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血清FGF23、klotho蛋白与维持性血液透析患者心脏瓣膜钙化的相关性

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中国临床医学 2024年第2期31卷 215-220页

作者：何正佳王娇王成军鲍晓荣复旦大学附属金山医院肾内科上海201508

目的探讨血清成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor-23,FGF23)、klotho蛋白水平与维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者心脏瓣膜钙化(cardiac valve calcification,CVC)的相关性。方法选取2022年1月至2023年1月期间复旦大学附属金山医院血液净化中心MHD患者169例,采用心脏超声检查患者CVC情况。结果169例MHD患者中CVC者共111例,占65.68%。与非CVC组相比,CVC组FGF23、β2微球蛋白、B型脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)水平、年龄、男性占比显著高,klotho、透前肌酐、血红蛋白、血浆白蛋白、iPTH水平显著低(均P蛋白、BNP与CVC正相关(r=0.20、0.41、0.15、0.28、0.12),klotho、透前肌酐、血红蛋白、血浆白蛋白、iPTH与CVC负相关(r=﹣0.16、﹣0.17、﹣0.16、﹣0.17、﹣0.16)。非条件二元logistic回归分析显示FGF23、klotho、年龄、β2微球蛋白是MHD患者CVC的独立影响因素(Pklotho蛋白水平与CVC负相关,FGF23、klotho、年龄、β2微球蛋白是MHD患者CVC的独立影响因素。

关键词：维持性血液透析心脏瓣膜钙化成纤维细胞生长因子23 klotho蛋白

精神分裂症患者血清klotho蛋白水平与炎症因子的相关性研究

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中外女性健康研究 2024年第7期 5-9页

作者：李博慧安宏伟徐倩孙大伟韩旭肖健楠大庆市第三医院检验科黑龙江大庆163712 大庆市第三医院精神科黑龙江大庆163712 大庆市第三医院药剂科黑龙江大庆163712 大庆市第三医院康复科黑龙江大庆163712

目的:目的:观察精神分裂症患者血清klotho蛋白水平及其与炎症因子的相关性。方法:纳入精神分裂症患者45例(观察组),健康对照45例(对照组),采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评定患者精神症状严重程度,采用酶联免疫吸附技术(ELISA)测定所有... 详细信息

目的:目的:观察精神分裂症患者血清klotho蛋白水平及其与炎症因子的相关性。方法:纳入精神分裂症患者45例(观察组),健康对照45例(对照组),采用阳性与阴性症状量表(PANSS)评定患者精神症状严重程度,采用酶联免疫吸附技术(ELISA)测定所有受试者血清中klotho蛋白和炎症因子IL-6、IL-10水平,使用全自动血细胞分析仪和生化分析仪测定其他炎症及抗炎指标。结果:观察组血清klotho蛋白水平明显高于对照组(Pklotho蛋白水平与炎症因子IL-6和NLR成正相关(r=0.517,Pklotho蛋白表达异常,且与炎症因子相关,klotho蛋白可能参与精神分裂症的神经炎症反应过程。

关键词：精神分裂症 klotho蛋白炎症因子

腹膜透析患者血清klotho蛋白水平与中医证候的相关性研究

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中国中医药科技 2024年第3期31卷 381-384页

作者：李红波姜南刘红熊飞王小琴武汉市中西医结合医院湖北武汉430022 湖北省中医院湖北武汉430022

目的:探讨腹膜透析患者血清klotho蛋白水平与中医证候的相关性。方法:选取180例规律腹膜透析患者作为研究对象,均进行中医辨证,分为主证和兼证两类;并根据患者肾小球滤过率(GFR)和血清分泌型klotho蛋白水平的四分位数,分为4组,统计各组... 详细信息

目的:探讨腹膜透析患者血清klotho蛋白水平与中医证候的相关性。方法:选取180例规律腹膜透析患者作为研究对象,均进行中医辨证,分为主证和兼证两类;并根据患者肾小球滤过率(GFR)和血清分泌型klotho蛋白水平的四分位数,分为4组,统计各组中医主证、兼证分布情况。结果:180例腹膜透析患者主证占比,脾肾气虚证>气阴两虚证>肝肾阴虚证>脾肾阳虚证>阴阳两虚证;兼证占比,瘀血证>湿热证>湿浊证;不同主证的GFR和klotho蛋白水平存在显著性差异(Pklotho蛋白水平比较,肝肾阴虚证klotho蛋白水平呈正相关。不同兼证患者GFR和klotho蛋白水平比较无统计学意义(P>0.05)。按照血清分泌型klotho蛋白水平分布范围分组,发现在klotho蛋白水平较低的患者中,肝肾阴虚证和阴阳两虚证的占比较高;相反,在klotho蛋白水平较高的患者中,脾肾气虚证和脾肾阳虚证的占比较高,各组中医主证比率比较有统计学意义(P0.05)。结论:腹膜透析患者血清klotho蛋白水平与中医主证呈显著相关性,且肝肾阴虚证、阴阳两虚证者klotho蛋白降低尤其明显,主要与肾精不足或衰退相关。

关键词：腹膜透析 klotho蛋白中医辨证主证兼证相关性

klotho蛋白灌胃对急性脑梗死大鼠脑缺血再灌注损伤的改善作用及其机制

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山东医药 2024年第21期 24-29页

作者：张晶张祎马晨李雯杨玉琮西安交通大学第一附属医院检验科

目的观察klotho蛋白灌胃对急性脑梗死（ACI）大鼠脑缺血再灌注损伤（CIRI）的改善作用，并探讨其作用机制。方法 50只SPF级SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、klotho低剂量组、klotho中剂量组、klotho高剂量组，每组10只。模型组和Kloth... 详细信息

目的观察klotho蛋白灌胃对急性脑梗死（ACI）大鼠脑缺血再灌注损伤（CIRI）的改善作用，并探讨其作用机制。方法 50只SPF级SD雄性大鼠分为假手术组、模型组、klotho低剂量组、klotho中剂量组、klotho高剂量组，每组10只。模型组和klotho低剂量组、klotho中剂量组、klotho高剂量组大鼠建立ACI后CIRI模型。假手术组只做颈动脉血管分离和伤口缝合，不做颈动脉夹闭处理。大鼠继续饲养24 h后，klotho低、中、高剂量组分别用25、50、100 mg/kg的klotho蛋白进行灌胃处理，模型组与假手术组均采用等体积生理盐水进行灌胃处理。5组大鼠均每天灌胃处理1次，持续处理14 d。取各组大鼠，采用Longa评分法和平衡木评分法进行神经功能评分。取各组大鼠，断头处死后取脑组织，采用苏木精染色法测算大鼠大脑皮层神经元凋亡率，采用Western Blotting法检测大鼠大脑皮层组织中受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)、RIP3蛋白，采用酶联免疫法检测大鼠大脑皮层组织中炎症介质IL-1β、TNF-α、IL-6，采用TBA法检测MDA，采用酶联免疫法检测SOD，采用紫外比色法检测GSH-Px。结果假手术组大鼠神经功能评分、大脑皮层神经元凋亡率均低于其余各组（P均klotho高剂量组均高于klotho低剂量组、klotho中剂量组（P均klotho中剂量组均高于klotho低剂量组（P均蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均低于其余各组，SOD、GSH-Px表达水平均高于其余各组（P均蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均高于其余各组，SOD、GSH-Px表达水平均低于其余各组（P均klotho高剂量组大鼠大脑皮层组织中RIP1、RIP3蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均低于klotho低剂量组、klotho中剂量组，SOD、GSH-Px表达水平均高于klotho低剂量组、klotho中剂量组（P均klotho中剂量组大鼠大脑皮层组织中RIP1、RIP3蛋白相对表达量和IL-1β、TNF-α、IL-6、MDA表达水平均低于klotho低剂量组，SOD、GSH-Px表达水平均高于klotho低剂量组（P均klotho蛋白灌胃对ACI大鼠CIRI具有改善作用，其作用机制可能与抑制大脑皮层组织中RIP1和RIP3蛋白表达、抑制脑损伤部位炎症反应和氧化应激反应有关。

关键词： klotho蛋白脑缺血再灌注损伤急性脑梗死神经元受体相互作用蛋白激酶

来源：博看期刊

达格列净对老年糖尿病肾病患者klotho蛋白及肾功能的影响

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医学研究杂志 2024年第5期53卷 144-148页

作者：丁鑫姬燕甯春陈梦楠卢海龙杨荣礼徐州医科大学研究生院 221004 徐州医科大学附属医院老年医学科 221006

目的观察达格列净对老年糖尿病肾病患者klotho蛋白及肾功能的影响,探究影响klotho蛋白水平的相关因素。方法选取2021年1~11月于徐州医科大学附属医院诊治的老年糖尿病肾病患者88例,按随机数字表法分为达格列净组和对照组,疗程12周,分别... 详细信息

目的观察达格列净对老年糖尿病肾病患者klotho蛋白及肾功能的影响,探究影响klotho蛋白水平的相关因素。方法选取2021年1~11月于徐州医科大学附属医院诊治的老年糖尿病肾病患者88例,按随机数字表法分为达格列净组和对照组,疗程12周,分别于治疗前和治疗结束时测定体重、血压、血糖、klotho蛋白、肾功能水平,尿白蛋白/尿肌酐(urinary albumin/creatinine,UACR),记录不良反应。结果治疗后,达格列净组患者的体重、体重指数、收缩压、舒张压、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血尿酸、胱抑素C、UACR下降幅度大于对照组,klotho蛋白升高幅度大于对照组,差异有统计学意义(Pklotho蛋白水平的独立相关因素。两组不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论达格列净治疗可以降低体重、血压,改善肾功能,升高klotho蛋白水平。达格列净对klotho蛋白的调节作用可能是其肾脏保护作用的重要机制之一。

关键词：达格列净老年人糖尿病肾病 klotho蛋白肾功能

klotho蛋白在子痫前期患者胎盘外泌体中表达及其对血管内皮细胞氧化应激的影响

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吉林大学学报（医学版） 2023年第6期49卷 1528-1538页

作者：薛筱蕾胥保梅新疆医科大学第五附属医院产科新疆乌鲁木齐830011

目的:探讨klotho在子痫前期(PE)患者来源的胎盘外泌体(Exo)中的表达,阐明其对血管内皮细胞氧化应激的影响。方法:收集40例孕产妇的临床资料,其中正常妊娠(NP)者20名,PE患者20例,设为NP组和PE组,分离2组研究对象外周血中胎盘Exo。将oe-Kl... 详细信息

目的:探讨klotho在子痫前期(PE)患者来源的胎盘外泌体(Exo)中的表达,阐明其对血管内皮细胞氧化应激的影响。方法:收集40例孕产妇的临床资料,其中正常妊娠(NP)者20名,PE患者20例,设为NP组和PE组,分离2组研究对象外周血中胎盘Exo。将oe-klotho和oe-NC质粒转染入人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo中,作为oe-klotho组和oe-NC组,收集HTR-8/SVneo细胞Exo。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法和Western blotting法检测2组研究对象胎盘Exo和2组HTR-8/SVneo细胞Exo中klotho mRNA及蛋白表达水平。取生长状态良好的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),按Exo来源不同将HUVECs分为PE-Exo组(与PE患者胎盘Exo共培养)、NP-Exo组(与NP胎盘Exo共培养)、oe-klotho-Exo组(与转染oe-klotho的HTR-8/SVneo细胞Exo共培养)和oe-NC-Exo组(与转染oe-NC的HTR-8/SVneo细胞Exo共培养)。采用透射电子显微镜(TEM)观察Exo形态表现,Western blotting法检测Exo标记分子CD63、TSG101和胎盘Exo标记分子PLAP蛋白表达水平以鉴定Exo,荧光显微镜观察HUVECs对Exo的摄取情况。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组HUVECs中一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,RT-qPCR法检测各组HUVECs中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组HUVECs中eNOS蛋白表达水平。结果:与NP组比较,PE组患者收缩压和舒张压升高(P蛋白CD63和TSG101及胎盘Exo特异性蛋白PLAP。纳米示踪分析(NTA)检测,胎盘Exo的粒径为50~200 nm,提示由外周血分离的囊泡均是胎盘来源Exo。TEM、Western blotting和NTA检测,来源于oe-NC组和oe-klotho组滋养层细胞的囊泡具有Exo的典型结构、分子标志物和粒径大小特征。HUVECs中均可见到明显的Exo绿色荧光表达,提示Exo可被HUVECs摄取。ELISA法检测,与NP-Exo组比较,PE-Exo组HUVECs中NO水平和SOD活性均明显降低(Pklotho-Exo组HUVECs中NO水平和SOD活性升高(Pklotho mRNA表达水平明显降低(Pklotho组滋养层细胞Exo中klotho mRNA表达水平明显升高(Pklotho-Exo组HUVECs中eNOS mRNA表达水平明显升高(Pklotho蛋白表达水平明显降低(P蛋白表达水平明显降低(Pklotho组滋养层细胞Exo中klotho蛋白表达水平明显升高(Pklotho-Exo组HUVECs中eNOS蛋白表达水平均明显升高(Pklotho的滋养层细胞Exo可减少HUVECs中NO的产生和氧化应激水平。

关键词： klotho蛋白子痫前期外泌体血管内皮细胞氧化应激

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klotho蛋白对肾缺血再灌注大鼠急性肾损伤及纤维化的保护作用

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天津医药 2023年第4期51卷 371-376页

作者：刘竹枫王文红范树颖刘艳刘涛王欣吴瑕天津市儿童医院(天津大学儿童医院)肾内科 300134

目的探讨klotho蛋白在缺血再灌注(I/R)大鼠引起的急性肾损伤及纤维化进程中的作用。方法60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注组(I/R组)和klotho蛋白干预组(I/R+Kl组),每组20只。I/R组采用夹闭右侧肾... 详细信息

目的探讨klotho蛋白在缺血再灌注(I/R)大鼠引起的急性肾损伤及纤维化进程中的作用。方法60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注组(I/R组)和klotho蛋白干预组(I/R+Kl组),每组20只。I/R组采用夹闭右侧肾蒂40 min再灌注法建立肾缺血再灌注急性肾损伤模型。Sham组游离出右侧肾动脉,但不夹闭右侧肾蒂,暴露40 min后缝合腹腔。I/R+Kl组手术方法同I/R组,造模成功后,腹腔注射klotho蛋白(0.01 mg/kg)。3组分别于造模成功后第1、7、14、28天收集大鼠血、肾组织标本,分别检测大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;HE染色观察肾组织损伤情况,Masson染色观察肾纤维化情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清及肾组织klotho蛋白水平,Western blot法检测肾脏组织klotho蛋白的表达。结果与Sham组比较,I/R组及I/R+Kl组血Scr及BUN水平均升高(Pklotho水平下降(Pklotho水平均低于I/R+Kl组(Pklotho水平均下降,而I/R+Kl组klotho水平均高于I/R组(Pklotho表达下调;外源性补充klotho蛋白可缓解缺血再灌注肾损伤大鼠的急性肾损伤及纤维化,起到肾保护作用。

关键词：急性肾损伤再灌注损伤纤维化肾疾病 klotho蛋白

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klotho蛋白通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬改善血管内皮细胞免受H2O2诱导损伤的机制研究

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Klotho蛋白通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬改善血管内皮细胞免受H...

作者：闫永宪锦州医科大学

学位级别：硕士

目的研究klotho蛋白对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤有保护作用,观察klotho蛋白通过调控AMPK/m TOR信号通路调控自噬,改善血管内皮细胞免受H2O2损伤的机制研究。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),并使用过氧化氢(H2... 详细信息

目的研究klotho蛋白对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤有保护作用,观察klotho蛋白通过调控AMPK/m TOR信号通路调控自噬,改善血管内皮细胞免受H2O2损伤的机制研究。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),并使用过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤。将实验分为4组:(1)空白对照组;(2)H2O2模型组(用200μmol/L H2O2孵育24h);(3)klotho蛋白组(首先用100μmol/L klotho蛋白在培养基中孵育12h,然后与200μmol/L H2O2孵育24h);(4)AMPK抑制剂Compound C组(培养基中先加入100μg/L的klotho蛋白和10μmol/L的AMPK抑制剂Compound C处理12h,随后加入200μmol/L H2O2孵育24h)。应用MTT法检测以上各组细胞活力。用二氢乙锭法,测定各组细胞活性氧(ROS)值。用丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒,测各组细胞培养液中的含量,评估氧化应激。用免疫荧光染色法,观察细胞微管相关蛋白1轻链3β(LC3II)的变化。用Western blot法,检测各组自噬相关蛋白p62、Beclin-1、LC3II/LC3I,信号通路AMPK/m TOR相关蛋白和凋亡蛋白Caspase3、Bax、Bcl-2的表达水平。流式细胞术检测细胞凋亡。结果与对照组相比较,(1)模型组中HUVECs的活力下降,凋亡率上升(P蛋白Beclin-1升高(Pklotho蛋白组中细胞活力增加,存活率上升(P蛋白Beclin-1升高(Pklotho蛋白组相反。结论klotho蛋白通过激活AMPK/m TOR信号通路和增强自噬来保护内皮细胞免受H2O2诱导的损伤。

关键词：动脉粥样硬化人脐静脉内皮细胞(HUVECs) klotho蛋白过氧化氢(H2O2) 自噬凋亡 AMPK/mTOR信号通路

klotho蛋白在盐敏感性高血压肾损伤中的作用及分子机制研究

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Klotho蛋白在盐敏感性高血压肾损伤中的作用及分子机制研究

作者：赵伟延安大学

学位级别：硕士

背景:klotho蛋白与肾脏疾病的发生、发展密切相关,盐敏感性高血压(SSH)常伴随肾脏疾病的发生。目前klotho蛋白在SSH肾损伤中的作用及分子机制研究鲜见报道。目的:探讨klotho蛋白在SSH肾损伤中的作用及分子机制。方法:首先,观察klotho在... 详细信息

背景:klotho蛋白与肾脏疾病的发生、发展密切相关,盐敏感性高血压(SSH)常伴随肾脏疾病的发生。目前klotho蛋白在SSH肾损伤中的作用及分子机制研究鲜见报道。目的:探讨klotho蛋白在SSH肾损伤中的作用及分子机制。方法:首先,观察klotho在SSH肾损伤中的表达情况。本实验选取大鼠肾小球系膜细胞株HBZY1为实验细胞,将实验细胞分为对照组与造模组,对照组正常环境下培养,造模组给予Na Cl 137mmol/L和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)10 mmol/L共同刺激诱导24h,收集细胞。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)与蛋白质印记法(Western Blot)检测klotho m RNA和蛋白表达的差异。其次,验证klotho蛋白对于SSH肾损伤的保护作用。构建klotho干扰载体和klotho过表达载体,将构建的载体转染至细胞中并验证转染效率;转染成功后将实验细胞分为四组,包括对照组、造模组、klotho过表达组与klotho干扰组。细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)与超氧化物歧化酶(SOD)含量。最后,探索klotho蛋白的肾脏保护作用是否与抑制血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)介导的氧化应激损伤相关。实验分五部分进行,第一部分验证klotho蛋白与AT1R的交互作用;第二部分分为对照组与造模组,检测肾损伤中AT1R表达情况;第三部分分为造模组与klotho过表达组,检测klotho蛋白对AT1R的影响;第四部分构建AT1R过表达载体并验证转染效率;第五部分分为造模组、klotho过表达组、klotho+AT1R过表达组,明确AT1R过表达是否降低了klotho蛋白的抗氧化能力以及对肾脏细胞保护作用。免疫共沉淀(Co-IP)检测klotho与AT1R相互作用的影响,Western Blot检测AT1R蛋白表达的差异,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞ROS含量,ELISA法检测细胞上清液中MDA与SOD含量。结果:(1)与对照组相比,造模组中klotho的m RNA水平与蛋白表达均下降(Pklotho-si RNA2干扰效果显著(Pklotho过表达组的klotho蛋白表达明显升高(Pklotho过表达组细胞活力升高(Pklotho干扰组细胞活力下降(Pklotho过表达组ROS、MDA含量下降,SOD含量上升(Pklotho干扰组ROS、MDA含量升高,SOD含量下降(Pklotho与AT1R之间存在交互作用;与对照组相比,造模组AT1R蛋白表达升高(Pklotho过表达组AT1R蛋白表达下降(P蛋白表达明显升高(Pklotho过表达组细胞内ROS、MDA含量下降,SOD含量上升(Pklotho过表达组相比,klotho+AT1R过表达组细胞内ROS、MDA含量上升,SOD含量下降(Pklotho表达下降。(2)klotho蛋白能够提高肾脏细胞活力,抑制氧化应激损伤,对SSH肾损伤起到一定的保护作用。(3)klotho蛋白发挥SSH肾损伤的保护作用与抑制AT1R介导的氧化应激损伤相关。

关键词：盐敏感性高血压肾损伤 klotho蛋白氧化应激 AT1R