3种MAPK抑制因子对亚砷酸钠活化LX-2细胞TGF-β1和α-SMA的影响

作     者：谢万生 胡婷 张琦 李晓之 段恬筱 杨兴 罗鹏 Xie Wansheng;Hu Ting;Zhang Qi;Li Xiaozhi;Duan Tianxiao;Yang Xing;Luo Peng

作者机构：贵州医科大学公共卫生学院贵阳550025 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵阳550025 

出 版 物：《中华地方病学杂志》 (Chinese Journal of Endemiology)

年 卷 期：2019年第38卷第2期

页      面：96-100页

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81660835) 

主　　题：砷剂 星形细胞,星状细胞 MAPK抑制因子 转化生长因子-β1 α-平滑肌动蛋白 

摘      要：目的探究3种丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制因子对亚砷酸钠活化的人肝星状细胞(LX-2细胞)中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白表达的影响。方法采用体外细胞培养方法,将处于对数生长期的LX-2细胞分别暴露于0.0(对照)、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L亚砷酸钠培养液中24h,CCK-8法检测细胞存活率。根据结果将LX-2细胞分为5组:对照组、亚砷酸钠组、细胞外信号调节激酶(ERK)抑制组、c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制组、p38抑制组。3个抑制组分别用10.0μmol/LERK、JNK、p38激酶抑制剂(PD98059、SP600125、SB203580)预先干预LX-2细胞30min,再加入20.0μmol/L亚砷酸钠培养24h;对照组不加亚砷酸钠和抑制剂;亚砷酸钠组不加抑制剂。采用蛋白印迹法(Westernblot)和实时荧光定量PCR法检测LX-2细胞内TGF-β1、α-SMAmRNA和蛋白表达水平。结果5.0、10.0、20.0、40.0、80.0μmol/L亚砷酸钠组LX-2细胞存活率[(92.35±0.92)%、(84.06±0.84)%、(74.27±0.74)%、(59.57±0.60)%、(27.77±0.23)%]明显低于对照组[(100.00±0.00)%,P均0.05]。亚砷酸钠组TGF-β1、α-SMAmRNA和蛋白表达高于对照组(P均0.01);3个抑制组TGF-β1、α-SMAmRNA和蛋白表达低于亚砷酸钠组(P均0.05)。结论砷暴露可引起LX-2细胞中TGF-β1、α-SMAmRNA和蛋白表达异常升高,3种MAPK抑制因子干预可以改善砷诱导LX-2细胞活化过程中对TGF-β1、α-SMAmRNA和蛋白表达的影响。