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马钱子碱对heymann肾炎大鼠MAPK介导的足细胞损伤干预作用的研究

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马钱子碱对Heymann肾炎大鼠MAPK介导的足细胞损伤干预作用的研究

作者：朱家欢浙江中医药大学

学位级别：硕士

目的通过研究中药马钱子碱对被动型heymann肾炎（Passive heymann nephritis,PHN）大鼠的足细胞分子Podocin及erk,jnk,p38表达的影响,探讨马钱子碱对膜性肾病（Membranous nephropathy,MN）大鼠模型的作用及机制。方法体重120-150g之... 详细信息

目的通过研究中药马钱子碱对被动型heymann肾炎（Passive heymann nephritis,PHN）大鼠的足细胞分子Podocin及erk,jnk,p38表达的影响,探讨马钱子碱对膜性肾病（Membranous nephropathy,MN）大鼠模型的作用及机制。方法体重120-150g之间正常的雄性SD大鼠98只,适应性喂养1周以后,随机分为2组,即空白组和PHN大鼠模型制作组。模型制作组大鼠按0.4ml/100g体重单次尾静脉注射羊抗大鼠Fx1A血清。空白组仅尾静脉注射等体积的生理盐水。将造模成功后的大鼠,随机分为马钱子碱低剂量组、马钱子碱中剂量组、马钱子碱高剂量组、雷米普利组、模型组。造模后第9天开始,马钱子碱低、中、高剂量组每日分别按5mg/kg体重、10mg/kg体重、15mg/kg体重腹腔注射马钱子碱溶液。雷米普利组每日按5mg/kg体重雷米普利混悬液灌胃。模型组和空白组按雷米普利组等体积生理盐水灌胃。实验期间,动物自由饮食饮水。给药第10天、20天,每组分别处死5只大鼠,给药第30天处死余下大鼠,测定24小时尿蛋白定量及血常规、血生化指标;留取肾组织,用western bolt 法检测 podocin,erk,jnk,p38 蛋白。结果 1.大鼠血液、尿液指标的变化:（1）24小时尿蛋白定量水平:给药第10天、20天、30天,模型组高于空白组（P＜0.05）。给药第10天、30天,各实验组与模型组之间无统计学差异（P＞0.05）,但各组马钱子碱干预组较模型组有所下降,各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。给药第20天,马钱子碱高剂量组显著低于模型组（P＜0.05）,余实验组与模型组之间无统计学差异（P＞0.05）,但马钱子低、中剂量组较模型组有所下降,各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。（2）血清白蛋白水平:给药第10天,模型组低于空白组（P＜0.05）,各实验组与模型组之间无统计学差异（P＞0.05）,各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。给药第20天、30天,各组之间无统计学差异（P＞0.05）。（3）血清肌酐、谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平,血白细胞水平:给药第10天、20天、30天,各组之间无统计学差异（P＞0.05）。*** blot法检测蛋白结果显示:（1）测定所得的肾组织podocin的表达:给药第10天,20天,30天,空白组最高,模型组最低（P＜0.05）;各实验组较模型组均有所上升（P＜0.05）;但各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。其中给药第20天,30天,马钱子碱各剂量组均高于雷米普利组（P＞0.05）,马钱子碱干预组中,马钱子高剂组＞马钱子中剂量组＞马钱子低剂量组（P＜0.05）。（2）测定所得的肾组织erk的表达:给药第10天,模型组高于空白组（P＜0.05）;各实验组较模型组均有所下降（P＜0.05）;但各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。给药第20天,模型组高于空白组（P＜0.05）;马钱子碱高剂量组显著低于模型组（P＜0.05）,且马钱子碱低、中剂量组较模型组均有所下降;各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。给药第30天,模型组高于空白组（P＜0.05）;各实验组较模型组均有所下降（P＜0.05）,其中马钱子碱高剂量组较模型组下降明（P＜0.05）;各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。（3）测定所得的肾组织jnk的表达:给药第10天,模型组高于空白组（P＜0.05）;各实验组较模型组均有所下降（P＜0.05）;但各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。给药第20天,模型组高于空白组（P＜0.05）;马钱子碱高剂量组显著低于模型组（P＜0.05）,且马钱子碱低、中剂量组较模型组均有所下降;各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。给药第30天,模型组高于空白组（P＜0.05）;各实验组较模型组均有所下降（P＜0.05）,其中马钱子碱中、高剂量组较模型组下降明显（P＜0.05）;各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。（4）测定所得的肾组织p38的表达:给药第10天,第20天,第30天,模型组最高,高于其余各组（P＜0.05）;给药第20天,第30天,空白组最低,模型组高于空白组（P＜0.05）;各实验组之间无统计学差异（P＞0.05）。结论 PHN大鼠模型是比较好的人MN模型,其造模所需时间短、成功率高,临床表现与病理特征与人MN十分相似。马钱子碱确能减少PHN大鼠的尿蛋白水平,可以上调足细胞Podocin及erk,jnk蛋白的表达,本次实验马钱子碱治疗剂量对PHN大鼠是安全的,无明显肝肾及骨髓毒性。

关键词：马钱子碱 heymann肾炎膜性肾病 podocin erk jnk p38

马钱子碱干预heymann肾炎大鼠及其对足细胞Nephrin、Podocin的作用研究

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马钱子碱干预Heymann肾炎大鼠及其对足细胞Nephrin、Podocin的作...

作者：余杭英浙江中医药大学

学位级别：硕士

目的通过研究马钱子碱对被动型heymann肾炎(PHN)大鼠的足细胞分子Nephrin、Podocin表达的影响,探讨马钱子碱对膜性肾病(MN)大鼠模型的作用及机制。方法选取SD雄性大鼠116只,适应性喂养1周后,随机分为7组,即正常对照组、马钱子碱A组、马... 详细信息

目的通过研究马钱子碱对被动型heymann肾炎(PHN)大鼠的足细胞分子Nephrin、Podocin表达的影响,探讨马钱子碱对膜性肾病(MN)大鼠模型的作用及机制。方法选取SD雄性大鼠116只,适应性喂养1周后,随机分为7组,即正常对照组、马钱子碱A组、马钱子碱B组、马钱子碱C组、马钱子碱D组、雷米普利组、模型对照组。造模后第9天开始,马钱子碱A、B、C、D组每日上午按5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、30mg/kg腹腔注射马钱子碱溶液。雷米普利组每日按5mg/kg雷米普利混悬液灌胃。模型对照组和正常对照组按雷米普利组等体积生理盐水灌胃。实验期间,动物自由饮食饮水。给药第7天、14天,每组分别处死5只大鼠,给药第21天处死余下大鼠,测定24小时尿蛋白定量及血常规、血生化指标;留取肾组织标本,行免疫荧光IgG、免疫组化检测足细胞Nephrin、Podocin蛋白。结果 1.大鼠血液、尿液指标的变化:(1)24小时尿蛋白定量水平:给药第7天、给药第14天和给药第21天,与空白组比较,其余各组24小时蛋白定量明显高于空白组,差异有统计学意义(P0.05),但各马钱子碱干预组较雷米普利组与模型组均有所下降。给药第14天,与模型组比较,马钱子碱C组、D组24小时蛋白定量低于模型组,且差异有统计学意义(P0.05);给药第21天,与模型组比较,实验各组24小时蛋白定量低于模型组,有显著性差异(P0.05),在马钱子碱为30mg/kg时下降最多。(2)血清白蛋白水平:给药第7天、第14天和给药第21天,与空白组比较,其余各组血清白蛋白水平明显低于空白组,差异有统计学意义(P0.05);给药第14天,与模型组比较,马钱子碱C组、D组血清白蛋白水平高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);给药第21天,与模型组比较,马钱子碱各组血清白蛋白水平高于模型组,有显著性差异(P0.05);与雷米普利组比较,马钱子碱各组血清白蛋白水平与雷米普利有显著性差异(P0.05),但马钱子碱各组随着浓度的上升,其血清白蛋白水平有增加的趋势,在马钱子碱为30mg/kg时增加最多。(3)血清肌酐、谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平,血白细胞水平:给药第7天、14天、21天,各组之间无统计学差异(P>0.05)。2.大鼠肾脏病理形态学改变:(1)大鼠肾脏免疫荧光IgG的沉积:给药第7天,实验各组之间没有统计学差异(P>0.05);给药第14天,与模型组比较,马钱子碱C组、D组与模型组有显著差异(P0.05),与雷米普利组比较,马钱子碱C组、D组与雷米普利组有显著差异(P0.05);给药第21天,与模型组比较,实验各组免疫荧光IgG阳性区平均积分光密度低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),但马钱子碱各组随着浓度的上升,其免疫荧光IgG阳性区平均积分光密度有下降的趋势。(2)大鼠肾脏免疫足细胞分子Nephrin、Podocin的沉积:给药第7天、第14天、第21天,各实验组和模型组大鼠足细胞分子Nephrin、Podocin的表达均低于空白组,有统计学意义(P0.05);给药第14天,与模型组比较,马钱子碱C组Podocin的表达显著升高(P0.05);给药第21天,与模型组比较,实验各组大鼠足细胞分子Nephrin、Podocin的表达显著升高(足细胞分子Nephrin的表达除马钱子碱A组外)(P0.05),且马钱子碱各组随着浓度的上升,其大鼠足细胞分Nephrin、Podocin的表达有增加的趋势,在马钱子碱为30mg/kg时增加最多。结论(1)马钱子碱可以减少PHN大鼠的尿蛋白排泄定量,可能提高PHN大鼠血浆白蛋白水平;(2)马钱子碱可以

关键词：马钱子碱 heymann肾炎足细胞分子 Nephrin Podocin

小分子多肽化合物CMS010.26对大鼠主动型heymann肾炎的治疗作用及其机制探讨

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小分子多肽化合物CMS010.26对大鼠主动型Heymann肾炎的治疗作用及...

作者：赵鹏鹏天津医科大学

学位级别：硕士

目的: 观察小分子多肽CMS010.26对大鼠主动型heymann肾炎的治疗作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法: 1.应用MTT法观察CMS010.26体外及体内对小鼠T淋巴细胞转化的影响,应用血清溶血素法观察CMS010.26对小鼠抗体生成的... 详细信息

目的: 观察小分子多肽CMS010.26对大鼠主动型heymann肾炎的治疗作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法: 1.应用MTT法观察CMS010.26体外及体内对小鼠T淋巴细胞转化的影响,应用血清溶血素法观察CMS010.26对小鼠抗体生成的影响。 2.同种异体大鼠肾皮质匀浆与完全弗氏佐剂腹腔注射免疫大鼠制备主动型heymann肾炎模型;提纯同种异体大鼠肾皮质成分FxlA,与完全弗氏佐剂足垫注射免疫大鼠制备主动型heymann肾炎模型。 3.观察CMS010.26对足垫注射FxlA制备大鼠heymann肾炎模型24小时尿蛋白、血肌酐、尿素氮、血清白蛋白、总甘油三酯、总胆固醇、体重、肾指数以及病理损害的影响。 4.建立大鼠肾小球系膜细胞体外原代培养的体系,MTT法观察CMS010.26对细胞增殖的影响,ELISA法检测CMS010.26对细胞TNF-α分泌的影响。结果: ***010.26(0.01～100μg/ml)作用72小时能够抑制ConA(5μg/ml)刺激的T淋巴细胞增殖(Pheymann肾炎,模型组大鼠24小时尿蛋白于首次免疫后第10周后到14周持续高于佐剂对照组,Pheymann肾炎模型,模型组大鼠24小时尿蛋白于首次

关键词： heymann肾炎小分子多肽(CMS010.26) 系膜细胞(MsC) 肿瘤坏死因子-αa(TNF-α)

来氟米特对大鼠被动型heymann肾炎的治疗作用

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来氟米特对大鼠被动型Heymann肾炎的治疗作用

作者：庄凌南京医科大学

学位级别：硕士

目的研究来氟米特对被动性heymann肾炎(PHN)的治疗作用，对其在PHN治疗时所起的作用机制做初步探讨，为临床膜性肾病的治疗提供依据。方法 Wistar大鼠尾静脉注射抗FX1A血清，建立PHN模型;用BCA法测量24小时尿蛋白变化，用光镜、电镜... 详细信息

目的研究来氟米特对被动性heymann肾炎(PHN)的治疗作用，对其在PHN治疗时所起的作用机制做初步探讨，为临床膜性肾病的治疗提供依据。方法 Wistar大鼠尾静脉注射抗FX1A血清，建立PHN模型;用BCA法测量24小时尿蛋白变化，用光镜、电镜观察肾脏病理改变，并用RT-PCR观察nephrin mRNA表达改变。结果成功复制了PHN模型，来氟米特能减轻PHN大鼠蛋白尿、肾脏病变程度，并抑制nephrin mRNA表达减少。结论来氟米特对PHN有一定的治疗作用，可能是通过提高nephrin表达及减少免疫复合物沉积来实现这一作用。

关键词：来氟米特 heymann肾炎 Nephrin

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heymann肾炎发病机制的实验研究

中华病理学杂志 1995年第2期24卷 102-102页

作者：王迎伟张建民王晓红江苏徐州医学院免疫病理室南京铁道医学院病理室

Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎发病机制的实验研究王迎伟，张建民，王晓红Ｈｅｖｍａｎｎ肾炎（ＨＮ）是大鼠免疫复合物（ＩＣ）性肾小球疾病。过去认为，ＨＮ属循环ＩＣ（ＣＩＣ）沉积所致。世近年研究表明，ＨＮ的发病与肾内ＩＣ原位形成有关。... 详细信息

Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎发病机制的实验研究王迎伟，张建民，王晓红Ｈｅｖｍａｎｎ肾炎（ＨＮ）是大鼠免疫复合物（ＩＣ）性肾小球疾病。过去认为，ＨＮ属循环ＩＣ（ＣＩＣ）沉积所致。世近年研究表明，ＨＮ的发病与肾内ＩＣ原位形成有关。据此，我们进行了下列实验，现将结果...

关键词：肾炎 heymann肾炎鼠病理实验研究

真武胶囊粉对主动型heymann肾炎大鼠的治疗作用研究

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河南科学 2018年第9期36卷 1395-1400页

作者：乔晓芳王梦妮李芬芬冉延涛李晓天河南省食品药品审评查验中心郑州450001 郑州大学药学院郑州450001

为研究真武胶囊粉对大鼠主动型heymann肾炎的治疗作用,将SD大鼠随机分为6组,其中1组为溶媒对照组,其余组建立主动型heymann肾炎模型.将造模成功的大鼠按体重及尿蛋白量随机分为5组,溶媒对照组与模型对照组给予0.5%的羧甲基纤维素钠混悬... 详细信息

为研究真武胶囊粉对大鼠主动型heymann肾炎的治疗作用,将SD大鼠随机分为6组,其中1组为溶媒对照组,其余组建立主动型heymann肾炎模型.将造模成功的大鼠按体重及尿蛋白量随机分为5组,溶媒对照组与模型对照组给予0.5%的羧甲基纤维素钠混悬液,治疗组(高、中、低剂量组)按1 mL/kg的容积给予相应剂量的真武胶囊粉的羧甲基纤维素钠混悬液,并观察给药前后一般状况和测24 h的尿蛋白含量,给药结束时检测血清中总蛋白和白蛋白、肌酐和尿素氮的含量,取肾脏计算其脏器系数并进行病理学检查.结果显示真武胶囊粉组的大鼠尿蛋白、肌酐、尿素氮含量均明显低于heymann肾炎模型组,白蛋白与总蛋白的水平显著提高;病理检查真武胶囊粉组与模型组相比肾小球系膜未见或轻微增厚.试验表明真武胶囊粉对主动型heymann肾炎大鼠有较好的治疗作用,可明显改善肾功能,减轻肾小球系膜增厚等病理改变,且存在剂量依赖性.

关键词：真武胶囊粉 heymann肾炎尿蛋白

黄芪颗粒对大鼠主动型heymann肾炎的作用

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中药与临床 2010年第1期1卷 42-44页

作者：曾勇李春雨戚太林伍文彬孟宪丽成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室四川成都610075 四川百利药业有限公司四川成都610041

目的:观察黄芪颗粒对大鼠主动型heymann肾炎模型的影响。方法:给大鼠腹腔注射同种肾脏免疫复合物,复制大鼠主动型heymann肾炎模型,并分为heymann肾炎模型组、黄芪颗粒高、中、低剂量组和地塞米松阳性对照组,造模同时分别给予相应的药物... 详细信息

目的:观察黄芪颗粒对大鼠主动型heymann肾炎模型的影响。方法:给大鼠腹腔注射同种肾脏免疫复合物,复制大鼠主动型heymann肾炎模型,并分为heymann肾炎模型组、黄芪颗粒高、中、低剂量组和地塞米松阳性对照组,造模同时分别给予相应的药物,观察灌胃给予黄芪颗粒对heymann肾炎大鼠肾功能的影响。结果:黄芪颗粒能明显降低主动型heymann肾炎大鼠尿蛋白、血清肌酐和尿素氮水平,能明显改善大鼠主动型heymann肾炎所致的肾组织病理学改变。结论:黄芪颗粒对主动型heymann肾炎有良好的治疗作用。

关键词：黄芪颗粒 heymann肾炎实验研究

肾复康对大鼠被动型heymann肾炎的治疗作用研究

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中国实验方剂学杂志 2001年第3期7卷 35-38页

作者：廖雪珍周玖瑶李锐廖惠芳黄桂英广州中医药大学广州510405

从尿蛋白定量 ,血清总蛋白、白蛋白、白蛋白球蛋白 (A G)、血胆固醇及血清肌酐和尿素氮含量的变化情况等方面观察肾复康治疗肾小球肾炎的疗效。从血清和肾组织过氧化脂质 (LPO)含量、总超氧化物歧化酶 (SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH ... 详细信息

从尿蛋白定量 ,血清总蛋白、白蛋白、白蛋白球蛋白 (A G)、血胆固醇及血清肌酐和尿素氮含量的变化情况等方面观察肾复康治疗肾小球肾炎的疗效。从血清和肾组织过氧化脂质 (LPO)含量、总超氧化物歧化酶 (SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH PX)活性变化探讨肾复康对大鼠被动型heymann肾炎的治疗机理。结果显示 ,肾复康显著消除被动型heymann肾炎模型大鼠尿蛋白 ,升高血清总蛋白含量、白蛋白、白蛋白球蛋白 (A G)比值 ,降低胆固醇含量 ,降低血清肌酐和尿素氮含量 ,对肾功能具有保护作用。肾复康能显著抑制被动型heymann肾炎模型大鼠血清和肾组织匀浆LPO的含量升高及总SOD及GSH PX活性的降低。

关键词：肾复康被动型 heymann肾炎中医药疗法药理中药

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补体攻膜复合物与heymann肾炎

国外医学（生理病理科学与临床分册） 2001年第1期21卷 57-59页

作者：李兆丽张东生邓红东南大学医学院病理教研室江苏南京210009

heymann肾炎是研究人类膜性肾病的经典动物模型 ,补体攻膜复合物与heymann肾炎的发病密切相关 ,在heymann肾炎的发病中 ,插入肾小球上皮细胞膜的补体攻膜复合物可造成细胞的亚溶解性损伤 ,进而介导血栓素A2 、活性氧和转化生长因子 β... 详细信息

heymann肾炎是研究人类膜性肾病的经典动物模型 ,补体攻膜复合物与heymann肾炎的发病密切相关 ,在heymann肾炎的发病中 ,插入肾小球上皮细胞膜的补体攻膜复合物可造成细胞的亚溶解性损伤 ,进而介导血栓素A2 、活性氧和转化生长因子 β等炎症介质的释放 ,通过不同的作用机制导致肾小球滤过屏障的损伤和蛋白尿的产生。

关键词： heymann肾炎补体膜攻击复合物转化生长因子β