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3种mapk抑制因子对亚砷酸钠活化LX-2细胞TGF-β1和α-SMA的影响

中华地方病学杂志 2019年第2期38卷 96-100页

作者：谢万生胡婷张琦李晓之段恬筱杨兴罗鹏贵州医科大学公共卫生学院贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025

目的探究3种丝裂原活化蛋白激酶(mapk)抑制因子对亚砷酸钠活化的人肝星状细胞(LX-2细胞)中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白表达的影响。方法采用体外细胞培养方法,将处于对数生长期的LX-2细胞分别暴露于0... 详细信息

目的探究3种丝裂原活化蛋白激酶(mapk)抑制因子对亚砷酸钠活化的人肝星状细胞(LX-2细胞)中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白表达的影响。方法采用体外细胞培养方法,将处于对数生长期的LX-2细胞分别暴露于0.0(对照)、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L亚砷酸钠培养液中24h,CCK-8法检测细胞存活率。根据结果将LX-2细胞分为5组:对照组、亚砷酸钠组、细胞外信号调节激酶(ERK)抑制组、c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制组、p38抑制组。3个抑制组分别用10.0μmol/LERK、JNK、p38激酶抑制剂(PD98059、SP600125、SB203580)预先干预LX-2细胞30min,再加入20.0μmol/L亚砷酸钠培养24h;对照组不加亚砷酸钠和抑制剂;亚砷酸钠组不加抑制剂。采用蛋白印迹法(Westernblot)和实时荧光定量PCR法检测LX-2细胞内TGF-β1、α-SMAmRNA和蛋白表达水平。结果5.0、10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L亚砷酸钠组LX-2细胞存活率[(92.35±0.92)%、(84.06±0.84)%、(74.27±0.74)%、(59.57±0.60)%、(27.77±0.23)%]明显低于对照组[(100.00±0.00)%,P均抑制组TGF-β1、α-SMAmRNA和蛋白表达低于亚砷酸钠组(P均mapk抑制因子干预可以改善砷诱导LX-2细胞活化过程中对TGF-β1、α-SMAmRNA和蛋白表达的影响。

关键词：砷剂星形细胞,星状细胞 mapk抑制因子转化生长因子-β1 α-平滑肌动蛋白

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