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龙须菜hsp和gln基因克隆及其在不同品系发育过程中表达分析

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中国海洋大学学报（自然科学版） 2018年第9期48卷 51-61页

作者：彭冲李晓东隋正红商二磊刘昊昕中国海洋大学海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室山东青岛266003

从龙须菜鲁龙1号、981品系不同发育阶段转录组数据中,挑选差异表达显著基因——hsp、gln,对其上游与全基因序列测序分析。Hsp中8个保守位点均处HSP20结构域内。gln具谷氨酰胺合成酶N结构域和龙须菜特有的两个跨膜区与低复杂性区域。2个... 详细信息

从龙须菜鲁龙1号、981品系不同发育阶段转录组数据中,挑选差异表达显著基因——hsp、gln,对其上游与全基因序列测序分析。Hsp中8个保守位点均处HSP20结构域内。gln具谷氨酰胺合成酶N结构域和龙须菜特有的两个跨膜区与低复杂性区域。2个基因表达均可能受缺氧、光照、茉莉酸甲酯等环境及植物激素调控影响。利用荧光定量技术发现不同品系龙须菜的发育过程中hsp与gln表达水平的变化趋势相似。hsp表达水平在Ⅰ到Ⅲ阶段缓慢上升,在Ⅳ阶段大幅升高,这可能与藻体表面伤口的修复相关。gln表达水平在Ⅰ到Ⅱ阶段上升,在Ⅱ到Ⅳ阶段下降,于Ⅳ阶段最低,gln可能与四分孢子囊形成相关。在龙须菜不同品系中2基因表达水平存在差异,这可能与两品系不同的育性表现相关。

关键词：龙须菜 hsp gln 实时荧光定量PCR 育性

EGF、gln和pGRF基因质粒对早期断奶仔猪肠道发育的影响

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畜牧兽医学报 2006年第5期37卷 457-463页

作者：范志勇王康宁周定刚湖南农业大学动物营养研究所长沙410128 四川农业大学动物营养研究所雅安625014

为研究表皮生长因子(EGF)及其与谷氨酰胺(gln)和pGRF基因质粒的不同组合形式对早期断奶仔猪肠道发育影响的差异,选取同日龄断奶仔猪30头,等分到EGF、EGF+gln、EGF+pGRF基因质粒、EGF+pGRF基因质粒+gln和对照组(生理盐水)共5个处理中,每... 详细信息

为研究表皮生长因子(EGF)及其与谷氨酰胺(gln)和pGRF基因质粒的不同组合形式对早期断奶仔猪肠道发育影响的差异,选取同日龄断奶仔猪30头,等分到EGF、EGF+gln、EGF+pGRF基因质粒、EGF+pGRF基因质粒+gln和对照组(生理盐水)共5个处理中,每个处理3个重复,每个重复2头猪,进行对比试验,试验期21d。试验结束时,从每个处理的每个重复中随机选取1头仔猪,空腹称重后屠宰取样。结果表明:EGF与pGRF基因质粒、gln的不同组合形式对肝脏、胰脏和胃主要消化器官重量没有显著影响(P>0.05),但均不同程度促进了仔猪小肠的发育。其中,以EGF+gln+pGRF基因质粒的效果最为明显,小肠、空肠前部、空肠中段、空肠后段及整个空肠的重量分别超过对照组37.12%(P0.05)。

关键词： EGF gln pGRF基因质粒早期断奶仔猪小肠消化器官

日粮中添加谷氨酰胺(gln)对断奶仔猪生产性能的影响

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黑龙江畜牧兽医 2008年第7期 43-44页

作者：冯君李宏基韩立强李岩河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002

随着养猪生产集约化程度的不断提高,仔猪早期断奶变得越来越重要.然而早期断奶会造成仔猪生理、环境及营养应激,常常表现出如消化机能紊乱、饲料利用率降低、抗病力下降等所谓的'仔猪早期断奶综合征',从而严重影响了养猪业的经济效益.

关键词：谷氨酰胺断奶仔猪生产性能 gln 仔猪早期断奶日粮消化机能紊乱营养应激

gln及其二肽对氧化应激下山羊瘤胃上皮细胞凋亡及其机制的研究

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Gln及其二肽对氧化应激下山羊瘤胃上皮细胞凋亡及其机制的研究

作者：韩奇鹏湖南农业大学

学位级别：硕士

本研究应川原代细胞分离技术、传代细胞培养模型、氧化应激模型、实时荧光定量PCR (RT-qPCR)、免疫组化学等技术进行体外试验,同时结合动物临床医学研究进展,从细胞与分子水平探讨谷氨酰胺(gln)及其二肽对断奶山羊瘤胃上皮细胞抗氧化应... 详细信息

本研究应川原代细胞分离技术、传代细胞培养模型、氧化应激模型、实时荧光定量PCR (RT-qPCR)、免疫组化学等技术进行体外试验,同时结合动物临床医学研究进展,从细胞与分子水平探讨谷氨酰胺(gln)及其二肽对断奶山羊瘤胃上皮细胞抗氧化应激的影响,掌握G1n及其二肽与断奶山羊瘤胃上皮细胞凋亡关系,进而为揭示G1n及其二肽对H202诱导断奶山羊瘤胃上皮细胞氧化应激调节作川机制和进一步深入研究提供理论依据。试验一湘东黑山羊瘤胃上皮细胞周期分布、增殖和凋亡特点研究本研究旨在为建立湘东黑山羊瘤胃上皮细胞体外培养模型,并对其凋亡比率进行初步研究。试验采集60日龄湘东黑山羊的瘤胃上皮组织,应用0.25%胰蛋白酶(Trypsin)+0.02%乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid, EDTA)对山羊瘤胃上皮组织进行消化,得到单个的山羊瘤胃上皮原代细胞进行体外培养。通过倒置显微镜观察原代和传代培养阶段山羊瘤胃上皮细胞形态,采用细胞计数法检测山羊瘤胃上皮传代细胞的生长活性;应用细胞免疫组化学方法对山羊瘤胃上皮传代细胞进行鉴定;并用流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)检测山羊瘤胃上皮传代细胞周期分布情况和凋亡比率。结果显示：1)经0.25%Trypsin+0.02% EDTA消化获得的山羊瘤胃上皮原代细胞,培养1d后开始贴壁生长,2d开始生长较快(对数期)呈典型的“波峰”状生长,3-7d生长最为迅速,7-8d生长速度平稳(平台期),8-9d后进入生长衰退期;2)经免疫细胞化学方法鉴定,细胞胞浆为黄褐色,即细胞角蛋白19呈阳性(CK19)表达;3)膜联蛋白-V (Annexin V)/碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)联合染色显示,随着培养时问的延长,细胞凋亡比率显著增加(Pgln (16.0mM)、Ala-gln (16.0mM)和Gly-gln水平(17.28mM),试验共设3个处理,每个处理3个重复;并添加5个处理的G1n及其二肽(0、800(H2O2) μM、17.28(GG)mM+800(H2O2)μM、16(G)mM+800(H2O2)μM、16(AG)mM+800(H2O2μM)。应用膜联蛋白-V/PI联合染色的结果显示：(1)与对照组相比,G组和GG组早期细胞凋亡显著降低(Pgln可以减少山羊瘤胃上皮传代细胞早期凋亡率;(2)与(C (H2O2))组相比,GG+C(H2O2)组晚期细胞凋亡显著降低(Pgln可缓解H202对山羊瘤胃上皮细胞氧化应激的损伤。实验四G1n及其二肽对H202诱导山羊瘤胃上皮细胞凋亡基因Bcl-2/BaxmRNA表达的影响本试验采用单因子试验设计,向山羊瘤胃上皮细胞中添加5个处理的G1n及其二肽(0、800(H2O2)μM、17.28(GG)mM+800(H2O2)μM、16(G)mM+800(H2O2)μM、 16(AG)mM+800(H2O2μM),检测山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡基因Bcl-2/Bax mRNA表达量。采集60日龄湘东黑山羊的瘤胃上皮传代细胞,采用荧光定量(real time quantitative polymerase chain reareaction, RT-qPCR)对山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡基因Bcl-2/Bax表达量进行检测。实验结果显示：(1)与对照组比较,添加H202显著降低Bcl-2基因表达量(Pgln、Gly-gln和Aln-gln,与C(H2O2)组相比,导致Bax基因表达量显著降低(P<0.01),而Bcl-2基因表达显著增加(P<0.01),Bcl-2/Bax比值显著增

关键词： gln Ala-gln Gly-gln 氧化应激湘东黑山羊瘤胃上皮细胞凋亡

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gln增加T2DM大鼠骨骼肌质量的探究

Gln增加T2DM大鼠骨骼肌质量的探究

作者：夏旭昆明理工大学

学位级别：硕士

肌肉减少症是一种老年多发病。肌肉减少症具有骨骼肌体积减少,肌力下降和生活质量下降3个特点。肌肉减少症的发病原因与年龄、营养、运动、疾病等多种因素相关。肌肉减少症发病的机制是复杂的。糖尿病是一种很常见的老年代谢性疾病,患... 详细信息

肌肉减少症是一种老年多发病。肌肉减少症具有骨骼肌体积减少,肌力下降和生活质量下降3个特点。肌肉减少症的发病原因与年龄、营养、运动、疾病等多种因素相关。肌肉减少症发病的机制是复杂的。糖尿病是一种很常见的老年代谢性疾病,患者因胰岛素的水平下降或胰岛素抵抗导致血糖升高而易患上肌肉减少症。谷氨酰胺(Glutamine,gln)是生物体的一种非必需氨基酸。由于gln在生物体中发挥极其重要的作用,又被称为“条件必需氨基酸”。gln在临床上有多种用途。胰岛素信号通路是生物体调节血糖水平以及促进生物体自身生长的重要信号通路。其中,PI3K/Akt信号通路是胰岛素信号通路下游之一。PI3K/Akt信号通路的下游靶基因成肌分化抗原基因(Myogenic Differentiation Antigen,MyoD)和肌肉环指1基因(muscle RING finger 1,MuRF1)与骨骼肌质量的变化有关。本研究利用高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素注射诱导2型糖尿病大鼠模型,分四周、八周进行gln灌胃治疗。研究gln对各组(正常对照组、2型糖尿病模型对照组、gln低剂量治疗组、gln高剂量治疗组)大鼠MyoD、MuRF1、表达量的影响。探究gln增加2型糖尿病大鼠骨骼肌质量的分子机制,为gln用于治疗由2型糖尿病引发的肌肉减少症提供理论依据。本研究还探究了 gln治疗后在所检测的血液指标中是否存在与2型糖尿病大鼠骨骼肌质量增加可能有关的血液指标。本研究发现,gln具有增加2型糖尿病大鼠骨骼肌质量的作用。gln可以分别上调2型糖尿病大鼠MyoD基因和下调MuRF1基因的表达,起到增加骨骼肌质量的作用。gln治疗后,在所检测的血液指标中不存在与2型糖尿病大鼠骨骼肌质量增加可能有关的血液指标。

关键词： gln 2型糖尿病骨骼肌质量血液指标

化浊解毒平溃煎对溃疡性结肠炎大鼠TNF-α、gln及MCP-1的影响

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化浊解毒平溃煎对溃疡性结肠炎大鼠TNF-α、GLN及MCP-1的影响

作者：董笑一河北医科大学

学位级别：硕士

目的：本实验通过观察对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）大鼠的一般状态、病理学改变、疾病活动指数（DAI）评分、血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、谷氨酰胺（gln）含量以及结肠组织中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响，分... 详细信息

目的：本实验通过观察对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）大鼠的一般状态、病理学改变、疾病活动指数（DAI）评分、血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、谷氨酰胺（gln）含量以及结肠组织中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达的影响，分析化浊解毒平溃煎治疗UC的作用机制，为临床应用提供实验依据。方法：将60只清洁级健康雄性Wistar大鼠（体重250g-300g），适应性喂养7天后随机分为空白对照组（CK）、模型组（MG）、美沙拉嗪组（MSG）、化浊解毒平溃煎高剂量组（HDG）、化浊解毒平溃煎中剂量组（MDG）、化浊解毒平溃煎低剂量组（LDG）。每组10只，给予正常饮食饮水。除空白对照组外，其余5组采用2，4，6,-三硝基苯磺酸(2，4，6–trini-trobenzeneesulfonic acid,TNBS)致敏和乙醇诱导的复合灌肠法制造大鼠实验性溃疡性结肠炎模型。造模后第3天，CK组大鼠正常喂养，MG组大鼠给予0.9%氯化钠溶液灌胃，MSG组大鼠采用美沙拉嗪混悬液灌胃，其余中药治疗组采用相应药物灌胃。连续治疗2周，观察大鼠在各个时期的精神状态、体重、饮食饮水、粪便性状等情况。治疗结束后，各组大鼠禁食不禁水24h，断头法处死并取血，用放射免疫法检测血清TNF-α含量，生化法测gln的含量，免疫组化法测MCP-1的表达。采血后快速剖腹，取出结肠，取肉眼观察病变明显的部位切取少许肠组织，进行常规固定，石蜡包埋及连续4um做病理切片，一部分进行HE染色后在光镜下观察结肠组织病理学改变，另一部分按免疫组化说明书操作，半定量法测定MCP-1的表达。结果：1大鼠的一般情况观察NG组大鼠精神佳，毛色光泽，饮食进水正常，活动佳，二便可，体重逐渐增加。其余5组大鼠造模后出现精神萎靡不振，嗜蜷卧，进食量及活动量显著减少，喜扎堆，体毛凌乱无光泽,并出现稀便，垫料污秽。MG组大鼠随实验天数增加可见症状逐渐加重,严重的大鼠肛周肉眼观察可见血便，称体质量均有不同程度的减轻。其余4组治疗组大鼠经药物干预后，大鼠的精神、皮毛色泽、活动状态、体重等一般状况均有好转，其中HDG大鼠好转最快，一般状况接近NG;MDG与MSG略差，但仍高于LDG,且MDG与MSG之间无明显差别;LDG大鼠比MG大鼠一般状况略好。2DAI评分疾病活动指数评分方面，各治疗组HDG(0.402±0.286)、MDG(0.892±0.362)、MSG(0.903±0.297)、LDG(1.328±0.255)与MG(2.489±0.245)比较，差异具有统计学意义（P0.05）。详见Table.3。3结肠粘膜肉眼与组织病理学观察肉眼观察MG情况最差，HDG接近CK组,MDG与MSG略好，且MSG好于MDG，LDG略好于MG。组织病理学观察：NG粘膜光滑色泽正常，为正常粘膜;MG大鼠粘膜退变坏死，大量炎细胞弥漫浸润，充血、水肿，溃疡形成明显，LDG组次之。HDG大鼠肠粘膜基本完整，接近NG，MDG大鼠肠粘膜次于HDG，MSG介于HDG与MDG之间，好于LDG。详见附图Fig.1-Fig.6。4血清TNF-α检测结果与MG（2.69±0.42）比较，各治疗组大鼠血清TNF-α含量的差异具有统计学意义（P0.05）。5血清gln含量检测结果与MG（1.65±0.24）比较，各治疗组大鼠血清gln含量的差异具有统计学意义（P0.05）。CK（3.21±0.29）与各治疗组之间差异具有统计学意义（P0.05），LDG与MDG比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。详见Table.2。结论：1化浊解毒平溃煎能有效地改善UC大鼠的一般状况，降低DAI评分，减轻病理损伤，而且其疗效与该方剂剂量存在一

关键词：溃疡性结肠炎化浊解毒平溃煎中医药实验研究 TNF-α MCP-1 gln

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gln(K)一可解子群的自同构

东北师大学报(自然科学版) 1986年第1期 1-9页

作者：游宏

设K为域,K上一切形如的n阶可逆上三角陈对方阵乘法构成一群,记为G;（K）。文[1]在研究G;（Z;）(n≥3,p>3)的自同构群为可解完全群时定出了G;（Z;）的自同构的形式。文[2]将[1]的结果推广到一般有限域上。但他们解决问题的方法都借助有... 详细信息

设K为域,K上一切形如的n阶可逆上三角陈对方阵乘法构成一群,记为G;（K）。文[1]在研究G;（Z;）(n≥3,p>3)的自同构群为可解完全群时定出了G;（Z;）的自同构的形式。文[2]将[1]的结果推广到一般有限域上。但他们解决问题的方法都借助有限域及有限群的一些性质。本文将定出特征不为2的域上的G;（K）(n≥2)的自同构的形式。而证明较[1]还简捷一些,

关键词：自同构完全群完备群可解子群 gln

gln与rhGh对肝硬化病人部分体液免疫因子的影响

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实用医学杂志 2005年第19期21卷 2188-2190页

作者：邵雄杰邓宇陈郁鲜杨晓燕中山大学附属第三医院急诊科广州市510630

目的:观察谷氨酰胺(gln)与重组人生长激素(rhGh)各自单独应用及联合应用对肝硬化病人部分体液免疫因子的影响。方法:将20例肝硬化病人随机分成gln+rhGh组、gln组、rhGh组和CONT对照组,所有病人给予等氮等热量营养支持7d,gln+rhGh组应用... 详细信息

目的:观察谷氨酰胺(gln)与重组人生长激素(rhGh)各自单独应用及联合应用对肝硬化病人部分体液免疫因子的影响。方法:将20例肝硬化病人随机分成gln+rhGh组、gln组、rhGh组和CONT对照组,所有病人给予等氮等热量营养支持7d,gln+rhGh组应用口服gln0.3g/(kg·d)和皮下注射rhGh10U/d;gln组应用口服gln0.3g/(kg·d);rhGh组应用皮下注射rhGh10U/d;CONT对照组应用相应安慰剂。观察治疗前后患者CD4T细胞百分比、CD8T细胞百分比、CD4/CD8比值、IL-2、TNF-α在外周静脉血中的水平,分别比较。结果:在试验后各组相比均无统计学意义,且各组与试验前比较差异无显著性(P>0.05)。结论:短期口服gln与rhGh无论单独应用还是联合应用对肝硬化病人的体液免疫均无明显影响。

关键词：肝硬化抗体生成谷氨酰胺生长激素(人) 体液免疫因子肝硬化病人 rhGh gln CD4/CD8比值重组人生长激素

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gln强化TPN在SAP患者中的应用

中国煤炭工业医学杂志 2001年第8期4卷 630-631页

作者：蒋婧张洪文李冬云河南医科大学第一附属医院临床营养中心郑州矿务局总医院

重症急性胰腺炎(SAP)是一种急性全身性危重病症,由于胰腺炎症时激活并释放多种酶,可使全身血管发生改变,除胰腺本身发生病理改变外,还常累及体内诸多脏器功能,能量消耗往往高于正常人的20%～50%,分解代谢大于合成代谢,从而不可避免地产... 详细信息

重症急性胰腺炎(SAP)是一种急性全身性危重病症,由于胰腺炎症时激活并释放多种酶,可使全身血管发生改变,除胰腺本身发生病理改变外,还常累及体内诸多脏器功能,能量消耗往往高于正常人的20%～50%,分解代谢大于合成代谢,从而不可避免地产生严重的营养不良及低蛋白血症,肠道及全身免疫力低下,多脏器功能衰竭的发生率和病死率极高,尽管给予足够的肠外营养治疗,也不能达到理想效果,谷氨酰胺双肽(gln)的应用目前被认为是重要的代谢调理剂和'免疫营养”[1].本文就gln强化TPN在SAP 30例患者中的应用报告如下.

关键词：急性胰腺炎谷氨酰胺双肽 gln SAP TPN 营养支持