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食管鳞状细胞癌组织中MRDI的表达及下调MRDI表达对食管癌细胞侵袭能力的影响

郑州大学学报（医学版） 2020年第5期55卷 593-597页

作者：秦宁刘宗文张艳杨瑜刘耀河侯歌宋锐袁金金郑州大学第二附属医院放射治疗科郑州450014 郑州大学基础医学院药理学教研室郑州450001

目的:观察食管鳞状细胞癌组织中MRDI表达及下调MRDI表达对食管癌细胞EC9706和EC109侵袭能力的影响。方法:采用免疫组化SP法检测45例食管鳞状细胞癌及癌旁食管黏膜组织中MRDI蛋白的表达;随访记录患者预后及生存信息,确定MRDI蛋白的表达... 详细信息

目的:观察食管鳞状细胞癌组织中MRDI表达及下调MRDI表达对食管癌细胞EC9706和EC109侵袭能力的影响。方法:采用免疫组化SP法检测45例食管鳞状细胞癌及癌旁食管黏膜组织中MRDI蛋白的表达;随访记录患者预后及生存信息,确定MRDI蛋白的表达与患者临床病理参数及术后生存之间的关系;分别用siNCtrl(阴性对照)和MRDI-siRNA转染EC9706和EC109细胞,Transwell法观察细胞侵袭能力的变化。结果:与癌旁食管黏膜组织相比,食管鳞状细胞癌组织中MRDI蛋白的表达升高(P=0.004);MRDI蛋白在低分化、病理分期T3+T4期及脉管癌栓阳性的食管鳞状细胞癌患者中的表达升高(PMRDI蛋白低表达者相比,MRDI高表达者预后差(PMRDI-siRNA组EC9706和EC109细胞的侵袭能力下降。结论:MRDI在食管鳞状细胞癌中可能充当癌基因,其高表达与食管鳞状细胞癌的侵袭有关。

关键词： MRDI 食管鳞状细胞癌侵袭

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探讨MRDI与食管鳞癌侵袭转移的关系及其在临床中的意义

探讨MRDI与食管鳞癌侵袭转移的关系及其在临床中的意义

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作者：秦宁郑州大学

学位级别：硕士

背景在我国消化道肿瘤中食管癌比较多见,我国的食管癌发病率、死亡率在世界上排首位。Ras同源基因家族成员A（Ras homolog gene family,member A,RhoA）是 Ras 超家族中具有 GTP 酶（guanosine triphosphate phosphohydrolase,GTPase）... 详细信息

背景在我国消化道肿瘤中食管癌比较多见,我国的食管癌发病率、死亡率在世界上排首位。Ras同源基因家族成员A（Ras homolog gene family,member A,RhoA）是 Ras 超家族中具有 GTP 酶（guanosine triphosphate phosphohydrolase,GTPase）活性的一种小G蛋白分子,其在肿瘤组织中的表达与肿瘤的恶性程度正相关。有研究证实,RhoA的酶活性通过信号通路参与细胞骨架重排,进而诱导细胞癌变及肿瘤细胞增殖、侵袭、转移、屏障功能和凋亡等多种生命活动。而 MRDI（Mediator of RhoA-dependent invasion,MRDI）基因作为一种“依赖 RhoA的侵袭媒介”的未被鉴定基因,其应答RhoA的感应并促进依赖RhoA细胞的侵袭及细胞运动。有文献报道,MRDI与多种肿瘤的侵袭性相关,但其在食管癌复发、转移中的作用,以往在国内外均无报道。食管癌及癌旁组织中MRDI的表达情况及其与临床病理的联系尚不明确。目的本研究拟初步探讨:1.MRDI在食管鳞癌组织及癌旁组织中的表达状况;2.MRDI蛋白表达与临床病理参数（性别、年龄、分化程度、淋巴结转移情况、肿瘤浸润深度、临床TNM分期、脉管癌栓、神经侵犯、烟酒嗜好等）之间的关系,及其对患者预后及生存时间的影响;3.MRDI基因表达对食管鳞癌细胞侵袭、迁移、增殖能力的影响;4.MRDI基因表达在临床中的意义。材料与方法1.本研究以郑州大学第二附属医院2014.04.20-2015.10.22收治的76例经手术治疗的食管癌病人为研究对象。入组条件:①患者信息完善（包括个人信息及临床病理资料信息）;②所有患者术前没接受过放、化疗以及其他特殊诊疗;③手术方式:食管癌根治性切除,于术后立即取材,将癌组织、癌旁组织制成组织病理蜡块保存。其组织类型均为食管鳞癌,病理诊断由病理科两位以上专家复诊为鳞癌。不满足以上条件的予以排除。所有患者均已签署由医院伦理委员会批准的患者知情同意书,符合医学伦理学规定。该76例食管癌患者年龄均在45-90岁范围内,余统计信息如下表（表1）:表1 76例食管鳞癌患者临床信息2.实验方法:①免疫组化SP法用于检测食管鳞癌及对应癌旁组织中的MRDI蛋白表达;②随访对应患者的预后及生存信息,确定MRDI蛋白表达与患者生存时间及不同临床病理参数之间的关系;③实验分为blank、siNCtrl、MRDI-siRNA#1、MRDI-siRNA#2、MRDI-siRNA#3 五组,应用 qRT-PCR 和Westerrn Blot法筛选转染效率最佳的siRNA;④利用已筛选出的siRNA调低食管鳞癌细胞EC109及EC9706中MRDI表达,Transwell法、划痕实验、CCK8法分别检测下调MRDI前后食管鳞癌细胞EC109和EC9706侵袭、迁移和增殖能力的变化。结果1.与癌旁组织相较,MRDI蛋白在食管鳞癌组织中呈高表达（P＜0.0001）。2.免疫组化结果显示MRDI蛋白在食管鳞癌组织中的亚细胞定位主要在细胞质,细胞核有少量表达,而在绝大多数表达阳性的食管鳞癌癌旁组织中MRDI蛋白的亚细胞定位主要在细胞核。3.在部分癌旁组织中MRDI蛋白的分布具有方向性,主要向细胞质膜的前缘富集,且这种积聚现象呈现逐步进展的趋势。4.生存分析显示:MRDI蛋白高表达的食管鳞癌患者总生存率下降（P=0.002）。5.食管鳞癌患者组织中的MRDI蛋白表达与低分化（P=0.010）、肿瘤浸润程度深（病理T分期）（P=0.015）和血管侵犯与否（脉管癌栓）（P=0.047）有关。6.食管鳞癌细胞EC109和EC9706中MRDI表达被调低后,细胞的侵袭、迁移和增殖能力均减弱。结论1.MRDI蛋白表达量与食管鳞癌患者的生存及预后相关,MRDI蛋白高表达的食管鳞癌患者3年总生存率降低。2.食管鳞癌中MRDI蛋白表达变化早于细胞形态学改变,而MRDI蛋白的质膜前缘积聚现象可能是肿瘤逐步进展的“先驱信号”。3.在食管鳞癌中,MRDI充当癌基因的作用,影响细胞的侵袭、迁移和增殖过程。

关键词： MRDI 食管鳞癌侵袭迁移 RhoA

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