1聚为一支... 详细信息

从桂花(Osmanthus fragrans)‘堰虹桂’转录组数据库中筛选获得Ofnced3基因序列。氨基酸序列分析发现Ofnced3具有nced家族特有的2个保守结构域MIAHPKxDP和HDFAITE以及4个保守的组氨酸残基。进化树分析发现Ofnced3与番茄Slnced1聚为一支。实时荧光定量PCR结果表明,桂花开放过程中,Of nced3在类胡萝卜素含量较高的‘堰虹桂’花瓣中的表达量显著低于类胡萝卜素含量较低的‘玉玲珑’,推测Ofnced3可能与‘堰虹桂’和‘玉玲珑’花瓣中类胡萝卜素含量差异有关。通过农杆菌介导的遗传转化方法获得过表达Ofnced3烟草株系。利用分光光度计和超高效液相(ultra high performance liquid chromatography,UPLC)测定叶绿素、类胡萝卜素和ABA的含量,并采用实时荧光定量PCR分析类胡萝卜素通路上相关基因的表达差异,结果发现异源过表达Of nced3导致转基因烟草叶片中叶绿素和类胡萝卜素含量下降,ABA含量增加,类胡萝卜素合成基因的表达量明显上调,且下游合成基因上调幅度高于上游合成基因。本研究表明Of nced3能降解类胡萝卜素,促进内源ABA合成。

关键词：桂花 nced 类胡萝卜素叶绿素 ABA

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

不同温度处理对珠芽魔芋球茎休眠调控的影响

西北植物学报 2023年第12期43卷 2088-2099页

作者：王蕊嘉李文涵赵青青谢雨琪李缘吴学尉云南大学资源植物研究院昆明650091

为探究不同温度处理对珠芽魔芋球茎休眠调控的影响,以珠芽魔芋叶面球茎为材料,在球茎休眠期设置昼/夜变温(24℃/9℃、24℃/13℃、24℃/17℃)、恒温(9℃、13℃、17℃、21℃)及室温处理,萌发期设置26℃、33℃催芽处理,分析不同温度处理后... 详细信息

为探究不同温度处理对珠芽魔芋球茎休眠调控的影响,以珠芽魔芋叶面球茎为材料,在球茎休眠期设置昼/夜变温(24℃/9℃、24℃/13℃、24℃/17℃)、恒温(9℃、13℃、17℃、21℃)及室温处理,萌发期设置26℃、33℃催芽处理,分析不同温度处理后珠芽魔芋球茎在休眠Ⅰ期、休眠Ⅱ期以及萌发前期、中期、后期、末期的生物表型变化、内源生理变化规律及其休眠调控相关基因的变化情况。结果表明,(1)休眠期恒温处理有利于提高珠芽魔芋球茎的出芽比,其中13℃恒温打破休眠和萌发期33℃催芽处理球茎的发芽率最先达到峰值,且其出芽比最高。(2)休眠Ⅱ期的球茎淀粉含量低于休眠Ⅰ期,而其可溶性糖含量高于休眠Ⅰ期,13℃恒温处理球茎淀粉含量下降最快,其可溶性糖含量最高;前期恒温处理球茎淀粉、可溶性糖含量在萌发前期和萌发后期之间均存在显著性差异,而前期昼夜变温处理球茎仅可溶性糖含量在萌发前期和萌发后期间差异显著。(3)珠芽魔芋球茎ABA含量在休眠Ⅰ期和休眠Ⅱ期逐渐增多,而其GA_(3)含量逐渐减少,萌发期ABA含量均先升后降,同期GA_(3)含量在26℃催芽处理下先升后降,在33℃催芽处理下整体上升。(4)珠芽魔芋nced基因表达量随着休眠程度的加深逐渐增加,而在萌发期逐渐减少,CYP707A基因表达量随着休眠的加深逐渐减少,而在萌发期增加。研究发现,珠芽魔芋打破休眠的最佳温度为恒温13℃,促进萌发的最佳温度为33℃;随着珠芽魔芋打破休眠,球茎中的淀粉含量降低,可溶性糖含量升高,ABA含量先升后降,GA_(3)含量先降后升;nced和CYP707A基因可能是珠芽魔芋休眠调控中的关键基因。

关键词：珠芽魔芋温度休眠 nced CYP707A

Cloning and expression analysis of the Fvnced3 gene and its promoter from ash(Fraxinus velutina)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Journal of Forestry Research 2019年第2期30卷 471-482页

作者： Tian Li Jingkuan Sun Chuanrong Li Zhaohua Lu Jiangbao Xia Shandong Provincial Key Laboratory of Eco-Environmental Science for Yellow River Delta Binzhou University Taishan Forest Ecosystem Research Station/Shandong Provincial Key Laboratory of Soil Erosion and Ecological Restoration

The 9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase(nced)gene is rate-limiting in abscisic acid(ABA) biosynthesis.In this study, an nced gene, designated Fvnced3(KY008746), was cloned from velvet ash(Fraxinus velutina Torr.) with a RACE method. The full length c DNA of Fvnced3 encodes a 573-amino acid polypeptide.Sequencing analysis showed that the Fvnced3 protein was highly homologous to other nced proteins. The expression patterns of Fvnced3 in different ash organs were analyzed by real-time PCR which revealed that Fvnced3 expression levels were highest in leaves and lowest in roots. The gene expression patterns of Fvnced3 under abiotic stress indicated that its expression increased under drought, salt and ABA stress and decreased due to high and low temperatures. There were no obvious changes under ultraviolet light. The 1094-bp upstream sequence 5' flank regulation region of the Fvnced3 gene was also cloned from ash using the Genome Walking method. To assess the activity of the Fvnced3 promoter, a p Fvnced3 p::GUS plant expression vector was constructed for tobacco transformation. GUS expression of the Fvnced3 GUS enzyme activity was detected in almost all transgenic tobacco tissues, especially in the young leaves,stigma, anther, ovule and ovary. After treating the transgenic tobacco with NaCl and placing it under drought stress, GUS staining of tobacco leaves increased compared with that under normal growth conditions. This result indicates that gene expression driven by the Fvnced3 promoter can be induced by salt and drought stress.

关键词： Ash Function analysis nced gene Promoter Tobacco

大蒜鳞芽萌发前后转录组分析及关键基因功能验证

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大蒜鳞芽萌发前后转录组分析及关键基因功能验证

作者：袁晓戈中国农业科学院

学位级别：硕士

大蒜(Allium sativum L.)是我国重要的经济作物之一,具有极高的食用和药用价值。大蒜鳞芽是其主要的繁殖器官,阐明大蒜鳞芽的休眠机制并合理进行调控有着非常重要的意义。本研究以大蒜‘二水早’萌发前后鳞芽为研究对象,采用有参转录组... 详细信息

大蒜(Allium sativum L.)是我国重要的经济作物之一,具有极高的食用和药用价值。大蒜鳞芽是其主要的繁殖器官,阐明大蒜鳞芽的休眠机制并合理进行调控有着非常重要的意义。本研究以大蒜‘二水早’萌发前后鳞芽为研究对象,采用有参转录组测序技术,分析大蒜鳞芽萌发前后的差异表达基因;并围绕休眠相关的脱落酸生物合成关键酶nced(9-cis-Epoxycarotenoid Dioxygenase,即9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶)基因进行重点研究,解析Asa nced基因(基因ID:Asa3G00834)功能。主要研究结果如下:(1)按照大蒜鳞芽休眠特性,就鳞芽萌发前后的茎盘芽点和贮藏叶部位分别进行转录组分析。每样本设置3个生物学重复,12个样本(2个时期×2个不同部位×3个重复)RNA测序共得到138.78 Gb的Clean Reads序列数据,每样本的数据量分布在10.97～12.03 G,Q30碱基分布在93.46～94.36%,平均GC含量为44.89%。基因表达比较分析发现,在鳞芽萌发后,茎盘芽点和贮藏叶中分别有2287和3335个基因发生了显著表达变化。(2)完成了差异表达基因Gene Ontology(GO)和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)富集分析,结果表明:共有121个基因显著富集在乙烯激活信号功能(GO:0009873)和植物激素信号转导通路(KO:04075),其中植物激素信号转通路中主要涉及脱落酸(ABA:Abscisic Acid)、赤霉素、生长素、乙烯和茉莉酸甲酯等。(3)ABA是参与植物休眠诱导和维持的重要激素,且其调控休眠萌发的分子机制在植物种高度保守。分析茎盘芽点部位全基因组表达谱共鉴定到6个ABA代谢相关差异表达基因(Asa1G03047、Asa3G00834、Asa4G03417、Asa4G04028、Asa8G04274和Asa7G01538),2个ABA信号转导相关差异表达基因(Asa8G04849和Asa7G02906)。(4)nced是ABA生物合成关键限速酶。在大蒜基因组中共鉴定到14个nced酶编码基因,其编码蛋白均含有保守的RPE65保守结构域。完成萌发前后差异表达基因Asa nced的克隆,并构建过表达载体。拟南芥中Asa nced异源过量表达分析表明,该基因过量表达导致转基因植株内源ABA含量显著增加,且能推迟转基因拟南芥种子萌发。本研究首次完成大蒜鳞芽萌发前后的全基因组表达谱分析,克隆了具有差异表达的Asa nced,并在拟南芥中验证了该基因的萌发调节功能。本研究为揭示大蒜休眠萌发机制提供了基础,也为分子改良创制耐休眠大蒜新种质提供候选基因资源。

关键词：大蒜鳞芽休眠脱落酸差异表达基因 nced

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

牡丹nced基因的克隆和表达分析

园艺学报 2012年第10期39卷 2033-2044页

作者：王晓庆张超王彦杰董丽北京林业大学园林学院国家花卉工程技术研究中心北京100083

通过RT-PCR和RACE技术克隆得到了牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)中编码9–顺式–环氧类胡萝卜素加双氧酶蛋白(nced)的一条cDNA基因全长(暂命名为Ps-nced1)。进化树分析显示Ps-nced1的氨基酸序列与葡萄、马铃薯、胡萝卜等植物中的NCE... 详细信息

通过RT-PCR和RACE技术克隆得到了牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)中编码9–顺式–环氧类胡萝卜素加双氧酶蛋白(nced)的一条cDNA基因全长(暂命名为Ps-nced1)。进化树分析显示Ps-nced1的氨基酸序列与葡萄、马铃薯、胡萝卜等植物中的nced一致性均达到了70%以上。通过与拟南芥中CCD(类胡萝卜素分解加双氧酶)家族氨基酸序列比对后发现,Ps-nced1与调控ABA合成的At-nced3一致性最高。对花朵中内源ABA的研究发现,ABA在花朵蕾期及衰老期含量较高,盛开期时含量较低,表明ABA对于植物的开放衰老具有促进作用。相对荧光定量PCR分析发现:在花朵完全开放的牡丹植株中,Ps-nced1在根、茎、叶、花托、萼片、花瓣、心皮、雄蕊中的表达量以在根和雄蕊中较高,在叶和萼片中最低。在外源ABA处理的牡丹花瓣中,Ps-nced1表达量变化与内源ABA含量变化具有相同的趋势,推测该基因是调控内源ABA含量的主要基因。

关键词：牡丹 ABA nced 基因实时定量PCR

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

甜樱桃果实nced基因的克隆及其表达

园艺学报 2010年第6期37卷 891-898页

作者：任杰吴洁芳冷平孙亮赵胜利中国农业大学农学与生物技术学院北京100193

为了进一步研究ABA在甜樱桃果实成熟过程中的作用,通过RT-PCR以及RACE-PCR方法从甜樱桃果实克隆得到了ABA合成关键酶nced基因片段Pacnced1及其3′末端序列,从乙烯利处理果实中克隆得到了乙烯合成关键酶ACO基因片段PacACO1。推测的PacNC... 详细信息

为了进一步研究ABA在甜樱桃果实成熟过程中的作用,通过RT-PCR以及RACE-PCR方法从甜樱桃果实克隆得到了ABA合成关键酶nced基因片段Pacnced1及其3′末端序列,从乙烯利处理果实中克隆得到了乙烯合成关键酶ACO基因片段PacACO1。推测的Pacnced1和PacACO1氨基酸序列与其它物种的nceds和ACOs氨基酸序列具有很高的同源性。通过半定量RT-PCR及定量RT-PCR方法分析了Pacnced1和PacACO1的表达模式,发现Pacnced1在甜樱桃果实发育的整个过程以及不同部位都有表达,在果肉和种子中的表达不断增加,在果实成熟之前达到最高峰,而在果柄中的表达则在果实完熟时达到最大。Pacnced1在未失水的叶片和根中有微弱表达,但在失水叶片中的表达急剧上升,表现出与失水的相关性。外源ABA和乙烯利能促进Pacnced1在果实中的表达,而NDGA和IAA对Pacnced1在果实中的表达没有显著影响。在甜樱桃果实发育过程中并没有检测到PacACO1的表达信号,但是外源乙烯利和ABA处理能诱导其在果实中的表达。

关键词：甜樱桃 nced ACO ABA 基因克隆表达

草莓nced基因正反义表达载体和RNAi载体的构建

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

热带作物学报 2012年第3期33卷 459-466页

作者：朱海生陈敏氡李严曼温庆放福建省农业科学院作物研究所福建省农业科学院蔬菜研究中心福建省蔬菜工程技术研究中心福建福州350003

根据草莓(Fragaria ananassa Duch)nced基因序列(GenBank:HQ399498),克隆nced基因开放阅读框,将该片段插入植物表达载体pBI 121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,构建了正义表达载体pBI 121nced。克隆nced基因正义、反义片段和作为内含... 详细信息

根据草莓(Fragaria ananassa Duch)nced基因序列(GenBank:HQ399498),克隆nced基因开放阅读框,将该片段插入植物表达载体pBI 121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,构建了正义表达载体pBI 121nced。克隆nced基因正义、反义片段和作为内含子的gusA基因片段,以植物表达载体pBI 121为基础,以pCAMBIA2301作为中间载体,通过多次酶切和连接,成功构建了草莓nced基因RNAi表达载体pBI121ncedRNAi和反义表达载体pBI 121ncedF。经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后,成功将pBI121nced、pBI 121ncedF和pBI 121ncedRNA 3个重组表达质粒导入农杆菌EHA105中。研究结果为进一步研究草莓nced基因的功能奠定了基础。

关键词：草莓 nced 表达载体 RNA干扰

柑橘Csnced3-2的克隆及其响应溃疡病菌侵染的表达分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

园艺学报 2020年第12期47卷 2405-2414页

作者：谢宇张庆雯祁静静邹修平何永睿许兰珍雷天刚彭爱红李强姚利晓陈善春龙琴西南大学/中国农业科学院柑桔研究所国家柑桔工程技术研究中心重庆400712

柑橘溃疡病是世界柑橘的一种重要病害,对柑橘产业造成严重的经济损失。对柑橘中9–顺式–环氧类胡萝卜素双加氧酶(nced)基因家族进行注释,并克隆出受柑橘溃疡病菌诱导表达的Csnced3-2,确定了其表达模式。从柑橘全基因组公共数据库共注释... 详细信息

柑橘溃疡病是世界柑橘的一种重要病害,对柑橘产业造成严重的经济损失。对柑橘中9–顺式–环氧类胡萝卜素双加氧酶(nced)基因家族进行注释,并克隆出受柑橘溃疡病菌诱导表达的Csnced3-2,确定了其表达模式。从柑橘全基因组公共数据库共注释出14个nced基因家族成员,根据系统发育树和功能结构域将其分为4个亚类;Csnced3-2其序列全长2377 bp,开放阅读框1830 bp,编码609个氨基酸,属于RPE65超家族成员和类胡萝卜素双加氧酶家族成员,是非分泌性蛋白;在‘晚锦橙’和‘金弹’叶片注射溃疡病菌后的各个时间点,‘晚锦橙’叶片中Csnced3-2的相对表达量总体高于‘金弹’,并且两品种的相对表达变化呈相反趋势;与茎、叶和种子相比,Csnced3-2在两品种果皮中表达量较高;两品种的CsN CED3-2上游启动子均含有参与植物激素和逆境应答相关的顺式作用元件ABRE(脱落酸响应)、TCA-element(水杨酸响应)、MYC/MYB(干旱响应)等,但数量和类型存在差异。

关键词：柑橘溃疡病 nced 基因克隆表达量启动子

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物对干旱胁迫的响应研究进展

应用与环境生物学报 2007年第4期13卷 586-591页

作者：杨帆苗灵凤胥晓李春阳中国科学院成都生物研究所成都610041 右江民族医学院广西百色533000

植物在经受干旱胁迫时,通过细胞对干旱信号的感知和传导,调节基因表达,产生新蛋白质,从而引起大量形态、生理和生化上的变化.干旱胁迫对植物在细胞、器官、个体、群体等水平上的形态指标有显著影响,也会影响其光合作用、渗透调节、抗氧... 详细信息

植物在经受干旱胁迫时,通过细胞对干旱信号的感知和传导,调节基因表达,产生新蛋白质,从而引起大量形态、生理和生化上的变化.干旱胁迫对植物在细胞、器官、个体、群体等水平上的形态指标有显著影响,也会影响其光合作用、渗透调节、抗氧化系统等生理生化指标.植物对干旱胁迫的分子响应较复杂,包括合成一些新的基因如nced、dehydrin基因和CBF、DREB等转录因子.另外,干旱胁迫还能造成蛋白质组学的变化.

关键词：干旱胁迫形态生理生化 CBF DREB nced