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FQ-PCR与imsa检测转基因豆奶外源基因的比较研究

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大豆科学 2018年第6期37卷 943-949,954页

作者：乐振窍许泽仰张细玲陈慧国祖新福建达利食品集团有限公司福建惠安362100 广州迪澳生物科技有限公司广东广州510507 甘肃省食品检验研究院甘肃兰州730030

为比较实时荧光定量PCR(FQ-PCR)与等温多自配引发扩增(imsa)技术检测转基因豆奶中外源基因(CaMV35S、NOS、EPSPS)的灵敏度和特异性。合成CaMV35S、NOS以及EPSPS基因的质粒,通过FQ-PCR与imsa检测定量的质粒,比较质粒灵敏度;按0. 50%、0. ... 详细信息

为比较实时荧光定量PCR(FQ-PCR)与等温多自配引发扩增(imsa)技术检测转基因豆奶中外源基因(CaMV35S、NOS、EPSPS)的灵敏度和特异性。合成CaMV35S、NOS以及EPSPS基因的质粒,通过FQ-PCR与imsa检测定量的质粒,比较质粒灵敏度;按0. 50%、0. 10%、0. 05%以及0. 01%的比例制作转基因豆奶,通过FQ-PCR与imsa检测转基因大豆标准品制成的豆奶,比较样品灵敏度和特异性。结果表明:imsa检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的质粒灵敏度分别为31. 01,31. 01,3. 10 cps·μL^(-1),FQ-PCR检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的质粒灵敏度皆为31. 01cps·μL^(-1); imsa检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的样品灵敏度分别为0. 05%、0. 05%、0. 01%,FQ-PCR检测CaMV35S、NOS、EPSPS基因的样品灵敏度皆为0. 10%; FQ-PCR非特异性检出DP356043的NOS以及MON87701的CaMV35S与EPSPS。说明imsa方法检测转基因豆奶外源基因(CaMV35S、NOS、EPSPS)的灵敏度与特异性优于FQ-PCR。

关键词： FQ-PCR imsa 豆奶外源基因灵敏度特异性

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美国imsa的PBL教学模式探析

教学研究 2014年第6期37卷 47-49页

作者：刘小龙郭艳秋王威四川师范大学生命科学学院四川成都610101 江苏师范大学生命科学学院江苏徐州221116

PBL(基于问题的学习)是一种教学模式,在培养学生的高阶思维等能力方面有显著的效果。imsa(伊利诺伊州数学与科学学院)是PBL教学模式在中学实施最成功的案例之一。通过对imsa的PBL教学模式的特征、模型等方面的分析,发现其PBL教师在PBL... 详细信息

PBL(基于问题的学习)是一种教学模式,在培养学生的高阶思维等能力方面有显著的效果。imsa(伊利诺伊州数学与科学学院)是PBL教学模式在中学实施最成功的案例之一。通过对imsa的PBL教学模式的特征、模型等方面的分析,发现其PBL教师在PBL课程中主要采用了调动高阶思维、搭建脚手架、学生自主评价学习关联性、引导研究方向和鼓励深入思考结论等五个关键指导策略。

关键词： imsa PBL 教师指导策略

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致病微生物imsa检测解决方案

食品安全导刊 2017年第Z1期 66-67页

对于从事食品生产相关产业的人来说,食品安全是重中之重,是维护消费者信任的首要因素。食品生产商为了确保产品的安全与品质,都会进行食源性致病菌的检测。广州迪奥生物科技有限公司针对目前的致病微生物检测现状开发了全方位的imsa技... 详细信息

对于从事食品生产相关产业的人来说,食品安全是重中之重,是维护消费者信任的首要因素。食品生产商为了确保产品的安全与品质,都会进行食源性致病菌的检测。广州迪奥生物科技有限公司针对目前的致病微生物检测现状开发了全方位的imsa技术平台,本次课程的主题主要由申洪杰老师对迪奥公司的imsa技术平台做一个简单的讲解。现行检测方法概述微生物学及生化鉴定方法(即国标方法)

关键词：致病微生物检测现状技术平台迪奥 PCR 病原微生物 imsa

双线拦截威胁——趋势科技推IWSA、imsa安全解决方案

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每周电脑报

每周电脑报 2006年第45期 44-44页

作者：王琨月

趋势科技 I W S A 支持 S N M P 、LDAP以及Active Directory,可提供丰富的日志,记录各种威胁和可疑事件活动,以实时或按需方式提供风险报告。

关键词：趋势科技企业企业管理安全解决方案 imsa IWSA

为大中型企业提供安全解决方案——趋势科技发布网关讯息安全设备(imsa)

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每周电脑报

每周电脑报 2006年第38期 41-41页

作者：王琨月

趋势科技发布的针对大中型企业的网关讯息安全设备,是EPS-5企业安全防护战略生命周期中的另一重要举措。

关键词：安全设备 imsa 垃圾邮件安全解决方案网关大中型企业讯息

定点突变提高大片段嗜热脂肪地芽孢杆菌DNA聚合酶活性的研究

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定点突变提高大片段嗜热脂肪地芽孢杆菌DNA聚合酶活性的研究

作者：张蓓蕾华南理工大学

学位级别：硕士

DNA聚合酶是重要的生物技术工具酶,根据氨基酸序列与三维结构的不同,DNA聚合酶可分为6个不同的家族,分别为A、B、C、D、X以及Y家族,其中Bst DNA聚合酶是A家族的一名成员,来源于嗜热脂肪地芽孢杆菌,全酶由三个独立的结构域组成分别是(I)5... 详细信息

DNA聚合酶是重要的生物技术工具酶,根据氨基酸序列与三维结构的不同,DNA聚合酶可分为6个不同的家族,分别为A、B、C、D、X以及Y家族,其中Bst DNA聚合酶是A家族的一名成员,来源于嗜热脂肪地芽孢杆菌,全酶由三个独立的结构域组成分别是(I)5’-3’外切核酸酶结构域;(II)5’-3’聚合酶结构域;(III)3’-5’外切核酸酶结构域。而Bst DNA聚合酶大片段缺少(I)5’-3’外切核酸酶结构域,在核酸扩增中表现出更好的聚合功能。与其他DNA聚合酶相比,Bst DNA聚合酶有着较强的热稳定性、链置换活性及聚合酶活性,因此更适用于等温扩增中。但是,目前市场上Bst DNA聚合酶受限于国际性大公司如NEB的专利限制,价格比一般的核酸扩增酶昂贵,因此迫切需要开发一种新的更加有效的Bst DNA聚合酶以满足日益增长的市场需求。本研究从一种新的菌株嗜热脂肪芽孢杆菌GIM1.543中取基因组,获得Bst DNA聚合酶基因,并构建重组质粒pET21a-Bst,转化表达宿主,成功实现了Bst DNA聚合酶的诱导表达。通过Bst DNA聚合酶结构以及对其进行同源建模预测的活性位点进行分析,选择4个活性位点(Gly310,Arg412,Lys416,Asp540)进行点突变,用RF克隆方法构建突变体,对其进行表达与Ni柱亲和层析纯化,获得高纯度蛋白。最后以手足口病原体EV71的VP1基因为模板,通过基于imsa的颜色判定法,恒温荧光法,离子对反高效液相法对表达的各个蛋白进行酶活检测,发现有G310L,G310A,D540E三个突变体蛋白在等温扩增中表现出优于商业化Bst DNA聚合酶的效果。本课题通过定点突变,有效地高了Bst DNA聚合酶的聚合效率,打破国外专利的限制,为Bst DNA聚合酶的国有化供了一种理论基础与思路,具有一定的科研意义和社会效益。

关键词： Bst DNA聚合酶嗜热脂肪地芽孢杆菌定点突变 imsa