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linc00176下调miR-761对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响

中国老年学杂志 2020年第13期40卷 2865-2870页

作者：宋志韬郑丹陈志涛甘洪颖吴凡周婷婷张姮华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院消化内科湖北武汉430014

目的探讨linc00176对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及潜在的作用机制。方法miR-NC组(转染miR-NC)、miR-761组(转染miR-761 mimics)、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1)、pcDNA3.1-linc00176组(转染pcDNA3.1-linc00176)、si-NC组(转染si-NC)、si-linc00176组(转染si-linc00176)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-761组(转染anti-miR-761)、miR-NC+WT-linc00176组(共转染miR-NC和WT-linc00176)、miR-NC+MUT-linc00176组(共转染miR-NC和MUT-linc00176)、miR-761+WT-linc00176组(共转染miR-761和WT-linc00176)、miR-761+MUT-linc00176组(共转染miR-761和MUT-linc00176)、pcDNA3.1-linc00176+miR-NC组(共转染pcDNA3.1-linc00176和miR-NC)、pcDNA3.1-linc00176+miR-761组(共转染pcDNA3.1-linc00176和miR-761)均用脂质体法转染至SGC-7901细胞;采用qRT-PCR检测linc00176和miR-761的表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测各组细胞凋亡;Western印迹检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果相较于正常胃黏膜细胞GES-1,胃癌细胞MGC-803、SGC-7901中linc00176的表达水平显著降低(Plinc00176、抑制表达miR-761均可抑制SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡;抑制Bcl-2、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MPP)-2蛋白表达,促进Bax蛋、E-钙黏蛋白(cadherin)、P21蛋白表达。linc00176靶向调控miR-761表达。过表达miR-761能逆转linc00176对胃癌细胞SGC-7901增殖、迁移、侵袭的抑制和凋亡的促进作用。结论长链非编码RNA linc00176可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,其机制可能与靶向miR-761基因有关,将可为胃癌的预防和治疗提供新靶点。

关键词： linc00176 miR-761 胃癌增殖凋亡迁移侵袭

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linc00176靶向miR-338-3/SMO轴对肝癌细胞增殖和迁移的影响

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肿瘤学杂志 2019年第10期25卷 858-863页

作者：李凌陈思翰朱德东石小军韦勇宁王哲袁登高中国科学院大学宁波华美医院北郊院区

[目的]探讨基因间长链非编码RNA linc00176靶向miR-338-3p/SMO对肝癌(HCC)细胞增殖和迁移的影响。[方法]收集手术切除的肝癌患者的HCC组织和癌旁组织标本各96例,采用荧光定量PCR检测linc00176和miR-338-3p在HCC组织和癌旁组织中的表达水... 详细信息

[目的]探讨基因间长链非编码RNA linc00176靶向miR-338-3p/SMO对肝癌(HCC)细胞增殖和迁移的影响。[方法]收集手术切除的肝癌患者的HCC组织和癌旁组织标本各96例,采用荧光定量PCR检测linc00176和miR-338-3p在HCC组织和癌旁组织中的表达水平;构建shRNA-Control、 shRNA-linc00176、miRNA-Control和miR-338-3p慢病毒肝癌细胞系,采用生物信息学和双荧光素酶报告基因检测分析linc00176和miR-338-3p的靶向关系;采用CCK-8法和异种移植瘤实验检测各组细胞的增殖能力;采用Transwell分析各组细胞的迁移能力;采用Western blot检测各组细胞中SMO蛋白的表达水平。[结果] linc00176在HCC组织中的mRNA相对表达水平(1.94±0.21)显著高于癌旁组织(0.57±0.10);miR-338-3p在HCC组织中的mRNA相对表达水平(0.35±0.08)显著低于癌旁组织(1.62±0.15),差异均有统计学意义(Plinc00176可能通过靶向调控miR-338-3p的表达,进一步影响SMO蛋白的表达。双荧光素酶报告基因检测显示转染linc00176-WT的miR-338-3p细胞(0.33±0.08)的相对荧光素酶活性显著低于miRNA-Control组细胞(1.25±0.16),差异有统计学意义(Plinc00176和miR-338-3p组细胞的增殖活力和成瘤能力与其各自的对照组相比显著下降,差异均有统计学意义(Plinc00176组(53.17±8.74)和miR-338-3p组(44.61±8.02)细胞的迁移个数均显著下降,差异有统计学意义(Plinc00176和miR-338-3p组细胞中SMO的蛋白表达水平较shRNA-Control和miRNA-Control组均显著降低,差异有统计学意义(Plinc00176可能通过靶向调控miR-338-3p/SMO的表达促进HCC细胞的增殖和迁移。

关键词： linc00176 肝肿瘤 miR-338-3p SMO 增殖迁移

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下调lncRNA linc00176对肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药和自噬的影响

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中国临床药理学与治疗学 2021年第6期26卷 616-623页

作者：崔华燕红霞尹梅宁夏医科大学总医院呼吸与危重症医学科宁夏银川750001 银川市第二人民医院神经内科宁夏银川750011

目的:研究下调lncRNA linc00176对肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药和自噬的影响及机制。方法:qRT-PCR方法测定正常支气管上皮16HBE细胞和肺癌A549、A549/DDP、NCI-H1299、SK-MES-1细胞中linc00176的表达。将A549/DDP细胞分成对照组、si-NC组、si-linc00176组、si-linc00176+Anti-miR-NC组、si-linc00176+Anti-miR-138-5p组。MTT实验检测顺铂对A549/DDP的半数抑制浓度(IC50)。流式细胞术测定细胞凋亡。Western blot测定LC3-I、LC3-II、Beclin 1、C-Caspase-3蛋白表达。利用荧光素酶报告系统鉴定linc00176和miR-138-5p的靶向关系。结果:与16HBE细胞比较,A549、A549/DDP、NCI-H1299、SK-MES-1细胞中linc00176表达水平显著升高(Plinc00176表达水平显著升高(Plinc00176组A549/DDP细胞IC50显著降低(Plinc00176与miR-138-5p直接结合。与si-linc00176+Anti-miR-NC组比较,si-linc00176+Anti-miR-138-5p组A549/DDP细胞IC50显著升高(Plinc00176通过靶向上调miR-138-5p能够抑制肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药,抑制细胞自噬,诱导细胞凋亡。

关键词：肺癌顺铂耐药自噬 linc00176 miR-138-5p

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