检索结果-南通市图书馆

沈阳农业大学学报 2007年第1期38卷 114-117页

作者：李会刘昱辉傅俊范沈阳农业大学植物保护学院中国农业科学院生物技术研究所北京100085

以新疆厚皮甜瓜K7品系为材料,利用农杆菌介导法进行甜瓜的遗传转化研究,建立了新疆厚皮甜瓜的遗传转化体系。将go基因导入甜瓜材料,分子检测和DAB检测证明外源基因已经整合到甜瓜转基因植株的基因组DNA中并具有较好的抗病性。

关键词：甜瓜 go基因农杆菌介导法抗病性

八棱海棠actin基因的克隆与go基因转化拟南芥研究

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八棱海棠actin基因的克隆与GO基因转化拟南芥研究

作者：徐锦涛南京农业大学

学位级别：硕士

本文通过RACE技术克隆了八棱海棠的肌动蛋白基因,5’-RACE获得长度1121bp的片段、3’-RACE获得883bp的片段,再通过设计引物扩增得到八棱海棠中肌动蛋白基因的cDNA的全长序列。该序列全长1134bp,推测其编码377个氨基酸,等电点为5.16。并... 详细信息

本文通过RACE技术克隆了八棱海棠的肌动蛋白基因,5’-RACE获得长度1121bp的片段、3’-RACE获得883bp的片段,再通过设计引物扩增得到八棱海棠中肌动蛋白基因的cDNA的全长序列。该序列全长1134bp,推测其编码377个氨基酸,等电点为5.16。并分析了其作为内标的可能性。通过实验验证其可以作为内标用于八棱海棠其它基因的表达情况研究。过氧化氢(HO)在植物受到病原微生物侵染后引发的一系列防御反应中起着非常重要的作用,因此通过外源基因导入提高植物体内过氧化氢的含量,可以增强植物的广谱抗病性。葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,go)可以催化β-D-葡萄糖氧化生成过氧化氢和葡萄糖酸,此酶已在数种细菌和真菌中检测到,但在植物和动物中仍未发现。本研究通过构建含go基因的植物双元载体,通过农杆菌介导法,用CaMV35S启动子控制go基因表达的植物双元载体转化拟南芥,对go基因进行功能鉴定。通过农杆菌蘸花法共获得12株拟南芥阳性植株,GUS染色和PCR鉴定结果初步显示,外源的go基因已经整合到转基因的拟南芥基因组中。RT-PCR分析结果显示,go基因在转基因拟南芥中已经表达。通过对转基因和对照的拟南芥的过氧化氢的含量测定,观测到转基因的拟南芥的过氧化氢含量要高于对照的拟南芥。通过对转基因的植株和非转基因植株的DAB染色,结果表明转基因拟南芥中积累的深棕色物质要比对照的拟南芥多。通过对转基因和对照拟南芥类黄酮含量测定,分析结果显示转基因植株的类黄酮含量比对照高。此外,转基因植株的抗病性也比对照显著提高。然后准备构建植物双元表达载体,通过农杆菌介导法将go基因转入八棱海棠,运用MrACT作为内标,来研究相关基因的表达情况。

关键词：八棱海棠 RACE 过氧化氢 go基因农杆菌介导法

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go基因导入对棉花农艺性状及抗病性的影响

分子植物育种 2003年第5期1卷 669-672页

作者：刘慧君简桂良邹亚飞中国农业科学院植物保护研究所北京100094

通过对转葡萄糖氧化酶 (go)基因棉株系B992 6 1(IV、Ⅷ代 )和B992 6 7(Ⅷ、Ⅳ代 )与受体新陆早 7号及耐黄萎病对照中棉所 12农艺性状及抗病性比较。结果表明 ,转基因棉花株型变矮 ,果柄变长 ,单株成铃数和纤维品质有明显提高。B992 6 1... 详细信息

通过对转葡萄糖氧化酶 (go)基因棉株系B992 6 1(IV、Ⅷ代 )和B992 6 7(Ⅷ、Ⅳ代 )与受体新陆早 7号及耐黄萎病对照中棉所 12农艺性状及抗病性比较。结果表明 ,转基因棉花株型变矮 ,果柄变长 ,单株成铃数和纤维品质有明显提高。B992 6 1对苗期炭疽病、立枯病及铃疫病抗性有显著提高 ,但不抗红腐病 ;B992 6 7对棉铃疫病抗性也显著增强。这两个品系对枯萎病和黄萎病抗性均有显著提高 ,其中第四代B992 6 1抗黄萎病性能最好 ,达到抗病水平。

关键词： go基因棉花农艺性状抗病性转基因葡萄糖氧化酶基因黄萎病

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go基因对草莓遗传转化及抗病性鉴定

分子植物育种 2005年第6期3卷 797-800页

作者：金万梅尹淑萍鲁韧强袁维风董静王桂霞北京市农林科学院林业果树研究所北京100093

利用PCR技术从黑曲霉(Aspergillusniger)中扩增并克隆了葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,简称go)基因,并将马铃薯病原诱导型启动子(Prp1-1基因启动子)与其融合构建了植物表达载体pCAMgo,经农杆菌介导转化获得了转基因草莓。在病原物灰霉菌... 详细信息

利用PCR技术从黑曲霉(Aspergillusniger)中扩增并克隆了葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase,简称go)基因,并将马铃薯病原诱导型启动子(Prp1-1基因启动子)与其融合构建了植物表达载体pCAMgo,经农杆菌介导转化获得了转基因草莓。在病原物灰霉菌孢子诱导后,由淀粉-KI的显色反应证实,转基因草莓中go基因的表达引起H2O2的生成;用草莓灰霉病病原侵染,结果表明:转基因草莓抗灰霉病的能力较对照明显提高。

关键词： go基因草莓遗传转化抗病

农杆菌介导转移go基因到马铃薯早大白的研究简报

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黑龙江农业科学 2000年第4期 52-52页

作者：吕晓波南相日刘文萍韩玉琴雷勃钧林忠平胡鸢雷黑龙江省农科院生物技术研究中心哈尔滨150086 北京大学生命学院北京100871

早大白是特早熟马铃薯,适于黑龙江的二季作,深受农民欢迎.但其晚疫病严重,常会给农民造成意外的损失.受马铃薯遗传复杂性的影响,常规方法选育抗病品种时间长,难度大.

关键词：马铃薯早大白 go基因农杆菌介导

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抗病基因PAP及go转化嘎啦苹果的研究

抗病基因PAP及GO转化嘎啦苹果的研究

作者：洪小娟西北农林科技大学

学位级别：硕士

苹果是我国重要的果树之一,真菌病和病毒病是影响苹果品质和产量的重要限制因素,抗病育种是解决这一问题的根本途径。由于苹果在遗传上高度杂合,传统的杂交育种手段选育抗病品种难度极大且育种周期较长,现代基因工程育种技术为转基因定... 详细信息

苹果是我国重要的果树之一,真菌病和病毒病是影响苹果品质和产量的重要限制因素,抗病育种是解决这一问题的根本途径。由于苹果在遗传上高度杂合,传统的杂交育种手段选育抗病品种难度极大且育种周期较长,现代基因工程育种技术为转基因定向改良苹果抗病性提供了可能。本研究以抗病基因go和抗病毒基因PAP为目的基因,研究了农杆菌介导法和基因枪法转基因定向改良嘎拉苹果抗病性。主要研究结果如下: 1优化了嘎啦苹果叶片遗传转化体系,利用农杆菌介导法将美洲商陆抗病毒蛋白（PAP）基因转入嘎啦苹果。研究表明叶片经过3 d的预培养,于OD600值为0.6的菌液中侵染10 min,3 d共培养,抑菌素Cef的浓度为250 mg/L,庆大霉素筛选压力为50 mg/L的条件下,转化效率最高。通过根癌农杆菌介导转化,获得了抗性植株,经初步鉴定其中2株为转化植株。 2构建了菠菜乙醇酸氧化酶基因的植物表达双元载体pBingo,并将其导入根癌农杆菌EHA105中。 3以嘎啦苹果叶片为受体材料,利用基因枪介导法进行go基因的遗传转化。初步确立了嘎啦苹果基因枪遗传转化的物理参数:金粉微粒大小为1.0 um,氦气压力为1100spi,真空度为27 inchHg,轰击距离为6 cm时转化效率最高;苹果待转化叶片在高渗培养基中经过4 h的预处理,基因枪转化后在分化培养基中进行2-3 d的恢复培养,然后在筛选培养基中进行筛选,转化效率较高;经基因枪法转化获得了抗性植株。为今后基因枪法在苹果遗传转化中的应用提供了方法依据。

关键词：苹果 PAP基因 go基因根癌农杆菌介导基因枪介导

葡萄糖氧化酶基因的克隆及其在转基因烟草中的表达

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自然科学进展 2003年第3期13卷 248-252页

作者：王志兴刘昱辉孙敬三贾士荣中国农业科学院生物技术研究所北京100081 中国科学院植物研究所北京100093

通过PCR扩增,克隆了黑曲霉编码葡萄糖氧化酶的go基因。构建了CaMV35S启动子驱动的go基因植物表达载体,经农杆菌介导的遗传转化,获得了转基因烟草植株.经Southern,Northern和Western杂交分析,证明了go基因在转基因烟草中的整合、转录和翻... 详细信息

通过PCR扩增,克隆了黑曲霉编码葡萄糖氧化酶的go基因。构建了CaMV35S启动子驱动的go基因植物表达载体,经农杆菌介导的遗传转化,获得了转基因烟草植株.经Southern,Northern和Western杂交分析,证明了go基因在转基因烟草中的整合、转录和翻译,转基因烟草中H_2O_2的含量最高可达610μmol/L,比对照提高近5倍,嫁接试验证实H_2O_2可由砧术远距离运输至接穗,但不能由接穗转运至砧木,说明H_2O_2是通过导管由下向上运输,非转基因接穗嫁接至转基因砧木上3周,接穗上不同节位叶片中H_2O_2的含量不存在浓度梯度,说明这是一种主动运输而不是被动扩散.

关键词：葡萄糖氧化酶 go基因转基因烟草基因克隆基因表达过氧化氢转运途径嫁接试验

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姜基因转化系统的建立及优化

山东农业科学 2006年第3期38卷 11-14页

作者：李庆芝尚志华房玉洁李玲莱芜市农业科学研究所山东莱芜271100 莱芜市农业广播学校山东莱芜271100

通过几种试验方案的设计．提高葡萄糖氧化酶基因在姜系统中的遗传转化,得出添加乙酰丁香酮100μmol／L．菌液浓度OD600=0．1～0．3．侵染5～15min．预培养1～2天，侵染后延迟选择2天，可以获得较高的转化和再生效率。

关键词： go基因农杆菌介导乙酰丁香酮