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雌激素拮抗剂ici-182780对ZDY101调节CHOm_2细胞M_2受体密度的影响

核技术 2003年第11期26卷 845-848页

作者：王雪松胡雅儿夏宗勤上海第二医科大学细胞调控研究室上海200025

CHOm2细胞加雌二醇、ZDY101或等体积溶媒DMSO培养后通过3H-NMS结合反应测定M受体密度,并与同时加雌激素受体拮抗剂ici-182780的细胞作对比。结果显示:雌二醇组M受体密度为(123.7±23.9)fmol·mg-1,加ici-182780后为(84.8±19.8)fmol·mg... 详细信息

CHOm2细胞加雌二醇、ZDY101或等体积溶媒DMSO培养后通过3H-NMS结合反应测定M受体密度,并与同时加雌激素受体拮抗剂ici-182780的细胞作对比。结果显示:雌二醇组M受体密度为(123.7±23.9)fmol·mg-1,加ici-182780后为(84.8±19.8)fmol·mg-1;相应的DMSO对照组为(89.6±22.9)fmol·mg-1,加ici后为(66.9±22.5)fmol·mg-1;雌二醇组加ici-182780后M受体密度降低的幅度远大于DMSO对照组。ZDY101组M受体密度为(147.3±36.9)fmol·mg-1,加ici-182780后为(120.8±40.4)fmol·mg-1;相应的DMSO对照组为(95.9±24.0)fmol·mg-1,加ici-182780后为(77.0±22.3)fmol·mg-1。表明雌激素和ZDY101都具有的提高M受体密度的功效,雌激素的药效可被ici抑制,而ZDY101的药效不被ici抑制,说明ZDY101有不同于雌激素的作用机制。

关键词： M受体阿尔采默病 ZDY101 知母雌二醇 ici-182780

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雌激素延缓皮肤老化作用机制的初步探讨

雌激素延缓皮肤老化作用机制的初步探讨

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作者：左俊南方医科大学

学位级别：硕士

第一部分雌二醇对皮肤成纤维细胞增殖迁移影响及其调控机制的实验研究目的：观察雌激素(17β-estrogen,17β-E2)对体外培养的正常人皮肤成纤维细胞(Human skin fibroblast,HSFB)增殖与迁移的影响,探究雌激素调控人皮肤成纤维细胞增殖... 详细信息

第一部分雌二醇对皮肤成纤维细胞增殖迁移影响及其调控机制的实验研究目的：观察雌激素(17β-estrogen,17β-E2)对体外培养的正常人皮肤成纤维细胞(Human skin fibroblast,HSFB)增殖与迁移的影响,探究雌激素调控人皮肤成纤维细胞增殖是否受到丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)的影响,弄清其可能的调控途径及机制。方法：采用酶消化法体外分离培养正常人皮肤成纤维细胞,取第3-6代细胞用于实验;1.采用MTT法,分别于不同浓度17β-E2、17β-E2+雌激素p受体拮抗剂ici-182780和空白干预后24、48、72、96h,检测成纤维细胞的分裂增殖活力;2.建立体外细胞划痕(Scratch-Wound)模型,分别于模型制备后24、48h、72h利用倒置相差显微镜观察细胞在不同浓度17β-E2、17β-E2+ici-182780和空白干预下的迁移情况;3.利用免疫细胞化学技术检测成纤维细胞爬片在17β-E2、17β-E2+ici-182780和空白干预后TGFβ1蛋白表达的变化;4.流式细胞术检测17β-E2及雌激素p受体拮抗剂ici-182780对成纤维细胞周期分布的影响;5.按干预因素的不同将细胞分为6组：空白对照组(A组)、17β-E2组(B组)、17β-E2+ici-182780组(C组)、17β-E2+PD98059组(D组)、17β-E2+SP600125组(E组)和17β-E2+SB203580组(F组),收集经上述各激酶抑制剂和(或)雌激素处理后的成纤维细胞,提取总RNA和总蛋白,分别利用荧光定量PCR和Western-Blot技术检测各组细胞增殖细胞核抗原(Proliferation cell nuclear antigen, PCNA) mRNA和蛋白的表达变化情况。结果：1.(1)MTT检测发现,24h时,各个浓度(10-8-10-12mol/L)雌激素刺激组细胞增殖效应与空白对照组无显著差异(0.118±0.005、0.113±0.007、0.128±0.013、0.113±0.006、0.122±0.012vs0.115±0.007)(P>0.05);48、72、96h时,均以10-10mol/l雌激素组促增殖效应最强(48h,0.208±0.015vs0.121±0.015、0.137±0.017、0.172±0.012、0.137±0.019);其中72、96h时各浓度组雌激素促增殖效应均显著强于空白组(72h,0.245±0.028、0.303±0.022、0.378±0.041、0.276±0.036、0.232±0.022vs0.166±0.025;96h,0.344±0.036、0.406±0.033、0.485±0.031、0.386±0.032、0.368±0.034vs0.196±0.033)(P182780+10-10mol/l雌激素组(B组)与空白对照(C组)、10-10mol/l雌激素组(A组)细胞增殖效应无统计学差异(0.120±0.015vs0.113±0.007、0.128±0.015)(P>0.05);而48、72、96h时,A组促增殖效应均明显强于另外两组(48h,0.211±0.015vs0.119±0.016、0.136±0.015;72h,0.352±0.049vs0.168±0.030、0.232±0.025;0.486±0.028vs0.196±0.024、0.368±0.034)(P0.05),但72、96h时均显著强于C组(72h,0.232±0.025vs0.168±0.030;96h,0.368±0.034vs0.196±0.024)(P 0.05);(2)24h、48h、72h时,10-8mol/l雌激素组

关键词：雌激素(二醇) ici-182780 SB203580 PD98059 SP600125 成纤维细胞苯甲酸雌二醇皮肤老化超氧化物歧化酶(SOD) 羟脯氨酸(HYP) 丙二醛(MDA)

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雌激素对人皮肤成纤维细胞增殖与迁移的影响

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中华医学美学美容杂志 2013年第3期19卷 207-210页

作者：左俊李勤陈葵曾东张斌余文林南方医科大学研究生学院广州510515 广州军区总医院

目的探讨雌激素（17pestrogen，17βE2）对人皮肤成纤维细胞（human skin fibro-blast，HSFB）增殖与迁移的影响。方法分离培养HSFB，传至第4代；（1）四甲基偶氮噻唑蓝比色法（MTT）检测不同浓度17β-E2和17β-E2＋雌激素β受体（estro... 详细信息

目的探讨雌激素（17pestrogen，17βE2）对人皮肤成纤维细胞（human skin fibro-blast，HSFB）增殖与迁移的影响。方法分离培养HSFB，传至第4代；（1）四甲基偶氮噻唑蓝比色法（MTT）检测不同浓度17β-E2和17β-E2＋雌激素β受体（estrogen β receptor，ER-β）拮抗剂ici-182780干预24、48、72、96h后HSFB增殖活力；（2）流式细胞仪检测17β-E2和ici-182780对HSFB周期分布的影响；（3）建立细胞划痕（Scratch-Wound）模型，24、48、72h后观察HSFB在不同浓度17β-E2和17β-E2＋ici-182780干预下的迁移情况。结果（1）MTT显示，48、72、96h时，10^-8、10^-9、10^-10、10^-11、10^-12mol／L浓度范围内，均以10μmol／L 17G-E2促增殖效应最强；并且10^-10mol／L17β-E2组（A组）细胞增殖效应强于ici-182780＋10^-10mol／L 17β-E2组（B组）与空白组（C组，P〈0．01）；（2）A组处于S期的细胞比例多于B、C组（P〈0．01），处于G0／G1期的细胞比例则少于B、C组（P〈0．01）；（3）48h时，10^-6、10^-7、10^-8、10^-9、10^-10mol／L浓度范围内，10mol／L 17β-E2促细胞迁移效应最强（P〈0．01）；24、48、72h时，10μmol／L 178-E2组（D组）细胞迁移距离均大于10^-8mol／L17βE2＋ici-182780组（E组）及空白组（F组）（P〈0．01）。结论10^-10mol／L浓度雌激素促HSFB增殖效应最强；10μmol／L浓度促HSFB迁移效应最强；ici-182780有效减弱上述2种效应。

关键词：人皮肤成纤维细胞雌激素细胞增殖细胞迁移 ici-182780

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雌激素诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转分化的机制研究

雌激素诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转分化的机制研究

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第七届中国医师协会美容与整形医师大会

作者：熊杰陈小波余文林程飚李勤广州军区总医院整形外科·全军激光整形中心

目的:探讨雌激素诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化的可能途径和调控机制。方法:将人皮肤成纤维细胞分为6组:对照组、雌激素组、雌激素+ici-182780组、雌激素+SB203580组、雌激素+PD98059组和雌激素+SP600125组。各组细胞经同步... 详细信息

目的:探讨雌激素诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞转分化的可能途径和调控机制。方法:将人皮肤成纤维细胞分为6组:对照组、雌激素组、雌激素+ici-182780组、雌激素+SB203580组、雌激素+PD98059组和雌激素+SP600125组。各组细胞经同步化处理后,直接以雌激素刺激或经上述各激酶抑制剂预处理后再以雌激素刺激。收集细胞,一部分以单细胞RT-PCR检测α-SMA阳性表达百分比,另一部分细胞抽提总RNA后采用实时荧光定量RT-PCR检测α-SMA的表达水平变化。结果:雌激素组的α-SMA表达水平和阳性百分比显著升高（雌激素组vs对照组,P＜0.01）,而ici-182780组和SP600125组中α-SMA表达水平和阳性百分比升高的作用则被显著抑制（雌激素+ici-182780组、雌激素+SP600125组vs雌激素组,P＜0.05）。结论:在雌激素诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞的转分化过程中,雌激素β受体及JNK/MAPK信号转导途径起到重要作用。

关键词：雌激素雌激素β受体成纤维细胞肌成纤维细胞转分化激酶抑制剂 ici-182780 SB203580 PD98059 SP600125

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