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VEGF融合蛋白疫苗联合环磷酰胺抗小鼠H22肝癌实验研究

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中国药理学通报 2017年第5期33卷 617-621页

作者：司春枫鲁美钰王巧云仲维兰周玲杨小平徐茂磊滨州医学院药学院"方剂效应与临床评价"国家中医药管理局重点实验室山东烟台264003

目的探讨分子佐剂修饰的VEGF融合蛋白疫苗与低剂量环磷酰胺(CTX)能否产生协同抗肝癌作用。方法建立小鼠H22肝癌模型,将BALB/c小鼠随机分为4组:生理盐水对照组、CTX单药组、VEGF蛋白疫苗单药组(V2组)、V2与CTX联合治疗组(V2+CTX)。分别在... 详细信息

目的探讨分子佐剂修饰的VEGF融合蛋白疫苗与低剂量环磷酰胺(CTX)能否产生协同抗肝癌作用。方法建立小鼠H22肝癌模型,将BALB/c小鼠随机分为4组:生理盐水对照组、CTX单药组、VEGF蛋白疫苗单药组(V2组)、V2与CTX联合治疗组(V2+CTX)。分别在H22肝癌皮下移植瘤及皮内肿瘤模型中评价联合治疗方案抗肿瘤生长及抗血管生成的能力,并通过Western blot及ELISA方法检测抗-VEGF抗体水平。结果皮下移植瘤模型结果显示V2+CTX联合治疗组的肿瘤体积、平均瘤重低于各单药治疗组(P肝癌作用。

关键词：血管内皮生长因子抗血管生成环磷酰胺蛋白疫苗 H22肝癌肿瘤联合治疗

塞来昔布联合卡培他滨对h_(22)肝癌移植瘤小鼠的抑制作用及机制

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中国医学科学院学报 2013年第4期35卷 447-450页

作者：姚志华苑亚东刘艳艳郭宏强赵燕姚书娜杨树军郑州大学附属肿瘤医院内科郑州450008 武警河南总队医院神经外科郑州450052

目的探讨塞来昔布联合卡培他滨对H22肝癌移植瘤小鼠的抑瘤作用及作用机制。方法 BALB/c裸鼠皮下接种H22肝癌细胞,建立移植瘤模型。40只模型小鼠随机分为对照组、塞来昔布组(100mg/kg)、卡培他滨组(755mg/kg)和联合干预组(100mg/kg塞来昔... 详细信息

目的探讨塞来昔布联合卡培他滨对H22肝癌移植瘤小鼠的抑瘤作用及作用机制。方法 BALB/c裸鼠皮下接种H22肝癌细胞,建立移植瘤模型。40只模型小鼠随机分为对照组、塞来昔布组(100mg/kg)、卡培他滨组(755mg/kg)和联合干预组(100mg/kg塞来昔布+755mg/kg卡培他滨)4组,每组10只。接种后第3天起,每天灌胃给药1次,对照组给予等量生理盐水,连续15d。处死动物,剥离完整瘤组织,称重并计算抑瘤率。采用荧光定量PCR和Western blotting检测瘤组织中核转录因子kappaB(NF-κB)p65和环氧合酶(COX)-2的mRNA及蛋白表达。结果塞来昔布和卡培他滨组抑瘤率分别为30.2%和49.9%,而联合干预组抑瘤率为75.4%,显著高于单药组(P0.05)。结论塞来昔布可通过抑制H22肝癌移植瘤小鼠瘤组织中NF-κBp65和COX-2的表达发挥抗肿瘤作用,且与卡培他滨联合应用具有协同增效作用。

关键词：塞来昔布卡培他滨 H22肝癌核转录因子kappa B p65 环氧合酶-2

迷迭香酸钠抗小鼠H22肝癌细胞移植瘤淋巴结转移的研究

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中药药理与临床 2018年第2期34卷 47-52页

作者：韩彬蒙宁夏莉莎刘媛琪任为邓文龙周黎明川北医学院附属医院药剂科南充637000 四川大学华西基础医学与法医学院药理教研室成都610041 四川大学华西基础医学2012级基地班成都610041 四川省中医药科学院成都610041

目的:探讨迷迭香酸钠对H22肝癌细胞小鼠移植瘤淋巴结转移的药理作用及相关机制。方法:小鼠爪垫皮下接种h22细胞,建立小鼠肿瘤淋巴结转移模型。荷瘤小鼠随机分为:正常对照组、模型组、阿霉素组(5mg/kg)、白藜芦醇组(40mg/kg)、迷迭香酸钠... 详细信息

目的:探讨迷迭香酸钠对H22肝癌细胞小鼠移植瘤淋巴结转移的药理作用及相关机制。方法:小鼠爪垫皮下接种h22细胞,建立小鼠肿瘤淋巴结转移模型。荷瘤小鼠随机分为:正常对照组、模型组、阿霉素组(5mg/kg)、白藜芦醇组(40mg/kg)、迷迭香酸钠高(200mg/kg)、中(100mg/kg)、低(50mg/kg)剂量组。造模第5天开始,各组小鼠每天腹腔注射相应剂量药物,连续给药21天,建模第30天后处死小鼠;观测小鼠移植瘤、淋巴结、免疫器官的变化;通过hE染色和Realtime-PCR等技术检测肿瘤淋巴结转移情况以及转移相关因子MMP-9、VEGF-C的表达,探索迷迭香酸钠对肿瘤淋巴结转移影响。结果:迷迭香酸钠50mg/kg以上剂量能明显抑制肿瘤增殖,减少其向腘窝、腹股沟淋巴结转移;对小鼠的免疫器官无明显的刺激作用;迷迭香酸钠还可降低肿瘤组织中淋巴管生成因子MMP-9、VEGF-C表达。结论:迷迭香酸钠能通过下调MMP-9、VEGF-C表达而在h22荷瘤小鼠体内发挥显著的抗肝癌淋巴结转移作用,其展现出低毒优点,具有良好抗肝癌转移活性。

关键词：迷迭香酸钠 H22肝癌淋巴结转移 MMP-9 VEGF-C

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中西医结合肝病杂志 2022年第10期32卷 907-911页

作者：司海龙张洁马一鸣马仰仰肖海娟方瑜王惠玲陕西中医药大学附属医院陕西咸阳712000

目的:观察培元抗癌汤通过调节癌相关成纤维细胞(CAFs)抑制H22肝癌细胞增殖、诱导H22肝癌细胞凋亡,以及对CAFs细胞MMP-2、MMP-9及CXCL1、CXCL2表达的调节作用。方法:原代CAFs细胞分离、培养并鉴定,分为模型组、中药组,药物干预后收集CAF... 详细信息

目的:观察培元抗癌汤通过调节癌相关成纤维细胞(CAFs)抑制H22肝癌细胞增殖、诱导H22肝癌细胞凋亡,以及对CAFs细胞MMP-2、MMP-9及CXCL1、CXCL2表达的调节作用。方法:原代CAFs细胞分离、培养并鉴定,分为模型组、中药组,药物干预后收集CAFs细胞培养上清,并加入对数生长期的h22细胞中培养24 h。CCK8法检测h22细胞的增殖情况,流式细胞学检测h22细胞的凋亡情况;ELISA法检测CAFs细胞上清中CXCL1、CXCL2水平,PCR检测CAFs细胞中MMP-2、MMP-9 mRNA表达,Western Blot检测CAFs细胞中MMP-2、MMP-9蛋白质表达。结果:与模型组相比,中药组h22细胞增殖抑制、细胞凋亡增加,差异具有统计学意义(Ph22细胞肝癌细增殖、诱导其凋亡,其机制可能是调节肿瘤微环境中CAFs,抑制MMP-2、MMP-9与CXCL1、CXCL2,进而抑制肿瘤生长、发展。

关键词： H22肝癌培元抗癌汤癌相关成纤维细胞基质金属蛋白酶趋化因子

茯苓发酵液多糖的提取及对H22肝癌细胞体内、外作用的初步研究

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茯苓发酵液多糖的提取及对H22肝癌细胞体内、外作用的初步研究

作者：陈阳大连医科大学

学位级别：硕士

目的:恶性肿瘤近年来已经成为严重威胁我国人群健康的主要公共卫生问题之一,肿瘤的发病率和死亡率均呈上升趋势,防控形势十分严峻。当前人们迫切需求寻找发现抗肿瘤作用效果好且副作用小的天然抗肿瘤药物。有关茯苓多糖的研究也越来越多... 详细信息

目的:恶性肿瘤近年来已经成为严重威胁我国人群健康的主要公共卫生问题之一,肿瘤的发病率和死亡率均呈上升趋势,防控形势十分严峻。当前人们迫切需求寻找发现抗肿瘤作用效果好且副作用小的天然抗肿瘤药物。有关茯苓多糖的研究也越来越多,很多研究表明茯苓多糖具有较好的抗肿瘤作用,但大多数茯苓多糖提取自茯苓菌核,培养周期长、产量低,提取多糖一般用超声或酶解的方式获取。利用液体发酵的方法从茯苓菌丝体发酵液中提取茯苓多糖周期短,成本低,水溶性多糖含量高,其用于抗肿瘤的研究较少,因此本实验主要利用液体发酵的方法提取茯苓发酵液多糖（PFBP）并在体内、外初步验证其抗肿瘤活性。方法:1.利用真菌液体培养基制备茯苓菌丝体发酵液,通过水提醇沉法提取发酵液多糖,利用苯酚-硫酸法检测多糖含量,计算多糖得率;2.通过PFBP体外直接作用h22小鼠肝癌细胞,以生理盐水为空白对照,顺铂为阳性对照,利用CCK-8法检测PFBP的细胞毒作用;3.通过建立h22荷瘤Balb/c小鼠模型,利用PFBP不同浓度（50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg）和生理盐水、顺铂分组处理小鼠,观察小鼠生存期、测量小鼠体重和腹围,取小鼠尾静脉血涂片瑞氏-吉姆萨染色观察实验小鼠外周血炎性细胞的变化,处死小鼠取肝脏,脾脏和胸腺并称重,取小鼠眼球血使用细胞因子试剂盒采用ELISA（酶联免疫吸附测定）法检测IL-2（白细胞介素-2）、IFN-γ（干扰素-γ）、TNF-α（肿瘤坏死因子-α）取小鼠腹水离心后制作石蜡切片并做hE（苏木精—伊红）染色,观察对腹水肿瘤细胞和免疫细胞的影响。结果:1.茯苓菌丝体经液体发酵得到茯苓菌丝体发酵液,水提醇沉法提取多糖,经苯酚-硫酸法检测其多糖浓度为10.1mg/mL,粗多糖得率为4.5%;2.PFBP体外直接作用于h22细胞,CCK-8检测细胞毒性显示PFBP体外能直接抑制h22细胞,并呈现时间-剂量依赖性,其最高浓度（2mg/mL）24小时和48小时抑制率分别为23.12%、35.7%,其抑制率低于顺铂24小时和48小时43.34%、75.96%的抑制率（p＜0.001）;3.治疗组以 PFBP 浓度 50mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg 为梯度给予荷瘤小鼠腹腔注射治疗,同时以生理盐水为空白对照,顺铂（20mg/kg）为阳性对照,结果显示在中、高浓度治疗组和顺铂组小鼠第8天的体重和腹围较空白对照组明显变小（p＜0.01）且增长速度较慢,高浓度组增长最慢;4.PFBP高浓度组有2只小鼠生存到第30天,生理盐水组小鼠在第12天出现死亡,到第25天全部死亡,顺铂组小鼠在第20天死亡一只,最终有一只小鼠仍活到第30天。结果显示治疗组和顺铂组干预的荷瘤小鼠最后生存时间均比生理盐水空白对照组要长。5.治疗组和顺铂组的肝脏指数与对照组相比无明显差异（p＞0.05）,表明各组对肝脏影响差异不大。而治疗组和顺铂组的脾脏指数和治疗组的胸腺指数相比空白对照组相应指数变大并呈现出浓度依赖性,顺铂组的脾脏指数也高于空白对照组（p＜0.001）,而胸腺指数与对照组相比无差异（p＞0.05）;6.PFBP治疗组在中浓度和高浓度时相比空白对照组能显著提高血清IL-2含量（p＜0.05）,而低浓度组和顺铂组与对照组比较无差异,此结果在血清IFN-γ中显示相同的趋势,而治疗组的中浓度和高浓度以及顺铂组血清TNF-α含量相比空白对照组显著增加（p＜0.05）,低浓度组此三个细胞因子的含量与空白对照组相比均无差异（p＞0.05）;7.外周血涂片染色可见治疗组外周血大量炎症细胞浸润可见中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞等,红细胞数目较多,排布紧密,而生理盐水组和顺铂组血涂片中红细胞排布比较稀疏,很少见到炎症细胞。腹水肿瘤细胞染色可见治疗组腹水中肿瘤细胞形态不规则,细胞体积较小,核边集,有的可以看到核碎裂,腹水中有大量炎性细胞和免疫细胞,如中性粒细胞,淋巴细胞和巨噬细胞等,而生理盐水组肿瘤细胞核深染,形态较规则,少见炎性细胞,顺铂组肿瘤细胞形态不规则,可见核不完整排列紊乱,炎症细胞较少。结论:1.水提醇沉法提取茯苓菌丝体发酵液中的多糖,经检测多糖浓度为10.1mg/mL,粗多糖得率为4.5%。2.利用CCK-8法检测PFBP体外作用h22细胞的细胞毒性作用,证实其体外具有一定的直接杀伤h22细胞的作用。3.经PFBP干预的h22荷瘤小鼠的生存期延长,小鼠腹水的症状减轻。4.PFBP能够使h22荷瘤小鼠脾脏和胸腺指数增加,对肝脏指数无影响。5.PFBP能够促进h22荷瘤小鼠血清IL-2、IFN-γ、TNF-α分泌增加,小鼠外周血和腹水中炎性细胞浸润,其主要依靠激发机体免疫功能来间接发挥抗肿瘤作用。

关键词：茯苓发酵液多糖 H22肝癌

蝎毒多肽促进5-氟尿嘧啶抑制H22肝癌血管生成的作用机制研究

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中草药 2014年第3期45卷 392-397页

作者：隋文文张维东武利存王兆朋张月英王朝霞贾青山东省医学科学院基础医学研究所病理室山东省罕见病重点实验室山东济南250062 济南大学山东省医学科学院医学与生命科学学院山东济南250062

目的探讨蝎毒多肽增强5-氟尿嘧啶(5-Fu)抑制肿瘤血管生成的机制。方法建立H22肝癌皮下荷瘤模型,随机分为模型组、蝎毒多肽(20 mg/kg)组、5-Fu(20 mg/kg)组、联合组(5-Fu+蝎毒多肽),每组20只。绘制肿瘤体积增长曲线并计算抑瘤率;免疫组... 详细信息

目的探讨蝎毒多肽增强5-氟尿嘧啶(5-Fu)抑制肿瘤血管生成的机制。方法建立H22肝癌皮下荷瘤模型,随机分为模型组、蝎毒多肽(20 mg/kg)组、5-Fu(20 mg/kg)组、联合组(5-Fu+蝎毒多肽),每组20只。绘制肿瘤体积增长曲线并计算抑瘤率;免疫组织化学法检测各组肿瘤组织微血管密度(MVD)、PTEN、PI3K、P-Akt、缺氧诱导因子-1α(hIF-1α)的变化;Western blotting检测各组肿瘤组织中PTEN、PI3K、P-Akt、hIF-1α蛋白的表达。结果联合组、5-Fu组、蝎毒多肽组H22肝癌移植瘤的生长较模型组均受到明显抑制(PhIF-1α表达(PH22肝癌移植瘤血管生成,其机制可能与抑制肿瘤微环境中PI3K、P-Akt、hIF-1α的表达,上调PTEN的表达有关。

关键词：蝎毒多肽 H22肝癌缺氧诱导因子-1a 血管生成微血管密度

灵芝多糖对H22肝癌小鼠肠道黏膜免疫功能的影响

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中国中西医结合杂志 2009年第4期29卷 335-339页

作者：周桂琴赵宏艳吕诚张皖东谭勇陈士林杨大坚陈新滋吕爱平北京地坛医院中西医结合科北京100011 中国中医科学院中医基础理论研究所中国中医科学院中医临床基础医学研究所安徽中医学院第一附属医院首都医科大学中医药学院广东省深圳市中药药学及分子药理学研究重点实验室

目的观察灵芝多糖(ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)抗肿瘤的黏膜免疫机制。方法将h22细胞浓度调整为1×109个/L,于昆明小鼠右腋下行无菌皮下接种,每只小鼠接种0.2mL细胞悬液,接种后随机将动物分为模型组、GLP组、环磷酰胺(cytox... 详细信息

目的观察灵芝多糖(ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)抗肿瘤的黏膜免疫机制。方法将h22细胞浓度调整为1×109个/L,于昆明小鼠右腋下行无菌皮下接种,每只小鼠接种0.2mL细胞悬液,接种后随机将动物分为模型组、GLP组、环磷酰胺(cytoxan,CTX)组、GLP+CTX组,另设空白对照组,每组8只。于造模后第2天,GLP组及GLP+CTX组分别以1.02g/(kg.d)灌胃GLP,每天1次,连续12天;CTX组及GLP+CTX组分别于第1天及第6天按100mg/(kg.d)腹腔注射CTX;空白对照组与模型组以等量蒸馏水灌胃。于造模后第14天,拉颈处死小鼠,分离小肠,取盲肠上端1cm处回肠,4%多聚甲醛固定,石蜡切片,采用免疫组化(ihC)的方法检测免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)及IL-10的表达;剩余小肠分离肠道上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes,IEL)、固有层内淋巴细胞(lamina propria lymphocytes,LPL)及PP结内淋巴细胞(peyer′s patch lymphocytes,PPL),采用免疫荧光染色及流式细胞仪分析T淋巴细胞亚群的变化。结果(1)与正常组比较,模型组肠道黏膜淋巴细胞表型及肠道内细胞因子的表达均发生改变,并且各部位的淋巴细胞表型变化不同;(2)与模型组比较,GLP、CTX及GLP+CTX均能不同程度的调节肠道黏膜淋巴细胞的表型及细胞因子的表达。结论GLP对肠道黏膜免疫的调节作用可能是其发挥抑瘤作用的另一条途径。

关键词：灵芝多糖肠道黏膜免疫 H22肝癌

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壁虎醇提物对H22肝癌血管新生的抑制作用

中国临床药理学杂志 2016年第24期32卷 2282-2285页

作者：郭梦丽王建刚靳颖河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室河南洛阳471000

目的研究壁虎醇提物(GEE)对h22小鼠肿瘤组织血管新生的抑制作用及其机制。方法建立腋下移植H22肝癌模型,按照体重随机分为5组:模型组(0.9%Na Cl)、对照组(2 mg·kg^(-1)阿霉素)和高、中、低3个剂量实验组(GEE:80,40,20 mg·kg^(-1)),连... 详细信息

目的研究壁虎醇提物(GEE)对h22小鼠肿瘤组织血管新生的抑制作用及其机制。方法建立腋下移植H22肝癌模型,按照体重随机分为5组:模型组(0.9%Na Cl)、对照组(2 mg·kg^(-1)阿霉素)和高、中、低3个剂量实验组(GEE:80,40,20 mg·kg^(-1)),连续腹腔注射10 d,计算抑瘤率;用免疫组化法观察血管内皮细胞标记物(CD34)表达水平,计算新生微血管密度(MVD);以免疫印迹法检测血管内皮生长因子A(VEGF-A)、基质金属蛋白酶(MMP-2)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化的细胞外信号调节激酶(P-ERK)的表达。结果高、中、低3个剂量实验组的抑瘤率分别为63.18%,50.91%,44.68%,说明GEE对h22小鼠移植瘤的抑瘤作用较明显。模型组小鼠肿瘤组织MVD为平均每个视野(24.7±4.1)个,与模型组比较,对照组、高、中、低3个剂量实验组的MVD分别为平均每个视野(13.6±3.6),(8.0±1.6),(11.0±1.1),(13.9±1.7)个,其中3个剂量实验组差异有统计学意义(均PH22肝癌移植瘤的生长,其抗肿瘤作用机制可能与降低肿瘤组织血管生成相关因子VEGF-A、MMP-2、P-ERK的表达及降低微血管密度有关。

关键词：壁虎醇提物 H22肝癌 ERK信号转导通路血管生成

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不同品类铁观音抗H22肝癌的研究

不同品类铁观音抗H22肝癌的研究

作者：朱秋芳福建农林大学

学位级别：硕士

众所周知,茶叶具有抗癌效果。前人主要集中研究绿茶、红茶、黑茶的抗癌作用,对铁观音抗癌领域的研究甚少。为探明铁观音的抗癌效果,本论文以H22肝癌为研究对象,系统探讨了不同浓度清香型铁观音和不同品类铁观音对H22肝癌的抑瘤作用、全... 详细信息

众所周知,茶叶具有抗癌效果。前人主要集中研究绿茶、红茶、黑茶的抗癌作用,对铁观音抗癌领域的研究甚少。为探明铁观音的抗癌效果,本论文以H22肝癌为研究对象,系统探讨了不同浓度清香型铁观音和不同品类铁观音对H22肝癌的抑瘤作用、全血象、炎症因子(IL1α、RANTES、Ax1、MIP-2)、生物活性因子(IL-2、IL-4、IL-9、Foxp3、FasL、Perforin、Granzyme B、IL-17、VEGF、survivin、NF-κB)、细胞增殖能力、细胞凋亡的影响,实验结果如下:(1)不同品类铁观音对H22肝癌荷瘤鼠的抑瘤作用以不同浓度清香型铁观音(浓度梯度设置为茶水比1:100、1:50、1:25)和不同品类铁观音(包括茶水比1:50的清香型铁观音、1:50的浓香型铁观音、1:50的陈香型铁观音、1:50的铁观音茶末和茶水比1:12.5铁观音鲜叶,茶水比1:250的铁观音速溶茶和1:250的高咖啡碱铁观音速溶茶)为材料,以凉开水为空白对照,以5-FU药物为阳性对照,通过测量肿瘤重量、计算抑瘤率,得到不同浓度清香型铁观音对H22肝癌荷瘤鼠抑瘤作用分别为:1:50组(53.29%)、5-FU组(42.76%)、1:25 组(35.53%)、1:100 组(30.92%);不同品类铁观音对H22肝癌荷瘤鼠抑瘤作用分别为:浓香组(71.05%)、陈香组(67.76%)、茶末组(66.45%)、高咖组(65.79%)、鲜叶组(59.87%)、清香组(53.29%)、速溶组(52.63%)、5-FU 组(42.76%)。(2)不同品类铁观音对H22肝癌荷瘤鼠全血象的影响不同浓度清香型铁观音处理后,各组的红细胞总数、血红蛋白含量和红细胞压积极显著上升。不同品类铁观音处理后,鲜叶组和高咖组的红细胞总数、血红蛋白含量极显著升高,红细胞压积显著升高。清香组极显著提高血红蛋白含量,显著提高红细胞总数和红细胞压积。茶末组显著提高红细胞总数、血红蛋白含量和红细胞压积。因此不同浓度清香型铁观音组、鲜叶组、高咖组、清香组和茶末组有利于提高H22肝癌荷瘤鼠血液中造血功能的趋势,并可减缓或消除贫血的发生。(3)不同品类铁观音对H22肝癌荷瘤鼠多种炎症因子的影响不同浓度清香型铁观音和不同品类铁观音处理后,三个浓度清香组、鲜叶组、茶末组和高咖组均下调了肿瘤组织中Ax1的表达,其中三个不同浓度组和鲜叶组达极显著性差异,其他达显著性差异。茶水比1:50和1:25的清香组、鲜叶组、浓香组、陈香组和茶末组均下调了肿瘤组织中MIP-2的表达,其中鲜叶组和茶末组达极显著性差异,其他达显著性差异。陈香组和清香组均上调了血清中RANTES的表达,其中陈香组达极显著性差异,清香组达显著性差异。(4)不同品类铁观音对H22肝癌荷瘤鼠肿瘤组织中生物活性因子mRNA表达的影响1:25组、陈香组、茶末组通过极显著上调IL-2、IL-4、IL-9、Perforin、Granzyme B和Foxp3 mRNA的表达,促进H22肝癌细胞凋亡,抑制肿瘤生长。1:100组极显著下调survivin的表达、显著下调VEGF和NF-κB的表达,1:50组极显著下调survivin和NF-κB的表达,浓香组和高咖组极显著降低VEGF、survivin和NF-κB的表达,鲜叶组极显著降低VEGF和survivin的表达、显著降低NF-κB的表达,抑制新血管生成、抑制癌细胞增殖及转移、促进凋亡信号通路的转导。速溶组极显著上调IL-4和Perforin的表达,显著上调FasL的表达,极显著下调survivin的表达,显著下调VEGF的表达,降低炎症程度,诱导h22癌细胞凋亡,抑制肿瘤生长。(5)不同品类铁观音在体外对H22肝癌细胞的抑制研究以不同品类铁观音为处理(不同品类铁观音原液包括茶水比1:12.5的清香型铁观音、1:12.5的浓香型铁观音、1:12.5的陈香型铁观音、1:12.5的铁观音茶末,茶水比1:3.125铁观音鲜叶,茶水比1:62.5铁观音速溶茶和1:62.5的高咖啡碱铁观音速溶茶),以5-FU药物为阳性对照(原液浓度为25 mg/mL),以1640培养基为空白对照组,通过MTT(噻唑蓝)和Annexin V(磷脂酰丝氨酸外翻分析)法检测细胞的增殖和凋亡,结果表明:不同品类铁观音均有抑制h22细胞增殖的作用,其生存率随时间的延长呈下降趋势。不同品类铁观音会促进H22肝癌细胞的凋亡和坏死,且主要作用在晚期凋亡。其中陈香组出现的晚期凋亡率最高,高咖组出现的早期凋亡率最高,鲜叶组出现的细胞坏死率最高。

关键词：铁观音 H22肝癌抗癌作用抗癌基因细胞凋亡