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hcv感染的血清学和病毒学试验

肝脏 1996年第3期1卷 177-179页

作者：陆志檬上海第二医科大学附屑瑞金医院200025

丙型肝炎病毒(hcv)是有囊膜的RNA病毒，属黄病毒科，它的基因组是由一条至少10000个核苷酸组成的正单链RNA，为一个连续翻译的开放读码框架(ORF)。编码一长约3011个氨基酸的多聚蛋白．经加工切割后分离为结构蛋白和非结构蛋白。

关键词： hcv感染病毒学血清学读码框架丙型肝炎病毒囊膜非结构蛋白 RNA 单链核苷酸

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hcv感染和晚期纤维化:等待还是治疗?

肝脏 2013年第9期18卷 633-634页

作者：王文俊党双锁西安交通大学医学院第二附属医院感染科 710004

我们医生实在是太频繁地忽视“首先不伤害”原则，且老是认为治疗就是答案。一旦有了可用的治疗，我们就频繁地认为能发生的最坏的事情就是治疗失败，而忽略了治疗的不良反应也可能很麻烦。如果不及时停药的话，即使通常认为安全的药物... 详细信息

我们医生实在是太频繁地忽视“首先不伤害”原则，且老是认为治疗就是答案。一旦有了可用的治疗，我们就频繁地认为能发生的最坏的事情就是治疗失败，而忽略了治疗的不良反应也可能很麻烦。如果不及时停药的话，即使通常认为安全的药物如拉米夫定也被证明对某些有特定病毒耐药变异的特殊个体是致命的。相比极少导致不良反应事件且与安慰剂安全性差不多的拉米夫定等抗HBV口服药物而言，目前抗hcv治疗对于每个患者既不足够安全也不足够有效。

关键词：治疗失败 hcv感染纤维化不良反应事件晚期拉米夫定口服药物安全性

整体护理在hcv感染合并肝功能异常患者抗病毒治疗中的应用评价

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中华医院感染学杂志 2018年第9期28卷 1363-1366页

作者：陈瑾饶高峰陈林平应丽勤陈晓莉温岭市第一人民医院戒毒中心浙江台州317500

目的探讨整体护理在hcv感染合并肝功能异常患者抗病毒治疗中的应用效果。方法选取2013年1月-2016年1月医院收治的肝功能异常合并hcv感染患者162例,抗病毒治疗的同时,按随机数字表法分为对照组和试验组,各81例;对照组患者行常规护理,试... 详细信息

目的探讨整体护理在hcv感染合并肝功能异常患者抗病毒治疗中的应用效果。方法选取2013年1月-2016年1月医院收治的肝功能异常合并hcv感染患者162例,抗病毒治疗的同时,按随机数字表法分为对照组和试验组,各81例;对照组患者行常规护理,试验组患者行整体护理,治疗48周后观察两组患者治疗前后肝功能变化,指标包括丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清白蛋白(ALB)、总胆红素(Total TBIL),同时观察两组早期病毒学应答(EVR)、治疗结束时病毒学应答(ETVR)、持续应答(SVR)、复发情况及不良反应发生情况,并采用健康调查简表(SF-36)对患者生活质量进行评定。结果两组患者抗病毒治疗后肝功能指标ALT、AST、ALB、TBIL水平较治疗前均降低,且两组水平比较差异无统计学意义;生活质量各指标评分均升高,两组比较差异有统计学意义(Phcv感染患者进行抗病毒治疗的同时,实施整体护理干预,可缓解患者病情,同时提高患者生活质量。

关键词：肝功能异常 hcv感染抗病毒整体护理

2004—2008年石家庄献血者hcv感染的调查分析

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中国输血杂志 2009年第9期22卷 746-747页

作者：宋任浩河北省血液中心河北石家庄050071

为了解本市献血者hcv感染的现状,同时评价现行hcv筛查的效果,创建新形势下血液安全策略,阻断输血后丙性肝炎的发生,进一步保证输血安全,我们对本中心近5年来献血者抗-hcv筛查情况回顾性调查,现报告如下。[第一段]

关键词：献血者 hcv感染输血

hcv F蛋白和负性共刺激分子2B4与hcv感染慢性化的关联研究

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HCV F蛋白和负性共刺激分子2B4与HCV感染慢性化的关联研究

作者：石丽萍南京医科大学

学位级别：硕士

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,hcv)是一种具有显著异源性和高度可变性的RNA病毒,病毒感染者极易发生慢性化、肝硬化,甚至出现肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)。迄今为止,临床上还没有出现有效的预防性疫苗。hcv感染已成为一... 详细信息

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,hcv)是一种具有显著异源性和高度可变性的RNA病毒,病毒感染者极易发生慢性化、肝硬化,甚至出现肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)。迄今为止,临床上还没有出现有效的预防性疫苗。hcv感染已成为一个全球性的公共卫生问题。目前,hcv感染最有效的预防方法是筛查hcv高危和易感人群,及早发现并积极治疗。因此,hcv慢性化感染转归的关联因素研究,如宿主免疫因素、生物学因素(病毒基因变异)、遗传因素的环境因素等,显得尤为重要。转框蛋白(Alternative reading frame protein,ARFP),即F蛋白,是由编码核心蛋白(hcv Core,Core,C蛋白)的核苷酸密码子移位产生的,与Core蛋白相似,发挥调节细胞内信号传导、物质代谢、细胞凋亡和诱导免疫应答的作用。2B4,即CD244,属于淋巴细胞信号活化分子(signaling lymphocyte activation molecule,SLAM)家族成员,主要表达于NK细胞、T细胞和粒细胞,与其配体CD48结合后发挥活化和抑制双相性的免疫功能。为探讨hcv F蛋白与负性共刺激分子2B4在慢性hcv感染中与宿主免疫因素的关联性,本研究共收集了45例慢性hcv患者(chronic hepatitis patient,CHP)及20例健康对照组的血液样本,分离并培养外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),采用特异性的2B4抗体阻断,运用酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测阻断前后白细胞介素4(interlunkin,IL-4)、干扰素γ(interferon,IFN-γ)的表达水平,并对PBMCs的增殖情况进行了检测。免疫学实验结果显示,2B4抗体阻断前,hcv患者PBMCs中IFN-γ和IL-4分泌水平均较健康组高(Phcv-F(-)组分泌IFN-γ水平显著高于hcv-F(+)组(Phcv-F(+)组(P0.05),慢性hcv患者IFN-γ分泌水平较阻断前显著升高(Phcv-F(-)组升高程度高于hcv-F(+)组;而IL-4分泌水平较阻断前明显降低(Phcv-F(-)组降低程度低于hcv-F(+)组。该结果提示F蛋白与负性共刺激分子2B4在免疫信号调控方面存在相关性。此外,PBMCs的增殖实验显示,hcv患者的PBMCs相对活性均小于1,2B4抗体阻断前后hcv-F(+)组的相对活性均小于hcv-F(-)组(Phcv-F(+)组和hcv-F(-)组的相对活性均有所上升(Phcv感染可导致细胞增值活性减弱,细胞活性降低;F蛋白的存在可增强hcv对细胞增殖的抑制作用;阻断2B4信号通路可缓解hcv对hcv对细胞增殖的抑制作用。本研究基于中国华东地区汉族人群的遗传背景,从分子水平初步探讨并揭示了hcv F蛋白、负性共刺激分子2B4在hcv感染慢性化中的相关性,为进一步开展个性化的hcv感染的预防和治疗提供理论依据和临床研究资料,对于hcv感染的预防和临床治疗具有重要的意义。

关键词： hcv F蛋白负性共刺激分子2B4 hcv感染

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STAT3信号通路对hcv感染的抑制作用

STAT3信号通路对HCV感染的抑制作用

作者：杨宪瑶昆明理工大学

学位级别：硕士

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,hcv)是引起重症传染性肝脏疾病的主要原因之一,慢性hcv感染可以导致肝细胞癌(HCC),全球每年约有四百万左右的新增感染病例,hcv感染依然是全球公共卫生负担之一。近年来,虽然新型直接抗丙肝病毒药物(dire... 详细信息

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,hcv)是引起重症传染性肝脏疾病的主要原因之一,慢性hcv感染可以导致肝细胞癌(HCC),全球每年约有四百万左右的新增感染病例,hcv感染依然是全球公共卫生负担之一。近年来,虽然新型直接抗丙肝病毒药物(direct-acting antiviral agents,DAAs)的应用大大提高了hcv感染者的治愈率,但是由于hcv流行广泛,突变率高,患者存在耐药性等因素,对于hcv感染者的治疗仍然存在困难。hcv疫苗的缺乏、hcv耐药突变的出现、以及hcv感染和致病机制研究的局限,需要我们进一步研究hcv的感染和致病机制,为hcv感染的预防以及hcv感染者的个体化治疗提供理论基础。STAT3信号通路被证明在HCC患者中具重要作用,并且对该类患者的耐药有影响。因此我们推测该信号通路对hcv感染存在影响作用,本研究在细胞水平上分析了hcv感染后细胞STAT3通路基因(IL6R、HNF1α、HNF4α、STAT3、MRP2)表达情况,并且使细胞过表达IL6基因,分析STAT3通路对hcv感染和复制的影响。首先对Huh7.5.1细胞进行hcv感染,检测细胞上清中hcv载量的时间变化趋势,STAT3通路中HNF1α基因mRNA表达量在hcv感染后的24 h(P=0.027)、48 h(Phcv感染后的24 h(P=0.001)、48 h(Phcv感染后的24 h差异不明显,在48 h(Phcv感染后的24 h差异不明显,在48 h(Phcv感染后的3个时间点均没有明显变化。Western blot结果显示该通路6个基因蛋白表达量均增高。随后为证实该通路蛋白表达量的变化对hcv感染是否存在影响,我们克隆了IL6基因,随后对其进行感染hcv的Huh7.5.1细胞转染。结果发现在转染后24小时,hcv病毒载量明显低于对照组,但hcv载量会随时间呈上升趋势。HNF1α基因mRNA表达量在转染后的24 h(P=0.023)和72 h(P=0.0004)明显增多,总体呈现上升趋势。STAT3基因mRNA表达量在转染后的24 h(P=0.003)、48 h(P=0.0015)和72 h(Phcv感染激活了STAT3信号通路,该通路基因在mRNA和蛋白水平表达量增高;同样,STAT3信号通路上游IL6基因过表达,对hcv的复制有抑制作用。本研究结果为进一步了解hcv感染和致病机理提供一定的理论依据。

关键词： hcv感染 STAT3信号通路 hcv载量基因表达水平

IL28B基因多态性与hcv感染自发清除和治疗应答相关性研究

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IL28B基因多态性与HCV感染自发清除和治疗应答相关性研究

作者：蔡阳中南大学

学位级别：硕士

目的探讨IL28B的单核苷酸多态性（SNPs）与hcv感染自发清除和干扰素（IFN）联合利巴韦林（RBV）治疗应答相关性。方法收集我院感染科门诊2009-2011年慢性丙型肝炎病例192例,包括完成了接受干扰素联合利巴韦林治疗并随访24... 详细信息

目的探讨IL28B的单核苷酸多态性（SNPs）与hcv感染自发清除和干扰素（IFN）联合利巴韦林（RBV）治疗应答相关性。方法收集我院感染科门诊2009-2011年慢性丙型肝炎病例192例,包括完成了接受干扰素联合利巴韦林治疗并随访24周的慢性丙型肝炎患者84例（其中获得持续病毒学应答（Sustained virologic response SVR）的有65例,无应答（No n-response NR）的有19例）和未治疗慢性hcv感染者72例和hcv自发清除者36例;通过收集血标本,提取血细胞DNA,用质谱基因分型法检测IL28B rs12979860, rs8099917, rs12980275, rs7248668位点的SNPs,用统计学方法比较分析两组间等位基因和基因型分布是否存在显著性差异。结果 1.我国hcv感染人群中IL28BSNPs四个位点基因型分布情况rs12979860（C/C86.5%,C/T13.5%）,没有出现TT基因型;rs8099917（T/T87.5%,G/T12.5%）,没有出现G/G基因型;rs12980275（A/A86.5%,G/A13.5%）,没有出现G/G基因型;rs7248668（G/G87.5%,G/A12.5%）,没有出现A/A基因型。对四个位点连锁不平衡检测,发现rs12979860与其他三个位点存在完全连锁不平衡（D’=1,r2=0.87-1）。 ***28B rs12979860位点C/C基因型和rs12980275位点A/A基因型频率（都为95.4%）在达到SVR的慢性hcv感染者组高于无应答组（χ2=8.03, P=0.004）;rs8099917位点T/T基因型和rs7248668位点G/G基因型频率（都为95.4%）在达到持续病毒学应答的慢性hcv感染者组高于无应答组（χ2=5.20,P=0.02）。 ***28B rs12979860位点C/C基因型和rs12980275位点A/A基因型频率（都为94.4%）在hcv自发清除组明显高于未治疗慢性hcv感染组（χ2=4.80,P=0.03）;rs8099917位点T/T基因型和rs7248668位点G/G基因型频率（都为94.4%）在hcv自发清除组明显高于未治疗慢性hcv感染组（χ2=4.22,P=0.04）。 ***28BSNPs rs12979860位点C/C基因型频率（95.4%）在达到SVR的慢性hcv感染者与hcv感染自发清除者之间差异无显著性（χ2=0.04,P=0.84）。结论： 1.我国hcv感染人群中IL28SNPs（rs12979860,rs8099917, rs12980275, rs7248668）四个位点的主要基因型主要分别是（C/CT/T, A/A, G/G）,4个位点的SNPs存在完全连锁不平衡;***28BSNPs（rs12979860,rs8099917, rs12980275,rs7248668）与hcv感染自发清除和干扰素（IFN）联合利巴韦林（RBV）治疗应答相关。IL28B4个基因位点的SNPs中,C/C、T/T、A/A、G/G纯合子基因型有利于机体自发清除hcv感染和达到抗病毒治疗后的SVR。

关键词： IL28B 单核苷酸多态性 hcv感染自发清除持续病毒学应答

HIV、hcv感染对pDC-NK细胞系统产生细胞因子的影响

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HIV、HCV感染对pDC-NK细胞系统产生细胞因子的影响

作者：孟思润广西医科大学

学位级别：硕士

目的研究HIV、hcv感染对浆细胞样树突状细胞(Plasmacytoid Dendritic Cell,pDC)-自然杀伤(Natural Killer,NK)细胞系统(pDC-NK)在体外未激活或被TLR-9激动剂(ODN2216)激活条件下产生细胞因子的影响,为了解两种病毒感染对pDC-NK细胞间作... 详细信息

目的研究HIV、hcv感染对浆细胞样树突状细胞(Plasmacytoid Dendritic Cell,pDC)-自然杀伤(Natural Killer,NK)细胞系统(pDC-NK)在体外未激活或被TLR-9激动剂(ODN2216)激活条件下产生细胞因子的影响,为了解两种病毒感染对pDC-NK细胞间作用的影响提供新信息。方法利用磁珠法分离pDC和NK细胞,建立pDC-NK细胞体外培养系统,确认两种免疫细胞在体外被激活时相关因子的表达以及细胞间作用;采集健康人群、HIV感染、hcv感染人群的血样样本,分离pDC和NK细胞,运用悬液芯片技术分别检测不同人群组pDC-NK细胞系统在体外激活或未激活条件下各种细胞因子的产生情况,通过与健康人群组相比,以及各组激活前后细胞因子产生情况的比较,分析两种病毒感染对pDC-NK细胞系统的影响。结果***、hcv感染对pDC细胞功能的影响1.1健康人pDC可在体外条件下被TLR-9激动剂(ODN2216)激活,大量释放细胞因子IFN-α,TNF-α,TNF-β,但IL-12和IL-18表达未出现增加。1.2 hcv感染对体内的pDC有一定的激活作用,hcv感染没有对pDC细胞TLR9信号通路产生抑制作用,体外条件下pDC仍然可以被ODN2216激活。hcv感染组pDC细胞在未激活条件下,IFN-α,TNF-α,TNF-β,IL-12,IL-18等5个细胞因子水平显著高于健康人群(Phcv感染pDC未处理组;与健康对照激活组相比,3个细胞因子(TNF-α,IL-12,IL18)的水平有一定程度增高。1.3 HIV感染对体内pDC有激活作用,但对pDC细胞TLR9信号通路体外激活产生抑制作用,IFN-α产生受到显著抑制。HIV感染组pDC细胞在未激活条件下,IFN-α,TNF-α,TNF-β,IL-12,IL-18等5个细胞因子的水平显著高于健康人群CP感染激活组的IFN-α水平显著降低。***2216不能直接激活NK细胞的细胞杀伤功能。各组人群分离NK细胞,在体外分别使用ODN2216进行处理,各组人群所检测的NK细胞的细胞杀伤因子(IFN-γ、Granzyme-B、FasL)的表达均没有明显变化,同时在各组内,ODN2216处理与未处理NK细胞表达细胞杀伤因子的差异也没有统计学意义。***、hcv感染对pDC-NK细胞系统的影响3.1体外条件下,NK细胞可由经TLR-9通路所激活的pDC而激活。健康人群的pDC-NK细胞系统加入ODN2216体外激活后,检测NK细胞产生的细胞因子,与未激活组相比,5个细胞因子(IFN-γ,IL-5,MIP-1α,MIP-1β,RANTES)的表达水平均有上调。3.2 hcv感染对pDC-NK细胞系统具有一定抑制作用,尽管hcv感染组的NK细胞仍可由经TLR-9通路所激活的pDC而激活,但其激活水平低于健康对照组。hcv感染人群的pDC-NK细胞系统,在未激活条件下,pDC-NK 产生的细胞因子(IFN-γ,IL-10,GM-CSF,MIP-1α 和 RANTES)与健康对照未激活组相比,表达水平下降,差异有统计学意义;hcv感染组pDC-NK加入ODN2216后,产生的4个细胞因子(IL-5,IL-13,MIP-1α,MIP-1β)与hcv感染组未激活对照相比,表达量上调,差异均有统计学意义,但与健康人群激活组相比,7个细胞因子(IFN-γ,IL-5,IL-10,GM-CSF,MIP-1α,MIP-1β和RANTES)的表达均呈现下降趋势,差异有统计学意义。3.3 HIV感染抑制了 pDC-NK细胞系统的体外激活。HIV感染组的pDC-NK细胞系统在未激活条件下,与健康对照未激活组相比,仅IL-5表达水平上调,其他7个细胞因子没有显著性差异;HIV感染组pDC-NK在ODN2216激活后,5个细胞因子(IFN-γ,IL-10,IL-13,GM-CSF和RANTES)的表达与健康人群激活组相比,表达水平显著下降,差异有统计学意义。结论本研究成功建立了 pDC-NK细胞体外培养及激活系统,体外条件下pDC可以被TLR-9通路激活剂ODN2216激活,分泌的细胞因子可激活NK细胞。HIV、hcv感染均可造成体内的pDC细胞处于一定的激活状态,但HIV感染损害了 pDC的TLR-9通路的体外激活,IFN-α产生受到显著抑制,进而损害pDC-NK细胞系统的体外激活;而hcv感染对pDC的TLR-9通路的体外激活没有显著影响,但也抑制了 pDC

关键词： HIV感染 hcv感染浆细胞样树突状细胞自然杀伤细胞

郴州地区静脉吸毒人群hcv感染状况及中和抗体免疫应答研究

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郴州地区静脉吸毒人群HCV感染状况及中和抗体免疫应答研究

作者：唐萍南华大学

学位级别：硕士

第一部分丙型肝炎病毒在郴州地区静脉吸毒人群和一般人群中的流行特征目的:分析静脉吸毒人群和一般人群中丙型肝炎病毒感染的流行情况及特征。方法:本研究分别在郴州地区采集了1040例静脉吸毒人群和体检中心780例体检的一般人群的静脉血... 详细信息

第一部分丙型肝炎病毒在郴州地区静脉吸毒人群和一般人群中的流行特征目的:分析静脉吸毒人群和一般人群中丙型肝炎病毒感染的流行情况及特征。方法:本研究分别在郴州地区采集了1040例静脉吸毒人群和体检中心780例体检的一般人群的静脉血样,所有研究对象均使用ELISA法检测了血清中的HBV、hcv、HDV、HIV及TP感染标记物,对hcv-IgG阳性样本使用RNA提取试剂盒提取了RNA,使用逆转录试剂盒进行了逆转录,用PCR仪进行了扩增,并测序,使用real-time PCR进行了病毒滴度定量检测。结果:在静脉吸毒人群中hcv感染率显著高于普通人群;hcv RNA阳性率也显著高于普通人群。两大人群的年龄分布及感染亚型均有差异,在静脉吸毒人群中,40岁以下、41-50岁、50岁以上人群都以6a型别为主,而在普通人群中40岁以下人群以6a型别为主,41-50岁以3a、3b型为主,50岁以上以1b型占主导。在静脉吸毒人群的病毒载量包括各型别（1b,3a,3b,6a,其它）的病毒载量明显低于普通人群。结论:1、静脉吸毒人群的感染率、RNA检测率显著高于普通人群,病毒载量显著低于普通人群。2、静脉吸毒人群年龄分布低于普通人群分布;男性分布比例多于普通人群的男性分布比例。3、静脉吸毒hcv感染以6a型为主,普通人群hcv感染以1b型为主。第二部分丙型肝炎感染患者血清的hcv包膜蛋白结合及假病毒中和抗体活性分析目的:分析慢性hcv感染与hcv感染恢复后的包膜蛋白抗体结合活性及中和活性方法:用ELISA方法检测样本血清对8个不同基因亚型的hcv包膜蛋白的抗体结合能力;用8个不同基因亚型hcv假病毒（hcv pseudo-particle,hcvpp）检测hcv感染患者的血清（抗体）的交叉中和能力。结果:hcv慢性感染组血清对各基因亚型的hcv包膜蛋白的相对结合率、中和活性均显著高于hcv恢复组,且相对结合的广度也显著广于hcv感染恢复组,而中和广度无显著差异。hcv1b,2a,3a,3b,6a基因型感染组血清抗体与3b包膜蛋白的相对结合力都较弱,其中2a感染组血清与8种基因亚型的相对结合力最弱,结合广度最窄,而1b,2a,4a感染组血清与各基因型抗原的相对结合力的比较无差异。而在1b,2a,3a,3b,6a感染组的血清抗体中和活性的比较中:3b感染组的中和活性最强,中和广度最广;2a,3a感染组的中和活性较其它组略低,2a感染组的中和广度最窄。血清对感染同型抗原与异型抗原的相对结合率比较中,各感染组血清抗体与包膜蛋白1b,2a结合活性比较无明显差异,其余感染组血清对同型的抗原的相对结合力均高于异型;而各感染组对同型假病毒的中和活性与对异型假病毒的中和活性无明显差异。与hcv包膜蛋白的相对结合力较强（75%）的血清样本中和活性较高,同时,血清对包膜蛋白的结合广度也与中和广谱性呈正相关。结论:1、慢性hcv感染人群比hcv恢复患者的血清对hcv包膜蛋白的结合能力及对hcv假病毒的中和活性较强且结合广度较广。2、.hcv感染血清抗体的结合活性及中和活性均有型别差异,其中2a感染组的结合活性及中和活性最弱,3b感染组最强。hcv感染者血清中的抗体对hcv包膜蛋白的结合力及对hcvpp的中和能力存在明显的型别差异。3、患者血清的中和活性及广谱性与其对包膜蛋白的结合强度及结合广度有密切的关系。

关键词：静脉吸毒人群 hcv感染抗体相对结合力中和活性