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鲸类mln和mlnR的适应性进化及蛋白功能分析

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鲸类MLN和MLNR的适应性进化及蛋白功能分析

作者：武云娥南京师范大学

学位级别：硕士

鲸类(Cetaceas)是一类在进化上具有十分重要意义的次生性水生哺乳动物,距今约55-53百万年前其祖先由陆地进入海洋,伴随着形态的巨大改变以及快速适应辐射,逐渐演变成海洋哺乳动物中的优势物种。鲸类由陆地进入海洋的过程中,能量储存和... 详细信息

鲸类(Cetaceas)是一类在进化上具有十分重要意义的次生性水生哺乳动物,距今约55-53百万年前其祖先由陆地进入海洋,伴随着形态的巨大改变以及快速适应辐射,逐渐演变成海洋哺乳动物中的优势物种。鲸类由陆地进入海洋的过程中,能量储存和保持体温是面临的重要的挑战,为了应对这种极端坏境,鲸类形成了厚厚的鲸脂层。本研究主要针对鲸类胃动素受体(motilin receptor,mlnR)和其配体胃动素(motilin,mln)的适应性进化过程以及功能进行实验研究。mln是一种由十二指肠黏膜的Mo细胞分泌的消化道激素,是胃肠蠕动的重要内分泌调节因子,参与形成小肠第三阶段的周期性移行性复合体,在哺乳动物的消化过程中发挥着重要的作用。遗传学研究表明,mlnR在小鼠等啮齿类动物中缺失,mln也在部分啮齿类动物中以假基因的形式存在,仅在奥氏更格卢鼠中存在完整的、有潜在生物功能的、保守的ORF序列。聚合酶链式反应(PCR)技术扩增出12种鲸类mlnR基因以及16种鲸类mln基因的完整ORF序列,发现除了弓头鲸外,其他11种鲸类的mlnR基因提前终止,以假基因的形式存在;4种鲸类的mln基因提前终止。通过ClustalX和MEGA6软件对序列进行分析,选择牛的mlnR作为对照,分析导致提前终止的插入、缺失或点突变,将各mlnR假基因的第一个提前终止的密码子标注到蛋白的二级结构上,发现这些突变均导致蛋白二级结构的缩短,从而使其功能丧失。鲸类物种中,只有弓头鲸是唯一一个保存完整的mlnR-mln受体-配体对的物种,而虎鲸等11种鲸类的mlnR变成假基因,只保存完整的mln。为了进一步了解上述不同鲸类对mlnR和mln保留情况的差异是否与水生环境相适应,即鲸类现存的mlnR和mln基因的适应性进化过程,我们使用PAML和Datamonkey分析软件对mlnR和mln进行选择压力分析,结果表明,mlnR和mln基因在鲸类中受到正选择作用,提示二者在鲸类进化过程中发生了适应性进化。根据文献报道以及选择压力分析结果,我们猜测mln可以促进鲸类脂肪的堆积,可能与鲸脂层的厚度有关。通过3T3-L1前脂肪细胞的诱导实验检测脂滴的形成、脂肪细胞分化marker基因PPARγ(过氧化物酶体增殖激活受体)的表达量以及成熟脂肪细胞对脂肪酸的摄取,证明化学合成的虎鲸mln蛋白确实可以促进3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,PPARγ表达量增多,并能够促进成熟脂肪细胞对脂肪酸的摄取过程。有意思的是,在脂肪酸摄取实验中,虎鲸的mln蛋白的作用效果比牛及人的mln蛋白更加明显,说明mln的功能在鲸类中发生了适应性进化,从而为其适应水生环境提供保障。由于鲸类物种中,只有弓头鲸是唯一一个保存完整的mlnR-mln受体-配体对的,通过Ca检测法验证了弓头鲸的mln和mlnR确实保留着完整的功能,根据演化生物学分析,我们猜测mlnR在弓头鲸中出现了新的功能。

关键词：鲸类 mln mlnR 适应性进化正选择鲸脂假基因

用群论的方法确定mln的中央体各种可能的δ杂化方案

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阜阳师范学院学报（自然科学版） 1989年第2期6卷 52-63页

作者：吴杰颍阜阳师范学院化学系

本文的中心谈了群论在σ杂化轨道方面的应用。文章分三个部分:第一部分,阐明用群论的方法确定mln中央体各种可能的σ杂化方案的基本原理;第二部分通过实例来说明整个处理过程;第三部分用表格形式列出常见配合物mln的中央体可能采取的σ... 详细信息

本文的中心谈了群论在σ杂化轨道方面的应用。文章分三个部分:第一部分,阐明用群论的方法确定mln中央体各种可能的σ杂化方案的基本原理;第二部分通过实例来说明整个处理过程;第三部分用表格形式列出常见配合物mln的中央体可能采取的σ杂化类型,给出第三、第六周期元素作为配位化合物的中央体的σ杂化方案。

关键词：中央体 mln 杂化轨道群论配位化合物正八面体不可约表示平面三角形表格形式处理过程

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CD68+Mφ在双峰驼小肠和mln中的分布特点

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CD68+Mφ在双峰驼小肠和MLN中的分布特点

大鼠Gast和mln mRNA荧光定量PCR检测方法的建立

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会

作者：李淑娴郭明刚王雯慧甘肃农业大学动物医学院

为了探讨CD68分子标记物标记的巨噬细胞(macrophage,Mφ)在双峰驼小肠和肠系膜淋巴结(mesenteric lymphoid nodes,mln)中的分布规律和形态特点,采用SABC免疫组织化学技术对10峰成年个体的小肠和mln不同部位的Mφ进行了定位和观察。结果... 详细信息

为了探讨CD68分子标记物标记的巨噬细胞(macrophage,Mφ)在双峰驼小肠和肠系膜淋巴结(mesenteric lymphoid nodes,mln)中的分布规律和形态特点,采用SABC免疫组织化学技术对10峰成年个体的小肠和mln不同部位的Mφ进行了定位和观察。结果显示,免疫组化染色显示CD68+Mφ形态呈椭圆形和圆形,椭圆形CD68+Mφ胞核较小呈椭圆形或肾形,胞浆丰富呈棕黄色阳性表达,主要分布在靠近小肠黏膜肌层的肠腺周围(深层肠腺周围)和黏膜下层,在mln中少见分布。圆形CD68+Mφ分布在小肠肠绒毛、mln胸腺依赖区和髓质淋巴窦等处,然而肠绒毛和浅层肠腺周围处分布数量较少。另外,在黏膜下层和mln胸腺依赖区,CD68+Mφ集中分布在毛细血管周围。结论:CD68+Mφ具有两种不同的形态提示它们可能发挥着不同的免疫功能,而且CD68+Mφ较密集分布在毛细血管周围和淋巴窦中,这种分布现象说明它能更加快速有效地吞噬来自血液和淋巴液内的凋亡细胞和病原微生物,并向T细胞呈递抗原从而刺激活化T细胞。

关键词：双峰驼小肠 mln CD68+Mφ

来源： cnki会议评论

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科技风 2015年第11期 74-74,79页

作者：蒋宁辽宁中医药大学辽宁沈阳110847

目的:建立一种逆转录-实时定量PCR(R T-Q PCR)检测大鼠胃组织中胃泌素(Gast)和胃动素(mln)m R N A表达的方法。方法:提取大鼠胃组织总RNA,逆转录合成c DNA,利用SYBRGreen荧光染料法实时检测Gast和mlnm RNA的表达水平。通过溶解曲线分析... 详细信息

目的:建立一种逆转录-实时定量PCR(R T-Q PCR)检测大鼠胃组织中胃泌素(Gast)和胃动素(mln)m R N A表达的方法。方法:提取大鼠胃组织总RNA,逆转录合成c DNA,利用SYBRGreen荧光染料法实时检测Gast和mlnm RNA的表达水平。通过溶解曲线分析检测特异性,以管家基因β-actin为内参对Gast和mln进行定量分析。结果:建立的大鼠Gast和mlnm RNART-QPCR检测方法具有良好的特异性和敏感性。结论:成功建立RT-QPCR检测Gast和mlnm RNA基因表达的方法。

关键词： Gast mln 大鼠定量PCR 实验方法

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China Textile Giant Acquires U.S. Garment Firm for $120 mln

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China Textile 2008年第2期 6-6页

Youngor Group Co., Ltd., China’s leading textile manufacturer, has acquired XinMa Apparel International Limited for 120 million U.S. dollars, the

关键词： Garment Firm for China Textile Giant Acquires U.S mln

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向您推荐:mln—18联合碾米设备

农家顾问 1995年第8期 32-32页

作者：余中方湖北安陆粮机厂科研所

mln—18联合碾米设备是由筛选去石组合机、高频低幅重力谷糙分离机、砂辊喷风碾米机、碎米清理分选筛、提升机、电气控制箱等设备组合而成,主要适合于小型粮食加工精米厂。其特点是——

关键词： mln 碎米

12041 mln 02治疗溃疡性结肠炎有效

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国外药讯 2005年第12期 17-17页

作者：李雅娟（摘）

据加拿大和美国的研究者报道，人单克隆抗体抵抗α4β7粘合素（inttgren）mln 02（Ⅰ）治疗溃疡性结肠炎患者可能是有效的。

关键词：溃疡性结肠炎治疗 mln 人单克隆抗体 α4β7 研究者加拿大粘合素

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烧伤后一次性进食预防肠道醇母菌的入侵

国际骨科学杂志 1990年第3期 166-167页

作者：陈玉林

近年研究提示,烧伤后第一个24小时小肠内白色念珠菌（CA）穿透肠壁的能力增强,它能通过肠管上皮细胞进入肠系膜淋巴结（mln）。作者取体重为300～400g的雌性豚鼠,先分笼在恒温条件下饲养1～2周。实验前将烧伤病人血液中分离出的CA进行... 详细信息

近年研究提示,烧伤后第一个24小时小肠内白色念珠菌（CA）穿透肠壁的能力增强,它能通过肠管上皮细胞进入肠系膜淋巴结（mln）。作者取体重为300～400g的雌性豚鼠,先分笼在恒温条件下饲养1～2周。实验前将烧伤病人血液中分离出的CA进行培养增殖后调整浓度为6x10;/ml,在烧伤前1小时将该菌液5ml通过饲喂管给实验动物灌胃。然后在麻醉下将躯干去毛,并在烧伤前按50ml/kg计算

关键词：皮质醇 mln 念珠菌

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烧伤面积与肠道细菌易位置的关系

国际骨科学杂志 1994年第2期 95-96页

作者：霍正录

感染性并发症和脓毒症仍是影响烧伤预后的主要因素。近年来的研究强调,胃肠道是烧伤后内源性细菌和内毒素播散的潜在来源。本研究通过制成不同烧伤面积和细菌易位范围关系的动物模型,借以了解烧伤引起的肠道通透性改变和宿主免疫系统清... 详细信息

感染性并发症和脓毒症仍是影响烧伤预后的主要因素。近年来的研究强调,胃肠道是烧伤后内源性细菌和内毒素播散的潜在来源。本研究通过制成不同烧伤面积和细菌易位范围关系的动物模型,借以了解烧伤引起的肠道通透性改变和宿主免疫系统清除细菌的能力对细菌易位的影响。实验用Balb/C鼠,体重20～22g,

关键词：肠道细菌易位 SK mln TBSA 烧伤面积