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Co-delivery of nigericin and decitabine using hexahistidine-metal nanocarriers for pyroptosis-induced immunotherapeutics

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Acta Pharmaceutica Sinica B 2022年第12期12卷 4458-4471页

作者： Qiang Niu Yu Liu Yujing Zheng Ziwei Tang Yuna Qian Ruogu Qi Jianliang Shen Ping Zhao School of Chemistry and Chemical Engineering Guangdong Pharmaceutical UniversityGuangzhou 510006China State Key Laboratory of Ophthalmology Optometry and Vision ScienceSchool of Ophthalmology and OptometrySchool of Biomedical EngineeringWenzhou Medical UniversityWenzhou 325027China Wenzhou Institute University of Chinese Academy of SciencesWenzhou 325001China School of Medicine&Holistic Integrative Medicine Nanjing University of Chinese MedicineNanjing 210023China

Pyroptosis provides a new window for relieving the tumor immunosuppressive microenvironment(TIM)and promoting systemic immune responses for tumor treatments.However,gasdermin D(GSDMD),a key protein in the pyroptosis process mediated by caspase-1,is low expressed in the majority of tumor cells and small-molecule inhibitors of DNA methylation suffer from nonspecific or single-function defects.To address these issues,hexahistidine(His6)-metal assembly(HmA)was employed as the drug delivery vector to load nigericin(Nig)and decitabine(DAC)affording a dual-drug delivery system(Nig^(+)DAC)@HmA.The(Nig^(+)DAC)@HmA nanoparticles are efficiently internalized by cells through endocytosis,easily escape from the lysosome,and are highly distributed in the tumor sites.DAC up-regulates the expression of GSDMD which is then cleaved by the nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3(NLRP3)inflammasome and caspase-1 protein activated by Nig.Effective cancer cell pyroptosis is thus achieved and induces a significant systemic antitumor immunity for impressive tumor suppression with negligible side effects in vivo.Our results suggest that such an easy-to-manipulate self-assembled nano-system(Nig^(+)DAC)@HmA provides a new anticancer path by enhancing pyroptosis through reinforced inflammation.

关键词： Self-assembled nanoparticle Pyroptosis NLRP3 GSDMD Inflammation IL-8 Immunotherapy responses Solid tumor

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Tryptophan 2,3-dioxygenase 2 controls M2 macrophages polarization to promote esophageal squamous cell carcinoma progression via AKT/GSK3β/IL-8 signaling pathway

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Acta Pharmaceutica Sinica B 2021年第9期11卷 2835-2849页

作者： Yumiao Zhao Jiaxin Sun Yin Li Xiuman Zhou Wenjie Zhai Yahong Wu Guanyu Chen Shanshan Gou Xinghua Sui Wenshan Zhao Lu Qiu Yongjie Yao Yixuan Sun Chunxia Chen Yuanming Qi Yanfeng Gao School of Life Sciences Zhengzhou UniversityZhengzhou 450001China Thoracic Surgery Department National Cancer Center/National Clinical Research Center for Cancer/Cancer HospitalChinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical CollegeBeijing 100021China School of Pharmaceutical Sciences(Shenzhen) Sun Yat-sen UniversityShenzhen 518107China

Tryptophan 2,3-dioxygnease 2(TDO2) is specific for metabolizing tryptophan to kynurenine(KYN),which plays a critical role in mediating immune escape of cancer.Although accumulating evidence demonstrates that TDO2 overexpression is implicated in the development and progression of multiple cancers,its tumor-promoting role in esophageal squamous cell carcinoma(ESCC) remains unclear.Here,we observed that TDO2 was overexpressed in ESCC tis sues and correlated significantly with lymph node metastasis,advanced clinical stage,and unfavorable prognosis.Functional experiments showed that TDO2 promoted tumor cell proliferation,migration,and colony formation,which could be prevented by inhibition of TDO2 and aryl hydrocarb on receptor(AHR).Further experimentation demonstrated that TDO2 could promote the tumor growth of KYSE150 tumor-bearing model,tumor burden of C57 BL/6 mice with ESCC induced by 4-NQO,enhance the expression of phosphorylated AKT,with subsequent pho sphorylation of GSK3β,and polarization of M2 macrophages by upregulating interleukin-8(IL-8) to accelerate tumor progression in the tumor microenvironment(TME).Collectively,our results discovered that TDO2 could upregulate IL-8 through AKT/GSK3β to direct the polarization of M2 macrophages in ESCC,and suggested that TDO2 could represent as an attractive therapeutic target and prognostic marker to ESCC.

关键词： Tryptophan 2,3-dioxygenase 2 M2 macrophage Esophageal squamous cell carcinoma IL-8 KYN

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长链非编码RNA NEAT1通过调控IL-8参与肠上皮细胞抗隐孢子虫反应

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2022年第4期40卷 487-492页

作者：李腾沈玉娟崔丽君刘华胡媛姜岩岩曹建平中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心) 国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织热带病合作中心国家级热带病国际研究中心上海200025

目的探索长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)在调控宿主细胞抗隐孢子虫免疫反应的作用及其初步机制。方法采用微小隐孢子虫感染人结直肠癌细胞系HCT-8细胞(卵囊∶细胞比例为2∶1),构建微小隐孢子虫感染肠上皮细胞模型。分别于感染后4 h... 详细信息

目的探索长链非编码RNA NEAT1(lncRNA NEAT1)在调控宿主细胞抗隐孢子虫免疫反应的作用及其初步机制。方法采用微小隐孢子虫感染人结直肠癌细胞系HCT-8细胞(卵囊∶细胞比例为2∶1),构建微小隐孢子虫感染肠上皮细胞模型。分别于感染后4 h和36 h观察感染组及未感染对照组的HCT-8细胞生长情况;提取各组细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测炎性细胞因子白细胞介素-8(IL-8)的基因表达水平,并动态检测lncRNA NEAT1及其长转录本lncRNA NEAT1_2的表达。同时利用lncRNA NEAT1抑制剂Smart Silencer体系建立lncRNA NEAT1敲减的细胞模型(lncRNA NEAT1KD),比较其与未敲减对照组细胞IL-8 mRNA的表达水平。结果微小隐孢子虫卵囊与HCT-8细胞共孵育4 h后,子孢子贴附并入侵细胞,感染组lncRNA NEAT1和lncRNA NEAT1_2的相对表达量分别为0.467±0.364和0.282±0.230,较对照组(0.960±0.152和0.865±0.219)降低(t=2.780、3.672,PIL-8相对表达量为1.273±0.647,与对照组(1.017±0.231)差异无统计学意义(t=0.828,P>0.05);感染后36 h,隐孢子虫成功侵入宿主细胞并繁殖,感染组细胞lncRNA NEAT1及lncRNA NEAT1_2相对表达量分别为2.728±0.897和3.303±2.643,较对照组(1.029±0.237和1.000±0.449)均上调(t=4.854,PIL-8相对表达量为6.835±2.065,较对照组(1.046±0.293)上调(t=5.652,P82±0.126和0.312±0.068,较对照组(1.040±0.446和1.005±0.410)下调(t=4.481,PIL-8 mRNA相对表达量为0.525±0.230,低于对照组(0.959±0.229)(t=4.688,PIL-8的转录,参与宿主细胞抗微小隐孢子虫免疫应答。

关键词：微小隐孢子虫长链非编码RNA lncRNA NEAT1 IL-8 宿主免疫

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Neutrophil extracellular traps mediate the crosstalk between glioma progression and the tumor microenvironment via the HMGB1/RAGE/IL-8 axis

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Cancer Biology & Medicine 2020年第1期17卷 154-168页

作者： Caijun Zha Xiangqi Meng Lulu Li Shan Mi Da Qian Ziwei Li Pengfei Wu Shaoshan Hu Shihong Zhao Jinquan Cai Yanhong Liu Department of Laboratory Diagnosis The Second Affiliated Hospital of Harbin Medical UniversityHarbin 150086China Department of Neurosurgery The Second Affiliated Hospital of Harbin Medical UniversityHarbin 150086China Neuroscience Institute Heilongjiang Academy of Medical SciencesHarbin 150086China

Objective:Neutrophil extracellular traps(NETs)produced by tumor-infiltrating neutrophils(TINs)are associated with poor prognosis in patients with several types of cancer.However,the mechanisms underlying the involvement of NETs in glioma progression remain largely unknown.This study aimed to elucidate the roles of NETs in biological processes that drive the crosstalk between glioma progression and the tumor microenvironment.Methods:Neutrophil infiltration and NETs formation were investigated in glioma tissue through immunohistochemistry,and their relationships with clinicopathological features and outcomes were statistically evaluated.The effects of NETs on glioma cell progression were studied in a co-culture system.In vivo and in vitro experiments validated the reactive oxygen species activity and cytokine production of TINs,as well as the ERK signaling pathway activation and the metastasis of gliomas.Results:Neutrophil infiltration and NETs formation were induced in high-grade glioma compared with low-grade glioma.NETs induced by TINs were determined to be an oncogenic marker of high-grade gliomas and to be involved in cell proliferation and invasion.NETs overproduction promoted glioma cell proliferation,migration,and invasion.Furthermore,HMGB1 was found to bind to RAGE and activate the NF-κB signaling pathway in vitro.In addition,NETs stimulated the NF-κB signaling pathway,thus promoting IL-8 secretion in glioblastoma.Subsequently,IL-8 recruited neutrophils which in turn mediated NETs formation via the PI3 K/AKT/ROS axis in TINs.Conclusions:Our results suggest that NETs produced by TINs mediate the crosstalk between glioma progression and the tumor microenvironment by regulating the HMGB1/RAGE/IL-8 axis.Targeting NETs formation or IL-8 secretion may be an effective approach to inhibit glioma progression.

关键词： Neutrophil extracellular traps HMGB1 IL-8 NF-κB glioma microenvironment

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原发性急性闭角型青光眼患者房水中IL-8和il-12p70的表达及其临床意义

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国际眼科杂志 2022年第3期22卷 443-446页

作者：樊芳李科军闵思马清敏赵智华王玲贾志旸河北省人民医院眼科中国河北省石家庄市050051

目的:对原发性急性闭角型青光眼(AACG)和年龄相关性白内障(ARC)患者房水中IL-8及il-12p70浓度进行检测,并探讨其临床意义。方法:选取2019-10/2020-12于我院治疗的原发性AACG急性发作期患者29例29眼作为研究组,同期于我院行手术治疗的AR... 详细信息

目的:对原发性急性闭角型青光眼(AACG)和年龄相关性白内障(ARC)患者房水中IL-8及il-12p70浓度进行检测,并探讨其临床意义。方法:选取2019-10/2020-12于我院治疗的原发性AACG急性发作期患者29例29眼作为研究组,同期于我院行手术治疗的ARC患者17例17眼作为对照组,通过流式液相蛋白定量技术检测患者房水中IL-8及il-12p70水平,同时收集患者的一般资料进行相关性分析。结果:与ARC患者相比,AACG患者房水中IL-8浓度显著升高(Z=-5.384,Pil-12p70水平无差异(Z=-1.587,P=0.112)。AACG患者房水中IL-8水平与急性发作持续时间呈正相关(r_(s)=0.387,P=0.038),其中滤过性手术患者房水中细胞因子IL-8、il-12p70浓度均显著高于非滤过性手术患者(PIL-8浓度明显升高,免疫相关因子il-12p70浓度随着疾病的进展出现差异性表达增加,提示炎症和免疫可能参与AACG的病理过程。

关键词：急性闭角型青光眼房水细胞因子 IL-8 il-12p70 炎症免疫

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猪德尔塔冠状病毒M蛋白参与病毒诱导IL-8产生的研究

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中国预防兽医学报 2022年第4期44卷 435-438页

作者：石照蓉陈建飞张洪玲时洪艳郭龙军冯力中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150069

为研究猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)感染能否诱导宿主细胞产生IL-8,本研究将PDCoV分别感染猪小肠上皮细胞(IPEC)和ST细胞,感染后6 h、12 h和24 h收集细胞,通过荧光定量PCR方法检测IL-8 mRNA转录水平。构建表达PDCoV M蛋白的真核表达质粒pCAG... 详细信息

为研究猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)感染能否诱导宿主细胞产生IL-8,本研究将PDCoV分别感染猪小肠上皮细胞(IPEC)和ST细胞,感染后6 h、12 h和24 h收集细胞,通过荧光定量PCR方法检测IL-8 mRNA转录水平。构建表达PDCoV M蛋白的真核表达质粒pCAGGS-M,经测序鉴定无误后转染HEK 293T细胞,采用间接免疫荧光试验(IFA)和western blot方法检测PDCoV M蛋白的表达。将pCAGGS-M质粒转染IPEC细胞,采用荧光定量PCR方法检测PDCoV M蛋白对IL-8转录的影响。为进一步评价PDCoV M蛋白对IL-8转录水平的影响,将不同浓度pCAGGS-M质粒(10 ng、100 ng和200 ng)、IL-8启动子质粒和pRL-TK质粒共转染HEK 293T细胞,采用双荧光素酶活性分析试验评价PDCoV M蛋白对IL-8转录活性的影响。荧光定量PCR结果显示,与未感染组相比,PDCoV感染能够显著上调细胞中IL-8 mRNA转录水平,其中PDCoV感染IPEC细胞6 h、12 h和24 h后IL-8 mRNA分别上调3倍、37倍和173倍;PDCoV感染ST细胞6 h、12 h和24 h后IL-8 mRNA分别上调20倍、19000倍和48000倍。IFA和western blot结果显示PDCoV M蛋白正确表达,与空载体质粒转染组相比,转染表达PDCoV M蛋白的质粒能够上调IPEC细胞IL-8转录水平约4.3倍。双荧光素酶活性分析试验结果显示,与对照组相比,转染10 ng、100 ng和200 ng pCAGGS-M质粒能够分别诱导细胞中IL-8转录活性上调1.9倍、3.8倍和5.7倍;表明PDCoV M蛋白能够上调宿主细胞IL-8的转录活性。综上所述,PDCoV感染能够显著上调IPEC和ST细胞中IL-8的转录水平,其中PDCoV M蛋白参与诱导细胞IL-8的产生,本研究为深入了解PDCoV致病机制提供参考依据。

关键词：猪德尔塔冠状病毒 IL-8 转录 M蛋白

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结核病患者IL-8、STAT3表达差异及其辅助诊断价值

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中国热带医学 2024年

作者：安红娟李昆张灵霞朱琰李改平史阅韩孙卫国解放军总医院第八医学中心结核病诊疗新技术北京市重点实验室

目的探索耐多药结核病患者（multi-drugresistanttuberculosis，MDR-TB）、药物敏感结核病患者（drugsusceptibletuberculosis，DSP-TB）及健康人3组人群外周血白细胞介素-8（interleukin-8，IL-8）、信号传导和转录激活因子3（signaltransducerandactivatoroftranscription3，STAT3）表达差异，对组间差异进行分析，为开展新型结核病实验室辅助诊断提供参考依据。方法对3组人群外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)mRNA芯片表达谱差异性进行分析；选取MDR-TB患者与DSP-TB患者为研究对象，以健康人为对照组，ELISA法测定各组血清IL-8浓度，比较组间差异；同时分离3组人群外周血单个核细胞（PBMC)，收集细胞并提取总RNA，分别通过实时荧光定量PCR技术分析各组IL-8、STAT3mRNA表达情况；以WesternBlot实验比较各组STAT3蛋白表达差异。结果MDR-TB和DSP-TB两组人群血清IL-8浓度明显高于健康对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)；MDR-TB组和DSP-TB组人群外周血PBMCs中IL-8基因mRNA的相对表达量也明显高于健康对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)；Q-PCR与WesternBlot实验结果均显示，健康组、DSP-TB组和MDR-TB组STAT3基因表达依次上调，组间有统计学差异(P＜0.05)，实验所得结果与mRNA芯片结果一致。结论IL-8在活动性结核病患者（ATB）体内表达显著升高，可以作为标志物区分ATB与健康人群；STAT3浓度的变化不仅作为ATB的诊断参考，还可以鉴别DSP-TB与MDR-TB人群。IL-8、STAT3联合检测有望成为不同结核病患者的临床辅助诊断依据。

关键词：结核分枝杆菌活动性结核病 IL-8 STAT3

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孕酮及其受体、IL-8与原因不明自然流产的相关性研究

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中国免疫学杂志 2022年第10期38卷 1245-1248页

作者：马铭艳杨美霞宫晓玲赵紫薇岳淑芬宋芳(指导) 包头医学院组织学与胚胎学教研室包头014040 包头医学院生殖医学研究所包头014040 包钢第三职工医院包头014040

目的:探讨孕酮(P)及其受体(PR)、IL-8在原因不明自然流产患者外周血及母胎界面的表达及相关性。方法:ELISA检测30例原因不明自然流产患者(流产组)和30例正常妊娠妇女(对照组)血清P、IL-8水平,免疫组织化学染色法检测两组流产绒毛和蜕膜... 详细信息

目的:探讨孕酮(P)及其受体(PR)、IL-8在原因不明自然流产患者外周血及母胎界面的表达及相关性。方法:ELISA检测30例原因不明自然流产患者(流产组)和30例正常妊娠妇女(对照组)血清P、IL-8水平,免疫组织化学染色法检测两组流产绒毛和蜕膜组织PR、IL-8表达。结果:流产组血清P水平明显低于对照组(PIL-8水平明显高于对照组(PIL-8均表达于绒毛上皮细胞的细胞质,且流产组表达明显高于对照组(PIL-8均表达于蜕膜细胞的细胞质,且流产组表达高于对照组(PIL-8呈显著负相关(r=-0.870,PIL-8呈显著负相关(r=-0.650,PIL-8高表达可能与原因不明自然流产发生相关,且P、PR可能通过下调IL-8表达维持正常妊娠。

关键词：自然流产孕酮受体 IL-8 绒毛组织蜕膜组织

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基于HMGB1/Beclin-1信号通路探讨温阳利水通络法对肾病综合征模型小鼠TNF-α、il-4、IL-8的作用机制

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中国免疫学杂志 2022年第21期38卷 2592-2596页

作者：吴鹏公敏黄琳曾冬梅吴洪皓邱家廷江西省赣州市中医院赣州341000

目的:基于HMGB1/Beclin-1信号通路探讨温阳利水通络法对肾病综合征模型小鼠TNF-α、il-4、IL-8的作用机制。方法:实验级小鼠30只,分为对照组、模型组、温阳利水通络法组,每组10只。模型组、温阳利水通络法组注射盐酸阿霉素构建肾病综合... 详细信息

目的:基于HMGB1/Beclin-1信号通路探讨温阳利水通络法对肾病综合征模型小鼠TNF-α、il-4、IL-8的作用机制。方法:实验级小鼠30只,分为对照组、模型组、温阳利水通络法组,每组10只。模型组、温阳利水通络法组注射盐酸阿霉素构建肾病综合征小鼠模型,对照组注射等体积生理盐水。造模结束后第5天,温阳利水通络法组进行给药,对照组和模型组给予同剂量蒸馏水灌胃,1次/d,连续3周。给药停止后24 h,检测小鼠的肾功能指标;HE染色观察小鼠肾组织病理变化;酶联免疫吸附法比较小鼠外周血TNF-α、il-4、IL-8的表达水平;Western blot检测各组小鼠肾组织中HMGB1/Beclin-1蛋白及相关蛋白的表达变化。结果:模型组小鼠肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白量较对照组增加;温阳利水通络法组CRE、BUN、24 h尿蛋白量较模型组下降。对照组小鼠肾小球形状规则,肾小囊列队排列,界限清晰;模型组小鼠肾小球形态异常肿大,肾小囊皱缩,基底膜加厚伴系膜基质变多,边界模糊;温阳利水通络法组小鼠肾小球形态改善,肿大减小,肾小囊皱缩缓解。模型组小鼠肾组织病理评分较对照组增加;温阳利水通络法组肾组织病理评分较模型组下降。模型组小鼠TNF-α、il-4、IL-8表达较对照组增加;温阳利水通络法组TNF-α、il-4、IL-8表达较模型组下降。模型组小鼠HMGB1、LC3、Beclin-1蛋白表达较对照组增加;温阳利水通络法组HMGB1、LC3、Beclin-1蛋白表达较模型组下降。结论:温阳利水通络法能够调节控制HMGB1/Beclin-1信号通路,抑制肾病综合征模型小鼠TNF-α、il-4、IL-8等炎症因子表达,从而对模型小鼠肾组织起保护作用。

关键词： HMGB1/Beclin-1信号通路温阳利水通络法肾病综合征模型小鼠 TNF-α il-4 IL-8

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疏肝利胆和胃方对反流性食管炎大鼠IL-8及VIPmRNA表达影响的研究

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中华中医药学刊 2022年第9期40卷 120-124,I0028-I0030页

作者：孟子惠白光姜巍何美君彭艳红王辉刘林李惠平辽宁中医药大学附属医院辽宁沈阳110032 辽宁中医药大学辽宁沈阳110847 辽宁中医悦禾医院辽宁沈阳110031

目的探讨疏肝利胆和胃方对肝胃不和型反流性食管炎大鼠IL-8的表达水平及相关受体的影响,阐明该方治疗肝胃不和型反流性食管炎的作用机理。方法对80只健康SD大鼠,采取SPSS 22.0软件随机平均分成4组,每组20只,分别为空白对照组、反流性食... 详细信息

目的探讨疏肝利胆和胃方对肝胃不和型反流性食管炎大鼠IL-8的表达水平及相关受体的影响,阐明该方治疗肝胃不和型反流性食管炎的作用机理。方法对80只健康SD大鼠,采取SPSS 22.0软件随机平均分成4组,每组20只,分别为空白对照组、反流性食管炎模型对照组、疏肝利胆和胃方中药干预组和艾速平阳性药对照组,用药后观察各组大鼠的生存状态、体质量等。同时,于治疗的第14天、第28天对每组大鼠进行处死,解剖取食管样本,观察病理变化及黏膜愈合进程,观察食管黏膜上皮细胞间隙;采用ELISA法测IL-8的表达。结果与模型组大鼠相较,中药组、艾速平组大鼠食管黏膜组织愈合率明显高于模型组,食管黏膜上皮细胞间隙均低于模型组,均有统计学差异(PIL-8表达水平与模型组比较,明显降低,差异有统计学意义(PIL-8相应受体的表达来治疗反流性食管炎。

关键词：反流性食管炎疏肝利胆和胃方肝胃不和大鼠食管黏膜组织 VIPmRNA IL-8

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