检索结果-南通市图书馆

基于层层自组装技术构建灵敏度可调的电化学发光传感器检测flt3

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分析试验室 2023年第5期42卷 631-637页

作者：孙莹莹严峰王柏山辽宁中医药大学医学检验学院沈阳110847

选择急性髓系白血病的标志性基因flt3作为目标物,构建了灵敏度可调的双信号放大电化学发光传感体系。采用层层自组装法将预处理的多壁碳纳米管有序组装到电极表面,利用无酶目标催化发夹反应放大传感器的灵敏度,实现FLT3基因的高灵敏、... 详细信息

选择急性髓系白血病的标志性基因flt3作为目标物,构建了灵敏度可调的双信号放大电化学发光传感体系。采用层层自组装法将预处理的多壁碳纳米管有序组装到电极表面,利用无酶目标催化发夹反应放大传感器的灵敏度,实现FLT3基因的高灵敏、快速、准确检测。通过电化学交流阻抗谱(EIS)对传感器的构建进行跟踪表征,采用电化学发光法(ECL)对不同浓度的FLT3基因进行检测。结果表明,该传感器可通过控制多壁碳纳米管的组装层数调节灵敏度与检出限。当多壁碳纳米管组装层数为6层时,检测flt3的线性范围为0.5~50 pmol/L,检出限为0.3 pmol/L。更高灵敏度的传感器有望通过组装更多层数的多壁碳纳米管实现。

关键词： FLT3基因目标催化发夹反应电化学发光层层自组装

成人急性淋巴细胞白血病患者中FLT3基因突变特点及其意义

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实用癌症杂志 2023年第3期38卷 415-417,421页

作者：洪英霞王卫敏李宁宁王瑞刘晓郑州大学第一附属医院 450000 郑州大学第三附属医院河南省妇幼保健院450000

目的分析成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者FLT3基因突变特点与其意义。方法选取123例成人ALL患者。运用聚合酶链式反应(PCR)扩增产物,以限制性酶切产物分析法了解成人ALL患者FLT3基因突变现象,探究FLT3基因与患者临床病理特征的关系;... 详细信息

目的分析成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者FLT3基因突变特点与其意义。方法选取123例成人ALL患者。运用聚合酶链式反应(PCR)扩增产物,以限制性酶切产物分析法了解成人ALL患者FLT3基因突变现象,探究FLT3基因与患者临床病理特征的关系;随访3年,探究该基因突变与此类患者预后的关系。结果 123例成人ALL患者内,FLT3基因突变的有14例,突变率为11.38%(14/123),突变类型内,flt3-ITD突变3例(21.43%),flt3-TKD突变11例(78.57%);FLT3基因突变与FLT3基因无突变患者的年龄、性别、血小板计数(PLT)、白细胞计数(WBC)、血红蛋白(Hb)、乳酸脱氢酶(LDH)、骨髓原始细胞比率、淋巴细胞绝对值(LYM)、外周血原始细胞比率相比,无统计学差异(P>0.05);FLT3基因突变71.43%(10/14)与FLT3基因无突变83.74%(103/123)患者的3年生存率相比,无统计学差异(P>0.05)。结论 FLT3基因突变在成人ALL患者中较为少见,且与患者的生存率无明显关系。

关键词：急性淋巴细胞白血病 FLT3基因临床病理特征基因突变生存率

变性PAGE检测急性髓系白血病FLT3基因突变及其临床意义

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中国实验血液学杂志 2010年第6期18卷 1386-1389页

作者：马亮钟明华丰岱荣龙红沈军马一盖黄尚志中国医学科学院、北京协和医学院基础医学研究所医学遗传学系北京100005 北京中日友好医院血液科北京100029 北京中日友好医院检验科北京100029

分析急性髓系白血病(AML)初诊患者flt3长度突变(flt3-LM)发生率及其与染色体核型及FAB亚型之间的关系,以及flt3-LM与疗效之间的关系。采用聚合酶链反应(PCR)扩增基因组DNA,应用2%琼脂糖凝胶与8%变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(PAGE)分析结果,检... 详细信息

分析急性髓系白血病(AML)初诊患者flt3长度突变(flt3-LM)发生率及其与染色体核型及FAB亚型之间的关系,以及flt3-LM与疗效之间的关系。采用聚合酶链反应(PCR)扩增基因组DNA,应用2%琼脂糖凝胶与8%变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(PAGE)分析结果,检测99例初诊AML患者FLT3基因长度突变;应用G显带方法对其中72例初诊AML患者进行细胞遗传学分析。结果表明:应用琼脂糖凝胶检测AML患者flt3-LM发生率为20.2%(20/99),而应用变性PAGE检测初诊AML患者flt3-LM发生率为29.29%(29/99);flt3-LM在各亚型患者中发生率分别为M0(0/1)、M2(30%,9/30)、M3(22.2%,6/27)、M4(28.6%,4/14)、M5(36.8%,7/19)、M6(37.5%,3/8)。flt3-LM在正常核型组为39.13%(9/23),高于异常核型组(24.49%,12/49),但无统计学差异。73例可评价疗效患者中flt3-LM阳性完全缓解(CR)率36.36%(8/22),低于flt3-LM阴性患者CR率62.75%(32/51)(pflt3-LM在完全缓解患者中占20%(8/40)、部分缓解(PR)患者中占38.1%(8/21)、未缓解(NR)患者中占50%(6/12)。结论:变性聚丙烯酰氨凝胶电泳检测flt3-LM比较敏感、可靠;flt3-LM在AML中发生率较高,但对AML的CR率有不利影响。

关键词：急性髓系白血病变性PAGE FLT3基因核型分析

FLT3基因3′-非翻译区-荧光素酶报告载体的构建及其活性鉴定

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中国实验血液学杂志 2010年第3期18卷 694-697页

作者：高晓宁林季李永辉王莉莉于力解放军总医院血液科北京100853 解放军总医院基础医学所生化室北京100853

为分析FMS样酪氨酸激酶3(FMS-liketyrosine kinase3,flt3)基因3′-非翻译区(3′-untranslated region,3′-UTR)可能的微小RNA(miRNA)调控位点,构建FLT3基因3′-UTR-荧光素酶报告载体,与miRNA共转染293T细胞,分析miRNA对其调控作用。采用PCR方法从HepG2细胞基因组DNA中扩增FLT3基因3′-UTR区序列,插入经PstI和EcoRI双酶切的经过改造的荧光素酶报告载体pGL3-control(pGL3-control-m);通过Target Scan5.1软件预测可能与FLT3基因3′-UTR作用的miRNA;采用FuGENEHD转染试剂包裹荧光素酶报告重组子和miRNA真核表达载体共转染293T细胞,双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。结果表明,成功构建了含有804bp的FLT3基因3′-UTR序列的荧光素酶报告重组子,通过酶切和基因测序的方法鉴定正确;miRNA靶位点预测显示,FLT3基因3′-UTR可能是miRNA-15a、miRNA-15b、miRNA-16、miRNA-195、miRNA-424、miRNA-497的作用靶点;与对照组相比,miRNA-15a、15b、195可使荧光素酶报告重组子的荧光素酶活性降低20%左右。结论:成功构建了FLT3基因3′-UTR-荧光素酶报告载体,而miRNA-15a、miRNA-15b、miRNA-195可抑制其荧光素酶活性。

关键词： FLT3基因 microRNA 3’-非翻译区荧光素酶报告载体基因调控基因转染

急性淋巴细胞白血病FLT3基因突变的发现及临床意义

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中国医学科学院学报 2009年第5期31卷 522-526页

作者：赵欣唐克晶田征陈礼平秘营昌王建祥中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者fms样酪氨酸激酶3(flt3)基因突变情况。方法采用PCR方法检测61例ALL患者的FLT3基因内部串联重复突变(flt3-ITD)与ASP835突变(flt3-TKD),并以7名健康志愿者为对照,对检测结果进行分析并探讨其临床意... 详细信息

目的研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者fms样酪氨酸激酶3(flt3)基因突变情况。方法采用PCR方法检测61例ALL患者的FLT3基因内部串联重复突变(flt3-ITD)与ASP835突变(flt3-TKD),并以7名健康志愿者为对照,对检测结果进行分析并探讨其临床意义。结果61例ALL患者中,2例出现flt3-ITD,1例出现flt3-TKD。结论少数ALL患者体内存在flt3突变。

关键词： FLT3基因内部串联重复 ASP835突变急性淋巴细胞白血病

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FLT3基因在苯造血毒性中的作用及其机制

Flt3基因在苯造血毒性中的作用及其机制

我如何治疗flt3-ITD突变阳性急性髓系白血病

中国毒理学会第九次全国毒理学大会

作者：许锴纪双斌余林玲濮韵秋孙蓉丽张娟尹立红浦跃朴环境医学工程教育部重点实验室东南大学公共卫生学院

苯是一种重要工业溶剂和常见环境污染物。持续苯暴露会引起慢性苯中毒,导致骨髓抑制,表现为全血细胞减少症、贫血、再生障碍性贫血和白血病等。flt3是主要表达于未成熟造血细胞表面的一类酪氨酸激酶受体,对干细胞的增殖、分化以及免疫... 详细信息

苯是一种重要工业溶剂和常见环境污染物。持续苯暴露会引起慢性苯中毒,导致骨髓抑制,表现为全血细胞减少症、贫血、再生障碍性贫血和白血病等。flt3是主要表达于未成熟造血细胞表面的一类酪氨酸激酶受体,对干细胞的增殖、分化以及免疫系统的正常发育具有重要的意义。目的研究FLT3基因在苯造血毒性中的作用及机制,探讨其作为苯暴露工人生物标志的可能性。方法构建苯暴露和苯中毒小鼠模型,检测苯暴露及苯中毒小鼠骨髓造血细胞比例的变化及骨髓细胞和干细胞FLT3基因的表达。同时在苯暴露人群外周血白细胞中验证FLT3基因的表达情况。构建flt3高表达细胞株(flt3-OE)及其对照(NC-OE)和flt3低表达细胞株(flt3-Si)及其对照(NC-Si),分别用0、10和20μmol·L

关键词：苯 FLT3基因苯暴露人群生物标志

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中华血液学杂志 2018年第1期39卷 1-4页

作者：王建祥中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

FLT3基因编码的酪氨酸激酶参与造血发育。在急性髓系白血病（AML）患者中存在两种FLT3基因突变：一种为FLT3基因激酶区的点突变（TKD），另一种为FLT3基因内部串联重复（ITD）。1996年一个日本研究组在研究将flt3mRNA作为微小残留病检... 详细信息

FLT3基因编码的酪氨酸激酶参与造血发育。在急性髓系白血病（AML）患者中存在两种FLT3基因突变：一种为FLT3基因激酶区的点突变（TKD），另一种为FLT3基因内部串联重复（ITD）。1996年一个日本研究组在研究将flt3mRNA作为微小残留病检测指标时发现了flt3-ITD突变。这类突变是FLT3基因的近膜区序列ITD，为非移码突变，

关键词：急性髓系白血病点突变 FLT3基因酪氨酸激酶阳性治疗内部串联重复微小残留病

FLT3基因突变在血液肿瘤中检测及临床特征分析

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FLT3基因突变在血液肿瘤中检测及临床特征分析

作者：杨金荣昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]通过基因突变分析,探讨我国血液肿瘤患者中flt3-ITD突变的发生率和分布情况,分析其患者临床特征、预后的相关性,并分析各基因突变间的相关性。[方法]收集2013年4月-2014年5月在昆明医科大学第一附属医院血液科收治住院的304例不... 详细信息

[目的]通过基因突变分析,探讨我国血液肿瘤患者中flt3-ITD突变的发生率和分布情况,分析其患者临床特征、预后的相关性,并分析各基因突变间的相关性。[方法]收集2013年4月-2014年5月在昆明医科大学第一附属医院血液科收治住院的304例不同类型血液肿瘤患者的骨髓液样品及10例非恶性血液肿瘤患者骨髓液样品（作对照）。采用PCR结合琼脂糖凝胶电泳法检测血液肿瘤患者的FLT3基因11号外显子并分析其突变。[结果]304例不同血液肿瘤患者（138例AML、39例ALL、43CML、16例CLL、15例MDS、22例MM、31例NHL）及10例非恶性血液肿瘤患者中flt3-ITD基因突变在恶性血液病中分布特点如下：1.复发难治AML和ALL组患者年龄明显高于完全缓解AML和ALL组,且差异有统计学意义。2.41例初诊AML患者检测到flt3-ITD突变6例,突变率为14.63%,其中NK-AML患者突变率为14.29%（2/14）,AK-AML患者突变率为13.33%（2/15）,两组差异无统计学意义;在38例复发难治AML患者中检测到突变6例,突变率为15.79%,均发生在异常核型患者,但差异无统计学意义;在AML-CR患者未检测到突变;初诊AML和复发难治AML患者组突变率明显高于AML-CR患者组,差异均有统计学意义;本研究中检测到1例在初诊时为flt3-ITD突变阳性,经3个疗程化疗后一直未缓解,仍检出该突变。初诊AML患者突变组和野生型组在年龄、性别、WBC、HGB、PLT计数、FAB分型及2疗程CR率相比较,差异无统计学意义,但骨髓原始细胞比例相比较,突变组明显高于野生型组,差异有统计学意义,而复发难治AML患者突变组和野生型组在临床特征上相比较,差异均无统计学意义。3.41例初诊AML患者中检测到1例flt3-ITD突变联合NPM1、DNMT3a基因突变,FAB分型为M5;1例flt3-ITD突变联合NPM1基因突变,FAB分型为M4,余未发现与其他基因联合突变。4.15例MDS患者中检测到1例flt3-ITD突变,为MDS-RAEB-2,突变组患者的WBC计数显著高于野生型组,差异有统计学意义,余临床特征差异无统计学意义。伴有该突变的MDS患者1月后转为AML-M4。5.31例NHL患者中检测到到1例flt3-ITD突变,根据2008年世界卫生组织（WHO）的分类标准属于T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤,这在国际上未见报道。6. ALL、CML、CLL、MM及非血液肿瘤患者中均未发现flt3-ITD突变。[结论]1. flt3-ITD突变主要发生在AML患者,且伴骨髓原始比例高,缓解率低,是AML预后不良的重要分子学标志。2. flt3-ITD突变在复发难治AML患者中具有高频率突变,提示该突变是AML复发难治的标志。3. NPM1、flt3-ITD、DNMT3a基因联合可能更易出现髓单核系中。4. flt3-ITD突变可能与MDS疾病进展有关,可能是MDS向AML转变的危险因素。5. flt3-ITD突变可出现在T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤,可能与其预后有关。我们检测到的这一例在国际上未见报道,进一步收集样本进行深入研究。

关键词：血液肿瘤 FLT3基因内部串联重复序列基因突变

FLT3基因体外转染对H9c2大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的影响

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徐州医科大学学报 2021年第10期41卷 737-741页

作者：蒋春英邹艳魏鹏张苗苗蒋鹤嵇利亚徐州市中心医院心内科徐州市心血管病研究所江苏徐州221009

目的探讨腺病毒转染FLT3基因对H9c2大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的影响。方法建立H9c2大鼠心肌细胞模拟缺血再灌注模型。FLT3基因腺病毒转染H9c2大鼠心肌细胞,缺血再灌注后免疫荧光法验证转染效果。将H9c2大鼠心肌细胞分为正常对照组(C组... 详细信息

目的探讨腺病毒转染FLT3基因对H9c2大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的影响。方法建立H9c2大鼠心肌细胞模拟缺血再灌注模型。FLT3基因腺病毒转染H9c2大鼠心肌细胞,缺血再灌注后免疫荧光法验证转染效果。将H9c2大鼠心肌细胞分为正常对照组(C组)、缺氧复氧组(IRI组)、空载体组(Ad-GFP组)及基因转染组(Ad-flt3组)。Western blot法检测flt3蛋白、Caspase-3蛋白的表达。采用CCK-8法检测各组心肌细胞活性。比色法测定乳酸脱氧酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与C组比较,心肌细胞缺血再灌注损伤后flt3蛋白表达下降(PFLT3基因后心肌细胞中的flt3蛋白较未转染细胞显著增加(PFLT3基因转染后细胞上清液LDH、CK-MB、MDA含量较未转染细胞显著降低,SOD活性升高(PFLT3基因转染H9c2大鼠心肌细胞可减轻细胞缺血再灌注损伤,其机制可能与抗氧化应激及减轻细胞凋亡有关。

关键词： FLT3基因缺血再灌注损伤转染