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当归多糖诱导k562白血病细胞凋亡的实验研究

当归多糖诱导K562白血病细胞凋亡的实验研究

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作者：曾炜炜武汉大学

学位级别：硕士

目的:当归多糖是从当归中提取出来的有效成分,体外实验表明,它有较强的抗癌活性。本研究旨在观察当归多糖对k562白血病细胞株增殖抑制作用,并从细胞凋亡角度这一新视野入手探讨其作用机制。方法:1、观察当归多糖对k562细胞的增殖作用... 详细信息

目的:当归多糖是从当归中提取出来的有效成分,体外实验表明,它有较强的抗癌活性。本研究旨在观察当归多糖对k562白血病细胞株增殖抑制作用,并从细胞凋亡角度这一新视野入手探讨其作用机制。方法:1、观察当归多糖对k562细胞的增殖作用,采用250—1000ug/ml当归多糖处理k562细胞,应用台盼蓝拒染法观察当归多糖对细胞增殖的影响;2、从细胞凋亡的角度对作用机制进行探讨,采用瑞氏染色和电子显微镜观察用药组细胞形态学改变。不同浓度当归多糖分别处理k562细胞,倒置显微镜、电镜下观察;3、为进一步验证DNA断裂的产生,我们采用小量凋亡DNA抽提试剂盒提取细胞内DNA行琼脂糖凝胶电泳;4、流式细胞仪观察药物对细胞凋亡的诱导作用。结果:结果表明:1、当归多糖对k562细胞生长呈显著的抑制作用,且该作用表现出明显的量效和时效依赖关系;2、倒置显微镜下可见四种细胞形态:核染色质正常的死、活细胞,核染色质固缩或碎裂的早期和晚期凋亡细胞。电子显微镜下可观察到凋亡的典型形态学变化:细胞体积缩小,胞膜皱缩,表面绒毛消失,核固缩或碎裂,沿核膜边集,并有凋亡小体形成;3、琼脂糖凝胶电泳结果未见凋亡特有的DNA 条带;4、在采用流式细胞仪对细胞周期和凋亡率进行的定量检测中,我们发现了亚 G1峰的出现,标志着凋亡现象的发生。1000ug/ml当归多糖对k562细胞凋亡率为最高,可达到20.8%。细胞周期分析表明,当归多糖可将细胞阻滞于S期。结论:(1)当归多糖在体外能明显抑制k562白血病细胞的增殖;(2)其作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡而实现的

关键词：当归多糖 k562白血病细胞株细胞增殖细胞凋亡

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