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糖尿病小鼠视网膜中JnK3 mRnA表达的动态变化

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中华实验眼科杂志 2014年第11期32卷 994-997页

作者：张曙光项杰李燕袁援生马林昆郑州市第二人民医院眼科 450000 河南省直第三人民医院眼科郑州450006 昆明医科大学第一附属医院眼科 650031 昆明医科大学第二附属医院眼科 650031

背景糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见的眼部并发症,其发病机制与多种因素有关,c-jun n末端激酶（JnK）作为一种凋亡基因,在糖尿病的病理过程中发挥着重要作用,其研究已成为近些年的热点之一,而JnK3作为JnK的亚基因之一,在DR中的研... 详细信息

背景糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见的眼部并发症,其发病机制与多种因素有关,c-jun n末端激酶（JnK）作为一种凋亡基因,在糖尿病的病理过程中发挥着重要作用,其研究已成为近些年的热点之一,而JnK3作为JnK的亚基因之一,在DR中的研究目前较少.目的定量检测JnK3在糖尿病小鼠视网膜中的表达,探讨JnK3在DR中的作用.方法选取SPF级6～8周龄C57BL/6雄性小鼠48只,适应性喂养1周后按照随机数字表法分为糖尿病组和正常对照组.30只糖尿病组小鼠用一次性腹腔内注射柠檬酸钠缓冲液溶解的质量分数1％链脲佐菌素（STZ）的方法诱导糖尿病模型,18只对照组小鼠腹腔内注射等容量柠檬酸钠缓冲液.分别于造模后2、4、8周摘除小鼠左眼眼球,提取视网膜组织,采用实时定量PCR法检测JnK3 mRnA在小鼠视网膜中表达的动态变化.结果造模后2、4、8周,糖尿病组小鼠血糖水平明显高于正常对照组,差异均有统计学意义（t=-5.675、-5.498、-5.347,P＜0.01）.糖尿病组和正常对照组在造模后不同时间点小鼠视网膜中JnK3 mRnA相对表达量（A值）的差异均有统计学意义（F分组=102.345,P＜0.05;F时间 =131.679,P＜0.05）;其中造模后4周和8周糖尿病组小鼠视网膜中JnK3 mRnA相对表达量分别为3.21±0.14和5.43±0.37,均明显高于正常对照组的2.54 ±0.42和2.26±0.67,差异均有统计学意义（t=4.073、23.399,P＜0.05）;糖尿病组内比较可见,造模后8周小鼠视网膜中JnK3 mRnA相对表达量明显高于2周和4周值,差异均有统计学意义（t=10.756、16.857,P＜0.05）.结论 JnK3在糖尿病小鼠视网膜中表达量上调,其早期表达量随时间延长而增加.JnK3可能参与早期DR的发生和发展.

关键词：糖尿病/并发症视网膜 C57BL/6小鼠 c—Jun n末端激酶实时定量PCR

去氢骆驼蓬碱诱导HepG2细胞凋亡并增强其对5-氟尿嘧啶和顺铂的敏感性

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中国病理生理杂志 2013年第2期29卷 284-289页

作者：李强曹明溶刘志龙蒋建伟暨南大学附属第一医院普通外科广东广州510632 暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632

目的:研究去氢骆驼蓬碱体外诱导HepG2细胞凋亡过程中c-Jun n末端激酶(JnK)途径的作用,并观察其联合化疗药物对HepG2细胞的影响。方法:CCK-8法检测联合或不联合使用JnK特异性抑制剂SP600125对细胞增殖的抑制作用;克隆形成实验观察不同浓... 详细信息

目的:研究去氢骆驼蓬碱体外诱导HepG2细胞凋亡过程中c-Jun n末端激酶(JnK)途径的作用,并观察其联合化疗药物对HepG2细胞的影响。方法:CCK-8法检测联合或不联合使用JnK特异性抑制剂SP600125对细胞增殖的抑制作用;克隆形成实验观察不同浓度药物对细胞克隆形成的影响;Hoechst 33258染色法观察细胞形态变化;PI单染检测细胞亚二倍体率;Annexin V-PI双染测定细胞早期凋亡水平;Western blotting检测细胞聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)、JnK和p-JnK蛋白表达的改变;联合5-氟尿嘧啶(5-FU)或顺铂(DDP)观察细胞对化疗药物的敏感性。结果:去氢骆驼蓬碱随药物浓度的升高而抑制作用增强,48 h后IC50为9.80 mg/L;去氢骆驼蓬碱能显著抑制细胞克隆形成,并且导致细胞凋亡形态学变化;PI单染检测发现细胞周期的G1期前有亚二倍体凋亡峰,Annexin V-PI双染检测细胞出现明显的早期凋亡细胞群;Western blotting检测到随着去氢骆驼蓬碱浓度增加PARP及p-JnK蛋白表达增加,JnK蛋白表达减少;联合使用SP600125对细胞增殖的抑制作用减弱;联合5-FU或顺铂明显增强化疗药物对肿瘤细胞的抑制作用,增敏倍数分别为1.47和5.78倍。结论:去氢骆驼蓬碱对HepG2细胞有增殖抑制作用,并诱导其凋亡,激活JnK信号通路可能是其主要机制之一;同时去氢骆驼蓬碱可以增强HepG2细胞对5-FU和顺铂的敏感性。

关键词：去氢骆驼蓬碱 HepG2细胞 c—Jun n末端激酶细胞凋亡

SP600125对蛛网膜下腔出血大鼠海马区神经细胞自噬及神经细胞丢失的影响

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医学研究生学报 2017年第5期30卷 470-475页

作者：任艺艺刘俊杰刘仁杰赵雅宁徐继伟安朝旺李建民华北理工大学临床医学院唐山063015 华北理工大学护理与康复学院唐山063015 华北理工大学附属医院神经外科唐山063000

目的适度自噬有利于提高神经细胞的存活率;而自噬过度又会引起细胞的调亡。文中旨在探讨SP600125对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠海马区神经细胞自噬及神经细胞丢失的影响。方法将健康雄性清洁级SD大鼠40只按随机化数字表法分为假手术组、模... 详细信息

目的适度自噬有利于提高神经细胞的存活率;而自噬过度又会引起细胞的调亡。文中旨在探讨SP600125对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠海马区神经细胞自噬及神经细胞丢失的影响。方法将健康雄性清洁级SD大鼠40只按随机化数字表法分为假手术组、模型组、二甲基亚砜(DMSO组)、SP600125组,每组10只。模型组、DMSO组和SP600125组应用血管内穿刺法制成大鼠SAH模型。采用3-0缝合线引入到右颈外动脉,通过颈内动脉推进刺破大脑前动脉和大脑中动脉分叉处,建SAH模型。假手术组除不刺破血管,其余操作均与模型组一致。SP600125组于造模前30 min,利用脑立体定位仪行侧脑室注射3μg/μL SP600125溶液10μL。假手术组和模型组均注射等体积等渗盐水,DMSO组注射等量的DMSO。24 h处死,HE染色观察各组海马区神经元形态及数量;免疫组化染色及Western blot法对p-JnK蛋白以及自噬标志物Beclin-1和LC3-Ⅱ进行定性定量检测。结果 HE结果显示,与假手术组比较,模型组海马区神经元排列紊乱、细胞多呈多边形、数量明显减少;与模型组比较,SP600125组海马区神经元损伤程度有所减轻、细胞明显增多。与假手术组大鼠海马区Beclin-1、LC3-Ⅱ、p-JnK蛋白平均光密度值(1.56±0.28、1.60±0.30、1.58±0.32)比较,模型组(14.66±4.40、12.62±3.46、12.82±3.68)、DMSO组(13.85±3.85、11.59±4.52、13.03±3.53)和SP600125组(9.86±3.14、6.78±2.56、5.60±2.42)明显升高(Pn-1、LC3-Ⅱ、p-JnK蛋白表达(0.136±0.014、0.126±0.012、0.102±0.009)比较,模型组(0.474±0.122、0.668±0.130、0.496±0.124)、DMSO组(0.432±0.102、0.628±0.113、0.416±0.094)和SP600125组(0.264±0.106、0.332±0.113、0.219±0.104)明显升高(PnK信号通路的活性使自噬适度激活有关。

关键词：蛛网膜下腔出血 LC3-Ⅱ Beclin-1 自噬 c-Jun n末端激酶

阿霉素对心肌肌醇依赖酶l-JnK通路的影响

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中国组织化学与细胞化学杂志 2013年第1期22卷 66-70页

作者：孔宏亮苗志林李占全叶丽萍辽宁省人民医院心脏中心沈阳110016

目的探讨肌醇依赖酶l(IRE1)-JnK通路是否参与阿霉素致心力衰竭(HF)效应的作用。方法阿霉素(adriamycin,Adr)致HF大鼠作为Adr组(n=15),同龄健康大鼠作为对照组(n=10);将乳鼠心肌细胞随机分为对照组和Adr组(1umol/L)。心脏超声后,流式细... 详细信息

目的探讨肌醇依赖酶l(IRE1)-JnK通路是否参与阿霉素致心力衰竭(HF)效应的作用。方法阿霉素(adriamycin,Adr)致HF大鼠作为Adr组(n=15),同龄健康大鼠作为对照组(n=10);将乳鼠心肌细胞随机分为对照组和Adr组(1umol/L)。心脏超声后,流式细胞仪和蛋白印迹等分别检测细胞凋亡率(AR)、IRE 1、X盒结合蛋白1(XBP l)、TnF受体相关因子2(TRAF 2)、c-Jun凋亡信号调节激酶(ASK1)和JnK等的表达。结果 ***在体成功构建HF模型,而体外干预显著增加心肌细胞AR(PnK1/2、p-JnK1/2蛋白和其磷酸化水平(p-JnK1/2与总JnK1/2比值)均显著高于相应对照组(PnK内质网通路介导其致心肌毒性并进而促发HF。

关键词：阿霉素心力衰竭肌醇依赖酶1 TnF受体相关因子2 c-Jun n末端激酶

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常用英语缩略语名词解释

中华实验眼科杂志 2014年第11期32卷 1009-1009页

作者：本刊编辑部《中华实验眼科杂志》编辑部

P13K／Akt：磷脂酰肌醇-3-羟基酶／苏氨酸激酶phosphatidylinositol 3-kinase／proteinkinaseBRPE：视网膜色素上皮 retinal pigment epitheliumJnK：c—jun n末端激酶 c—jun n terminal kinase。

关键词：英语缩略语名词解释 P13K/Akt 视网膜色素上皮苏氨酸激酶磷脂酰肌醇 n末端激酶 jun