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The miRNA let-7al inhibits the expression of insulin-like growth factor 1 receptor （igfir） in prostate cancer PC-3 cells

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Asian Journal of Andrology 2013年第6期15卷 753-758,I0006页

作者： Li-Na Wang Wei-Wen Chen Ju Zhang Chao-Yang Li Chun-Yan Liu Iing Xue Peng-Ju Zhang An-Li Jiang Institution of Biochemistry and Molecular Biology Medical School of Shandong University Jinan 250012 China

Reduced microRNA （miRNA） let-7a expression and the activation of insulin-like growth factor-1 receptor （igfir） signalling are both involved in prostate cancer and progression. In the present study, we demonstrated that the growth inhibitory effect of let-7al is directly related to targeting igfirgene expression in PC-3 cells. TargetScan predicted three potential target sites （T1, T2 and T3） of let-7a in the 3＇ untranslational region （3＇ UTR） of igfir mRNA. Real-time PCR, Western blot and luciferase reporter assays were used to detect the effects of let-7al overexpression or let-7al inhibitor on the igfirgene expression in PC-3 cells. The results indicated that let-7al could inhibit igfir expression by directly targeting the T1 and T2 sites in the 3＇ UTR of the igfir mRNA. We then used RT-PCR, luciferase reporter assays, 3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide （MTT） assay, flow cytometry and Hoechst 33342 staining to examine whether let-7al-mediated inhibition of igfir expression also affects the igfir-mediated signalling events, including Elk1 activity and c-fos gene expression, proliferation, apoptosis and cell cycle. We demonstrated that let-7al-mediated igfir downregulation was accompanied by attenuation of Elk1 activity and c-fos expression, inhibition of cell proliferation, enhanced apoptosis and cell cycle arrest, and that loss function of let-7al via inhibition can upregulate IGF1R accompanied by an increase of Elk1 activity and c-fos expression, thereby enhancing cell proliferation. Altogether, these findings sueeest that let-7a mav be novel therapeutic candidate for Drostate cancer.

关键词： igfir microRNA (miRNA) prostate cancer

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胃癌中IGFBP-2、IGFI、igfir的表达及意义

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皖南医学院学报 2008年第2期27卷 98-101页

作者：张雪英吉兆宁皖南医学院附属弋矶山医院肿瘤科安徽芜湖241001

目的:探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-2(insulin- like growth factor binding protein-2,IGFBP-2)、胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGFI)和胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,igfir)在胃癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化法检测了60例胃癌以及20例浅表性胃炎的胃粘膜组织中IGFBP-2、IGFI和igfir的表达情况并分析它们与生物学行为预后的关系。结果:胃癌组织中IGFBP-2、IGFI、igfir阳性率分别为70%、63.3%、65%,与对照组比较差异有统计学意义(Pigfir在胃癌组织中均有较高表达,三者表达有相关性.可能存在共同的激活机制,在胃癌的发生、发展及转归过程中具有一定的意义。

关键词：胃癌 IGFBP-2 IGFI igfir 免疫组化

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携带沉默igfir shRNA和表达Wtp53的重组慢病毒的构建和鉴定

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中国肿瘤生物治疗杂志 2007年第4期14卷 337-337页

作者：牛坚李向农黄建韩泽广徐州医学院附属第一医院普外科徐州221004 国家人类基因组南方研究中心上海201203

胰岛素样生长因子Ⅰ类受体(insulin.1ikegrowthfactorIreceptor,igfir)的胞内信号转导涉及众多信号通路,与多种肿瘤的发生、发展关系密切。p53基因与igfir家族关系密切,能够抑制igfir启动子活性及mRNA水平。本研究构建igfir基因shRNA和... 详细信息

胰岛素样生长因子Ⅰ类受体(insulin.1ikegrowthfactorIreceptor,igfir)的胞内信号转导涉及众多信号通路,与多种肿瘤的发生、发展关系密切。p53基因与igfir家族关系密切,能够抑制igfir启动子活性及mRNA水平。本研究构建igfir基因shRNA和同时表达Wtp53慢病毒载体(pPRIME-WtP53-shlGFIR),感染肝癌HEP3B细胞,观察能否下调igfir和上调P53蛋白水平,为研究肝癌的基因治疗奠定基础。[第一段]

关键词：小干扰RNA igfir p53 慢病毒

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Polymorphisms of the IGF1 gene and their association with growth traits, serum concentration and expression rate of IGF1 and IGF1R in buffalo

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Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology) 2017年第12期18卷 1064-1074页

作者： Mohammed A.EL-MAGD Ayman A.SALEH Abeer A.NAFEAA Shymaa M.EL-KOMY Mohamed A.AFIFI Department of Anatomy&Embryology Faculty of Veterinary MedicineKafrelsheikh UniversityE1-Geish StreetKafrelsheikhEgypt Department of Animal Wealth Development Veterinary Genetics&Genetic EngineeringFaculty of Veterinary MedicineZagazig UniversityZagazigEgypt Department of Physiology Faculty of Veterinary MedicineBenha UniversityBenhaEgypt Department of Animal Production Faculty of AgricultureTanta UniversityTantaEgypt Department of Animal Wealth Development BiostatisticsFaculty of Veterinary MedicineZagazig UniversityZagazigEgypt Department of Health Management Atlantic Veterinary CollegeUniversity of Prince Edward IslandCharlottetownPE C1A 4P3Canada

The insulin-like growth factor 1（IGF1） gene is a member of the group of somatotropin axis genes that play a significant role in cell proliferation and growth of muscles. Here, we searched for polymorphisms in buffalo IGF1 and found two novel single nucleotide polymorphisms（SNPs）, G64 A and G280A, in the noncoding sequences of exon 1 and exon 4, respectively. Statistical analysis of different genotypes showed that the individuals with GG genotypes had significantly（P〈0.05） higher body weight（BW） and average daily gain（ADG） than those with other genotypes at ages of 3–6 months in G64A SNP and 6–9 months in G280A SNP. The combined genotypes of these two SNPs produced three haplotypes, GG/GG, AG/AG, and AA/AA, which were significantly associated（P〈0.0001） with BW and ADG at an age from 3 to 12 months. Buffaloes with the homozygous GG/GG haplotype showed higher growth performance than other buffaloes. The two SNPs were correlated with m RNA levels of IGF1 and IGF1 receptor（IGF1 R） in semitendinosus muscle as well as with the serum concentration level of IGF1. Also, buffaloes with GG/GG haplotype showed higher m RNA and serum concentration levels. The data revealed that these two SNPs could be valuable genetic markers for selection of Egyptian buffaloes for better performance in the population.

关键词： Insulin-like growth factor 1 (IGF1) igfir Single nucleotide polymorphism (SNP) Growth traits Buffalo

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京海黄鸡IGF1R基因Alu Ⅰ、Hin1 Ⅰ多态位点的发现及其与生产性状的相关性

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中国畜牧杂志 2012年第3期48卷 10-14页

作者：金崇富王金玉赵秀华张跟喜顾玉萍俞亚波施会强扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏沿海地区农业科学研究所江苏盐城224002 江苏京海集团江苏南通226103

根据GenBank发表的鸡IGF1R基因序列针对外显子2和3设计2对引物,采用池DNA测序和PCR-R FLP技术,对京海黄鸡IGF1R基因的AluⅠ、Hin1Ⅰ位点进行多态性检测,并与京海黄鸡的生产性状进行相关性分析。结果表明:AluⅠ位点AA基因型个体在8周龄... 详细信息

根据GenBank发表的鸡IGF1R基因序列针对外显子2和3设计2对引物,采用池DNA测序和PCR-R FLP技术,对京海黄鸡IGF1R基因的AluⅠ、Hin1Ⅰ位点进行多态性检测,并与京海黄鸡的生产性状进行相关性分析。结果表明:AluⅠ位点AA基因型个体在8周龄体重显著低于BB型个体(P<0.05),AA和AB基因型个体在12周龄体重显著低于BB型个体(P<0.05)。Hin1Ⅰ位点CC、CD基因型个体的初生重显著低于DD基因型(P<0.05),CC基因型个体的300日龄体重显著低于DD基因型(P<0.05)。研究结果初步显示,IGF1R基因可能是影响京海黄鸡生长性状的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的一个标记。

关键词： igfir PCR-RFLP 连锁京海黄鸡

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14-3-3β调控奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成的分子机制

14-3-3β调控奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成的分子机制

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作者：黄冠东北农业大学

学位级别：硕士

奶牛乳腺上皮细胞的增殖和泌乳受多种信号网络的调控,研究泌乳相关的重要功能基因及其调控网络一直是泌乳生物学关注的重点内容。因此,这部分研究将为改善乳品质和提高乳产量提供理论依据。14-3-3蛋白作为一类适配蛋白,是多种重要细胞... 详细信息

奶牛乳腺上皮细胞的增殖和泌乳受多种信号网络的调控,研究泌乳相关的重要功能基因及其调控网络一直是泌乳生物学关注的重点内容。因此,这部分研究将为改善乳品质和提高乳产量提供理论依据。14-3-3蛋白作为一类适配蛋白,是多种重要细胞过程如信号转导、蛋白折叠和降解和细胞周期等的关键调控组分。实验室前期研究奶牛乳腺组织RNA-seq转录组测序中发现,与泌乳晚期相比,14-3-3β基因在泌乳高峰期表达量显著升高。同时有研究表明,小鼠成纤维细胞系NIH-3T3中,14-3-3β与胰岛素样生长因子I受体(Insulin-like growth factor I receptor,igfir)相关。igfir信号通路在奶牛乳腺发育与泌乳调控中发挥重要作用,提示14-3-3β有可能参与奶牛乳腺泌乳调控。本实验室前期研究还发现,在奶牛泌乳期乳腺上皮细胞中,应激信号通路的重要蛋白激活转录因子4(Activating transcription factor 4,ATF4)与14-3-3β能够相互作用,因此推测14-3-3β可能参与奶牛乳腺上皮细胞应激信号传导。本研究选取14-3-3β为研究对象,以揭示其参与调控奶牛乳腺上皮细胞增殖、乳蛋白合成和细胞应激的分子机制。本研究首先确定奶牛乳腺上皮细胞中14-3-3β在细胞增殖和乳蛋白合成中的作用。应用质谱鉴定和Co-IP技术分析14-3-3β的互作蛋白并验证14-3-3β与igfir的互作关系;应用RNAi技术抑制14-3-3β基因表达后,检测igfir及其磷酸化蛋白、p-AKT1、p-m TOR、cyclin D1、乳脂和β-酪蛋白表达,并检测细胞增殖和细胞活力;并在14-3-3β基因抑制后添加IGF-I或亮氨酸检测泌乳效应情况,应用q RT-PCR和WB检测igfir信号通路泌乳相关基因m RNA和蛋白表达。研究结果表明,14-3-3β与igfir存在互作关系,14-3-3β基因抑制后显著降低细胞增殖能力和活力,igfir信号通路泌乳相关蛋白表达降低,cyclin D1蛋白表达降低使细胞周期停滞。与单独添加IGF-1或亮氨酸促进泌乳表现相比,在14-3-3β基因抑制后添加IGFI或亮氨酸,igfir信号通路泌乳相关基因m RNA和蛋白表达均显著降低,IGF-I或亮氨酸的促进泌乳的作用减弱。以上结果揭示,14-3-3β能够通过igfir信号通路介导IGF-I和亮氨酸发挥对泌乳效应的正向调控作用。本研究进一步分析14-3-3β在奶牛乳腺上皮细胞内质网应激和氨基酸饥饿诱导的细胞应激中的调控作用。应用Co-IP技术和质谱鉴定分析出14-3-3β与应激相关蛋白真核细胞起始因子2(Eukaryotic translation initiator factor 2α,e IF2α)和ATF4的互作关系;通过q RT-PCR和WB检测青春期和泌乳期奶牛乳腺组织14-3-3β、e IF2α和ATF4基因m RNA和蛋白表达;检测14-3-3β基因表达抑制后,p-e IF2α、ATF4和CHOP等应激相关蛋白表达;并在14-3-3β基因表达抑制后应用毒胡萝卜素(Thapsigargin,TG)诱导内质网应激反应,或氨基酸饥饿诱导的细胞应激反应,通过q RT-PCR和WB检测e IF2α、ATF4和CHOP等应激相关基因m RNA和蛋白表达。研究结果表明,14-3-3β与e IF2α、ATF4之间存在互作关系,14-3-3β基因抑制后p-e IF2α和ATF4等应激相关蛋白表达降低。与单独应用TG或氨基酸饥饿诱导产生应激反应相比,14-3-3β基因抑制后以TG或氨基酸饥饿诱导应激反应,应激信号通路相关基因m RNA表达上调,而蛋白表达均显著降低,TG或氨基酸饥饿诱导的应激反应显著减弱。研究结果显示,14-3-3β能够通过与e IF2α相互作用,参与调控奶牛乳腺上皮细胞应激反应正常进行。综上所述,14-3-3β通过igfir信号通路介导IGF-I和Leu发挥对泌乳效应的正调控作用。14-3-3β通过与e IF2α相互作用是细胞应激反应进行的必要条件,参与调控细胞应激信号传导和调控蛋白质翻译,从而间接对泌乳进行调控。乳蛋白合成受一系列转导途径的调控,包括igfir-m TOR机制及细胞应激反应。在14-3-3β参与下,这些途径能够精准调控乳蛋白合成从而确保泌乳的正常进行。这些信号通路之间的相互联系凸显了乳蛋白合成调节的复杂性,合成代谢与分解代谢的协调互作才能维持蛋白质稳态。本研究充分揭示了14-3-3β参与乳腺上皮细胞增殖以及乳蛋白合成调控的分子机制,为奶牛乳腺泌乳调控领域提供了新的实验思路和研究方向。

关键词：奶牛奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成 14-3-3β igfir

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表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂在非小细胞肺癌应用的瓶颈——获得性耐药

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循证医学 2008年第4期8卷 193-197页

作者：钟文昭吴一龙广东省人民医院肿瘤中心广东省肺癌研究所广州510080

以表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor，EGFR-TKI）分子靶向治疗研究为肇始，转化性研究使基础实验和临床实践间的鸿沟迅速填平，改变着人们认识治疗肺癌的视角。无可否认... 详细信息

以表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor，EGFR-TKI）分子靶向治疗研究为肇始，转化性研究使基础实验和临床实践间的鸿沟迅速填平，改变着人们认识治疗肺癌的视角。无可否认，EGFR-TKI上市后极大地延伸了肿瘤学家治疗肺癌的手段，但不管从临床经验、临床研究数据、分子生物学层面还是文献计量学的角度，

关键词：肺肿瘤表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂获得性耐药 T790M c-Met扩增 KRAS 不可逆性酪氨酸激酶抑制剂 mTOR抑制剂 MET抑制剂 igfir

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二甲双胍通过IGF-1RSTAT3信号通路抑制前列腺癌生长的实验研究

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西南国防医药 2018年第9期28卷 808-811页

作者：蒋东方卜强曾明辉秦锁炳夏东东彭毅丹阳市人民医院泌尿外科江苏丹阳212300

目的探讨二甲双胍对前列腺癌细胞的生物学功能影响及其机制。方法使用4～6周龄的SPF级BALB/c裸鼠,注射DU145细胞系建立前列腺癌小鼠模型。将小鼠随机分为对照组、二甲双胍组、PPP组,每组6只。对照组给予100μl生理盐水,二甲双胍组给予50... 详细信息

目的探讨二甲双胍对前列腺癌细胞的生物学功能影响及其机制。方法使用4～6周龄的SPF级BALB/c裸鼠,注射DU145细胞系建立前列腺癌小鼠模型。将小鼠随机分为对照组、二甲双胍组、PPP组,每组6只。对照组给予100μl生理盐水,二甲双胍组给予50μl生理盐水+50μl二甲双胍(250 mg/kg),PPP组给予50μl生理盐水+50μl 0.1μM鬼柏苦(PPP),每日瘤内注射1次。注射3 w后,处死小鼠,检测小鼠肿瘤重量,分析二甲双胍对前列腺癌生长的影响作用;qRT-PCR、WB法测定肿瘤组织中IGF-1R、STAT3的mRNA与蛋白的表达水平,ELISA法检测小鼠血清中IL-6和TNF-α的含量。结果与对照组相比,二甲双胍组、PPP组的肿瘤大小、体积显著降低。与对照组相比,二甲双胍组IGF-1R、STAT3的mRNA与蛋白表达显著减少,血清IL-6的含量显著减少;PPP组的IGF-1R mRNA表达显著低于二甲双胍组,二甲双胍组STAT3 mRNA表达显著低于PPP组。结论二甲双胍可能通过下调IGF1R/STAT3信号通路,抑制小鼠前列腺癌的生长。

关键词：二甲双胍 igfir STAT3 前列腺癌小鼠

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IGF1R 3’UTR多态性位点rs3743249与miR-141结合差异与前列腺癌发展风险关系的研究

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广西医科大学学报 2017年第3期34卷 327-331页

作者：王慧敏胡艳玲广西医科大学生命科学研究院南宁530021

目的:探讨位于胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)基因3'非翻译区(UTR)的前列腺癌(PCa)相关的多态性位点rs3743249与靶microRNA(miRNA)结合位点的改变对PCa发展风险的影响。方法:用miRbase预测与rs3743249结合相关的靶miRNA,分析从癌症基因... 详细信息

目的:探讨位于胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)基因3'非翻译区(UTR)的前列腺癌(PCa)相关的多态性位点rs3743249与靶microRNA(miRNA)结合位点的改变对PCa发展风险的影响。方法:用miRbase预测与rs3743249结合相关的靶miRNA,分析从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载IGF1R基因mRNA和靶miRNA的表达数据,同时筛选符合纳入标准的GEO数据集,对基于TCGA数据分析的靶miRNA结果进行验证,采用双荧光素酶报告基因技术对转染后的人胚肾细胞(HEK293T)在体外检测rs3743249的不同等位位点对靶miRNA结合的影响。结果:rs3743249位于IGF1R的3'UTR第4 752个碱基,与其结合相关的靶miRNA为miR-141。用TCGA数据分析IGF1R基因显示,IGF1R在PCa组织显著上调(P<0.05);与配对的癌旁组织相比,miR-141在3套公共数据(TCGA、GSE23022和GSE36803)的PCa组织样本中均显著上调(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因的检测结果显示,miR-141与含rs3743249等位位点为G的IGF1R3'UTR的结合更稳定,miR-141与IGF1R基因的结合起到稳定IGF1R基因表达的作用,而不是抑制作用。结论:IGF1R3'UTR多态性位点rs3743249等位位点G在促进PCa发展上风险性更大,遗传突变影响PCa的发展风险。

关键词：前列腺癌 igfir 多态性位点 miR-141

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