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介绍一种改良Masson染色法在肾穿刺组织中的应用

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诊断病理学杂志 2016年第2期23卷 151-151,153页

作者：洪少君陈顺平吴文乔苏海燕王丽菊蔡加英张中平福建医科大学附属漳州市医院病理科福建漳州363000

肾穿刺活检组织常规特殊染色有PAS、PASM、Masson、PASM套染Masson法。传统的Masson染色法主要用于鉴别胶原纤维与肌纤维,而应用于肾穿刺活检标本的染色效果对比不鲜明、易褪色且染色效果不稳定。有文献报道,传统的Masson染色法经改良... 详细信息

肾穿刺活检组织常规特殊染色有PAS、PASM、Masson、PASM套染Masson法。传统的Masson染色法主要用于鉴别胶原纤维与肌纤维,而应用于肾穿刺活检标本的染色效果对比不鲜明、易褪色且染色效果不稳定。有文献报道,传统的Masson染色法经改良可得到较满意效果,但仍需经二次固定,时间长、操作繁琐[1]。

关键词：肾穿组织 Masson 染色法改良

Bouin氏液二次固定时间对家兔肝脏纤维化Masson三色染色的影响

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中国医学创新 2019年第12期16卷 22-25页

作者：徐艳王玲董洋郭冬梅李延辉辽宁省大连市金州区第一人民医院辽宁大连116100 大连医科大学附属第二医院广东省东莞市石碣医院

目的:探讨Bouin氏液二次固定时间对Masson三色染色效果的影响,进一步寻找Bouin氏液二次固定的最佳条件。方法:取5例肝纤维化模型家兔肝脏组织(10%中性福尔马林固定)的蜡块,切片、脱蜡后,用Bouin氏液二次固定,固定时间分别为0 min、15 mi... 详细信息

目的:探讨Bouin氏液二次固定时间对Masson三色染色效果的影响,进一步寻找Bouin氏液二次固定的最佳条件。方法:取5例肝纤维化模型家兔肝脏组织(10%中性福尔马林固定)的蜡块,切片、脱蜡后,用Bouin氏液二次固定,固定时间分别为0 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、过夜。进行Masson三色染色并用光镜和统计软件分析比较染色结果。结果:未经二次固定的切片与所有经过二次固定的切片染色评分比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:Bouin氏液二次固定的肝纤维化切片的Masson三色染色效果优于仅经福尔马林固定的切片;二次固定4 h或过夜切片的染色效果最佳。

关键词： Bouin 氏液 10%中性福尔马林 Masson 三色染色肝纤维化

Effect of exogenous spastin combined with polyethylene glycol on sciatic nerve injury

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Neural Regeneration Research 2019年第7期14卷 1271-1279页

作者： Yao-Fa Lin Zheng Xie Jun Zhou Hui-Hao Chen Wan-Wan Shao Hao-Dong Lin Department of Orthopedics Changzheng Hospitalthe Second Military Medical University Department of Orthopedics the Second People's Hospital of Karamay

Polyethylene glycol can connect the distal and proximal ends of an injured nerve at the cellular level through axonal fusion to avoid Wallerian degeneration of the injured distal nerve and promote peripheral nerve regeneration.However,this method can only prevent Wallerian degeneration in 10% of axons because the cytoskeleton is not repaired in a timely fashion.Reconstruction of the cytoskeletal trunk and microtubule network has been suggested to be the key for improving the efficiency of axonal fusion.As a microtubule-severing protein,spastin has been used to enhance cytoskeletal reconstruction.Therefore,we hypothesized that spastin combined with polyethylene glycol can more effectively promote peripheral nerve regeneration.A total of 120 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham,suture,polyethylene glycol,and polyethylene glycol + spastin groups.In suture group rats,only traditional nerve anastomosis of the end-to-end suture was performed after transection of the sciatic nerve.In polyethylene glycol and polyethylene glycol + spastin groups,50 μL of polyethylene glycol or 25 μL of polyethylene glycol + 25 μL of spastin,respectively,were injected immediately under the epineurium of the distal suture.Sensory fiber regeneration distance,which was used to assess early nerve regeneration at 1 week after surgery,was shortest in the suture group,followed by polyethylene glycol group and greatest in the polyethylene glycol + spastin group.Behavioral assessment of motor function recovery in rats showed that limb function was restored in polyethylene glycol and polyethylene glycol + spastin groups at 8 weeks after surgery.At 1,2,4 and 8 weeks after surgery,sciatic functional index values and percentages of gastrocnemius muscle wet weight were highest in the sham group,followed by polyethylene glycol + spastin and polyethylene glycol groups,and lowest in the suture group.Masson staining was utilized to assess the morphology of muscle tissue.Morphological changes in skeletal muscle were detectable in suture,p

关键词： nerve regeneration peripheral nerves Wallerian degeneration polyethylene glycol axonal fusion spastin peripheral nerve injuries Masson staining microtubule neural regeneration

Dyke Davidhoff Masson Syndrome Presenting in Adulthood: A Case Report

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Open Journal of Clinical Diagnostics 2015年第2期5卷 46-49页

作者： Monika Jawanjal Nilesh Walke Archana Bhate Avinash Jawanjal Padmashree Dr. D Y Patil Hospital

Dyke Davidhoff Masson syndrome (DDMS) was first described by Dyke Davidhoff and Masson in 1933 in a series of 9 patients [1]. It’s a very rare condition presenting in childhood ranging from infancy to late adolescence [2]. It is characterised by cerebral hemiatrophy, unilateral ventriculomegaly, calvarial thickening, skull and facial asymmetry, sometimes even contralateral hemiplegia in childhood and seizures [2]. An adult presentation is seen in late adolescence or teen age. However in literature the latest presentation reported so far is at 19 years of age [3]. We report a case of Dyke Davidhoff Masson syndrome who presented first time at the age of 28 years which is probably the oldest presentation of this rare entity reported in the literature.

关键词： Dyke Davidhoff Masson Syndrome Cerebral Hemiatrophy Childhood Hemiplegia

用改良Masson三色法鉴别生前死后的皮肤压痕

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法医学杂志 1996年第2期12卷 95-96页

作者：龚毓昌秦志强袁世俊司法部司法鉴定科学技术研究所法医病理学研究室

本实验用改良ｍａｓｓｏｎ三色染新技术，即固绿ＦＣＦ－丽春红Ｓ酸性品红一铁苏木素染色对６０只小白鼠的生前和死后颈部皮肤压痕进行实验研究，发现生前组３０只小白鼠均显示压痕处皮下肌肉呈深红染而死后组３０只小鼠深红染阴性２３... 详细信息

本实验用改良ｍａｓｓｏｎ三色染新技术，即固绿ＦＣＦ－丽春红Ｓ酸性品红一铁苏木素染色对６０只小白鼠的生前和死后颈部皮肤压痕进行实验研究，发现生前组３０只小白鼠均显示压痕处皮下肌肉呈深红染而死后组３０只小鼠深红染阴性２３只，可疑４只，假阳性３只。结果表明用固绿ＦＣＦ－丽春红Ｓ酸性品红一铁苏木素染色，以光学显微镜检查鉴别生前和死后的皮肤压痕有一定价值。

关键词：法医学鉴定皮肤压痕 Masson 三色法

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微波技术在Masson染色中的应用

分子诊断与治疗杂志 1999年第1期 28-29页

作者：郝亚萍黄奕莉中山医科大学肿瘤医院病理科

Masson三色染色在病理诊断上主要用于胶原纤维与肌纤维的鉴别,在临床病理诊断中仍然起着十分重要的作用.由于传统的Masson三色染色费时较长,这给病理诊断带来许多不便,将微波辐射技术应用于Masson三色染色中,可使染色时间由以往24h左右... 详细信息

Masson三色染色在病理诊断上主要用于胶原纤维与肌纤维的鉴别,在临床病理诊断中仍然起着十分重要的作用.由于传统的Masson三色染色费时较长,这给病理诊断带来许多不便,将微波辐射技术应用于Masson三色染色中,可使染色时间由以往24h左右缩短到约40min.

关键词：微波辐射电磁辐射三色染色组织切片 Masson 病理诊断脱片微波技术电子技术常规法

新生儿坏死性小肠结肠炎后肠狭窄的相关危险因素分析及Smad3调控...

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作者：章露尹浙江大学

学位级别：硕士

第一部分坏死性小肠结肠炎后肠狭窄的危险因素分析及预测模型建立目的:探索对坏死性小肠结肠炎（Neonatal necrotizing enterocolitis,NEC）后肠狭窄的发生发展有影响的危险因素并建立临床预测模型。方法:回顾收集2018年6月至2020年10... 详细信息

第一部分坏死性小肠结肠炎后肠狭窄的危险因素分析及预测模型建立目的:探索对坏死性小肠结肠炎（Neonatal necrotizing enterocolitis,NEC）后肠狭窄的发生发展有影响的危险因素并建立临床预测模型。方法:回顾收集2018年6月至2020年10月我院收治的手术确诊为NEC后肠狭窄的患儿60例（56.6%）和确诊为NEC后未发生肠狭窄的患儿46例（43.4%）,对其一般情况、确诊NEC前合并症、确诊NEC后临床资料进行分析与总结,探索可预测NEC后肠狭窄的危险因素,并通过多因素回归分析建立预测模型,为预判NEC后肠狭窄提供参考依据。结果:胎龄、出生体重、抗生素应用、缺血缺氧及确诊NEC后炎症相关指标与坏死性小肠结肠炎后肠狭窄的发生有关。构建的临床预测模型有较好的区分度和校准度,最大约登指数对应的最佳风险预测临界值为66.8%,并进行风险分层,即预测风险＞66.8%为高风险组,预测风险≤66.8%为低风险组。结论:胎龄、出生体重及出生后缺血缺氧、肠管炎症对NEC后肠狭窄有影响,构建NEC后肠狭窄预测模型具有一定的指导意义。第二部分坏死性小肠结肠炎后肠狭窄组织中肠管炎症与纤维化的相关性分析目的:探索新生儿坏死性小肠结肠炎后肠狭窄中肠管炎症与肠纤维化的相关性。方法:通过免疫组织化学染色获得NF-κB在NEC后肠狭窄组织中的表达。并通过HE和Masson染色获得胶原纤维在NEC后肠狭窄组织中的沉积面积。结合NF-κB免疫组化结果和HE、Masson染色结果,分析肠管炎症与胶原纤维面积的相关性。结果:NF-κB蛋白在肠狭窄组织中表达较正常组织明显升高,且胶原沉积面积实验组较对照组明显增大。NF-κB蛋白阳性表达量在肠狭窄组织中呈正相关性,且NF-κB蛋白表达升高与胶原纤维面积呈正相关性。结论:肠管炎症和肠纤维化可能在NEC后肠狭窄的过程中起作用。第三部分Smad3在坏死性小肠结肠炎后肠狭窄中的作用及其机制研究目的:探究Smad3在新生儿坏死性小肠结肠炎后肠狭窄组织中的表达特点及其可能的影响机制。方法:通过免疫组化获得Smad3蛋白在NEC后肠狭窄组织中的表达特点。运用si RNA技术抑制小肠上皮IEC-6细胞中Smad3表达。Western Blot检测IEC-6细胞NF-κB、TNF-α、TGF-β1、ZO-1蛋白表达变化。CCK8试剂盒和Transwell细胞迁移试验检测细胞增殖和迁移能力变化。检测上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition,EMT）标志物E-cadherin和Vimentin表达变化。结果:Smad3蛋白在狭窄组织中表达较正常组织明显升高。Smad3“沉默”后的IEC-6细胞TGF-β1、NF-κB、TNF-α蛋白表达下降（p＜0.05）,ZO-1表达上升（p＜0.05）,细胞增殖和迁徙功能均下降（p＜0.05）,E-cadherin和Vimentin表达水平无明显变化。结论:Smad3可能通过促进肠上皮细胞炎症反应、纤维化及影响细胞增殖迁移,介导了NEC后肠狭窄的发生发展。

关键词：坏死性小肠结肠炎肠狭窄危险因素炎症临床预测模型纤维化 NF-κB Masson 免疫组化 Smad3 促炎因子肠纤维化上皮间质转化

BMP-4修饰BMSCs复合同种异体骨软骨柱修复兔膝关节软骨缺损

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BMP-4修饰BMSCs复合同种异体骨软骨柱修复兔膝关节软骨缺损

作者：张飞蚌埠医学院

学位级别：硕士

第一章BMSCs体外培养及鉴定目的:建立体外培养、鉴定BMSCs完整体系,为动物体内实验提供细胞来源。方法:1.取普通级雄性新西兰兔股骨及胫骨,全骨髓贴壁法分离原代BMSCs。2.倒置相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪检测CD34、CD45、CD2... 详细信息

第一章BMSCs体外培养及鉴定目的:建立体外培养、鉴定BMSCs完整体系,为动物体内实验提供细胞来源。方法:1.取普通级雄性新西兰兔股骨及胫骨,全骨髓贴壁法分离原代BMSCs。2.倒置相差显微镜观察细胞形态变化,流式细胞仪检测CD34、CD45、CD29、CD44、CD90表面分子标志物表达率。3.对分离培养细胞进行成骨、脂肪及软骨诱导分化,诱导周期结束后行特异性染色（茜素红、油红O、阿利辛蓝染色）。结果:本实验分离、培养的原代细胞形态均一,呈长梭形,漩涡状、稻穗样分布。高表达CD29、CD44及CD90,低表达CD34、CD45。三系诱导可见脂滴、骨盐、胶原纤维形成,证实所培养细胞为BMSCs。第二章BMP-4对BMSCs体外增殖及成软骨分化影响目的:探明Ad-BMP-4对BMSCs体外增殖及相关成软骨蛋白分泌的影响。方法:1.取P2代细胞,设立病毒梯度组,感染细胞,观察绿色荧光蛋白表达情况,检测绿色荧光蛋白表达量以确定最佳MOI。2.取P2代细胞,设立对照组、空载组、实验组,于铺板第0d、1d、3d、5d、7d行CCK-8法检测细胞增殖。3.取P2代细胞,设立对照组、空载组、实验组,于铺板第0d、1d、3d、5d、7d裂解细胞,提取蛋白,ELISA检测BMSCs成软骨分化中相关蛋白分泌。4.取第3步所制蛋白样本,经加样、电泳、转膜、封闭、加抗体、洗涤、曝光取得蛋白条带。结果:MOI为100时,重组腺病毒载体感染效率高,细胞状态好。BMP-4能显著促进细胞体外增殖及成软骨相关蛋白Sox9、COLⅡ的分泌。第三章Ad-BMP-4-BMSCs复合同种异体骨软骨柱修复兔膝关节软骨缺损目的:以同种异体骨软骨柱作为生物支架,BMSCs作为种子细胞,BMP-4作为生物活性因子修复兔膝关节软骨缺损。方法:1.18只新西兰白兔无菌条件下取股骨髁关节面骨软骨柱36个,梯度降温。2.将同种异体骨软骨柱浸入细胞悬液,低速离心以充分吸附BMSCs。3.取24只新西兰兔,随机分4组,建立动物模型,按分组条件行对应处理。4.术后4w、8w、16w,各组分别取2只（4膝）动物标本,行HE染色、番红固绿染色、Masson染色及Ⅱ型胶原免疫组化检测。结果:D组16w时HE染色提示软骨缺损基本修复,新生组织与周围软骨整合度较高,层次清晰,无赘生现象;番红固绿及Masson染色可见周围有大量新生软骨组织;免疫组化显示Ⅱ型胶原蛋白呈强表达。

关键词：骨髓间充质干细胞表面分子标志物诱导分化 MOI BMP-4 COLⅡ Sox9 同种异体骨 HE 番红固绿 Masson 免疫组化

瘦素在致大鼠肝纤维化形成中对AngII-ERK1/2信号通路的影响

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中国现代医学杂志 2014年第10期24卷 11-15页

作者：周光耀林巍潘陈为金玲湘温州医科大学附属第二医院感染内科浙江温州325027

目的使用40%CCl4皮下注射诱导大鼠肝纤维化同时腹腔注射瘦素,通过组织切片和分子生物学及免疫技术检测肝组织的病理变化、瘦素、AngII及AT1R的表达。方法采用皮下注射CCl4造肝纤维化模型,对照组只注射生理盐水;肝纤维化模型组腹腔注射... 详细信息

目的使用40%CCl4皮下注射诱导大鼠肝纤维化同时腹腔注射瘦素,通过组织切片和分子生物学及免疫技术检测肝组织的病理变化、瘦素、AngII及AT1R的表达。方法采用皮下注射CCl4造肝纤维化模型,对照组只注射生理盐水;肝纤维化模型组腹腔注射生理盐水;低剂量和高剂量瘦素组分别腹腔给予瘦素2ng/kg、20 ng/kg。每周2次,连续5周。采用HE、Masson组织染色及ELISA检测,RT-qPCR及免疫印迹检测AT1R等的表达。结果 HE染色显示瘦素组大多数肝细胞轻度肿胀,可观察到脂滴空泡,血管周围纤维组织增生,高剂量瘦素组最严重。Masson染色胶原纤维呈蓝色,正常组胶原纤维主要分布在血管壁,而模型组血管壁周围和细胞间质内均可见蓝色胶原纤维,瘦素组纤维化程度较模型组更严重。ELISA检测结果示肝纤维化模型组瘦素水平较对照组更高(P<0.05),不同浓度瘦素组比肝纤维化模型组瘦素表达更高(P<0.05),且高剂量与低剂量相比差异具有显著性(P<0.05)。RT-qPCR定量示AT1R随着瘦素浓度增加而上调;Western blot表明随着肝纤维化越严重,AT1R和pERK1/2表达越高。结论瘦素具促进肝纤维化的发生发展,而且在肝纤维化形成过程中对AngII-AT1R-ERK1/2信号通路也发挥了重要作用。

关键词：肝纤维化瘦素 HE Masson ELISA RT-qPCR Western blot AngII-AT1R-ERK1 2