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Synthesis and biological evaluation of novel N-(alkoxyphenyl)-aminocarbonylbenzoic acid derivatives as PTP1B inhibitors

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Chinese Chemical Letters 2010年第12期21卷 1415-1418页

作者： Yuan Feng Tong Pei Zhang Feng Chen Ling Hua Hao Fei Ye Jin Ying Tian Song Wu Department of New Drug Research and Development (Key Laboratory of Biosynthesis of Natural Products Ministry of Health of PRC) Institute of Materia Medica Peking Union Medical College & Chinese Academy of Medical Sciences Beijing 100050 China Department of Pharmacology Institute of Materia Medica Peking Union Medical College & Chinese Academy of Medical Sciences Beijing 100050 China

基于 petroselinic 酸看了好禁止的活动的事实(ic50 = 6.99 mol/L ) 对在 vitro 的蛋白质酷氨酸 phophatase 1B (PTP1B ) ，一系列新奇的 N-(alkoxyphenyl )-aminocarbonylbenzoic 酸衍生物被设计并且综合。结果显示大多数衍生物对 PTP... 详细信息

基于 petroselinic 酸看了好禁止的活动的事实(ic50 = 6.99 mol/L ) 对在 vitro 的蛋白质酷氨酸 phophatase 1B (PTP1B ) ，一系列新奇的 N-(alkoxyphenyl )-aminocarbonylbenzoic 酸衍生物被设计并且综合。结果显示大多数衍生物对 PTP1B 显示出更多的有势力活动。特别，在 vitro 与 106 nmol/L 的 ic50 加重 13 举办明显的活动。

关键词：衍生物烷氧基合成系抑制剂评价 ic50 抑制活性酪氨酸

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纳米抗体在真菌毒素检测中的应用

广东农业科学 2022年第11期49卷 9-20页

作者：吴绍文邹新路胥锦涛晏石娟广东省农业科学院农业生物基因研究中心/广东省农作物种质资源保存与利用重点实验室

真菌毒素是由真菌产生的次生代谢产物，给人类和禽畜健康造成严重危害，且其对农产品的污染给全球经济造成重大损失。因此，控制毒素污染、毒素检测和降解的相关技术研发尤为迫切。目前农产品中真菌毒素检测和大规模筛查的常用手段是以... 详细信息

真菌毒素是由真菌产生的次生代谢产物，给人类和禽畜健康造成严重危害，且其对农产品的污染给全球经济造成重大损失。因此，控制毒素污染、毒素检测和降解的相关技术研发尤为迫切。目前农产品中真菌毒素检测和大规模筛查的常用手段是以抗体为核心材料的免疫分析技术，相比于传统的单克隆抗体和多克隆抗体，新兴的纳米抗体具有体积小、易于体外表达、稳定性高等天然优势，因此其在真菌毒素检测技术研发中广受重视。系统总结了黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇等常见真菌毒素检测相关纳米抗体的研发进展，重点综述抗真菌毒素纳米抗体和抗独特型纳米抗体在酶联免疫吸附测定、生物发光酶联免疫分析、电化学免疫传感器和荧光共振能量转移免疫测定等不同免疫分析方法中的应用。通过比较不同检测方法中纳米抗体的半数抑制率、检测限和线性范围等性能参数，分析基于不同类型纳米抗体的检测技术的优缺点。探讨新抗体研发难度大、检测毒素种类少等亟待解决的关键问题，指出纳米抗体和真菌毒素结合机制分析、理性设计、定向进化、结合多肽的筛选和设计等前沿技术在纳米抗体设计研究中的重要方向，以期为进一步开发基于纳米抗体的真菌毒素检测技术提供思路。

关键词：真菌毒素纳米抗体免疫分析农产品检测技术 ic50 检测限

急性博落回总碱中毒对窦房结HCN4表达变化影响的研究

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急性博落回总碱中毒对窦房结HCN4表达变化影响的研究

作者：张静皖南医学院

学位级别：硕士

目的:观察家兔博落回总碱中毒的表现及窦房结组织的形态学改变,探究家兔急性博落回总碱中毒时HCN4(超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4,hyperpolarization activated cyclic nucleotide-gated cation channel 4)在窦房结的表达的变化。... 详细信息

目的:观察家兔博落回总碱中毒的表现及窦房结组织的形态学改变,探究家兔急性博落回总碱中毒时HCN4(超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4,hyperpolarization activated cyclic nucleotide-gated cation channel 4)在窦房结的表达的变化。定性检测博落回总碱的主要成分,比较博落回总碱不同成分对原代窦房结细胞及原代心肌细胞细胞毒性差异。方法:家兔急性毒性实验采用健康清洁级家兔20只,雌雄各半,随机分为空白对照组(n=5)和实验组(n=20),分别灌胃最大给药容积0.1%羧甲基纤维素钠(0.1%CMC-Na)溶液,和梯度浓度的博落回总碱0.1%CMC-Na溶液。观察24h内实验组家兔一般体征,对家兔死亡情况及时间进行统计,计算得出半数致死量(LD),采用LD及2LD博落回总碱溶于最大给药容积0.1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液再次灌胃家兔,至每组死亡数量为4只,对家兔进行系统解剖,采用苏木素-伊红(HE)染色法、Masson三色染色法观察部分脏器及窦房结组织病理学改变,采用免疫组织化学染色法和蛋白质免疫印迹法(Western-Blot)检测HCN4的表达情况,采用统计学分析方法计算差异是否存在统计学意义,进一步了解博落回总碱急性中毒对家兔窦房结HCN4蛋白表达水平的影响。采用高效液相色谱法(HPLC)定性检测博落回总碱的主要成分。培养SD大鼠原代窦房结细胞及原代心肌细胞,采用细胞计数试剂-8法(CCK-8)计算不同成分的对SD大鼠原代窦房结细胞和原代心肌细胞半数抑制浓度ic及其95%可信限,比较博落回总碱中不同成分细胞毒性的差异。结果:1、根据急性毒性实验结果,家兔急性博落回总碱中毒半数致死量LD为510.62mg/kg,其95%可信区间为(255.31-1021.24)mg/kg;2、急性博落回中毒家兔HE染色结果显示,窦房结组织P细胞空泡化,胞浆淡染,肝、脾、肾等器官小血管淤血,余未见明显特异性病理改变;3、采用Western Blot及免疫组织化学方法证实,急性博落回总碱中毒家兔HCN4蛋白主要表达定位于窦房结P细胞胞质及胞膜,与对照组相比,中毒组窦房结HCN4蛋白表达降低(Pic=1.619μM,95%置信区间为(0.7915-1.988)μM,对SD大鼠原代心肌细胞的ic=1.626μM,95%置信区间为(1.445-1.777)μM;6、白屈菜红碱对SD大鼠原代窦房结细胞ic=1.903μM,95%置信区间为(1.548-2.515)μM;白屈菜红碱对SD大鼠原代心肌细胞ic=1.997μM,95%置信区间为(1.862-2.148)μM。结论:1、家兔急性博落回总碱中毒LD为510.62mg/kg,其95%可信区间为(255.31-1021.24)mg/kg,中毒靶器官无特征性组织病理学改变;2、中毒死组窦房结HCN4蛋白表达较对照组下调;3、博落回总碱主要成分为血根碱及白屈菜红碱;4、血根碱对SD大鼠原代培养的窦房结细胞的细胞毒性较其对原代心肌细胞的细胞毒性强;白屈菜红碱对原代窦房结细胞的细胞毒性较其对原代心肌细胞的细胞毒性强;5、血根碱对原代心肌细胞和原代窦房结细胞的毒性强于白屈菜红碱对原代心肌细胞及原代窦房结细胞的毒性。

关键词：博落回 HCN4 血根碱白屈菜红碱 ic50

动力学分光光度法测定中药对超氧阴离子自由基的清除率

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光谱学与光谱分析 2005年第4期25卷 617-619页

作者：田益玲陈冠华崔同河北农业大学食品科技学院河北保定071001 河北农业大学生命科学学院河北保定071001

建立了一种利用动力学分光光度法测定中药对超氧阴离子自由基清除率的新方法。研究表明:当波长为5 2 0nm、黄嘌呤氧化酶浓度为4×10 -3 μg·mL-1,反应时间在2～7min时,可得到最佳测定条件。在该条件下测得的抗坏血酸对超氧阴离子自由... 详细信息

建立了一种利用动力学分光光度法测定中药对超氧阴离子自由基清除率的新方法。研究表明:当波长为5 2 0nm、黄嘌呤氧化酶浓度为4×10 -3 μg·mL-1,反应时间在2～7min时,可得到最佳测定条件。在该条件下测得的抗坏血酸对超氧阴离子自由基的清除率与文献报道值一致。方法用于中药厚朴和杜仲的测定,它们对超氧阴离子自由基的ic50 分别为7 5. 80和32 3. 80 0mg·L-1。

关键词：超氧阴离子自由基分光光度法测定动力学中药自由基清除率反应时间测定条件文献报道抗坏血酸 ic50 酶浓度黄嘌呤

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KRAS对T-ALL细胞株体外生存的影响

KRAS对T-ALL细胞株体外生存的影响

作者：柳梓杨重庆医科大学

学位级别：硕士

第一部分T-ALL细胞株RAS基因编码区突变状况目的:检测在T细胞急性淋巴细胞白血病(acute T-lymphocytic leukemia,T-ALL)细胞株中,RAS基因编码区序列是否发生点突变及突变类型的分布信息。方法:利用血液/组织/细胞基因组DNA提取试剂盒纯... 详细信息

第一部分T-ALL细胞株RAS基因编码区突变状况目的:检测在T细胞急性淋巴细胞白血病(acute T-lymphocytic leukemia,T-ALL)细胞株中,RAS基因编码区序列是否发生点突变及突变类型的分布信息。方法:利用血液/组织/细胞基因组DNA提取试剂盒纯化8个人T-ALL细胞株Loucy、MOLT-4、CCRF-CEM、CUTLL1、HPB-ALL、Jurkat、PEER、P12-icH的DNA,利用PCR法分别扩增各个细胞的RAS基因编码区序列,送至擎科公司进行测序。经T-A克隆后,利用Sanger法分别对KRAS、NRAS、HRAS基因的编码区测序;利用DNAMAN软件和Chromas软件进行序列与峰图比对,检验8个T-ALL细胞株中RAS基因的点突变情况。结果:在所纳入的8个T-ALL细胞株(Loucy、MOLT-4、CCRF-CEM、CUTLL1、HPB-ALL、Jurkat、PEER、P12-icH)中,对于KRAS基因,发生错义突变的细胞株共有两种,分别为Loucy和P12-icH细胞,均为p.KRAS突变,蛋白翻译由甘氨酸转变为天冬氨酸,其余6种T-ALL细胞株经过序列和峰图比对均未发现任何类型的突变。对于HRAS基因,T-ALL细胞株发生了同义突变,其中,在Loucy细胞发现c.177C>T,导致HRAS第7号外显子的22位密码子同义突变,蛋白翻译为丙氨酸;在其余6株T-ALL细胞株中发现c.81T>C,导致HRAS第6号外显子的27位密码子同义突变,蛋白翻译为组氨酸。对于NRAS基因,8种T-ALL细胞株均未发现任何类型的突变。结论:RAS基因作为最常见的癌基因,在本实验中,T-ALL细胞株中的Loucy细胞与P12-icH细胞发现p.KRAS突变,突变发生在第12位常见激活性突变位点,提示KRAS在T-ALL中可发挥促癌作用,须进一步阐释KRAS对T-ALL细胞株的具体作用机制。第二部分抑制RAS活性对T-ALL细胞株体外生存的影响目的:通过使用不同RAS抑制剂分别处理8种T-ALL细胞株,并计算其ic值,检测对T-ALL细胞株有效的RAS抑制剂,及处理后T-ALL细胞株的体外生存变化,为探索RAS对T-ALL细胞株体外生存的具体机制奠定基础。方法:使用四种RAS抑制剂pan-RAS inhibitor Compound 3144(KRAS、NRAS及HRAS抑制剂)、Tipifarnib(KRAS及NRAS抑制剂)、BI-3406及BAY-293(SOS1抑制剂,阻止SOS-RAS相互作用),以不同浓度梯度分别作用于8种T-ALL细胞株(Loucy、MOLT-4、CCRF-CEM、CUTLL1、HPB-ALL、Jurkat、PEER、P12-icH),观察处理后细胞的生长情况;利用Annexin V-PE/7-AAD双染色法和流式细胞术检测不同RAS抑制剂处理后8种T-ALL细胞株的凋亡情况。结果:除了ETP-ALL细胞系PEER细胞(ic=47.916μmol/L)外,Compound 3144对其它7种T-ALL细胞株均有一定的杀伤作用,ic分别是CCRF-CEM ic=2.085μmol/L,HPB-ALL ic=5.469μmol/L,CUTLL1 ic=3.275μmol/L,Jurkat ic=4.738μmol/L,Loucy ic=4.344μmol/L,MOLT-4 ic=3.017μmol/L,P12-icH ic=7.208μmol/L;同样,Tipifarnib对除ETP-ALL细胞系PEER(ic=94.2265μmol/L)外的其他7种T-ALL细胞株均有一定的杀伤作用,ic分别为CCRF-CEMic=13.62μmol/L,HPB-ALL ic=7.1μmol/L,CUTLL1 ic=10.64μmol/L,Jurkat ic=12.28μmol/L,Loucy ic=11.57μmol/L,MOLT-4 ic=8.79μmol/L,P12-icH ic=29.49μmol/L。所有T-ALL细胞对BI-3406不敏感,而与之药理作用相同的BAY-293促进细胞凋亡(可能存在其它作用),二者均不是治疗T-ALL的有效RAS抑制剂。结论:表明RAS在大多数T-ALL细胞株生存中扮演主要促进作用。对T-ALL细胞有效的RAS抑制剂难以选用,抑制RAS活性也会促进细胞凋亡,影响T-ALL细胞株的体外生存。第三部分敲低KRAS表达对T-ALL细胞株体外生存的影响目的:验证RAS蛋白家族在维持T-ALL细胞株体外生长中的功能。方法:利用分子克隆实验,构建靶向KRAS基因编码区siRNA表达逆转录质粒;将siRNA克隆到pSEH-361载体,应用pAMPHO与pVSVG质粒在HEK-293T细胞中,包装逆转录病毒,感染T-ALL细胞株,构建敲低KRAS基因表达的P

关键词： RAS基因突变 T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL) 细胞株 RAS抑制剂细胞凋亡细胞生存 ic50 KRAS 细胞增殖

Twist1抑制剂Harmine抑制肾脏纤维化的安全性及有效性研究

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Twist1抑制剂Harmine抑制肾脏纤维化的安全性及有效性研究

作者：黄刘奕菲中国人民解放军空军军医大学

学位级别：硕士

【背景】目前全球多达10%的成年人患有慢性肾病(CKD),其中约8.5亿人患有不同类型的肾脏疾病。肾脏纤维化是各种CKD发生发展所共有的病理表现。目前缺乏直接抑制肾脏纤维化的药物。抗肾纤维化药物的开发是延缓CKD的进展,改善CKD患者的预... 详细信息

【背景】目前全球多达10%的成年人患有慢性肾病(CKD),其中约8.5亿人患有不同类型的肾脏疾病。肾脏纤维化是各种CKD发生发展所共有的病理表现。目前缺乏直接抑制肾脏纤维化的药物。抗肾纤维化药物的开发是延缓CKD的进展,改善CKD患者的预后的关键点之一。课题组前期研究证实转录因子Twist1在促进肾脏纤维化过程中发挥着重要作用。提出Twist1可能是抗肾纤维化的有效干预靶点。Harmine是一种β-碳碱生物碱,在许多植物中都有发现。在一项无偏筛选中,Harmine被首次发现可以有效抑制Twist1,在肺癌中具有显著抗肿瘤活性。Harmine处理可导致非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Carcinoma,NSCLC)细胞的Twist1降解,诱导细胞衰老或凋亡。因此,Harmine是否能作为有效的抗肾纤维化的药物,值得进一步研究。为此,我们通过收集原发性肾小球病Ig AN患者和DN患者的肾脏活检组织标本进行Mssson染色、纤维化因子α-SMA以及Twist1的免疫组化染色并进行了生存分析探索了Twist1在CKD患者的肾活检组织标本中的表达与肾纤维化及e GFR的相关性;MTT实验和LD实验初步评定了Hamrine在体内体外的安全性;以及体内外实验验证了Harmine通过抑制Twist1进而抑制肾脏纤维化的作用,为进一步探究Harmine的抗纤维化的临床前研究奠定基础。【目的】本研究旨在探索Twist1抑制剂Harmine抑制肾脏纤维化的有效性及安全性,为进一步探索抑制肾脏纤维化的临床用药奠定基础。1.探索CKD患者肾组织Twist1高表达与纤维化程度的相关性。2.通过体内外实验对Harmine的安全性进行初步评价。3.通过体内外实验对Harmine缓解肾脏纤维化的有效性进行研究。【方法】1.收集原发性肾小球病Ig AN患者和DN患者的肾脏活检组织标本进行Mssson染色、纤维化因子α-SMA以及Twist1的免疫组化染色,对染色结果进行相关性分析,以此探究Twist1在CKD患者的肾活检组织标本中的表达与肾纤维化及e GFR的相关性。2.分别用人肾小管上皮细胞系HK-2,HKC-8,小鼠肾小管上皮细胞BUMPT以及大鼠肾小管上皮细胞系NRK-52E进行MTT实验,分别计算Harmine在四种细胞中24h,48 h以及72 h的半数抑制浓度(ic),以此评价Harmine在体外的安全性。设置不同浓度梯度,C57小鼠腹腔注射Harmine进行半数致死量(LD)检测,观察小鼠给药后60分钟内的反应及状态,每日给药前记录体重,一周后取重要脏器进行HE染色以及血清肝肾功能检测,以此评价Harmine在体内的安全性。3.利用缺氧孵箱设24 h,48 h两个时间梯度缺氧处理HK-2细胞,并同时进行Harmine给药处理,根据前期LD结果设置三个适宜的浓度梯度,在蛋白和RNA水平对Harmine对Twist1的抑制作用及对促纤维化因子的抑制作用进行评价。利用野生型(Wild Type,WT)C57小鼠以及Twist1小鼠构建单侧肾脏缺血再灌注(unilateral ischemic re-perfusion injury,u IRI)肾脏纤维化模型,腹腔注射不同浓度梯度的Harmine溶液。由于目前临床没有显著有效的抗纤维化药物,鉴于盐酸贝那普利可通过降低肾脏高内压、高滤过、高灌注而去改善肾脏功能,发挥部分缓解肾纤维化表型的作用,因此,同时,设立一组u IRI+盐酸贝那普利灌胃组作为阳性对照组。14天后取肾脏组织进行HE、Masson、PAS染色以及免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)染色,并在蛋白和组织形态学水平对Harmine在抑制肾脏纤维化过程中的有效性进行评价。【结果】1.经相关性分析发现,Twist1表达越高,纤维化程度越重,同时e GFR越低。2.通过MTT实验成功计算出了四种细胞系在24 h,48 h以及72 h的ic值,在HK2细胞中,Harmine在24 h,48 h以及72 h的ic值分别为86.44μmol/L,89.18μmol/L,以及30.50μmol/L;在HKC-8细胞中,Harmine在24 h,48 h以及72 h的ic值分别为117.61μmol/L,20.72μmol/L,以及18.30μmol/L;在小鼠肾小管上皮细胞BUMPT中,其在三个时间点的ic值分别为21.82μmol/L,11.32μmol/L,以及6.31μmol/L;在NRK-52E细胞中,Harmine在24 h,48 h以及72 h的ic值分别为51.43μmol/L,19.82μmol/L,以及16.16μmol/L。为后续细胞给药处理实验提供了浓度参考,并对Harmine在体外的安全性进行了评价。成功计算出Harmine在C57小鼠体内的LD为36.87mg/kg,此外,通过

关键词： Twist1 Harmine 肾脏纤维化慢性肾脏病 ic50 LD50

^(99m)Tc-MIBI检测肺癌耐药性的作用研究

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中华医学杂志 2005年第21期85卷 1493-1498页

作者：胡硕胡成平梁昌华中南大学湘雅医院核医学科长沙410008 中南大学湘雅医院呼吸内科长沙410008

目的拟探讨99mTcMIBI能否检测肺腺癌A549DDP细胞的耐药性及人参单体Rh2作用后A549DDP细胞对顺铂耐药性的变化。方法用MTT法检测顺铂对敏感A549细胞和耐药A549DDP细胞的ic50、对A549DDP细胞的低效浓度(≤ic20),Rh2对A549DDP细胞的无毒浓... 详细信息

目的拟探讨99mTcMIBI能否检测肺腺癌A549DDP细胞的耐药性及人参单体Rh2作用后A549DDP细胞对顺铂耐药性的变化。方法用MTT法检测顺铂对敏感A549细胞和耐药A549DDP细胞的ic50、对A549DDP细胞的低效浓度(≤ic20),Rh2对A549DDP细胞的无毒浓度(≤ic5)。以无毒浓度Rh2和低效浓度的顺铂联合作用于A549DDP细胞,检测Rh2对顺铂抑制A549DDP细胞的影响。以无毒浓度的Rh2单独作用于A549DDP细胞作为Rh2组,以低效浓度的顺铂单独作用于A549DDP细胞作为DDP组,以无毒浓度的Rh2和低效浓度的顺铂联合作用于A549DDP细胞作为Rh2+DDP组,以不加药物干预作为对照组,Hoechst33258染色荧光显微镜下观察细胞形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡峰。γ计数器检测以上4组细胞及A549细胞的放射性活性。将以上细胞注入裸鼠皮下建模后,用99mTcMIBI进行SPECT显像。结果順铂对A549细胞、A549DDP细胞的ic50分别为24、325μmol/L,耐药指数为13.54。Rh2≤10μmol/L时,对A549DDP细胞无明显毒性作用;100μmol/L顺铂对A549DDP细胞的抑制率为12%。10μmol/LRh2与100μmol/L顺铂联合作用,顺铂对A549DDP细胞的ic50降为94μmol/L,与100μmol/L顺铂单独作用于A549DDP细胞的ic50比,逆转3.5倍。荧光显微镜下,Rh2组和DDP组的大部分细胞核和对照组的一样,荧光分布均匀;Rh2+DDP组的荧光成团块分布,有凋亡小体形成。对照组、Rh2组和DDP组的细胞无明显凋亡峰,而Rh2+DDP组则出现了显著的凋亡峰。各组A549DDP细胞和A549细胞均能摄取99mTcMIBI,Rh2组和DDP组与对照组之间细胞的放射性活性差异无统计学意义,而Rh2+DDP组则较对照组细胞的放射性活性显著性降低,P<0.05。A549细胞的放射性活性显著性高于A549DDP细胞的对照组,P<0.01。99mTcMIBI显像,A549组裸鼠可见瘤块的放射性浓聚影。A549DDP对照组和DDP组裸鼠亦可见瘤块的放射性浓聚影,其放射性浓度较A549组淡,这两组间的R或R′差异无统计学意义,但与A549组比较,P<0.05。DDP+Rh2组裸鼠无肿瘤生长,局部未见明显放射性浓聚影。结论99mTc-MIBI能检测肺腺癌耐药的A549DDP细胞的耐药性;无毒浓度的Rh2能有效逆转A549DDP细胞对顺铂的耐药性,这种耐药性的变化亦能被99mTc-MIBI有效检测。

关键词： ^99mTc-MIBI显像作用研究 A549细胞 mol/L DP细胞放射性活性放射性浓聚流式细胞仪检测 SPECT显像 ic50 肺癌 MTT法检测显微镜下观察 Rh2 0.05 对照组顺铂耐药性 DDP 放射性浓度药物干预细胞形态细胞凋亡 γ计数器

二色补血草多糖的结构表征及其对Hela细胞的抑制作用

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高等学校化学学报 2004年第11期25卷 2034-2037页

作者：张连茹陈喀林李妮邹国林武汉大学生命科学学院武汉430072 内蒙古赤峰学院实验中心赤峰024001

从中药二色补血草中分离提取到一种水溶性多糖 ( LP) . 1 H NMR,1 3C NMR,IR,HPLC和 GC-MS等方法分析表明 ,LP是以α-D-[Glc A( 1→ 6) Glc]二糖为结构单位 ,每个重复的二糖单位彼此以α-( 1→ 4)糖苷键连接成直链多糖 .荧光光谱显示 L... 详细信息

从中药二色补血草中分离提取到一种水溶性多糖 ( LP) . 1 H NMR,1 3C NMR,IR,HPLC和 GC-MS等方法分析表明 ,LP是以α-D-[Glc A( 1→ 6) Glc]二糖为结构单位 ,每个重复的二糖单位彼此以α-( 1→ 4)糖苷键连接成直链多糖 .荧光光谱显示 LP的荧光谱峰出现在 460 nm附近 ,Zn2 + ,Ca2 + 通过与 LP络合 ,其荧光强度增加 .MTT实验表明 ,LP具有抑制肿瘤细胞活性 ,对 Hela细胞抑制的 ic50 为 62 .2 μg/m L.

关键词：二色补血草多糖结构 Hela细胞 ic50

酶解辅助提取广藿香挥发油成分分析与抗肿瘤活性初探

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中药材 2012年第5期35卷 796-799页

作者：于敬齐悦罗刚段宏泉周晶天津市临床药物关键技术重点实验室/天津医科大学药学院天津300070 天津医科大学基础医学研究中心天津300070

目的:优化广藿香挥发油的提取方法并考察其抗肿瘤活性。方法:在蒸馏法提取广藿香油之前进行酶解处理,通过正交试验研究酶的用量、酶解时间、温度以及pH对广藿香油提取率的影响,优选最佳工艺。采用气-质联用(GC-MS)测定广藿香挥发油的组... 详细信息

目的:优化广藿香挥发油的提取方法并考察其抗肿瘤活性。方法:在蒸馏法提取广藿香油之前进行酶解处理,通过正交试验研究酶的用量、酶解时间、温度以及pH对广藿香油提取率的影响,优选最佳工艺。采用气-质联用(GC-MS)测定广藿香挥发油的组成以及各成分的相对百分含量。通过MTT法测定广藿香油对Hela细胞增殖活性的抑制作用。结果:酶辅助提取广藿香油的最佳条件是:酶用量为生药重量的1%,在pH 4.5,45℃条件下酶解1 h;药典法、酶解法提取的总挥发油的提取率分别为2.2220、3.1360 mg/g;两种方法提取的广藿香油抑制He-la增殖细胞活性的ic50分别为:12.2±0.46、0.36±0.03μg/mL。结论:酶解法可提高广藿香挥发油的提取率,该法提取的广藿香油抑制Hela细胞增殖的活性强于药典法提取的广藿香油。

关键词：广藿香挥发油半纤维素酶 GC-MS ic50