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姜黄素通过调控组蛋白乙酰化修饰上调乳腺癌mcf-7和mcf-7/dox细胞中MDR1表达

中国临床药理学与治疗学 2017年第5期22卷 512-517页

作者：李絮代谊黄家凤温纯洁邹镇吴兰香王果周宏灏重庆医科大学生命科学研究院重庆400016 中南大学临床药理研究所

目的:从组蛋白乙酰化修饰角度探讨姜黄素上调乳腺癌mcf-7和mcf-7/dox细胞中多药耐药基因1(multidrug resistance protein 1,MDR1)表达水平的作用机制。方法:CCK-8(Cell Counting Kit-8)法观察姜黄素对mcf-7和mcf-7/dox细胞生长增殖以及多柔比星敏感性的影响;Realtime PCR和Western blot方法检测姜黄素处理前后两种细胞中MDR1 mRNA和蛋白质表达水平的变化;染色质免疫共沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)检测姜黄素对两种细胞中MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4乙酰化水平的影响。结果:不同浓度姜黄素处理72 h对mcf-7和mcf-7/dox细胞的生长增殖有显著抑制作用,其IC50值分别为22.03μmol/L和27.46μmol/L;10μmol/L姜黄素处理72 h可显著提高两种细胞多柔比星敏感性,多柔比星IC50值分别下降了57.14%和54.52%(Pmcf-7和mcf-7/dox细胞后,MDR1在mRNA水平分别上调(32.90±0.96)和(5.70±0.55)倍(Pmcf-7和mcf-7/dox细胞多柔比星敏感性的同时,可通过调控MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4的乙酰化水平而上调MDR1的表达。

关键词：姜黄素 mcf-7 mcf-7/dox 多药耐药基因1 乙酰化

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Hesperidin as a preventive resistance agent in mcf-7 breast cancer cells line resistance to doxorubicin

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Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine 2014年第3期4卷 228-233页

作者： Rifki Febriansah Dyaningtyas Dewi P.P. Sarmoko Nunuk Aries Nurulita Edy Meiyanto Agung Endro Nugroho Cancer Chemoprevention Research Center Faculty of PharmacyUniversitas Gadjah Mada YogyakartaIndonesia Pharmacy study programme Faculty of Medicine and Health SciencesUniversitas Muhammadiyah YogyakartaYogyakartaIndonesia Faculty of Pharmacy Universitas Jenderal SoedirmanPurwokertoIndonesia Faculty of Pharmacy Universitas Muhammadiyah PurwokertoPurwokertoIndonesia

Objective:To evaluate of hesperidin to overcome resistance of doxorubicin in mcf-7 resistant doxorubicin cells(mcf-7/dox)in cytotoxicity apoptosis and P-glycoprotein(Pgp)expression in combination with ***:The cytotoxic properties.50%inhibition concentration(IC_(50))and its combination with doxorubicin in mcf-7 cell lines resistant to doxorubicin(mcf-7/dox)cells were determined using MTT *** induction was examined by double staining assay using ethidium bromide-acridine *** assay was performed to determine the level and localization of ***:Single treatment of hesperidin showed cytotoxic activity on mcf-7/dox cells with IC_(50)value of 11μmol/***,combination treatment from hesperidin and doxorubicin showed addictive and antagonist effect(CI>1.0).Hesperidin did not increase the apoptotic induction,but decreased the Pgp expressions level when combined with doxorubicin in low ***:Hesperidin has cytotoxic effect on mcf-7/dox cells with IC_(50)of 11μmol/*** did not increased the apoptotic induction combined with *** application of doxorubicin and hesperidin on mcf-7/dox cells showed synergism effect through inhibition of Pgp expression.

关键词： Hesperidin doxorubicin mcf-7/dox cells line Apoptosis Pgp expression

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The reversal effects of piperine and(R)-(+)-citronellal on multidrug resistant breast cancer cells

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2016年第5期25卷 351-356页

作者：周毅王婷赵佳佳王凌蒋学华重庆医科大学附属第一医院药学部重庆400016 四川大学华西药学院靶向药物及释药系统教育部重点实验室四川成都610041

Multidrug resistance （MDR） in tumor cells can reduce the efficacy of chemotherapy. Overexpression of transporters is an important mechanism for MDR. P-glycoprotein （P-gp） is an ATP-binding cassette transporter frequently expressed in multidrug resistant tumor cells, inducing MDR. To reverse P-gp dependent MDR, anticancer drugs can be administered with P-gp inhibitors. Piperine and （R）-（＋）-citronellal both are P-gp inhibitors from dietary sources. In the present study, we aimed to evaluate the MDR reversal effects of piperine and （R）-（＋）-citronellal in multidrug resistant mcf-7/dox cells. The results of cytotoxicity studies indicated that piperine and （R）-（＋）-citronellal both could abate the resistance of mcf-7/dox after 72-h incubation. After 72-h incubation, piperine could dose-dependently down-regulate the MDR1 expression at the mRNA level, while （R）-（＋）-citronellal had no effect on the MDR1 expression. Therefore, piperine and （R）-（＋）-citronellal both could reverse MDR in mcf-7/dox cells, and the reversal effect ofpiperine was related to dose-dependent down-regulation of the MDR1 expression at the mRNA level.

关键词： MDR1 Piperine (R)-(+)-Citronellal mcf-7/dox P-Glycoprotein

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The reversal effect of capsaicin on doxorubicin-resistant breast cancer cells

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2021年第8期30卷 666-674页

作者： Yi Zhou Ting Wang Jiajia Zhao Xuehua Jiang Department of Pharmacy the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical UniversityChongqing 400016China Key Laboratory of Drug Targeting and Drug Delivery System West China School of PharmacySichuan UniversityChengduSichuan 610041China Department of Pharmacy Sichuan Cancer Hospital&InstitutionChengduSichuan 610041China

Overexpression of P-glycoprotein(P-gp),encoded by the MDR1 gene,in tumor cells curtails the efficacy of chemotherapy,leading to multidrug resistance(MDR),which can be reversed by the P-gp ***,the principal pungent component of hot chili,is a reported P-gp inhibitor with anti-cancer *** the present study,we aimed to evaluate the MDR reversal effect of *** mcf-7/dox cells were treated with capsaicin for a short term(3 h)or long term(72 h).The cytotoxicity studies were completed by using the SRB ***-PCR method was utilized to evaluate the effect of capsaicin on the expression of MDR1 at the m RNA *** accumulation and subcellular distribution studies were implemented to further investigate the reversal effect of *** effect of capsaicin on the ATP production of mitochondria was also *** results of the cytotoxicity study indicated that capsaicin(50μM)reversed the resistance of mcf-7/dox cells to doxorubicin(dox)with the reversal fold of 4.68,and concentration-dependently down-regulated the expression of MDR1 at the m RNA level after long-term(72 h)*** short-term(3 h)incubation,capsaicin reversibly and concentration-dependently increased the accumulation of dox into mcf-7/dox cells and induced a different subcellular distribution of dox compared with verapamil as a positive *** ATP production of mitochondria was also concentration-dependently inhibited by *** conclusion,capsaicin was capable of reversing the resistance of mcf-7/dox cells to dox,making it a promising lead compound for MDR reversal.

关键词： MDR1 Capsaicin mcf-7/dox P-glycoprotein

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氟哌啶醇与新型人重组肿瘤坏死因子逆转肿瘤细胞耐药机制的研究

氟哌啶醇与新型人重组肿瘤坏死因子逆转肿瘤细胞耐药机制的研究

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作者：周京红中国人民解放军军事医学科学院

学位级别：硕士

本文研究的目的是为了在临床应用的药理活性物质中探寻逆转肿瘤耐药性的新药。重点研究了氟哌啶醇(Haloperidol，Hal)及新型人重组肿瘤坏死因子rhTNF-NC对人红白血病耐阿霉素(doxorubicin，dox)细胞株K562／dox及人乳癌耐阿霉素细胞株MC... 详细信息

本文研究的目的是为了在临床应用的药理活性物质中探寻逆转肿瘤耐药性的新药。重点研究了氟哌啶醇(Haloperidol，Hal)及新型人重组肿瘤坏死因子rhTNF-NC对人红白血病耐阿霉素(doxorubicin，dox)细胞株K562／dox及人乳癌耐阿霉素细胞株mcf—7／dox多药耐药性(Multidrug resistance，MDR)的逆转及其机制。此外，还观察了中药提取物ZYY-6、新合成药LY980503的逆转作用及其机制。应用MTT法及乳酸脱氢酶(LDH)法测定了细胞对0-20umol／L阿霉素(dox)的敏感性。RT-PCR法分析Hal、rhTNF-NC、ZYY-6处理后MDR1、MRP和GST π，TopoⅡαmRNA表达的变化。通过流式细胞术观察0、6.25、12.5、25umol／L Hal对细胞内dox蓄积和细胞周期进程的影响，同时也观察了rhTNF-NC对细胞内dox蓄积的影响。应用MOAE荧光染料探针荷载细胞，通过日立F4500荧光分光光度计测定细胞荧光强度来检验Hal及rhTNF-NC对瘤细胞体积激活的氯离子通道的影响。应用Fura2／AM荧光探针染料(用于单层贴壁细胞mcf-7／dox)及库尔特频道测定仪(用于悬浮细胞K562／dox)测定了低渗环境下细胞的体积调节功能(Regulatory volume decrease，RVD)。此外，还观察了反义PKC。基因转染了耐药细胞后氯离子通道及细胞体积的变化。氟呱陡醇和新型人重组肿瘤坏死因子逆转肿瘤耐药机理的研究第一部分实验证明Hai对K562/dox的耐药性具有明显的逆转作用。在1 2.5、 6.25及3.125umol/L时的逆转倍数分别为9.06、4.33及2.19。rh1NF一NC在500及 500OLI/mL时也可逆转K562/dox细胞对dox的耐药性2.51与5.33倍。当Hal3.125 umol/L及rhTNF一NC500u/mL联合应用时逆转作用可以相加，其逆转倍数在 K562/dox细胞可由单用时的2.19及2.51倍，增加到5.01倍;在mcf一7/dox细胞中Hal和rh1NF一NC也表现出逆转耐药的作用，并且由两药单用时的2 .28及2 .18 倍增至合用时的5.27倍。量一效曲线分析表明Hal及th1NF一NC可将耐药细胞的 dox浓度一效应曲线平行上移，与单用dox比较Pdox3天后，其MDRI 及M对的mRNA表达水平均呈现时间依赖性明显降低，分别较原水平下降76.29% 及64.63%。GST，mRNA表达于药后d2下降66.06%，于d3回升。rhTNF一NC也表现相似的对MDRI，MRP及GST:mRNA的抑制作用，2500川mLthTNF处理 K562/dox细胞3天后MDRI、MRP、GST:可分别下降59.52%、65.52%及57.93%， rhTNF一NC还可使Topoll。基因由0.37士0.11升高077士0.07。当6.25umo比Hal与 1000侧mL rhTNF一NC合用时，对MDRI的抑制作用呈现明显相加，由单用时的抑制率31.3%及33.17%升高为62.03%。ZYY一6也表现相似的抑制作用。FCM的检测结果表明Hal处理细胞th后，dox在K562/dox细胞内的蓄积量(以荧光强度表示)明显增加，并呈浓度依赖性。单用1.25或sumol/L dox时的荧光强度分别为6 .67士1.31和20，12士5.67。当6，25、12.5或25 umol/L Hal与1‘25 umol/L的dox 合用时，荧光值可分别增加至10.01士2.05、一3.33士2.43及17.44士2.69，与5 umol/L dox合用时可分别增加至23.87士5.05、26.19士7.35和30.33士6.81。thTNF一C也表现类似的增加细胞内dox蓄积的作用。5000u/m L th1NF一NC可使5 umol/L dox引导的K562/dox细胞的凋亡率由3.78士0.56%增加到6.89士0.12%(与单用dox比较pdox对K562/dox细胞的GZ/M阻滞作用，而且这一增强作用呈现明显的量一效关系。3.125、12.5和25LImol/L Hal可使阻断在GZ/M期的细胞由单用sumol几dox时的9.9士4.3%，上升至合用时的16.3士 5.5%、23.4士3.0%及37.6士7.0%与单用时比较P<0.01。氟呱咙醇和新型人重组肿瘤坏死因子逆转肿瘤耐药机理的研究第三部分:逆转耐药的药物影响P一gP的研究

关键词：氟哌啶醇重组人肿瘤坏死因子多药耐药 K562/dox mcf-7/dox 氯离子通道

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