检索结果-南通市图书馆

作者：李越山西医科大学

学位级别：硕士

目的:心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)其可诱导心肌细胞死亡和加重心肌缺血性损伤,加重心脏疾病并严重影响心脏手术的预后,危及人们的生命安全。越来越多的研究表明,micro RNA(mir)在心肌I/R损伤的发展中至关重要。本研究通过使用大鼠心肌细... 详细信息

目的:心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)其可诱导心肌细胞死亡和加重心肌缺血性损伤,加重心脏疾病并严重影响心脏手术的预后,危及人们的生命安全。越来越多的研究表明,micro RNA(mir)在心肌I/R损伤的发展中至关重要。本研究通过使用大鼠心肌细胞,采用氧和葡萄糖剥夺再灌注处理建立体外的心肌缺血再灌注损伤模型,探讨mir-503及PDCD4在心肌细胞中缺血再灌注时的作用,并为减轻或者治疗心肌缺血再灌注损伤提供理论依据和策略。方法:(1)细胞模型:将H9C2细胞置于缺氧和葡萄糖剥夺状态下,然后再灌注处理,建立心肌细胞的I/R的体外模型。采用无葡萄糖的缺氧培养基培养H9C2细胞,于37℃含95%N和5%CO的厌氧室中培养4小时。之后把细胞放入含葡萄糖(4.5mg/m L)的培养基中,在培养箱(95%空气和5%CO)中培养24小时。(2)将心肌细胞培养后分别处理,总共分为对照组,I/R组,I/R+mir-503inhibitor组,I/R+mir-503 mimic组。(3)通过qRT-PCR检测各组心肌细胞mir-503以及PDCD4的mRNA水平。(4)通过使用Western blot检测各组心肌细胞的PDCD4的表达水平。(5)采用流式细胞术,检测各组细胞中的细胞凋亡情况。(6)双荧光素酶报告分析:构建PDCD4基因野生型3’UTR以及突变型3’UTR双荧光素酶报告质粒。将他们分别与mir-503空白载体和mir-503模拟物共转染至H9c2细胞中,并检测和分析细胞中荧光素酶活性。结果:(1)经I/R处理后,与对照组相比,心肌细胞中mir-503表达下调,PDCD4表达增加。(2)mir-503mRNA表达的增加会使PDCD4的表达水平下调,细胞凋亡减少。而mir-503mRNA表达降低,则使PDCD4的表达上调,细胞凋亡增加。(3)双荧光素酶活性报告分析提示mir-503可直接靶向PDCD4。结论:(1)在心肌I/R的体外模型中,mir-503的表达下降,PDCD4的表达水平上升。(2)mir-503在I/RI中起着保护作用,其可通过靶向PDCD4,抑制PDCD4的表达,参与调控MI/RI的细胞凋亡过程,减轻心肌细胞的缺血再灌注损伤。

关键词： mir-503 PDCD4 缺血再灌注

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

重楼皂苷Ⅰ抑制IL-1β诱导的人髓核细胞凋亡相关机制研究

重楼皂苷Ⅰ抑制IL-1β诱导的人髓核细胞凋亡相关机制研究

引用

作者：苗辉昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]研究重楼皂苷Ⅰ对椎间盘退变中髓核细胞的抗凋亡作用以及对髓核细胞中lncRNAMALAT1 与 mir-503 的影响。[方法]①人髓核细胞分离培养及鉴定:将手术台上获取的人椎间盘组织,在无菌条件下进行分离,得到髓核组织,传代培养至第3代... 详细信息

[目的]研究重楼皂苷Ⅰ对椎间盘退变中髓核细胞的抗凋亡作用以及对髓核细胞中lncRNAMALAT1 与 mir-503 的影响。[方法]①人髓核细胞分离培养及鉴定:将手术台上获取的人椎间盘组织,在无菌条件下进行分离,得到髓核组织,传代培养至第3代用于后续实验。以人纤维环细胞为对照,通过qPCR检测髓核细胞内角蛋白KRT19的表达量,完成对髓核细胞的鉴定。②CCK-8法检测重楼皂苷Ⅰ最佳浓度:将第3代生长良好的人髓核细胞,分别与5、10、20、40、60、80、100 μg/mL的重楼皂苷Ⅰ混合,并设置空白组（只加培养基）、对照组（髓核细胞加培养基）,采用CCK-8法计算细胞存活率,来测定重楼皂苷Ⅰ作用于髓核细胞的最佳作用浓度。③CCK-8法检测重楼皂苷Ⅰ最佳作用时间:分成以下8组:髓核细胞培养24h、36h、48h;髓核细胞+40 μg/mL重楼皂苷Ⅰ培养24h、36h、48h,并设置空白组（只加培养基）、对照组（髓核细胞加培养基）,采用CCK-8法计算细胞存活率,来测定重楼皂苷Ⅰ最佳作用时间。④重楼皂苷Ⅰ药效及qPCR检测:共分成4组:对照组（髓核细胞加培养基）、髓核细胞+40ug/ml重楼皂苷Ⅰ组、髓核细胞+100ng/ml IL-1 β组、髓核细胞+100ng/ml IL-1 β+40ug/ml重楼皂苷Ⅰ,各组作用24h后,倒置显微镜下观察各组髓核细胞形态,流式细胞凋亡术检测各组髓核细胞凋亡情况,CCK-8法检测各组髓核细胞存活率,qPCR检测重楼皂苷Ⅰ对髓核细胞中lncRNA MALAT1与mir-503表达量的影响。⑤双荧光素酶基因检测lncRNA MALAT1与mir-503是否有共同结合位点:将lncRNA MALAT1-WT、lncRNA MALAT1-MU 分别与 mir-503 mimic、mir-503 NC 结合并共转染人肾胚293T细胞,以转染空质粒作为对照,以海肾荧光素酶为内参质粒。[结果]①与人纤维环细胞组相比,人髓核细胞组中KRT19 mRNA表达量明显升高（P＜0.05）。②重楼皂苷Ⅰ作用于髓核细胞的最佳作用浓度为40μg/mL（P＜0.05）,髓核细胞存活率最高为116.12±1.01%;③重楼皂苷Ⅰ作用于髓核细胞的最佳作用时间为24h（P＜0.05）,其髓核细胞存活率为116.64±1.45%;④空白对照组:髓核细胞呈多角形、梭形,形状不规则,多个细长突起从细胞四周发出,细胞胞体透亮,具有折光性,细胞轮廓清晰。髓核细胞经IL-1β诱导后,髓核细胞形态发生了明显改变,细胞形态不清晰,出现颗粒状凋亡小体,镜下可见明显细胞核碎裂及核固缩。将重楼皂苷Ⅰ作用于经IL-1β诱导的髓核细胞,可部分逆转细胞凋亡情况,镜下可见颗粒状凋亡小体密集度降低。⑤流式细胞凋亡术检测各组髓核细胞凋亡率由高到低依次是髓核细胞+100ng/ml IL-1β（55.86±0.47%）、髓核细胞+100ng/ml IL-1β+40ug/ml 重楼皂苷Ⅰ（29.05±0.59%）、正常髓核细胞（3.90±0.74%）、髓核细胞+40ug/ml重楼皂苷 Ⅰ（3.81±0.35%）。⑥CCK-8法检测各组髓核细胞存活率由高到低依次为髓核细胞+40ug/ml重楼皂苷 Ⅰ（112.70±1.01%）、髓核细胞（100.40±0.69%）、髓核细胞+100ng/ml IL-1β+40ug/ml 重楼皂苷 Ⅰ（71.83±0.51%）、髓核细胞+100ng/mlIL-1β（55.49±0.46%）。⑦qPCR检测各组髓核细胞mir-503表达水平由高到低依次是髓核细胞+100ng/mlIL-1β、正常髓核细胞、髓核细胞+100ng/ml IL-1β+40ug/ml重楼皂苷Ⅰ、髓核细胞+40ug/ml重楼皂苷Ⅰ;LncRNAMALAT1表达水平由高到低依次是髓核细胞+40ug/ml重楼皂苷Ⅰ、髓核细胞、髓核细胞+100ng/ml IL-1β+40ug/ml重楼皂苷 Ⅰ、髓核细胞+100ng/ml IL-1β。⑧双荧光素酶基因检测结果显示,lncRNAMALAT1-WT与mir-503 mimic共转染细胞组与其余各组相比,萤火虫荧光素酶强度下降了 60%（P＜0.05）,但其余各实验组与对照组之间均无显著差异（P＞0.05）。[结论]1.重楼皂苷Ⅰ可抑制IL-1 β诱导的髓核细胞凋亡,并且是通过对mir-503、lncRNAMALAT1调控发挥的抗炎作用。2.双荧光素酶基因检测证明lncRNAMALAT1与mir-503具有直接靶向关系。

关键词：椎间盘退变重楼皂苷Ⅰ 髓核细胞 lncRNAMALAT1 mir-503

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

RANKL/RANK/OPG系统与绝经后骨质疏松模型的研究

引用

浙江中西医结合杂志 2015年第9期25卷 892-894,F0003页

作者：任洁卢建华浙江中医药大学第一临床医学院杭州310053

绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteopo-rosis，PMOP）是指绝经后的妇女由于卵巢功能减退，雌激素不分泌或者分泌过少，骨吸收大于骨形成，形成高转化型的骨质疏松特点。临床研究[1-2]发现：〉60岁的女性发病率高达24%，中老年女性... 详细信息

绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteopo-rosis，PMOP）是指绝经后的妇女由于卵巢功能减退，雌激素不分泌或者分泌过少，骨吸收大于骨形成，形成高转化型的骨质疏松特点。临床研究[1-2]发现：〉60岁的女性发病率高达24%，中老年女性诊断为骨质疏松是男性的3倍。绝经后骨质疏松模型是通过切除动物的卵巢，造成雌激素分泌减少，来模拟PMOP。雌激素的减少破坏了骨吸收和骨形成的平衡，而RANKL/RANK/OPG系统存在于骨吸收过程中，必然受到雌激素的影响。因此，本文主要针对RANKL/RANK/OPG系统与绝经后骨质疏松动物模型的成果进行研究，现综述如下。

关键词： RANKL/RANK/OPG 绝经后骨质疏松护骨素 mir-503 肿瘤坏死因子-α

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：