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Butyrate in combination with Forskolin alleviates necrotic enteritis,increases feed efficiency,and improves carcass composition of broilers

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Journal of Animal Science and Biotechnology 2022年第4期13卷 1115-1125页

作者： Qing Yang Binlong Chen Kelsy Robinson Thiago Belem Wentao Lyu Zhuo Deng Ranjith Ramanathan Guolong Zhang Department of Animal and Food Sciences Oklahoma State UniversityStillwaterOKUSA College of Animal Science Xichang UniversityXichangSichuanChina Poultry Production and Product Safety Research Unit USDA–Agricultural Research Service(ARS)FayettevilleARUSA State Key Laboratory for Managing Biotic and Chemical Threats to the Quality and Safety of Agro-products Institute of Agro-product Safety and NutritionZhejiang Academy of Agricultural SciencesHangzhouChina Center for Excellence in Hip Disorders Texas Scottish Rite Hospital for ChildrenDallasTXUSA.

Background:The emergence of antimicrobial resistance has necessitated the development of effective alternatives to antibiotics for livestock and poultry production.This study investigated a possible synergy between butyrate and Forskolin(a natural labdane diterpene)in enhancing innate host defense,barrier function,disease resistance,growth performance,and meat quality of broilers.Methods:The expressions of representative genes involved in host defense(AvBD9 and AvBD10),barrier function(MUC2,CLDN1,and TJP1),and inflammation(IL-1β)were measured in chicken HD11 macrophages in response to butyrate and Forskolin in the presence or absence of bacterial lipopolysaccharides(LPS).Intestinal lesions and the Clostridium perfringens titers were also assessed in C.perfringens-challenged chickens fed butyrate and Forskolincontaining Coleus forskohlii(CF)extract individually or in combination.Furthermore,growth performance and carcass characteristics were evaluated in broilers supplemented with butyrate and the CF extract for 42 d.Results:Butyrate and Forskolin synergistically induced the expressions of AvBD9,AvBD10,and MUC2 in chicken HD11 cells(PForskolin also suppressed LPS-induced IL-1βgene expression in HD11 cells in a synergistic manner(PForskolin-containing CF extract had no influence on weight gain,but significantly reduced feed intake(PForskolin combination significantly decreased abdominal fat deposition(P=0.01)with no impact on the carcass yield,breast meat color,drip loss,or pH of d-42 broilers.Conclusions:Butyrate and Forskolin has potential to be developed as novel antibiotic alternatives to improve disease resistance,feed efficiency,and carcass c

关键词： Antibiotic alternatives Butyrate Forskolin Necrotic enteritis Poultry

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Adenylate cyclase activator Forskolin alleviates intracerebroventricular propionic acid-induced mitochondrial dysfunction of autistic rats

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Neural Regeneration Research 2020年第6期15卷 1140-1149页

作者： Sidharth Mehan Saloni Rahi Aarti Tiwari Tarun Kapoor Kajal Rajdev Ramit Sharma Himanshi Khera Sourabh Kosey Umesh Kukkar Rajesh Dudi Department of Neuropharmacology ISF College of PharmacyMogaPunjabIndia Department of Pharmacology Rajendra Institute of Technology&SciencesSirsaHaryanaIndia Pharmacology Division CSIR-Indian Institute of Integrative MedicineJammuIndia

Neuronal mitochondrial dysfunction increases inflammatory mediators and leads to free radical generation and anti-oxidant enzymatic alterations,which are major neuropathological hallmarks responsible for autism.Mitochondrial dysfunction in autism is associated with decreased ATP levels due to reduced levels of cyclic adenosine monophosphate.Rat models of autism were established by intracerebroventricular injection of propionic acid.These rat models had memory dysfunction,decreased muscle coordination and gait imbalance.Biochemical estimation of propionic acid-treated rats showed changes in enzyme activity in neuronal mitochondrial electron transport chain complexes and increases in pro-inflammatory cytokines,oxidative stress and lipid biomarkers.Oral administration of 10,20 and 30 mg/kg adenylate cyclase activator Forskolin for 15 days reversed these changes in a dose-dependent manner.These findings suggest that Forskolin can alleviate neuronal mitochondrial dysfunction and improve neurological symptoms of rats with autism.This study was approved by the RITS/IAEC,SIRSA,HARYANA on March 3,2014(approval No.RITS/IAEC/2014/03/03).

关键词： adenylate cyclase ATP autism Forskolin mitochondrial dysfunction neuroinflammation oxidative stress propionic acid

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Forskolin and Phorbol 12-myristate 13-acetate modulates the expression pattern of AP-1 factors and cell cycle regulators in estrogen-responsive MCF-7 cells

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Genes & Diseases 2019年第2期6卷 159-166页

作者： R.L.Babu M.Naveen Kumar Rajeshwari H.Patil K.M.Kiran Kumar K.S.Devaraju Govindarajan T.Ramesh S.Chidananda Sharma Department of Bioinformatics and Biotechnology Akkamahadevi Women’s UniversityJnanashakthi CampusVijayapura586108KarnatakaIndia Department of Microbiology and Biotechnology Bangalore UniversityJnana BharathiBengaluru560056KarnatakaIndia Department of Biochemistry Karnatak UniversityDharwad580003KarnatakaIndia Department of Biology Center for Biotechnology and Biomedical SciencesNorfolk State UniversityNorfolkVAUSA

Activator protein-1(AP-1)transcription factor is a key component of many signal transduction pathways involved in the regulation of cellular processes and controls rapid responses of mammalian cells when exposed to the variety of stimulus.The phorbol 12-myristate 13-acetate and Forskolin(Fo)are well-known kinase activators/stimulators of Protein Kinase C(PKC)and Protein Kinase A(PKA)respectively.Importantly,these kinases are found to be present in transitional points of many cell signaling pathways,especially those involved in proliferation.The stimulating effect of PKC and PKA on the expression of AP-1 factors in MCF-7 breast cell proliferation is not well characterized.Hence,the role of PKC by PMA treatment and the role of PKA by using Fo in MCF-7 cells is investigated.Where,cells treated with PMA showed increased cell proliferation,while Fo had no effect,but inhibited the PMA induced proliferation.The RT-PCR results showed the PMA induced c-Jun,c-Fos and Fra-1 expressions compared to control and Fo.However,Fo in combination with PMA,inhibit the PMA induced above mRNA expressions where Fo alone has no effect.Western blot studies validated the c-Jun expressions in PMA treated MCF-7 cells.Further,PMA increases the mRNA expression of Cyclin-E1,Cyclin-D1,and CDK-4,whereas Fo decreases their expressions.Thus,mitogenic effect of PMA and inhibitory action of Fo on MCF-7 cells is probably enhanced via activation of AP-1 factors and concomitant action of cell cycle regulators in the downstream singling cascade.

关键词： AP-1 transcription factor Cell cycle Forskolin MCF-7 cells Phorbol esters

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Forskolin引起大鼠脂肪细胞内脂滴重塑(英文)

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生理学报 2019年第3期71卷 379-387页

作者：刘梅芳杜从阔苏雪莹济宁医学院药学院日照276826 北京大学基础医学院生理与病理生理学系北京100191

脂肪组织是人体的主要能量储库,甘油三酯贮存在细胞内脂滴(lipid droplets, LDs)中,越来越多的研究表明脂滴是细胞内代谢活跃的细胞器。本研究旨在探讨Forskolin长时间刺激脂肪分解过程中脂滴形态和脂滴表面perilipin家族蛋白的改变。以... 详细信息

脂肪组织是人体的主要能量储库,甘油三酯贮存在细胞内脂滴(lipid droplets, LDs)中,越来越多的研究表明脂滴是细胞内代谢活跃的细胞器。本研究旨在探讨Forskolin长时间刺激脂肪分解过程中脂滴形态和脂滴表面perilipin家族蛋白的改变。以Sprague-Dawley (SD)大鼠附睾脂肪垫来源的分化脂肪细胞为研究对象,给予1μmol/L Forskolin慢性刺激24 h,采用比色方法测定培养基中甘油的浓度;采用尼罗红染色观察细胞内脂滴形态的变化;采用荧光定量PCR检测perilipin家族蛋白mRNA水平的改变;采用免疫印迹和免疫荧光染色观察蛋白水平以及蛋白的亚细胞定位。结果表明,1μmol/L Forskolin孵育24 h可以持续刺激脂肪分解。伴随着脂肪分解的进行,细胞内脂滴形态逐渐发生改变,细胞内聚集存在的大脂滴逐渐减少,位于细胞周边的小脂滴逐渐增加,最终细胞内大脂滴全部消失,取而代之的是在细胞质中弥散存在的微小脂滴。在脂肪分解过程中,perilipin家族蛋白水平也发生明显变化。分化成熟的脂肪细胞几乎没有Plin2蛋白表达,而Forskolin慢性刺激可以显著增加Plin2蛋白以及mRNA的水平,增加的Plin2蛋白特异性结合在脂滴表面。Forskolin慢性刺激对Plin3的mRNA水平无显著影响,但可以显著降低Plin1、Plin4和Plin5的mRNA水平。以上结果提示,在Forskolin慢性持续刺激脂肪分解过程中,脂滴形态和perilipin家族蛋白均发生显著改变。

关键词： Forskolin 脂肪细胞脂滴 perilipin家族蛋白

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基于MAPKs信号通路探讨Forskolin联合HSV-1在GBM中的抗肿瘤效应及机制

基于MAPKs信号通路探讨Forskolin联合HSV-1在GBM中的抗肿瘤效应及...

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作者：蒋佩文成都医学院

学位级别：硕士

研究背景与目的:神经胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是成年人中枢神经系统(Central nervous system,CNS)中最常见、最致命的恶性肿瘤。目前GBM治疗的标准方案是以手术切除为主,再辅以放疗和替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)化疗的多模式组... 详细信息

研究背景与目的:神经胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)是成年人中枢神经系统(Central nervous system,CNS)中最常见、最致命的恶性肿瘤。目前GBM治疗的标准方案是以手术切除为主,再辅以放疗和替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)化疗的多模式组合疗法;然而治疗后患者1年以上的生存率低于30%,诊疗后五年的生存率约5%,仍然存在患者术后易复发、预后差、生存期短等问题,并且这些问题在过去几年里没有得到很好的解决。因此,迫切需要更有效的治疗策略来改善GBM的预后以延长患者的生存期。溶瘤病毒疗法(Oncolytic viruses therapy,OVT)作为治疗肿瘤的现代免疫疗法之一,近20年OVT逐渐成为GBM治疗的研究热点。大多数靶向GBM治疗的溶瘤病毒(Oncolytic viruses,OVs)研究主要涉及单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)和腺病毒等病毒株,而HSV-1是第一个在GBM小鼠模型实验中获得成功的OV,HSV-1应用于GBM的治疗有着广阔的前景。研究报道了HSV-TK/GCV通过降低MAPK/ERK活性以激活自噬诱导视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma,RB)毒性,而MAPKs信号通路是否参与调控了HSV-1对GBM的杀伤作用还未见研究报道。同时,由于单一的OVT存在靶向性不高、溶瘤效应不足、病毒复制限制等局限性,OVT的联合疗法渐渐成为OVs治疗肿瘤的发展趋势,越来越多的研究开始把OVs与其他疗法相结合(如小分子化合物、过继性T细胞疗法和免疫检查点抑制剂等),取得了较好的效果。小分子化合物佛司可林(Forskolin,FOR),是一种从植物毛喉鞘蕊花植物中分离得到的天然二萜类化合物,具有强大的激活腺苷酸环化酶(Adenylate Cyclase,AC)的作用,已有研究报道了Forskolin通过升高c AMP促进神经胶质瘤C6、神经胶质母细胞瘤U87细胞分化,抑制细胞增殖的作用。因此,本研究探讨HSV-1感染GBM细胞株LN229细胞后,肿瘤细胞的死亡方式及胞内信号通路的活化情况,在阐释HSV-1对LN229细胞杀伤效应的分子机制的基础上,进而探索Forskolin与HSV-1联合对LN229细胞的抗肿瘤效应及机制,以期为GBM的治疗提供新的选择方案以及OVT联合小分子化合物的治疗策略提供理论依据。材料与方法:研究首先选用HSV-1病毒F株、GBM细胞株LN229细胞,对病毒杀伤肿瘤细胞的效应(如细胞形态的改变、细胞死亡的方式等)以及此过程中MAPKs信号通路的活化情况进行探索;在阐释HSV-1的溶瘤效应及机制后,研究进一步探讨小分子化合物Forskolin与HSV-1联合对LN229细胞的协同抗肿瘤效应。方法第一部分:1.PCR扩增、产物测序鉴定病毒HSV-1(F株),采用TCID法对病毒滴度进行测定。2.采用显微镜成像法和CCK-8法检测HSV-1感染LN229细胞后细胞病变及细胞增殖抑制情况。3.使用PI、Annexin V-FITC/PI、DCFH-DA染色及Western Blot检测HSV-1感染LN229细胞后对细胞的生物学功能的影响,即细胞周期情况、凋亡比例、细胞内ROS水平和MAPKs信号通路(即MAPK/JNK、MAPK/p38和MAPK/ERK)的活化情况。第二部分:1.CCK-8法检测了Forskolin及Forskolin与HSV-1联合作用对LN229细胞增殖抑制的情况。2.采用RT-qPCR对HSV-1感染Vero细胞后的不同时间点病毒复制关键基因IE(ICP4)、E(UL12)和L(Us6)的表达情况进行检测,以建立更快捷、灵敏的病毒核酸定量检测方法;使用不同MOI的HSV-1感染Vero细胞24 h,RT-qPCR检测HSV-1基因IE(ICP4、ICP27)和E(UL12)的表达情况。3.采用显微镜成像法、Annexin V-FITC/PI、JC-1、DCFH-DA染色检测Forskolin联合HSV-1感染LN229细胞24 h后的协同抗肿瘤效应,即细胞的形态学改变、细胞死亡情况、细胞线粒体膜电位变化和细胞内ROS水平等。4.通过RT-qPCR检测Forskolin联合HSV-1感染LN229细胞后的病毒关键基因ICP4、UL12和Us6的表达情况。5.通过Western Blot检测Forskolin联合HSV-1作用LN229细胞后,肿瘤细胞内MAPKs信号通路的活化情况。结果:第一部分:1.PCR扩增、产物测序结果确定了供试HSV-1为F株,同时TCID法测定HSV-1(T4)的病毒滴度为1×10 TCID/m L。2.不同MOI的HSV-1感染LN229细胞24 h后,显微镜成像和CCK-8结果显示HSV-1可有效感染细胞、细胞形态发生典型的CPE并抑制LN229细胞增殖。3.不同M

关键词：单纯疱疹病毒1型神经胶质母细胞瘤 Forskolin 联合疗法

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Forskolin抑制大鼠胃窦环行平滑肌自发性收缩运动

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生理学报 2013年第2期65卷 224-228页

作者：姜京植孙倩许东元张默函朴丽花蔡英兰金政延边大学医学院组织学与胚胎学教研室延吉133002

本文旨在探讨环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)对胃窦环行平滑肌功能的调节作用。分离大鼠胃窦环形肌条,用多道生理记录仪观察腺苷酸环化酶(adenylyl cyclase,AC)直接激活剂Forskolin对胃平滑肌自发性收缩活动的影响,并... 详细信息

本文旨在探讨环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)对胃窦环行平滑肌功能的调节作用。分离大鼠胃窦环形肌条,用多道生理记录仪观察腺苷酸环化酶(adenylyl cyclase,AC)直接激活剂Forskolin对胃平滑肌自发性收缩活动的影响,并用ELISA法测定灌流液中cAMP生成量的变化。结果显示,Forskolin浓度依赖性地抑制胃窦环形肌条自发性收缩活动,降低肌条的收缩振幅和频率,使收缩运动基线明显下移。Forskolin浓度依赖性地提高灌流液中的cAMP含量,且灌流液中cAMP含量与肌条收缩振幅呈显著负相关。Forskolin对大鼠胃窦环行肌自发性收缩活动的抑制作用可被cAMP依赖性的蛋白激酶(cAMP-dependent protein kinase,PKA)抑制剂H-89所阻断。以上结果提示,Forskolin可通过增加cAMP含量激活PKA途径,从而抑制大鼠胃窦环行平滑肌的自发性收缩活动。

关键词： Forskolin cAMP 胃平滑肌自发性收缩活动

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Forskolin对小鼠CD8^(+)记忆T细胞富集的影响

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中华实用诊断与治疗杂志 2022年第12期36卷 1210-1214页

作者：李铁鹏王瑶高耀何美颉陈广玉徐本玲高全立郑州大学附属肿瘤医院免疫治疗科河南郑州450008

目的探讨Forskolin对体外培养小鼠不同T细胞亚群的影响及对CD8^(+)记忆T细胞的富集作用。方法25只C57BL/6小鼠,采用密度梯度离心法分离脾脏淋巴细胞,应用CD3^(+)T细胞分离试剂盒分选CD3^(+)T细胞,经体外培养后分为对照组和5、10、20μmo... 详细信息

目的探讨Forskolin对体外培养小鼠不同T细胞亚群的影响及对CD8^(+)记忆T细胞的富集作用。方法25只C57BL/6小鼠,采用密度梯度离心法分离脾脏淋巴细胞,应用CD3^(+)T细胞分离试剂盒分选CD3^(+)T细胞,经体外培养后分为对照组和5、10、20μmol/L Forskolin组,5、10、20μmol/L Forskolin组分别加入5、10、20μmol/L Forskolin,对照组加入等体积DMSO。采用台盼蓝染色法对4组总T细胞数进行计数,应用流式细胞仪检测4组CD8^(+)记忆T细胞比率,选择与对照组差异最大的Forskolin浓度进行后续实验。采用液相色谱-质谱联用法分析对照组和20μmol/L Forskolin组非靶向代谢组学,应用流式细胞仪检测对照组和20μmol/L Forskolin组CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞比率及增殖活跃(低CFSE荧光强度)的CD8^(+)记忆、非记忆T细胞比率,计算增殖活跃的CD8^(+)记忆与非记忆T细胞比值(CD8^(+)记忆/非记忆T细胞)。结果对照组和5、10、20μmol/L Forskolin组总T细胞数[(102.91±2.91)%、(69.84±6.88)%、(31.61±2.52)%、(14.02±2.12)%]依次降低(PForskolin组CD8^(+)记忆T细胞比率[(23.03±12.06)%、(31.58±10.39)%、(44.35±9.10)%]依次升高(PForskolin组比较差异无统计学意义(P>0.05);选择与对照组差异最大的20μmol/L Forskolin组进行后续实验。对照组与20μmol/L Forskolin组差异代谢物有123种,主成分分析显示2组细胞代谢特征存在差异,20μmol/L Forskolin组三羧酸循环代谢物焦磷酸硫胺素、琥珀酸酯水平均低于对照组(P0.05)。20μmol/L Forskolin组CD8^(+)T细胞比率[(91.24±3.71)%]高于对照组[(81.14±9.22)%](t=9.297,P=0.008),CD4^(+)T细胞比率[(0.57±0.45)%]低于对照组[(8.33±6.58)%](t=12.449,P=0.003)。20μmol/L Forskolin组增殖活跃的CD8^(+)记忆T细胞比率[(37.50±1.15)%]高于CD8^(+)非记忆T细胞[(6.46±0.75)%](t=72.779,PForskolin组增殖活跃的CD8^(+)记忆、非记忆T细胞比率均低于对照组(t=7.956,P=0.001;t=70.692,PForskolin对小鼠不同T细胞亚群的增殖抑制存在差异,对CD4^(+)T细胞的抑制强于CD8^(+)T细胞,对CD8^(+)非记忆T细胞的抑制强于CD8^(+)记忆T细胞,添加Forskolin有助于CD8^(+)记忆T细胞富集。

关键词： Forskolin 记忆T细胞增殖代谢组学小鼠

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Forskolin激活cAMP信号通路调控小鼠心肌成纤维细胞结缔组织生长因子的表达

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华中科技大学学报（医学版） 2015年第1期44卷 1-9页

作者：刘波黄晓帆李冬寒王生伟杜心灵华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科武汉430022

目的研究胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平提高对小鼠心肌成纤维细胞(MCFs)表达结缔组织生长因子(CTGF)的影响及其信号通路。方法采用出生1周内C57BL乳鼠心脏分离培养原代MCFs,第3代MCFs使用腺苷酸环化酶激活剂Forskolin干预培养后检测细胞CTG... 详细信息

目的研究胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平提高对小鼠心肌成纤维细胞(MCFs)表达结缔组织生长因子(CTGF)的影响及其信号通路。方法采用出生1周内C57BL乳鼠心脏分离培养原代MCFs,第3代MCFs使用腺苷酸环化酶激活剂Forskolin干预培养后检测细胞CTGF、蛋白激酶A(PKA)、p44/42丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)及磷酸化p44/42 MAPK表达情况。分别给予磷酸化p44/42 MAPK抑制剂PD98509及PKA抑制剂Rp-cAMPS阻断相关信号节点,检测细胞内PKA、p44/42 MAPK、磷酸化p44/42 MAPK以及CTGF表达变化。结果 Forskolin干预培养MCFs细胞后,胞内cAMP水平提高,细胞活力下降,PKA表达上升,p44/42 MAPK总蛋白无明显改变,p44/42 MAPK磷酸化水平下降,CTGF mRNA及蛋白表达下降;给予PD98509抑制p44/42 MAPK磷酸化后,PKA表达上升,CTGF mRNA及蛋白表达下调;Rp-cAMPS抑制PKA活化后,p44/42 MAPK磷酸化水平升高,CTGF mRNA及蛋白表达上调。结论Forskolin可以通过提高MCFs胞内cAMP水平抑制CTGF的表达,其作用信号通路为高水平cAMP上调PKA表达,降低下游p44/42 MAPK磷酸化水平,抑制CTGF的表达。

关键词： Forskolin 环磷酸腺苷结缔组织生长因子心肌成纤维细胞心肌纤维化

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Forskolin对小鼠体外T淋巴细胞活化、增殖和周期的影响

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中药材 2008年第7期31卷 1008-1012页

作者：宋兵曾耀英黄秀艳李林滕菲杨志姚满林暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:研究Forskolin对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞活化、增殖和周期的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育,运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色... 详细信息

目的:研究Forskolin对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞活化、增殖和周期的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育,运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术来检测CD3+T细胞早期活化标志CD69的表达水平;用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色技术结合流式细胞术和CELLQuest、Mod FitLT软件,分析T细胞增殖情况;用碘化丙锭(PI)染色技术分析细胞周期分布。结果:加入终浓度为10-7、10-6、10-5M的Forskolin,孵育8 h后,CD3+T细胞CD69的表达水平和平均荧光强度(MFI)与Con A组相比都有显著的降低,且呈梯度依赖性;对Con A刺激的小鼠CD3+T细胞的增殖指数(PI)也有梯度性抑制;对细胞周期的影响表现为:随着Forskolin浓度升高,处于G0/G1期的细胞增加,S期细胞减少,G2/M期的细胞也有少量减少。结论:Forskolin能有效抑制小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖,阻滞细胞从G0/G1期进入S、G2/M期。由此推断Forskolin在某种程度上是一种潜在的免疫抑制剂。

关键词： Forskolin 活化增殖周期流式细胞术

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Forskolin对CNP抑制缺氧心房机械活动及HIF-1a活性的影响

Forskolin对CNP抑制缺氧心房机械活动及HIF-1a活性的影响

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作者：关成明延边大学

学位级别：硕士

目的:观察C型钠尿肽（C-type natriuretic peptid,CNP）对缺氧心房的机械活动及其缺氧诱导因子-1a（hypoxia-inducible factor-1a,HIF-1a）活性的影响,并探讨腺苷酸环化酶激活剂Forskolin对CNP调节缺氧心房机械活动及HIF-1a活性的作用... 详细信息

目的:观察C型钠尿肽（C-type natriuretic peptid,CNP）对缺氧心房的机械活动及其缺氧诱导因子-1a（hypoxia-inducible factor-1a,HIF-1a）活性的影响,并探讨腺苷酸环化酶激活剂Forskolin对CNP调节缺氧心房机械活动及HIF-1a活性的作用。方法:本研究利用SD大鼠为实验对象,制备离体搏动的急性缺氧大鼠心房灌流装置模型。实验分为对照组、缺氧组、缺氧加CNP组、缺氧加Forskolin组、缺氧加CNP组加Forskolin组。运用生物记录仪监测心房搏动压的变化,运用蛋白印迹技术（western blot,WB）的方法,检测磷酸二酯酶3A亚型（phosphodiesterse type 3A,PDE 3A）和 HIF-1a 的表达。结果:1.缺氧明显抑制心房搏动压,CNP则易化缺氧抑制心房机械活动的效应。2.Forskolin明显减缓CNP抑制缺氧心房机械活动的作用,但Forskolin未能改变单纯缺氧抑制心房机械活动的效应。3.Forskolin明显增加缺氧心房肌组织PDE 3A含量。缺氧及CNP均未能改变缺氧心房PDE 3A的含量,但在Forskolin存在下CNP显著降低PDE 3A的含量。4.缺氧明显著增加心房肌组织HIF-1a含量,Forskolin则增强缺氧增加心房肌组织HIF-1a含量的作用;而CNP不仅可完全阻断缺氧增加心房肌组织HIF-1a含量的作用,而且明显抑制Forskolin对缺氧心房HIF-1a含量的效应。结论:1.CNP显著抑制离体搏动大鼠缺氧心房的机械活动及其HIF-1其活性;2.Forskolin通过CNP-PDE3A信号通路明显减缓CNP抑制心房机械活动及其HIF-1a活性的作用。

关键词： Forskolin C型钠尿肽缺氧诱导因子-1a 磷酸二酯酶3A 腺苷酸环化酶

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