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高效表达重组猪il-10的基因工程菌株的构建

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畜牧兽医学报 2003年第4期34卷 385-388页

作者：仇华吉金吉东兰文升郭海龙周艳君王云峰童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

白细胞介素 10(il 10)是一种Th2细胞等产生的能抑制Th1细胞释放细胞因子的免疫调节因子。从经脂多糖(LPS)活化的猪外周血单核细胞(PBMC)中提取总RNA,用RT PCR扩增了猪il 10(poil 10)编码基因,克隆并测序验证后,将其亚克隆到表达载体pPRO... 详细信息

白细胞介素 10(il 10)是一种Th2细胞等产生的能抑制Th1细胞释放细胞因子的免疫调节因子。从经脂多糖(LPS)活化的猪外周血单核细胞(PBMC)中提取总RNA,用RT PCR扩增了猪il 10(poil 10)编码基因,克隆并测序验证后,将其亚克隆到表达载体pPROEXTMHTb中,转化DH5α后,用IPTG诱导培养,经免疫印迹和生物活性检测显示,重组菌株表达了具有活性的重组poil 10,重组poil 10表达水平达3mg/ml培养液,占菌体细胞总蛋白的30 2%,本研究为poil 10的功能研究和临床应用奠定了基础。

关键词：基因表达基因重组猪 il—10 基因工程菌株构建

生物人工肾小管对多脏器障碍/多器官衰竭猪il-10和生存时间影响的研究

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南京医科大学学报（自然科学版） 2003年第6期23卷 638-638,641页

作者：王笑云王恒进毛慧娟应旭旻沈霞南京医科大学第一附属医院肾科江苏南京210029

从2002年6月～2003年1月,我们采用猪近曲小管上皮细胞株(LLC-PK1)自行构建的生物人工肾小管装置(RAD)[1],对急性肾衰竭(ARF)合并多脏器障碍/多器官衰竭(MODS/MOF)猪进行治疗,观察对抗炎细胞因子il-10和生存时间的影响,获得满意的结果.

关键词：生物人工肾小管 il—10 多脏器障碍/多器官衰竭急性肾衰竭生存时间

严重创伤患者TNF、il-6和il-10水平的变化及其临床意义

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陕西医学杂志 2003年第5期32卷 407-408页

作者：程三放陆宏伟李小珍王丽娜西安交通大学第二医院急诊外科西安710004

目的 :研究严重创伤后细胞因子的变化规律及其临床意义。方法 :采用双抗体夹心法和 ELISA法检测严重创伤患者 ( ISS≥ 1 6)血中 TNF、il- 6及 il - 1 0水平。结果 :严重创伤后血中 TNF、il - 6和 il - 1 0水平显著高于正常对照组 ( P<0 ... 详细信息

目的 :研究严重创伤后细胞因子的变化规律及其临床意义。方法 :采用双抗体夹心法和 ELISA法检测严重创伤患者 ( ISS≥ 1 6)血中 TNF、il- 6及 il - 1 0水平。结果 :严重创伤后血中 TNF、il - 6和 il - 1 0水平显著高于正常对照组 ( Pil- 1 0与严重创伤程度相关。结论 :细胞因子活性的检测助于病情的评估及预后判断。

关键词：严重创伤 TNF il—6 il—10 细胞因子临床意义

系统性红斑狼疮患者血清il-10与T细胞凋亡的关系研究

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南京医科大学学报（自然科学版） 2007年第10期27卷 1118-1122页

作者：王晓乐吴秀梅陈斌李世荣王慧娟杨晓帆季晓辉南京医科大学附属常州二院核医学科江苏常州213003 南京医科大学第一附属医院皮肤科江苏南京210029 南京医科大学免疫微生物学系江苏南京210029

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血清il-10与T细胞凋亡的关系。方法:采用ABC-ELISA法检测SLE患者血清il-10含量;三色荧光流式细胞术检测患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群及其Fas、FasL的表达和早期凋亡,并分析其与血清il-10水... 详细信息

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者血清il-10与T细胞凋亡的关系。方法:采用ABC-ELISA法检测SLE患者血清il-10含量;三色荧光流式细胞术检测患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群及其Fas、FasL的表达和早期凋亡,并分析其与血清il-10水平的相关性。结果:SLE患者血清il-10水平明显升高,并与SLE活动指数(SLEDAI)和血清中抗ds-DNA抗体呈正相关;外周血中T细胞CD4+亚群比例下降、CD4+/CD8+的比值降低,CD3+、CD4+、CD8+T细胞Fas、FasL的表达均增高,T细胞尤其是CD4+亚群凋亡增加,以上变化以活动性SLE更为显著;SLE患者血清il-10水平与CD4+/CD8+细胞比值呈负相关,与T细胞FasL表达异常增加和CD4+T细胞亚群凋亡显著增多呈正相关。结论:SLE异常增高的il-10促使T细胞高表达FasL,诱导CD4+T细胞凋亡,参与了SLE的病理进程。

关键词：系统性红斑狼疮 il—10 T细胞 FasL 细胞凋亡

无症状HBeAg阳性患者外周血单个核细胞培养液中il-10、il-12及γ-IFN检测水平的研究

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临床肝胆病杂志 2003年第3期19卷 176-177页

作者：宋闽宁骆梅兰黄文棋闵峰解放军174医院传染科福建厦门361003

探讨HBeAg阳性无症状乙肝病毒感染者免疫调控状况 ,采用外周血单个核细胞 (PBMC) ,体外刺激诱导培养 ,用ELISA法同时检测il - 10、il - 12及γ -IFN ,并以抗 -HBe阳性者、慢性肝炎及体检健康者作为对照。发现il - 10不受HBeAg+ /抗 -HBe... 详细信息

探讨HBeAg阳性无症状乙肝病毒感染者免疫调控状况 ,采用外周血单个核细胞 (PBMC) ,体外刺激诱导培养 ,用ELISA法同时检测il - 10、il - 12及γ -IFN ,并以抗 -HBe阳性者、慢性肝炎及体检健康者作为对照。发现il - 10不受HBeAg+ /抗 -HBe+的影响 ,经受刺激培养后其分泌明显高于正常对照组 ,在轻度ALT增高病人中亦呈分泌增强状态。γ -IFN在无症状HBeAg+组测定值明显较低 ;但在无症状抗 -HBe+、ALT及TBil异常组增高。il -12检测水平在HBV感染各组均显著高于正常对照组 ,与血清转换及肝功异常无关。免疫负调控优势可发生于无症状HBeAg携带者。il -

关键词：无症状HBeAg阳性患者外周血单个核细胞培养液 il—10 il—12 γ—IFN 检测

胸腺肽对扁平疣患者il-10、IFN-γ水平的影响及疗效分析

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中国麻风皮肤病杂志 2004年第5期20卷 460-461页

作者：臧运书吴梅王青红青岛大学医学院附属医院皮肤科青岛266003 山东省皮肤病性病防治研究所济南250022

双抗体夹心ELISA技术检测扁平疣患者治疗组、对照组治疗前后及正常人血清il - 10、IFN -γ水平。结果 :治疗前两组扁平疣患者il - 10水平都明显高于正常人 ,IFN -γ水平则明显低于正常人 (均P <0 .0 1)。胸腺肽组治疗后il - 10水平显著... 详细信息

双抗体夹心ELISA技术检测扁平疣患者治疗组、对照组治疗前后及正常人血清il - 10、IFN -γ水平。结果 :治疗前两组扁平疣患者il - 10水平都明显高于正常人 ,IFN -γ水平则明显低于正常人 (均P il - 10水平显著降低 ,IFN -γ水平显著升高 (均P il - 10、IFN -γ水平差异无显著性 ,且治疗组的疗效 (有效率 80 .76 % )明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。扁平疣患者存在Th1 Th2型细胞因子失衡 ,胸腺肽可能通过调节细胞因子失衡而改善患者免疫功能 ,提高治疗效果。

关键词： IFN-γ 患者扁平疣 il-10 胸腺肽对照组正常人治疗前后治疗组 il—10

人il-10基因重组复制缺陷型腺病毒DNA的构建

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上海第二医科大学学报 2004年第9期24卷 720-722页

作者：陈紫千汤耀卿张奕张轶张圣道刘新垣邹卫国上海第二医科大学瑞金医院消化外科上海200025 中国科学院上海生命科学院细胞生化所

目的构建人il-10基因的重组腺病毒并进行体外表达和检测。方法从质粒pcDNA3il-10的CMV启动子下游完整切下il-10 cDNA的片段,将其定向插入Gateway载体,在克隆酶的作用下将阳性克隆质粒转入目的腺病毒载体。PacI酶线性化il-10腺病毒DNA... 详细信息

目的构建人il-10基因的重组腺病毒并进行体外表达和检测。方法从质粒pcDNA3il-10的CMV启动子下游完整切下il-10 cDNA的片段,将其定向插入Gateway载体,在克隆酶的作用下将阳性克隆质粒转入目的腺病毒载体。PacI酶线性化il-10腺病毒DNA后阳离子质脂体转染293A细胞,获得人il-10的复制缺陷型重组腺病毒。体外感染人胰腺癌细胞株Bxpc-3和大鼠胰腺细胞株AR-42J;Western blot检测人il-10的表达。结果成功地构建人il-10重组腺病毒,病毒滴度达2×109PFU/mL。体外感染的细胞株均检测到il-10的表达。结论构建复制缺陷型重组腺病毒能够介导il-10的基因表达,为细胞因子的抗炎冶疗奠定实验基础。

关键词： il—10 缺陷型 il-10 重组腺病毒体外感染表达 DNA 阳性克隆质粒基因重组

拉米夫定治疗慢性乙肝患者血清il-2，il-4，il-10，IFN-γ水平变化的临床研究

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拉米夫定治疗慢性乙肝患者血清IL-2，IL-4，IL-10，IFN-γ水平变...

作者：鲁晓擘新疆医科大学

学位级别：硕士

目的：探讨拉米夫定治疗慢性乙肝患者前后其血清il-2，IFN-γ，il-4，il-10水平变化及其临床意义。方法：应用ELISA法检测20例接受拉米夫定治疗的慢性乙肝患者血清中的il-2，IFN-γ，il-4，il-10水平，并做治疗前后的对照比较。结果：... 详细信息

目的：探讨拉米夫定治疗慢性乙肝患者前后其血清il-2，IFN-γ，il-4，il-10水平变化及其临床意义。方法：应用ELISA法检测20例接受拉米夫定治疗的慢性乙肝患者血清中的il-2，IFN-γ，il-4，il-10水平，并做治疗前后的对照比较。结果：拉米夫定治疗慢性乙肝（轻度）前后其血清il-2，IFN- γ，il-4，il-10水平无显著性差异（P＞0.05）。中低拷贝的HBV-DNA与高拷贝的HBV-DNA这两组慢性乙肝（轻度）患者相比较其血清il-2，IFN-γ，il-4，il-10水平无显著性差异（P＞0.05）。il-2与FN-γ水平正相关。结论：拉米夫定治疗慢性乙肝（轻度）思者前后血清il-2，IFN-γ，il-4，il-10水平无明显变化。拉米夫定无免疫调节作用。慢性乙肝（轻度）患者血清HBV-DNA量似乎并不影响il-2，IFN-γ，il-4，il-10的分泌。

关键词：拉米夫定慢性乙肝 il-2 IFN—γ Yil—4 il—10

针灸对克隆氏病大鼠结肠TNF-αil-10mRNA的调节机制研究

同方学位论文库评论

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中医药学刊 2005年第2期23卷 272-275页

作者：施茵刘慧荣华卫国秦秀娣吴焕淦钱睛兰上海市针灸经络研究所上海200030 上海市气功研究所上海200030

目的 :探讨针灸对克隆氏病大鼠结肠TNF -α、il -10mRNA的调节机制。方法 :在成功制备克隆氏病大鼠模型的基础上 ,随机分为模型组、隔药灸组、电针组三组 ,并与正常大鼠进行对照。隔药灸组、电针组选用“天枢”、“气海”穴分别进行隔... 详细信息

目的 :探讨针灸对克隆氏病大鼠结肠TNF -α、il -10mRNA的调节机制。方法 :在成功制备克隆氏病大鼠模型的基础上 ,随机分为模型组、隔药灸组、电针组三组 ,并与正常大鼠进行对照。隔药灸组、电针组选用“天枢”、“气海”穴分别进行隔药灸和电针治疗 ,以原位杂交法观察大鼠结肠组织TNF -α与il -10mRNA的表达。结果 :克隆氏病模型大鼠结肠TNF -αmRNA与il -10mRNA表达较正常组大鼠增高 ,隔药灸组、电针组均显著降低。结论 :针灸可能是通过抑制克隆氏病大鼠结肠组织促炎症细胞因子TNF -αmRNA的表达 ,调整il -10mRNA与TNF -αmRNA之间的平衡 ,从而减轻或消除肠道炎症 ,以达治疗之目的。

关键词：克隆氏病 TNF—α 隔药灸大鼠结肠 il—10 RNA 结论调节机制目的