草莓NCED基因正反义表达载体和RNAi载体的构建

作     者：朱海生 陈敏氡 李严曼 温庆放 ZHU Haisheng;CHEN Mindong;LI Yanman;WEN Qingfang

作者机构：福建省农业科学院作物研究所 福建省农业科学院蔬菜研究中心 福建省蔬菜工程技术研究中心福建福州350003 

出 版 物：《热带作物学报》 (Chinese Journal of Tropical Crops)

年 卷 期：2012年第33卷第3期

页      面：459-466页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(No.31101534) 福建省自然科学基金项目(No.2010J0111) 福建省科技重大专项(No.2008NZ0002) 福建省属公益类科研院所基本科研专项(No.2010R1028-5) 福建省农业科学院科技创新团队重点科研项目(No.CXTD2011-20) 

主　　题：草莓 NCED 表达载体 RNA干扰 

摘      要：根据草莓(Fragaria ananassa Duch)NCED基因序列(GenBank:HQ399498),克隆NCED基因开放阅读框,将该片段插入植物表达载体pBI 121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,构建了正义表达载体pBI 121NCED。克隆NCED基因正义、反义片段和作为内含子的gusA基因片段,以植物表达载体pBI 121为基础,以pCAMBIA2301作为中间载体,通过多次酶切和连接,成功构建了草莓NCED基因RNAi表达载体pBI121NCEDRNAi和反义表达载体pBI 121NCEDF。经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后,成功将pBI121NCED、pBI 121NCEDF和pBI 121NCEDRNA 3个重组表达质粒导入农杆菌EHA105中。研究结果为进一步研究草莓NCED基因的功能奠定了基础。