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生理科学进展 2002年第1期33卷 25-25页

作者：郑瑞茂邹长江

Orexin-A对肠缺血再灌注大鼠肠功能损伤的保护作用及潜在机制研究

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Orexin-A对肠缺血再灌注大鼠肠功能损伤的保护作用及潜在机制研究

作者：荆保华青岛大学

学位级别：硕士

目的:肠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤常可发生在出血性休克、小肠移植及严重外伤等过程中,可引起小肠收缩力降低、微血管通透性升高以及肠黏膜屏障功能下降,进而可导致多脏器功能衰竭。食欲素(Orexins)是一种脑肠肽,主要... 详细信息

目的:肠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤常可发生在出血性休克、小肠移植及严重外伤等过程中,可引起小肠收缩力降低、微血管通透性升高以及肠黏膜屏障功能下降,进而可导致多脏器功能衰竭。食欲素(Orexins)是一种脑肠肽,主要分布于下丘脑,但其受体广泛分布于中枢及外周组织,包括胃肠道系统的各个部分,如肌间神经丛、粘膜下神经丛、胃肠道黏膜以及平滑肌等。Orexins主要参与摄食、能量平衡、心血管功能以及应激等功能调控。但关于orexins在肠缺血再灌注损伤中的作用,尤其是对肠缺血之后对肠运动功能和肠神经系统保护作用尚未见报道。本课题通过构建肠缺血再灌注模型,探讨在肠缺血再灌注之前给予orexin-A静脉灌注对肠收缩活性、摄食及肠神经元的保护作用及潜在机制。方法:选用雄性Wistar大鼠,制备大鼠空肠平滑肌条,分别给予10m、10m、10m orexin-A,观察不同浓度orexin-A对空肠肌条收缩的影响;预先分别以SB-334867、一氧化氮合酶神经元型(nNOS)、选择性抑制剂N’-硝基-L-精氨酸(L-NNA)、m受体阻断剂阿托品、或Na通道阻滞剂河豚毒素(TTX)预先孵育空肠肌条,观察orexin-A促肌条收缩效应的影响,分析该效应潜在机制。采用夹闭肠系膜上动脉45min再灌注90min建立肠缺血再灌注大鼠模型;通过肠缺血再灌注前尾静脉微量注射泵注射orexin-A(500 pmol/Kg/min)30min,观察orexin-A对离体大鼠空肠平滑肌条收缩活动的影响;采用肠缺血再灌注前尾静脉灌注orexin-A 30min,观察I/R大鼠术后小肠推进率和摄食变化;通过荧光免疫组化或TUNEL等研究方法,观察orexin-A预处理对I/R大鼠肠粘膜上皮细胞形态学、凋亡、以及肠肌间神经丛神经元表达的影响;采用Western blot、Elisa等方法,检测空肠组织凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax以及Caspase-3)和过氧化或炎性反应相关因子(丙二醛、谷胱甘肽和髓过氧化物酶)的改变。结果:在正常大鼠,Orexin-A剂量依赖性促进空肠肌条收缩(P334867预先孵育,可完全阻断orexin-A促肌条收缩效应(P30min,可明显改善上述肌条收缩减弱现象(P3天始摄食量明显增加(P受体3(m3)和Bcl-2表达均显著降低(P3表达量显著升高(Pm3和Bcl-2表达显著回升(P3表达回降(PmDA(PmPO(PmDA和mPO含量显著降低(P<0.05),GSH含量显著升高(P<0.05)

关键词： Orexin-A 缺血再灌注损伤 M3受体氧自由基大鼠

丙酸对山羊血液理化指标、真胃组织结构及相关基因表达的影响

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丙酸对山羊血液理化指标、真胃组织结构及相关基因表达的影响

作者：刘威扬州大学

学位级别：硕士

奶牛真胃变位是奶牛业生产中一种常见内科疾病,但其发病机制尚不清楚。丙酸作为反刍动物体内挥发性脂肪酸（Volatile fatty acids, VFA）重要组成部分,有研究表明VFA蓄积对真胃运动有一定抑制作用。本实验通过手术安装的瘤胃瘘管向山羊... 详细信息

奶牛真胃变位是奶牛业生产中一种常见内科疾病,但其发病机制尚不清楚。丙酸作为反刍动物体内挥发性脂肪酸（Volatile fatty acids, VFA）重要组成部分,有研究表明VFA蓄积对真胃运动有一定抑制作用。本实验通过手术安装的瘤胃瘘管向山羊瘤胃内灌注不同剂量的丙酸,检测丙酸对山羊血液理化指标、真胃组织结构及相关基因表达的影响,为真胃变位的发病机制提供实验资料。选取健康山羊12只,体重30.0±2.6 kg,随机分为4组：对照组、低剂量组、中剂量和高剂量组。每天向试验组山羊瘤胃内分别灌注0.5 g/kg、1.0 g/kg和1.2 g/kg的丙酸,对照组山羊灌注等量生理盐水,连续灌注一周。每天灌注后4h采集血液和瘤胃液,检测血常规、血液生化、瘤胃液pH值和VFA含量。灌注丙酸一周后,于次日手术采集山羊真胃组织样品,用于病理组织学观察和用荧光定量PCR法检测m2、m3和eNOS的mRNA表达水平。试验结果如下：1.灌注丙酸后,与对照组相比,三个试验组山羊的肝、肾功能相关指标和血钙含量均未见明显变化（P＞0.05）,高剂量组山羊血糖含量极显著升高（P＜0.01）,低、中和高剂量组山羊的血液白细胞数和红细胞数均未出现显著变化（P＞0.05）。2.灌注丙酸后,与对照组相比,低、中和高组山羊瘤胃内pH值均无明显变化（P＞0.05）;低、中剂量组山羊瘤胃内乙酸、丙酸和丁酸的浓度和高剂量组山羊瘤胃内乙酸浓度均未出现显著变化（P＞0.05）;高剂量组山羊瘤胃内丙酸和丁酸浓度均极显著升高（P＜0.01）。3.灌注丙酸后,进行真胃壁病理组织学观察,在低、中剂量组山羊真胃黏膜层未见明显异常;高剂量组山羊真胃黏膜上皮形成的胃小凹消失,单层柱状上皮细胞形态消失,固有层中腺体分布排列松散、不规则,黏膜肌层平滑肌肌纤维连续性消失。4.灌注丙酸后,在山羊真胃壁组织中见有m2、m3和eNOS的mRNA表达。与对照组相比,低、中剂量组山羊真胃黏膜层和全层组织中m2、m3和eNOS的mRNA表达量没有显著变化（P＞0.05）,但高剂量组山羊真胃黏膜层和全层组织中m2和m3的mRNA表达量下降极显著P＜0.01), eNOS的mRNA表达量极显著升高（P＜0.01）。综上所述,丙酸对山羊血常规和血液相关生化指标无显著影响,但是高剂量组山羊血糖含量升高且真胃黏膜层组织发生明显病变,真胃黏膜层和全层组织中m2和m3的mRNA表达量下调,eNOS的mRNA表达量有不同程度的上调,这可能是丙酸诱导真胃蠕动减弱、继而导致真胃变位的主要原因。

关键词：山羊丙酸 m2受体 M3受体内皮型一氧化氮合酶

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心律失常发病机制研究进展

国际药学研究杂志 2010年第2期37卷 81-88页

作者：杨宝峰蔡本志哈尔滨医科大学药学院药理学教研室省部共建生物医药国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150081

心律失常是心血管疾病常见的临床表现形式,尤其是室性心动过速、心室颤动等恶性心律失常,不但加重原有心脏疾病,还可诱发心源性猝死。目前抗心律失常药物的疗效并不十分理想,总有效率只有30%～60%。人们对心律失常作用机制的认识仍有限... 详细信息

心律失常是心血管疾病常见的临床表现形式,尤其是室性心动过速、心室颤动等恶性心律失常,不但加重原有心脏疾病,还可诱发心源性猝死。目前抗心律失常药物的疗效并不十分理想,总有效率只有30%～60%。人们对心律失常作用机制的认识仍有限,因此,揭示心律失常发生的深层机制,寻找新的作用靶点是抗心律失常研究领域的重点、难点。近年人们发现心房特异性钾离子通道电流IKur、IKAch等参与了心房颤动,这使心房颤动治疗的研究向前推进一步。钙渗漏、缝隙连接蛋白及钙通道自身抗体在心律失常发生中发挥重要作用。这些发现为开发更有效的抗心律失常药物提供了理论基础。近年研究发现,一类调控基因的小分子RNA(microRNA,miRNA)在心血管疾病的发生、发展中起重要作用,特别是对心律失常及其引起的猝死起关键作用。miR-1、miR-133、miR-590等对心肌缺血、心肌梗死伴随的心律失常表现出明显调控作用。miRNA的生物学特性是同时对多个靶点具有调控作用,这使其具有成为理想抗心律失常靶点的潜力,为心律失常及猝死的防治带来希望。

关键词：心律失常离子通道小分子RNA M3受体心房颤动缝隙连接蛋白心肌梗死 AT1受体溶血磷脂酰胆碱类

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前列腺组织中m受体亚型的表达及意义

山东大学学报（医学版） 2009年第8期47卷 107-110页

作者：袁明振赵升田孟彦葛南刘玉强王洪伟许纯孝山东大学第二医院泌尿外科山东大学泌尿外科研究所济南250033

目的检测不同前列腺组织中m1、m2、M3受体亚型的表达,分析其在前列腺肿瘤发生发展中的作用。方法取正常前列腺、良性前列腺增生(BPH)、前列腺癌标本各36例。采用蛋白免疫印迹(Western-blot)方法分别检测各组标本中m1、m2、M3受体,免疫... 详细信息

目的检测不同前列腺组织中m1、m2、M3受体亚型的表达,分析其在前列腺肿瘤发生发展中的作用。方法取正常前列腺、良性前列腺增生(BPH)、前列腺癌标本各36例。采用蛋白免疫印迹(Western-blot)方法分别检测各组标本中m1、m2、M3受体,免疫组织化学染色法检测人白细胞分化抗原34(CD34)的蛋白表达;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组标本中M3受体的基因表达。结果Western-blot检测结果显示,正常前列腺组织中m2受体表达(0.334 8±0.151 5)高于m1与m3(0.18±0.08;0.27±0.11),Pm2与M3受体表达(0.36±0.15;0.37±0.15)高于m1(0.18±0.07),PM3受体表达(0.48±0.16)高于m1与m2(0.20±0.05;0.41±0.12),PM3受体的基因表达(0.84±0.19)高于BPH组织(0.67±0.16)和正常前列腺组织(0.54±0.16),P34蛋白表达在前列腺癌组织微血管密度(44.89±8.43)高于BPH组织(18.44±7.10),在正常前列腺组织表达最低(10.97±4.48),Pm1、m2、m33种受体在不同前列腺组织中有不同程度的表达,其中M3受体表达变化最大,与前列腺肿瘤的发生、发展关系密切。

关键词：前列腺肿瘤 M3受体 CD34蛋白

胆碱对H_2O_2诱导的心肌细胞凋亡的保护作用

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中国老年学杂志 2009年第15期29卷 1900-1901页

作者：李丽于宏伟刘春凤金龙云牡丹江医学院药理教研室黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院生化教研室黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院医学影像学系黑龙江牡丹江157011

目的探讨M3受体激动对H2O2诱导的大鼠培养心肌细胞凋亡的作用。方法以H2O2诱导大鼠培养心肌细胞损伤模型为基础,给予M3受体激动剂胆碱和M3受体阻断剂4DAmP进行干预。流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR检测凋亡抑制蛋白Bcl-2。结果①胆碱可... 详细信息

目的探讨M3受体激动对H2O2诱导的大鼠培养心肌细胞凋亡的作用。方法以H2O2诱导大鼠培养心肌细胞损伤模型为基础,给予M3受体激动剂胆碱和M3受体阻断剂4DAmP进行干预。流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR检测凋亡抑制蛋白Bcl-2。结果①胆碱可显著降低H2O2对心肌细胞的损伤,提高心肌细胞存活率,并降低细胞的凋亡率;②胆碱可增加凋亡心肌细胞Bcl-2的表达;③M3受体阻断剂4DAmP可逆转胆碱的上述作用(PM3受体对H2O2诱导的心肌细胞凋亡有保护作用,其机制可能与凋亡抑制蛋白Bcl-2有关。

关键词： M3受体心肌细胞凋亡过氧化氢流式细胞仪反转录聚合酶链式反应

胆碱对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

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中国药理学通报 2007年第5期23卷 600-603页

作者：王丽艳刘艳李丹露单宏丽吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理学教研室

目的观察胆碱对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响。方法采用Langendorff灌注系统,建立离体大鼠全心缺血/再灌注损伤模型。观察胆碱对复灌后冠脉流量、心肌组织丙二醛(mDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和心肌梗死面积的影响。结果胆... 详细信息

目的观察胆碱对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响。方法采用Langendorff灌注系统,建立离体大鼠全心缺血/再灌注损伤模型。观察胆碱对复灌后冠脉流量、心肌组织丙二醛(mDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和心肌梗死面积的影响。结果胆碱可明显增加缺血/再灌注后1、5、10min的冠脉流量,减少心肌组织mDA含量、提高SOD活性,缩小心肌梗死面积,与模型组比较差异均有显著性(PM3受体阻断剂4-di-phenylacetoxy-N-methylpiperidine-methiodide(4-DAmP)所逆转。结论胆碱对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用。

关键词：胆碱心肌缺血/再灌注损伤 4-DAmP M3受体

肉毒毒素在肿瘤治疗和辅助治疗领域的研究进展

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微生物学免疫学进展 2015年第2期43卷 57-61页

作者：苏娟张雪平兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心甘肃兰州730046

肉毒毒素是肉毒梭状芽胞杆菌生长繁殖过程中产生的一种细菌外毒素。它可以通过抑制相关神经递质的释放而抑制神经的生理作用,目前临床适应症涉及神经内科、整形外科、康复科、泌尿科等多领域。最新研究发现,肉毒毒素作为毒蕈碱受体拮抗... 详细信息

肉毒毒素是肉毒梭状芽胞杆菌生长繁殖过程中产生的一种细菌外毒素。它可以通过抑制相关神经递质的释放而抑制神经的生理作用,目前临床适应症涉及神经内科、整形外科、康复科、泌尿科等多领域。最新研究发现,肉毒毒素作为毒蕈碱受体拮抗剂可抑制迷走神经释放乙酰胆碱,从而抑制胃癌的发生与发展。同时发现肉毒毒素可通过阻断去甲肾上腺素等神经递质的释放引起神经性的血管舒张,从而打开肿瘤神经血管网来改善肿瘤的放射和化学治疗的疗效。现就其在肿瘤治疗及其辅助治疗相关领域的研究现状进行了综述。

关键词：肉毒毒素 M3受体失神经作用肿瘤放射和化学治疗

2型糖尿病大鼠不同时期膀胱收缩力动态变化的实验研究

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中国药物与临床 2013年第5期13卷 549-551页

作者：韩宾林王东文双卫兵胡操阳山西医科大学第一医院泌尿外科太原030001

目的观察2型糖尿病(T2Dm)大鼠不同时期膀胱收缩力的动态变化情况,以探讨糖尿病膀胱病变的病理生理学机制。方法制备T2Dm大鼠模型,以同龄正常大鼠为对照,在成模后6、12和20周,应用m受体激动剂卡巴胆碱,在不同药物浓度水平下进行离体逼尿... 详细信息

目的观察2型糖尿病(T2Dm)大鼠不同时期膀胱收缩力的动态变化情况,以探讨糖尿病膀胱病变的病理生理学机制。方法制备T2Dm大鼠模型,以同龄正常大鼠为对照,在成模后6、12和20周,应用m受体激动剂卡巴胆碱,在不同药物浓度水平下进行离体逼尿肌环收缩刺激实验。结果 6周时实验组的最大收缩力(1.12±0.16)g/mg,比对照组(0.99±0.06)g/mg增高;半数有效剂量浓度(EC50)实验组(1.7±0.4)×10-7mol/L比对照组(2.7±0.3)×10-7mol/L降低;12周时实验组的最大收缩力(1.20±0.12)g/mg与对照组(1.21±0.08)g/mg差异无统计学意义;EC50实验组(2.2±0.4)×10-7mol/L与对照组(2.3±0.4)×10-7mol/L差异无统计学意义;20周时实验组的最大收缩力(1.01±0.05)g/mg比对照组(1.90±0.09)g/mg降低;EC50实验组(2.7±0.4)×10-7mol/L比对照组(2.0±0.4)×10-7mol/L增高。结论不同时期的糖尿病大鼠膀胱收缩力表现不同,随着病程的进展,膀胱逼尿肌收缩力呈现先增高后降低的趋势,对卡巴胆碱的敏感性也呈现先增高后降低的变化趋势。

关键词：糖尿病并发症膀胱疾病逼尿肌收缩力 M3受体

金黄色葡萄球菌肠毒素B和鼻腔胆碱能受体的过度表达

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金黄色葡萄球菌肠毒素B和鼻腔胆碱能受体的过度表达

作者：谢聪山西医科大学

学位级别：硕士

目的 1.探讨金黄色葡萄球菌肠毒素B（Staphylococcus enterotoxin B,SEB）在鼻腔慢性炎症发生、发展过程中的作用。 2.探讨毒蕈碱样胆碱能受体3（muscarinic receptor 3,M3受体）在鼻腔慢性炎症发展过程中的表达情况。 3.... 详细信息

目的 1.探讨金黄色葡萄球菌肠毒素B（Staphylococcus enterotoxin B,SEB）在鼻腔慢性炎症发生、发展过程中的作用。 2.探讨毒蕈碱样胆碱能受体3（muscarinic receptor 3,M3受体）在鼻腔慢性炎症发展过程中的表达情况。 3.为进一步研究SEB和M3受体之间的关系奠定基础。方法选择慢性鼻-鼻窦炎合并鼻息肉（CRS/NP）的患者30例作为研究对象。于鼻内镜手术过程中严格无菌操作取鼻息肉组织及水肿黏膜,通过细菌培养、PCR检测金葡菌菌落和SEB;通过免疫组织化学法、RT-PCR分别从蛋白质和基因水平确定M3受体表达部位及密度。患者术后三月换药时取恢复期黏膜同法测定上述指标,最后进行统计分析。结果 30例标本有13例慢性鼻-鼻窦炎合并鼻息肉患者的鼻腔或鼻窦黏膜培养出金葡菌菌落,其中9例检测出SEB;30例患者鼻腔或鼻窦黏膜的粘液腺和毛细血管上均有胆碱能M3受体亚型的过度表达。功能性鼻内镜手术后有5例标本培养出金葡菌菌落,SEB未检出。鼻腔黏膜M3受体表达下调。结论实验证实了SEB在鼻腔慢性炎症中的重要作用,也证实了M3受体的过度表达。在经过以功能性鼻内镜手术为主的综合治疗后,SEB检出率降低,M3受体的表达减少。二者之间是否具有相关性,将是进一步研究的目标。

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B M3受体鼻腔