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肺癌前病变、肺癌中fhit基因表达的临床研究

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中国肺癌杂志 2006年第4期9卷 320-324页

作者：常秀军杨声张海青汪惠姜颖北京市结核病胸部肿瘤研究所胸外科 101149 北京市结核病胸部肿瘤研究所病理科 101149 北京市结核病胸部肿瘤研究所肺癌分子生物研究室 101149

背景与目的fhit基因为近年发现的新的候选抑癌基因,位于3p14.2,跨越FRA3B易脆点,在包括肺癌在内的多种人类肿瘤中均存在异常表达。本研究旨在观察fhit基因在人肺癌前病变、肺癌中的表达情况,探讨fhit基因在肺癌发生、发展过程中的可能... 详细信息

背景与目的fhit基因为近年发现的新的候选抑癌基因,位于3p14.2,跨越FRA3B易脆点,在包括肺癌在内的多种人类肿瘤中均存在异常表达。本研究旨在观察fhit基因在人肺癌前病变、肺癌中的表达情况,探讨fhit基因在肺癌发生、发展过程中的可能作用。方法采用免疫组化方法检测298例甲醛固定、石蜡包埋的标本(包括161例肺癌、51例肺癌前病变、30例正常肺组织、23例肺良性病变和33例肺癌转移淋巴结)中fhit蛋白表达情况。结果fhit蛋白在正常肺组织及肺良性病变组织中均无失表达,癌前病变组织和肺癌组织中失表达率分别为54.9%(28/51)和59.0%(95/161),肺癌转移淋巴结组织中失表达率为78.8%(26/33);肺癌前病变、肺癌及转移淋巴结组织中fhit蛋白失表达率显著高于正常肺组织及肺良性病变组织(Pfhit基因表达水平与肺癌组织学类型、肿瘤细胞分化程度、患者pTNM分期、淋巴结转移有密切关系(Pfhit蛋白失表达组肺癌患者的术后5年生存率显著低于表达组(Pfhit基因失表达率69.1%显著高于无吸烟组49.5%(Pfhit蛋白失表达可能是肺癌发生过程中的早期分子事件,与肺癌的发生、发展及预后有关;吸烟导致fhit蛋白表达下降可能是诱发肺癌的原因之一。

关键词：肺癌前病变肺肿瘤 fhit基因免疫组织化学

MMP10、fhit基因在食管癌中的表达及临床意义

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山东大学学报（医学版） 2005年第12期43卷 1159-1162页

作者：杨国涛闫召华周玉汀王善政山东大学齐鲁医院胸外科山东济南250012

目的:探讨基质金属蛋白酶10(MMP10)、脆性组氨酸三联体(fhit)基因在食管癌中的异常表达及二者对其发生、发展的作用。方法:应用免疫组化法对54例食管癌组织及癌旁正常组织MMP10、fhit基因的表达水平进行检测,并研究与病史及临床病理指... 详细信息

目的:探讨基质金属蛋白酶10(MMP10)、脆性组氨酸三联体(fhit)基因在食管癌中的异常表达及二者对其发生、发展的作用。方法:应用免疫组化法对54例食管癌组织及癌旁正常组织MMP10、fhit基因的表达水平进行检测,并研究与病史及临床病理指标的关系。结果:MMP10在食管癌组织阳性表达率为35.19%(19/54),而食管癌旁正常组织为阴性表达。fhit基因在食管癌组织中缺失率为72.22%(39/54),明显高于食管癌旁正常组织中缺失率12.96%(7/54),二者差异有统计学意义(P0.05)。fhit基因缺失与食管癌患者的性别、病史长短、吸烟、饮酒、P-TNM分期及淋巴结转移无明显关系(P>0.05)。而与食管癌组织分化程度有关(Pfhit基因存在较高的缺失率,且二者与食管癌临床病理指标有关,提示MMP10、fhit基因在食管癌的发生、发展中起重要作用。

关键词：食管肿瘤基质金属蛋白酶 fhit基因脆性组氨酸三联体

膀胱移行细胞癌中fhit基因启动子甲基化及其蛋白的表达

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临床泌尿外科杂志 2009年第8期24卷 627-630页

作者：黄力陈立新张孝斌姚启盛王晓康郧阳医学院附属太和医院泌尿外科湖北十堰442000 武汉大学医学院武汉大学附属人民医院泌尿外科

目的:探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)fhit基因启动子甲基化状态及其与fhit蛋白表达的关系。方法:采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)方法及免疫组织化学S-P法检测62例BTCC组织和10例正常膀胱组织中fhit基因启动子甲基化状态及fhit蛋白表达。结果:B... 详细信息

目的:探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)fhit基因启动子甲基化状态及其与fhit蛋白表达的关系。方法:采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)方法及免疫组织化学S-P法检测62例BTCC组织和10例正常膀胱组织中fhit基因启动子甲基化状态及fhit蛋白表达。结果:BTCC组织、正常膀胱组织fhit基因启动子甲基化频率分别为19.4%(12/62),0(0/10)。fhit蛋白在正常膀胱组织、BTCC中阳性表达率分别为100.0%(10/10)和46.77%(29/62),肿瘤不同分级中随恶性程度的增高,表达减少,Ⅰ级与Ⅲ级比较,差异有统计学意义(P0.05)。fhit基因的启动子甲基化和蛋白阳性表达有相关(Pfhit基因的启动子甲基化可能是基因失活重要机制之一,fhit基因启动子甲基化及表达在BTCC的发生、发展中起重要作用。

关键词：膀胱移行细胞癌甲基化抑癌基因 fhit基因

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肾细胞癌中fhit基因的研究

湖南医科大学学报 2000年第5期25卷 457-459页

作者：陈湘申鹏飞陈主初湖南医科大学附属湘雅医院湖南长沙 410008 湖南医科大学湖南长沙 410078

目的 :探讨肾细胞癌中fhit基因的改变及意义。方法 :用RT PCR及Southern印迹杂交法检测肾细胞癌及其细胞系中fhit基因转录本 ,并观察其基因组的改变。结果 :约 8 3% (2 / 2 4)肾细胞癌有异常转录本 ;其中一株细胞系cDNA在用外引物扩增... 详细信息

目的 :探讨肾细胞癌中fhit基因的改变及意义。方法 :用RT PCR及Southern印迹杂交法检测肾细胞癌及其细胞系中fhit基因转录本 ,并观察其基因组的改变。结果 :约 8 3% (2 / 2 4)肾细胞癌有异常转录本 ;其中一株细胞系cDNA在用外引物扩增时 ,只有一个变小的fhit基因异常转录本 ;用内引物扩增时 ,fhit基因转录本完全缺失。约 2 0 % (5 / 2 4)肾细胞癌fhit基因区域的基因组DNA出现重排。结论 :部分肾细胞癌存在fhit基因转录本及基因组异常 ;fhit基因的改变在肾细胞癌的发生、发展中可能起一定作用。

关键词：肾肿瘤基因重排 fhit基因肾细胞癌

食管鳞状细胞癌中fhit基因的表达异常及与吸烟关系的研究

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食管鳞状细胞癌中FHIT基因的表达异常及与吸烟关系的研究

作者：杜嘉慧山东大学

学位级别：硕士

目的 fhit基因是Ohta等于1996年利用外显子捕获方法首次发现的一个新的人类基因,该基因跨越人类染色体脆弱位点FRA3B,并含有编码组氨酸三联体的功能区,是一个与食管癌等大多数肿瘤相关的候选抑癌基因。在食管癌、胃癌、大肠癌、肺癌、... 详细信息

目的 fhit基因是Ohta等于1996年利用外显子捕获方法首次发现的一个新的人类基因,该基因跨越人类染色体脆弱位点FRA3B,并含有编码组氨酸三联体的功能区,是一个与食管癌等大多数肿瘤相关的候选抑癌基因。在食管癌、胃癌、大肠癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌和宫颈癌等多种原发性肿瘤和肿瘤细胞系中频繁发现fhit基因异常,包括fhit转录本异常、fhit位点等位基因缺失和fhit基因蛋白表达下调或缺乏等。本研究通过检测食管鳞状细胞癌组织中fhit蛋白的表达水平,确定食管癌组织中是否有fhit基因的表达下降,来探讨fhit基因在食管鳞状细胞癌及正常食管组织中的表达及意义,吸烟与fhit基因异常的关系,了解食管癌的发生机制及吸烟致癌的分子靶点,为食管癌的早期诊断、预防及基因治疗提供理论依据。方法随机选择46例临床确诊为食管癌且进行手术治疗的患者,术中采集食管癌及正常食管组织标本,用10%的福尔马林固定。对每一例病人临床资料进行详细记录包括术前详细吸烟情况、术后病理特征。应用免疫组织化学S-P法对食管鳞状细胞组织和正常食管组织进行fhit基因的表达水平检测,分析fhit基因表达与临床病理特征、临床病理分期、细胞分化程度、淋巴结转移及吸烟史的关系。结果 (1) fhit基因蛋白在食管癌组织中的表达水平明显低于正常食管组织(Pfhit基因蛋白在吸烟组食管癌组织中的表达明显低于非吸烟组食管

关键词：食管癌 fhit基因吸烟

宫颈病变中fhit基因微卫星不稳定性与错配修复基因表达的相关性研究

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宫颈病变中FHIT基因微卫星不稳定性与错配修复基因表达的相关性研...

作者：宋春丽河北医科大学

学位级别：硕士

目的:在全世界范围内,宫颈癌是女性癌症中最常见的死亡原因之一。高危型人乳头状瘤病毒(human papillomo- viruses, HPV)感染是其发生的主要因素之一,但HPV感染并不能单独导致宫颈癌,遗传学改变在宫颈癌的发生、发展方面也起了非常重要... 详细信息

目的:在全世界范围内,宫颈癌是女性癌症中最常见的死亡原因之一。高危型人乳头状瘤病毒(human papillomo- viruses, HPV)感染是其发生的主要因素之一,但HPV感染并不能单独导致宫颈癌,遗传学改变在宫颈癌的发生、发展方面也起了非常重要的作用。宫颈癌的发生是一个多因素、多步骤综合作用的结果,其发生、发展与多个基因的激活或失活有关。近年来研究发现DNA修复基因突变引起DNA错配修复系统的功能降低或丧失,从而引起遗传物质不稳定,主要表现为微卫星不稳定性(microsatellite instability, MSI),进而导致肿瘤的发生。目前国内外同时对MSI和错配修复基因hMLH1、hMSH2与宫颈癌发生关系的研究很少,因此本研究通过对宫颈癌及癌前病变中脆性组氨酸三联体(fragile histidine traid, fhit)基因中两个微卫星位点的MSI分析以及对错配修复基因hMLH1、hMSH2蛋白缺失表达的检测,并分析两者之间的相关性,探讨其在宫颈癌发生、发展中的重要作用,为阻断宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia , CIN)向宫颈癌的恶性转化提供新的思路,为探询宫颈癌的发生、发展机制提供一定理论依据,同时也为宫颈癌临床诊断和合理治疗奠定理论基础。方法: 1标本收集:收集2006年6月007年6月在河北医科大学附属第二医院宫颈病变门诊活检或病房手术的CINⅠ组织42例、CINⅡINⅢ组织24例、宫颈癌组织56例(均为宫颈鳞癌)。每例患者手术或活检时留取小部分病变宫颈组织,同时取病变周围的正常宫颈组织作自身对照,如无条件获取正常组织,则抽取患者静脉血3ml,作自身对照。将病变组织一分为二,一部分同其正常组织配对放入冻存管中,速冻于液氮中,然后贮存于-80℃冰箱备用,另一部分病变组织投入4%多聚甲醛固定。所有患者术前均未接受过放疗和化疗,术后经病理证实。 2 MSI的检测:采用聚合酶链反应-非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-溴化乙锭染色技术检测fhit基因中2个微卫星位点D3S1300和D3S1234的MSI。按照DNA提取试剂盒说明提取组织DNA,应用相应引物进行PCR扩增,扩增产物通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和溴化乙锭染色进行分析。检测结果判定:与正常组织相比,若病变组织出现DNA等位条带的增多、减少或移位,即判断为MSI阳性。 3错配修复基因hMLH1、hMSH2在不同宫颈病变组织中缺失表达的检测:采用免疫组织化学方法进行检测。 4统计方法:应用SPSS13.0统计软件对结果进行统计处理。MSI状态在不同宫颈病变组织、不同位点、宫颈癌临床分期、病理分级中的差异,hMLH1、hMSH2蛋白缺失表达水平在CINⅠ组、CINⅡINⅢ组和宫颈癌组的差异,采用chi-squareχ2或Fisher’s确切概率法检验。宫颈癌MSI与hMLH1、hMSH2缺失表达的相关性采用spearman相关性检验,检验水准为0.05,P0.05),两组与宫颈癌组差异有统计学意义(P0.05)。在宫颈癌中,D3S1300和D3S1234上出现MSI的阳性率分别为7.14%(4/56)、10.71% (6/56),差异无统计学意义(P>0.05)。 1.3 MSI与宫颈癌临床分期的关系 MSI出现在宫颈癌组织Ⅰ期2例(2/22,9.09%),Ⅱ期4例(4/28,14.28%),Ⅲ期4例(4/6,66.67%),差异有统计学意义(P0.05)。Ⅰ期、Ⅱ期与Ⅲ期差异有统计学意义(P<0.05)。 1.4 MSI与临床病理分级的关系 MSI出现在宫颈癌组织高分化鳞癌4例(4/22,18.18%),中分化鳞癌2

关键词： fhit基因 MSI hMLH1 hMSH2 宫颈癌 CIN 聚合酶链反应免疫组织化学法

叶酸、DNMT1蛋白表达及fhit基因甲基化在宫颈癌变中的作用

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叶酸、DNMT1蛋白表达及FHIT基因甲基化在宫颈癌变中的作用

作者：霍晓旭山西医科大学

学位级别：硕士

目的宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一,目前已明确人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是导致宫颈癌发生的主要原因,但并非唯一因素。近年来的研究表明,叶酸缺乏可增加宫颈癌发生的风险。叶酸是机体必需的微量营养素,它作为体内... 详细信息

目的宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤之一,目前已明确人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染是导致宫颈癌发生的主要原因,但并非唯一因素。近年来的研究表明,叶酸缺乏可增加宫颈癌发生的风险。叶酸是机体必需的微量营养素,它作为体内一碳单位的主要供体,参与DNA的甲基化过程,与肿瘤的发生发展关系密切。随着表观遗传学研究的深入,已发现在宫颈癌的发生、发展中存在DNA甲基化水平和模式的紊乱。鉴于叶酸缺乏和DNA甲基化在宫颈癌变过程中均有不可忽视的作用,而叶酸与DNA甲基化之间又存在不可分割的内在联系,提示叶酸可能通过对甲基化的调节而作为协同因子在宫颈癌变过程中发挥作用。本研究选择不同宫颈病变的妇女为研究对象,在界定其HPV感染和机体叶酸水平的前提下,检测在DNA甲基化中发挥重要作用的DNMT1蛋白的表达改变,并选择抑癌基因fhit为靶基因,以评价叶酸、DNMT1蛋白表达、fhit基因CpG岛甲基化与宫颈癌发生、发展的关系及其在宫颈癌变中的相互作用,为宫颈癌的预防和控制提供新思路。方法以人群研究为基础,采用多组比较的病例对照研究方法,选择2008年6月～2009年8月在山西省肿瘤医院经病理学确诊的宫颈鳞状细胞癌新发病人100例作为病例组1,选择同一时期在山西医科大学第二医院妇科就诊的宫颈上皮内瘤样变(CIN)患者101例和慢性宫颈炎患者109例分别作为病例组2和对照组。病例与对照均需排除营养性巨幼细胞贫血、溶血性疾病、白血病、局限性肠炎、肝脏疾病、其他肿瘤患者,以及三个月内B族维生素使用者。通过调查问卷收集研究对象人口学特征、生殖因素等相关资料,在知情同意的原则下,采集研究对象空腹静脉血以及手术或阴道镜活检宫颈组织。采用放射免疫法(RIA)检测血清叶酸;通过PCR扩增法检测HPV16的感染状况;采用Western Blotting方法检测DNMT1蛋白的表达量;应用甲基化特异性PCR (MSP)方法检测fhit基因CpG岛的甲基化状况。使用SPSS16.0软件分析数据,正态分布资料用t检验和方差分析,偏态分布资料用Wilcoxon检验和Kruskal-Wallis检验,分类资料采用χ2检验,趋势χ2检验,相关因素分析采用单因素分析和多因素非条件Logistic回归分析,交互作用采用叉生分析等。结果(1)HPV16感染率在宫颈癌组(61.0%)和CIN组(38.6%)均显著高于对照组(20.2%),差别均有统计学意义(χ2=36.29,P=0.000;χ2=8.64,P=0.003)。(2)血清叶酸水平在宫颈癌组(1.86±2.14ng/ml)明显低于对照组(3.19±2.50ng/ml),但在CIN组(2.60±2.46 ng/ml)和对照组间无显著差别;随着血清叶酸水平的下降,宫颈癌发生的危险逐渐增加(χ2趋势1=14.842,P1=0.000)。(3)DNMT1蛋白的表达水平在宫颈癌组(2.93±0.36)和CIN组(1.87±0.33)均明显高于对照组(0.89±0.30),差别均有统计学意义;(4)fhit基因CpG岛甲基化率在宫颈癌组(39.0%)显著高于对照组(2.8%)(χ2=42.67,P=0.00),但在CIN组(3.0%)和对照组间无明显差别(χ2=0.00,P=1.00)。随着宫颈病变的进展,fhit基因CpG岛的甲基化率逐渐增高(χ2趋势=53.56,P=0.000);(5)对血清叶酸与DNMT1蛋白表达的生物学交互作用的定性分析显示：在宫颈癌和CIN中,这两个因素间均存在正相加交互作用。(6)在宫颈癌中,血清叶酸与fhit基因CpG岛甲基化之间、DNMT1蛋白表达与fhit基因甲基化之间均显示有正相加交互作用,但在CIN中,均未发现他们的正相加作用。(7)在宫颈癌中,HPV16、血清叶酸、fhit基因CpG岛甲基化、血清叶酸*DNMT1蛋白表达、文化程度、首次性行为年龄及孕次作为主要因素进入回归模型;在CIN中,HPV16感染、首次性行为年龄及孕次3个因素被引入回归方程。结论(1)血清叶酸水平低是宫颈癌发生的危险因素,DNMT1蛋白高表达对宫颈癌和CIN的发生均具有重要作用,两者在宫颈癌的发生中可能存在协同作用,但在CIN的发生中未发现两者的协同作用。(2) fhit基因CpG岛甲基化可增加宫颈癌发生的危险。(3) HPV16感染、首次性行为年龄小、孕次多是宫颈癌和CIN发生共同的危险因素,文化程度高对宫颈癌具有保护性意义。

关键词：宫颈癌变叶酸人乳头瘤病毒16型 fhit基因 DNA甲基转移酶1

Livin、fhit基因对上皮性卵巢癌的表达及意义

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Livin、FHIT基因对上皮性卵巢癌的表达及意义

作者：王皓莹吉林大学

学位级别：硕士

目的:导致女性死亡的生殖道恶性肿瘤中,卵巢癌因其缺乏早期诊断依据、恶性程度高、病情发展快、预后差,高居死亡率首位。在原发性卵巢癌中,上皮性卵巢癌为最常见的病理类型(约为60%-90%)。因此,本文针对上皮性卵巢癌中Livin、fhit的表... 详细信息

目的:导致女性死亡的生殖道恶性肿瘤中,卵巢癌因其缺乏早期诊断依据、恶性程度高、病情发展快、预后差,高居死亡率首位。在原发性卵巢癌中,上皮性卵巢癌为最常见的病理类型(约为60%-90%)。因此,本文针对上皮性卵巢癌中Livin、fhit的表达情况给予研究探索,同时对二者之间的关系进行分析整合,以期在上皮性卵巢癌的筛查阶段找到突破点,为临床早期诊断及治疗提供新的理论支持,进而改变卵巢癌的高死亡率。材料与方法:标本随机选取自2014年-2016年就诊于吉林大学中日联谊医院妇产科的住院患者100例,手术获取的卵巢组织作为研究标本,所有研究对象均经病理确诊并分类,这其中正常卵巢组织、良性卵巢组织各20例,交界性卵巢瘤组织10例,以及上皮性卵巢癌组织50例。经石蜡包埋切片后,利用免疫组化SP法染色制备玻片,显微镜下检测Livin、fhit在四种不同类型的卵巢组织中的翻译表达情况,分析二者在同一种卵巢组织中的表达结果及联系。结果:1.在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织、交界性卵巢瘤组织及上皮性卵巢癌组织中,Livin的阳性表达率明显不同,差异有统计学意义(P0.05)。组织病理学分级:低分化组阳性表达率明显高于高分化组及中分化组,三者比较,差异有统计学意义(p0.05);盆腔有无淋巴结转移对表达率无明显影响,无统计学意义(p>0.05)。2.在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织、交界性卵巢瘤组织及上皮性卵巢癌组织中,fhit的阳性表达率明显下降,差异有统计学意义(pfhit蛋白在正常卵巢组及卵巢良性肿瘤组的表达分别与上皮性卵巢癌组之间进行比较,fhit的表达差异明显,二者均具有统计学意义(p0.05)。组织病理学分级:低分化组阳性表达率明显低于高、中分化组阳性表达率,三者对比均有统计学意义(p0.05);盆腔有无淋巴结转移对fhit的表达率无明显影响(p>0.05)。***等级相关性分析结果显示,livin与fhit在上皮性卵巢癌的表达中呈负性相关。结论:***可能为一种上皮性卵巢癌的早期诊断标志,同时livin具有作为上皮性卵巢癌预后参考指标的可能性。***可能为一种上皮性卵巢癌的早期诊断标志,同时fhit具有作为上皮性卵巢癌预后参考指标的可能性。***、fhit的协同检测,可能提高上皮性卵巢癌的早期诊断率,并预测预后情况。

关键词： Livin基因 fhit基因上皮性卵巢癌免疫组化

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fhit基因在肺癌研究中的新进展

国外医学（呼吸系统分册） 2002年第1期22卷 11-13,16页

作者：吴镇洲李清泉湖北武汉大学人民医院呼吸内科武汉430060

fhit基因是近年来发现的基因,包括肺癌在内的多种肿瘤,特别是上皮性因环境致癌因素导致的肿瘤中常可检测出fhit基因的纯合性和杂合性缺失,对研究肺癌特别是吸烟相关性肺癌的发生机制、早期诊断和治疗的探索提供了新的思路。它可能通过与... 详细信息

fhit基因是近年来发现的基因,包括肺癌在内的多种肿瘤,特别是上皮性因环境致癌因素导致的肿瘤中常可检测出fhit基因的纯合性和杂合性缺失,对研究肺癌特别是吸烟相关性肺癌的发生机制、早期诊断和治疗的探索提供了新的思路。它可能通过与P53无关的途径诱导凋亡,从而抑制肿瘤的发生。

关键词： fhit基因肺癌发病机制早期诊断治疗吸烟