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VEGF融合蛋白疫苗联合环磷酰胺抗小鼠h22肝癌实验研究

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中国药理学通报 2017年第5期33卷 617-621页

作者：司春枫鲁美钰王巧云仲维兰周玲杨小平徐茂磊滨州医学院药学院"方剂效应与临床评价"国家中医药管理局重点实验室山东烟台264003

目的探讨分子佐剂修饰的VEGF融合蛋白疫苗与低剂量环磷酰胺(CTX)能否产生协同抗肝癌作用。方法建立小鼠h22肝癌模型,将BALB/c小鼠随机分为4组:生理盐水对照组、CTX单药组、VEGF蛋白疫苗单药组(V2组)、V2与CTX联合治疗组(V2+CTX)。分别在... 详细信息

目的探讨分子佐剂修饰的VEGF融合蛋白疫苗与低剂量环磷酰胺(CTX)能否产生协同抗肝癌作用。方法建立小鼠h22肝癌模型,将BALB/c小鼠随机分为4组:生理盐水对照组、CTX单药组、VEGF蛋白疫苗单药组(V2组)、V2与CTX联合治疗组(V2+CTX)。分别在h22肝癌皮下移植瘤及皮内肿瘤模型中评价联合治疗方案抗肿瘤生长及抗血管生成的能力,并通过Western blot及ELISA方法检测抗-VEGF抗体水平。结果皮下移植瘤模型结果显示V2+CTX联合治疗组的肿瘤体积、平均瘤重低于各单药治疗组(P肝癌作用。

关键词：血管内皮生长因子抗血管生成环磷酰胺蛋白疫苗 h22肝癌肿瘤联合治疗

灵芝多糖对h22肝癌小鼠肠道黏膜免疫功能的影响

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中国中西医结合杂志 2009年第4期29卷 335-339页

作者：周桂琴赵宏艳吕诚张皖东谭勇陈士林杨大坚陈新滋吕爱平北京地坛医院中西医结合科北京100011 中国中医科学院中医基础理论研究所中国中医科学院中医临床基础医学研究所安徽中医学院第一附属医院首都医科大学中医药学院广东省深圳市中药药学及分子药理学研究重点实验室

目的观察灵芝多糖(ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)抗肿瘤的黏膜免疫机制。方法将h22细胞浓度调整为1×109个/L,于昆明小鼠右腋下行无菌皮下接种,每只小鼠接种0.2mL细胞悬液,接种后随机将动物分为模型组、GLP组、环磷酰胺(cytox... 详细信息

目的观察灵芝多糖(ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)抗肿瘤的黏膜免疫机制。方法将h22细胞浓度调整为1×109个/L,于昆明小鼠右腋下行无菌皮下接种,每只小鼠接种0.2mL细胞悬液,接种后随机将动物分为模型组、GLP组、环磷酰胺(cytoxan,CTX)组、GLP+CTX组,另设空白对照组,每组8只。于造模后第2天,GLP组及GLP+CTX组分别以1.02g/(kg.d)灌胃GLP,每天1次,连续12天;CTX组及GLP+CTX组分别于第1天及第6天按100mg/(kg.d)腹腔注射CTX;空白对照组与模型组以等量蒸馏水灌胃。于造模后第14天,拉颈处死小鼠,分离小肠,取盲肠上端1cm处回肠,4%多聚甲醛固定,石蜡切片,采用免疫组化(ihC)的方法检测免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)及IL-10的表达;剩余小肠分离肠道上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes,IEL)、固有层内淋巴细胞(lamina propria lymphocytes,LPL)及PP结内淋巴细胞(peyer′s patch lymphocytes,PPL),采用免疫荧光染色及流式细胞仪分析T淋巴细胞亚群的变化。结果(1)与正常组比较,模型组肠道黏膜淋巴细胞表型及肠道内细胞因子的表达均发生改变,并且各部位的淋巴细胞表型变化不同;(2)与模型组比较,GLP、CTX及GLP+CTX均能不同程度的调节肠道黏膜淋巴细胞的表型及细胞因子的表达。结论GLP对肠道黏膜免疫的调节作用可能是其发挥抑瘤作用的另一条途径。

关键词：灵芝多糖肠道黏膜免疫 h22肝癌

不同剂量IFN-γ体内对小鼠h22肝癌发生发展的作用研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第4期25卷 292-296页

作者：贺宇飞张桂梅张慧陈洪涛冯作化华中科技大学同济医学院生化与分子生物学系武汉430030

目的　探讨不同剂量尤其是低剂量的γ干扰素(IFN γ)体内表达对小鼠h2 2肝癌发生发展的影响。方法　利用小鼠h2 2肝癌体内发生和进展的模型,以不同剂量IFN γ表达质粒(mIFNG)进行长期和短期直接肌肉转染,检测h2 2肝癌的发生率及生长速率... 详细信息

目的　探讨不同剂量尤其是低剂量的γ干扰素(IFN γ)体内表达对小鼠h2 2肝癌发生发展的影响。方法　利用小鼠h2 2肝癌体内发生和进展的模型,以不同剂量IFN γ表达质粒(mIFNG)进行长期和短期直接肌肉转染,检测h2 2肝癌的发生率及生长速率;半定量RT PCR、ELISA及实时定量PCR检测IFN -γ的表达情况;肌肉转染表达IFN -γ阻断剂,检测其对IFN -γ作用的影响。结果　注射低剂量(10 μg)的mIFNG质粒局部持续表达IFN γ可明显促进小鼠h2 2肝癌的发生和发展,然而短暂的表达则没有这种促进作用。IFN -γ拮抗剂则可对抗低剂量表达IFN -γ对肿瘤的促进作用。另一方面,注射高剂量(10 0 μg)的mIFNG质粒局部持续表达IFN -γ则能够介导明显的抗肿瘤效应。结论IFN γ对小鼠h2 2肝癌具有双重作用,也可能是联系慢性炎症与肿瘤发生发展之间的一个十分重要的衔接者。

关键词： IFN-γ h22肝癌发生发展不同剂量小鼠作用研究半定量RT-PCR 定量PCR检测 ELISA 抗肿瘤效应体内表达 γ干扰素表达质粒生长速率表达情况双重作用慢性炎症低剂量发生率阻断剂拮抗剂高剂量转染肌肉局部

胰岛素增强5-氟脲嘧啶对h22肝癌移植瘤的抑制作用及其机制

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中国肿瘤临床 2008年第4期35卷 214-218页

作者：王瑞成鹏王瑞林王留兴吴欣爱樊青霞郑州大学第一附属医院郑州市450052 郑州空军94600部队医院

目的:建立裸鼠h22肝癌移植瘤模型,观察胰岛素是否增强5-氟脲嘧啶(5-FU)对裸鼠移植瘤的化疗疗效并探讨其机制。方法:免疫组织化学方法检测肿瘤组织中细胞周期蛋白D(CyclinD)的表达。用流式细胞仪检测肿瘤组织细胞周期改变。结果:大、中... 详细信息

目的:建立裸鼠h22肝癌移植瘤模型,观察胰岛素是否增强5-氟脲嘧啶(5-FU)对裸鼠移植瘤的化疗疗效并探讨其机制。方法:免疫组织化学方法检测肿瘤组织中细胞周期蛋白D(CyclinD)的表达。用流式细胞仪检测肿瘤组织细胞周期改变。结果:大、中、小剂量胰岛素(0.09,0.06,0.03U/20g)联合5-FU均能增加单用5-FU时的抑瘤作用,大剂量胰岛素联合5-FU组对h22肝癌移植肿瘤生长抑制率达51.35%,明显高于单用5-FU组的27.93%(Ph22肝癌移植瘤组织中CyclinD的阳性表达率为62%,明显高于对照组的30%(Ph22肝癌移植瘤模型中,胰岛素能增强5-FU对h22肝癌移植瘤的化疗疗效。推测胰岛素可以通过或者至少是部分通过增加CyclinD蛋白的表达而使大量肿瘤细胞处于S期,此时加入S期特异性化疗药物5-FU能够更加有效地杀伤肿瘤细胞。

关键词：胰岛素 5-氟脲嘧啶 h22肝癌增效

干、鲜壁虎冻干粉对小鼠h22肝癌体内外抑制作用

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世界华人消化杂志 2007年第2期15卷 157-160页

作者：杨金霞王学美朱伟富宏刘庚信北京大学第一医院中西医结合研究室北京市100034

目的:研究干、鲜壁虎冻干粉对荷h22实体型移植瘤小鼠体内抑瘤作用及其含药血清体外对h22肝癌细胞的增殖抑制作用.方法:采用昆明小鼠h22移植瘤模型观察干、鲜壁虎冻干粉体内抑瘤活性及小鼠胸腺、脾脏指数变化:MTT法检测不同浓度干、鲜壁... 详细信息

目的:研究干、鲜壁虎冻干粉对荷h22实体型移植瘤小鼠体内抑瘤作用及其含药血清体外对h22肝癌细胞的增殖抑制作用.方法:采用昆明小鼠h22移植瘤模型观察干、鲜壁虎冻干粉体内抑瘤活性及小鼠胸腺、脾脏指数变化:MTT法检测不同浓度干、鲜壁虎冻干粉含药血清对h22肝癌细胞体外杀伤作用.结果:干、鲜壁虎低、中、高3个剂量组的抑瘤率分别为25.6%,40.0%,48.5%和20.7%,28.1%,51.1%.各壁虎组与西药5-FU组相比,不同程度提高了荷瘤小鼠的胸腺质量(Ph22细胞的增殖,干、鲜壁虎低、中、高含药血清组的增殖抑制率为17.4%,21.0%,34.5%和16.4%,26.3%,43.2%.结论:干、鲜壁虎冻干粉均具有良好的抗肿瘤作用.

关键词：壁虎抗肿瘤作用 h22肝癌小鼠

迷迭香酸钠抗小鼠h22肝癌细胞移植瘤淋巴结转移的研究

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中药药理与临床 2018年第2期34卷 47-52页

作者：韩彬蒙宁夏莉莎刘媛琪任为邓文龙周黎明川北医学院附属医院药剂科南充637000 四川大学华西基础医学与法医学院药理教研室成都610041 四川大学华西基础医学2012级基地班成都610041 四川省中医药科学院成都610041

目的:探讨迷迭香酸钠对h22肝癌细胞小鼠移植瘤淋巴结转移的药理作用及相关机制。方法:小鼠爪垫皮下接种h22细胞,建立小鼠肿瘤淋巴结转移模型。荷瘤小鼠随机分为:正常对照组、模型组、阿霉素组(5mg/kg)、白藜芦醇组(40mg/kg)、迷迭香酸钠... 详细信息

目的:探讨迷迭香酸钠对h22肝癌细胞小鼠移植瘤淋巴结转移的药理作用及相关机制。方法:小鼠爪垫皮下接种h22细胞,建立小鼠肿瘤淋巴结转移模型。荷瘤小鼠随机分为:正常对照组、模型组、阿霉素组(5mg/kg)、白藜芦醇组(40mg/kg)、迷迭香酸钠高(200mg/kg)、中(100mg/kg)、低(50mg/kg)剂量组。造模第5天开始,各组小鼠每天腹腔注射相应剂量药物,连续给药21天,建模第30天后处死小鼠;观测小鼠移植瘤、淋巴结、免疫器官的变化;通过hE染色和Realtime-PCR等技术检测肿瘤淋巴结转移情况以及转移相关因子MMP-9、VEGF-C的表达,探索迷迭香酸钠对肿瘤淋巴结转移影响。结果:迷迭香酸钠50mg/kg以上剂量能明显抑制肿瘤增殖,减少其向腘窝、腹股沟淋巴结转移;对小鼠的免疫器官无明显的刺激作用;迷迭香酸钠还可降低肿瘤组织中淋巴管生成因子MMP-9、VEGF-C表达。结论:迷迭香酸钠能通过下调MMP-9、VEGF-C表达而在h22荷瘤小鼠体内发挥显著的抗肝癌淋巴结转移作用,其展现出低毒优点,具有良好抗肝癌转移活性。

关键词：迷迭香酸钠 h22肝癌淋巴结转移 MMP-9 VEGF-C

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壁虎醇提物对h22肝癌血管新生的抑制作用

中国临床药理学杂志 2016年第24期32卷 2282-2285页

作者：郭梦丽王建刚靳颖河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室

目的研究壁虎醇提物（GEE）对h22小鼠肿瘤组织血管新生的抑制作用及其机制。方法建立腋下移植h22肝癌模型,按照体重随机分为5组:模型组（0.9%Na Cl）、对照组(2 mg·kg;阿霉素)和高、中、低3个剂量实验组(GEE:80,40,20 mg·kg;),连续腹... 详细信息

目的研究壁虎醇提物（GEE）对h22小鼠肿瘤组织血管新生的抑制作用及其机制。方法建立腋下移植h22肝癌模型,按照体重随机分为5组:模型组（0.9%Na Cl）、对照组(2 mg·kg;阿霉素)和高、中、低3个剂量实验组(GEE:80,40,20 mg·kg;),连续腹腔注射10 d,计算抑瘤率;用免疫组化法观察血管内皮细胞标记物（CD34）表达水平,计算新生微血管密度（MVD）;以免疫印迹法检测血管内皮生长因子A（VEGF-A）、基质金属蛋白酶（MMP-2）、细胞外信号调节激酶（ERK）、磷酸化的细胞外信号调节激酶（P-ERK）的表达。结果高、中、低3个剂量实验组的抑瘤率分别为63.18%,50.91%,44.68%,说明GEE对h22小鼠移植瘤的抑瘤作用较明显。模型组小鼠肿瘤组织MVD为平均每个视野（24.7±4.1）个,与模型组比较,对照组、高、中、低3个剂量实验组的MVD分别为平均每个视野（13.6±3.6）,（8.0±1.6）,（11.0±1.1）,（13.9±1.7）个,其中3个剂量实验组差异有统计学意义（均Ph22肝癌移植瘤的生长,其抗肿瘤作用机制可能与降低肿瘤组织血管生成相关因子VEGF-A、MMP-2、P-ERK的表达及降低微血管密度有关。

关键词：壁虎醇提物 h22肝癌 ERK信号转导通路血管生成

脂质体rIL-2和肿瘤浸润淋巴细胞治疗鼠h22肝癌的体内实验研究

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中国肿瘤临床 2000年第4期27卷 297-299页

作者：于静赵治国卢玫段芳龄河南省人民医院二内科郑州市450003 河南医科大学第二附属医院消化科日本中外制药北京事务所

目的 :比较脂质体rIL - 2和游离rIL - 2分别联合肿瘤浸润淋巴细胞治疗鼠h2 2肝癌的效果及副作用。方法 :采用薄膜分散法和超声波粉碎处理法制备脂质体rIL - 2 ;选昆明鼠 40只 ,随机分组进行体内治疗 ,游离rIL - 2用量为脂质体rIL - 2的 ... 详细信息

目的 :比较脂质体rIL - 2和游离rIL - 2分别联合肿瘤浸润淋巴细胞治疗鼠h2 2肝癌的效果及副作用。方法 :采用薄膜分散法和超声波粉碎处理法制备脂质体rIL - 2 ;选昆明鼠 40只 ,随机分组进行体内治疗 ,游离rIL - 2用量为脂质体rIL - 2的 3倍 ,观察瘤出现时间、瘤体积、瘤湿重及鼠体温的变化。结果 :TIL +rIL - 2组的瘤出现时间、瘤体积、瘤湿重分别为 :15± 2 .5d、2 .44± 2 .97cm3 、4.7± 2 .0 g ;TIL +脂质体rIL - 2组分别为 :15± 3.2d、2 .2 7± 2 .5 8cm3 、4.5± 2 .1g ;二者与对照组比较均显出了肯定的治疗效果 (P 0 .0 5 )。TIL +rIL - 2组有明显发热反应 ,TIL +脂质体rIL - 2组体温正常。结论 :脂质体rIL - 2较游离rIL - 2抗肿瘤作用提高 ,副作用降低。

关键词：脂质体 rIL-2 肿瘤浸润淋巴细胞 h22肝癌

扶正解毒通络方对h22肝癌小鼠抗肝癌作用及对其细胞因子的影响

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中国急救医学 2016年第z1期36卷 -页

作者：张景洲孟繁平长春中医药大学附属医院吉林长春130000 延边大学医学院免疫学与病原生物学教研室吉林延吉133000

随着医学技术的不断进步,中医治疗肝癌的理念得以广泛开展并得到了广大医疗研究人员的认可.扶正解毒通络方(FJTLF)是由黄芪、白术、姜黄、半边莲等多种中药复合而成,一些临床应用证明,FJTLF对于恶性肿瘤及改善免疫功能具有很好的作用.... 详细信息

随着医学技术的不断进步,中医治疗肝癌的理念得以广泛开展并得到了广大医疗研究人员的认可.扶正解毒通络方(FJTLF)是由黄芪、白术、姜黄、半边莲等多种中药复合而成,一些临床应用证明,FJTLF对于恶性肿瘤及改善免疫功能具有很好的作用.本课题以“毒损肝络”理论为核心,提出采用解毒通络法治疗肝癌,并通过扶正解毒通络方应用于治疗取得了一定的效果.本研究采用h22肝癌小鼠进行体内实验,探究扶正解毒通络方在抗肝癌的临床效果,现汇报如下.

关键词：扶正解毒通络方 h22肝癌细胞因子抗癌作用