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mn-sod的提取及其应用研究进展

食品工业科技 2019年第15期40卷 363-367页

作者：秦松何雨峰况嘉铀范淑敏黄邵培王伟平发酵工程教育部重点实验室湖北工业大学生物工程与食品学院

锰超氧化物歧化酶(Manganese superoxide dismutase,mn-sod)是广泛存在于动植物体以及微生物体内的金属酶,能够清除超氧阴离子。位于线粒体内的mn-sod作为清除超氧阴离子的第一道防线,在生物体内的表达和调控对于平衡机体的氧化还原稳... 详细信息

锰超氧化物歧化酶(Manganese superoxide dismutase,mn-sod)是广泛存在于动植物体以及微生物体内的金属酶,能够清除超氧阴离子。位于线粒体内的mn-sod作为清除超氧阴离子的第一道防线,在生物体内的表达和调控对于平衡机体的氧化还原稳态的维持起着十分重要的作用。目前已有许多研究者对mnsod的提取及功能应用进行了研究。本文对mn-sod功能、来源、提取等进行了概述,重点对利用基因工程菌生产mnsod、以及其在医学农业上的应用情况等方面进行综述,以期为我国mn-sod产品的深入开发和利用提供参考。

关键词： mn-sod 提取生产应用

耐盐节杆菌Arthrobacter pascens DMDC12中mn-sod的纯化及性质

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食品与生物技术学报 2008年第1期27卷 103-108页

作者：刘妮娜姚忠叶艳华方民何冰芳南京工业大学制药与生命科学学院江苏南京210009 无锡日用化工应用研究所江苏无锡214045

作者从自行分离的高度耐盐菌Arthrobacter pascens DMDC12中分离提取超氧化物歧化酶（sod），粗酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sapharose FF及Source 15Q柱层析，获得了电泳纯的sod。其亚基相对分子质量23300，比活力为2183U／mg，纯化倍... 详细信息

作者从自行分离的高度耐盐菌Arthrobacter pascens DMDC12中分离提取超氧化物歧化酶（sod），粗酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sapharose FF及Source 15Q柱层析，获得了电泳纯的sod。其亚基相对分子质量23300，比活力为2183U／mg，纯化倍数为53，回收率51％。根据sod同功酶对抑制剂氯仿：乙醇和H2O2的敏感性，判断其为mn—sod。金属离子Mg^2＋、Zn^2＋、Ba^2＋、Cu^2＋对酶产生一定抑制，Fe^2＋对酶产生显著的抑制，0．5mmol／L的mn抖对酶有激活作用，进一步证实该酶为mn—sod。该酶在45℃以下、PH5～9范围内显示较好的稳定性。相关研究进一步验证了极端微生物是mn-sod的重要酶源。

关键词：耐盐节杆菌 mn-sod 纯化性质

黄芪对老年小鼠脑线粒体mn-sod、MDA及脑细胞凋亡影响的实验研究

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中国老年学杂志 2003年第9期23卷 596-597页

作者：张鹏霞朴金花欧芹李晶江旭东魏晓东卢凤美戚晓莉鲁彦佳木斯大学基础医学院生化教研室黑龙江佳木斯154007

目的　研究黄芪对老年小鼠脑抗氧化系统的影响。方法　用 TUNEL法观察老年小鼠神经细胞凋亡率 ,并检测脑线粒体锰超氧化物歧化酶 (mn- sod)活性及丙二醛 (MDA)含量。以黄芪水煎剂灌胃老年小鼠 30 d,观察黄芪对老年小鼠上述指标的影响。... 详细信息

目的　研究黄芪对老年小鼠脑抗氧化系统的影响。方法　用 TUNEL法观察老年小鼠神经细胞凋亡率 ,并检测脑线粒体锰超氧化物歧化酶 (mn- sod)活性及丙二醛 (MDA)含量。以黄芪水煎剂灌胃老年小鼠 30 d,观察黄芪对老年小鼠上述指标的影响。结果　老年小鼠 mn- sod活性降低 ,MDA含量升高 ,具有典型的凋亡特征 ;与老年组比较黄芪组脑线粒体 mn- sod活性升高 ,MDA含量降低 ,凋亡细胞数减少。结论　黄芪通过抗氧化作用抑制老年小鼠脑神经细胞凋亡。

关键词：黄芪老年小鼠脑线粒体 mn-sod MDA 细胞凋亡脑神经细胞自由基衰老

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卵巢癌患者红细胞mn-sod检测的意义

中国医科大学学报 2002年第6期31卷 452-454页

作者：温放王晓宁魏永和中国医科大学第一临床学院妇科辽宁沈阳110001

目的 :通过对卵巢癌患者红细胞中锰超氧化物歧化酶 (mn sod) ,超氧化物歧化酶 (sod)检测来探讨机体防御机制的变化。方法 :对卵巢肿瘤患者 85例 ,其中良性肿瘤 43例 ,卵巢癌 42例及健康女性 94例的外周血 ,用黄嘌呤法检测sod活性 ,并... 详细信息

目的 :通过对卵巢癌患者红细胞中锰超氧化物歧化酶 (mn sod) ,超氧化物歧化酶 (sod)检测来探讨机体防御机制的变化。方法 :对卵巢肿瘤患者 85例 ,其中良性肿瘤 43例 ,卵巢癌 42例及健康女性 94例的外周血 ,用黄嘌呤法检测sod活性 ,并加入氰化钾 ,破坏Cu1Zn sod后测量mn sod活性。将所测结果用方差分析作比较。结果 :在正常人与卵巢良性肿瘤患者外周血的比较中 ,sod及mn sod活性差异均无显著意义。卵巢癌患者外周血sod活性明显低于正常人也低于良性肿瘤患者 ,其差异均有显著性意义 (P mn sod活性则高于正常人与卵巢良性肿瘤者 ,其差异也有显著性意义 (P mn sod活力随着临床期别升高而上升 ,在不同病理分化程度中 ,低分化者其mn sod活性高于高分化者 (P mn sod ,sod活性变化可能与卵巢癌发生。

关键词：卵巢癌红细胞 mn-sod 检测超氧化物歧化酶锰-超氧化物歧化酶

mn-sod基因转化仙客来（Cyclamen persicum）的研究

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Mn-SOD基因转化仙客来（Cyclamen persicum）的研究

作者：周连霞西北农林科技大学

学位级别：硕士

仙客来(Cyclamen persicum),为报春花科仙客来属球茎花卉。仙客来花姿奇特,花瓣反转,是世界著名的盆栽花卉。仙客来属共有21个种,目前市场上的品种均来源于Cyclemen persicum Mill. 仙客来原产于南欧及地中海一带,抗性较差,逆境严重影... 详细信息

仙客来(Cyclamen persicum),为报春花科仙客来属球茎花卉。仙客来花姿奇特,花瓣反转,是世界著名的盆栽花卉。仙客来属共有21个种,目前市场上的品种均来源于Cyclemen persicum Mill. 仙客来原产于南欧及地中海一带,抗性较差,逆境严重影响仙客来的经济价值。研究表明,提高植物体内mn-sod活性是增强植物抗逆性的有效途径之一。本试验通过根癌农杆菌介导法将mn-sod基因导入仙客来,获得转化完整植株,为选育具有高抗逆性的仙客来新品种奠定基础。主要研究结果如下: 1.建立了仙客来品种“鲜红1011”高效再生体系。采用正交试验设计研究了基本培养基、TDZ和NAA等3个因素及其组合对仙客来叶片不定芽再生的影响。结果表明,TDZ浓度对叶片不定芽的诱导起主要作用,其次为基本培养基种类和NAA,仙客来叶片再生的适宜组合是1/3 MS+TDZ 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,在此培养基上,叶片再生频率达到93.1%,平均再生芽数为15.7。不同叶龄的叶片再生能力不同,试验中发现培养40d的试管苗叶片再生效率高于其它叶龄的叶片。叶片不同部分再生能力也有差异,叶基部再生效率高。不同浓度的AgNO3对仙客来叶片再生的影响不同,AgNO3质量浓度在0.1-0.6 mg/L范围内,对叶片再生几乎没影响,浓度增高,叶片再生受抑制。在无菌条件下培养仙客来种子,并以无菌萌发植株的子叶节、子叶及叶柄为外植体进行不定芽再生研究。试验结果表明,不同浓度的TDZ对外植体的诱导效果不同,TDZ 0.2 mg/L对叶柄和子叶节再生芽的诱导效果最好,叶柄最高再生频率为53.2%,再生芽数为6.7,子叶节最高再生频率为68.5%,再生芽数为8.4,其适宜再生培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L;0.5 mg/L TDZ对子叶再生芽的诱导效果最好,最高再生频率为23.6%,再生芽数为3.5,其适宜再生培养基为MS+TDZ 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L。以叶片再生不定芽为材料,进行了不同激素组合对仙客来不定芽增殖和生根的研究,筛选出仙客来不定芽适宜增殖、生根培养基分别为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L和1/2 MS+IBA 1.0 mg/L。 2.建立了农杆菌介导的仙客来遗传转化体系,首次获得mn-sod基因转化仙客来的转化植株。在建立仙客来叶片再生体系的基础上,研究了mn-sod基因转化中影响叶片转化效率的的多种因素,包括Kan浓度、抑菌素浓度、预培养时间、共培养时间,侵染菌液以

关键词：仙客来离体再生遗传转化 mn-sod

mn-sod基因多态性与放射人员染色体损伤易感性研究

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工业卫生与职业病 2012年第2期38卷 95-98页

作者：张佳更范雪云金玉兰王良群河北联合大学公共卫生学院河北唐山063000 唐山市疾病预防控制中心河北唐山063000

目的研究mn-sod基因多态性与辐射人员染色体损伤效应之间的关系,为筛检电离辐射高危人群提供生物学指标。方法应用1∶1配对病例对照研究方法,以唐山市所有从事射线工作人员为调查对象,选择有染色体异常的放射人员120人为病例组,同时选... 详细信息

目的研究mn-sod基因多态性与辐射人员染色体损伤效应之间的关系,为筛检电离辐射高危人群提供生物学指标。方法应用1∶1配对病例对照研究方法,以唐山市所有从事射线工作人员为调查对象,选择有染色体异常的放射人员120人为病例组,同时选择与病例组在相同工作岗位,年龄、性别、民族、工种、累积工龄和累积受照剂量相似,且无辐射损伤的放射人员120人为对照组,进行1∶1匹配。采集外周静脉血,微量全血培养法检测染色体结构,聚合酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测mn-sod基因多态性。结果病例组mn-sod-9位点TT、CT和CC基因型频率分别为62.5%、34.17%和3.33%,对照组分别为70.8%、26.7%和2.5%,两组基因型分布比较,差异无统计学意义(χ2=2.584,P>0.05)。病例组mn-sod-5777位点CC、CT和TT基因型分布频率分别为85.8%、13.3%和0.9%,对照组分别为75.0%、23.3%和1.7%,两组基因型分布频率比较,差异有统计学意义(χ2=5.83,OR=4.393,95%CI=1.513～12.758,Pmn-sod-5777位点野生型CC在辐射致染色体损伤过程中是一种危险因素,未发现mn-sod-9位点基因多态性与辐射致染色体损伤有关联。

关键词：电离辐射染色体损伤 mn-sod 基因多态性

卵巢上皮类肿瘤患者红细胞mn-sod检测及其临床意义

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中国肿瘤临床 2002年第9期29卷 664-665页

作者：温放王晓宁魏永和中国医科大学第一临床学院妇科沈阳市110001

自由基与恶性肿瘤的发生、发展密切相关。超氧化物歧化酶（sod）是使机体免受自由基伤害的一个重要防御系统，但是其中mn-sod的作用众说不一。本文通过检测卵巢癌患者红细胞中sod及mn-sod的变化，来探讨这一重要防御体系的改变及其意义。

关键词：卵巢上皮类肿瘤红细胞 mn-sod 临床意义自由基

朱桔mn-sod的纯化、鉴定及浓度梯度胶电泳在其中的应用

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植物研究 2004年第2期24卷 240-244页

作者：程光宇吴国荣储慧君南京师范大学生命科学学院南京210097

朱桔叶中存在mn sod、Fe sod和CuZn sod三种类型 ,在 1 0 %的PAGE中有三条活性带 ,其中mn sod的Rf值大于Fe sod与CuZn sod1 的Rf 值相同 ;在 4%～ 35 %的梯度胶电泳中有四条活性带 ,而mn sod的Rf 值最小 ,表明该酶带有较高的电荷密度。M... 详细信息

朱桔叶中存在mn sod、Fe sod和CuZn sod三种类型 ,在 1 0 %的PAGE中有三条活性带 ,其中mn sod的Rf值大于Fe sod与CuZn sod1 的Rf 值相同 ;在 4%～ 35 %的梯度胶电泳中有四条活性带 ,而mn sod的Rf 值最小 ,表明该酶带有较高的电荷密度。mn sod占总活性的2 0 %左右 ,已被纯化到均一程度。该酶的比活性为 1 2 4 9U/mg ,分子量和亚基分子量分别为5 4 .0kD和 2 6.6kD ,在紫外区最大吸收值为 2 80nm ,在 95℃处理 1 5min仍保留了 46%的酶活性 ,等电点为 5 .0 6。该酶的活性不被KCN、H2 O2 抑制 ,但对 1 %SDS和氯仿

关键词：朱桔 mn-sod 纯化鉴定电荷密度酶活性超氧物歧化酶

龙眼mn-sod基因的表达及其启动子功能分析

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热带作物学报 2018年第5期39卷 913-919页

作者：陈晓慧曾丽兰徐小萍王亚婷张梓浩陈裕坤林玉玲赖钟雄福建农林大学园艺植物生物工程研究所/亚热带果树研究所福建福州350002

以龙眼胚性愈伤组织为材料,研究龙眼mn-sod基因在应答非生物因子和外源激素处理下的转录情况,并利用烟草瞬时转化法分析其启动子的表达活性。结果表明:龙眼胚性愈伤组织中mn-sod基因的表达受到红光和蓝光的抑制;而在白光处理下,mn-sod... 详细信息

以龙眼胚性愈伤组织为材料,研究龙眼mn-sod基因在应答非生物因子和外源激素处理下的转录情况,并利用烟草瞬时转化法分析其启动子的表达活性。结果表明:龙眼胚性愈伤组织中mn-sod基因的表达受到红光和蓝光的抑制;而在白光处理下,mn-sod呈现先上升再下降的趋势,在绿光中,则是先下调再上升。在盐胁迫处理下,mn-sod基因的表达受到抑制,在蔗糖和不同天数处理中则不受影响。在一定浓度范围内,外源激素IAA、GA3、Me JA、SA和ETH均能诱导或抑制龙眼胚性愈伤组织中mn-sod基因的表达,提示其参与外源激素的应答。构建4个不同启动子缺失片段驱动报告基因GUS的植物表达载体并转化烟草。结果表明,龙眼mn-sod基因4个不同启动子缺失片段启动GUS基因的能力均低于Ca MV35S启动子,但均可启动GUS基因的表达。瞬时表达和定量表达结果显示,3’缺失的MSD-pro4(-669^-267 bp)启动GUS基因的能力最强,其次为5’缺失的MSD-pro1(-669^-1 bp),最弱的为MSD-pro2(-432^-1bp)和MSD-pro3(-267^-1 bp),提示mn-sod启动子-669^-432 bp区段内含有重要的正向顺式调控元件;而-432^-1 bp区段含有负调控元件。

关键词：龙眼 mn-sod 启动子瞬时表达