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ezh2蛋白在食管上皮永生化细胞、癌细胞和癌组织中的表达及意义

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EZH2蛋白在食管上皮永生化细胞、癌细胞和癌组织中的表达及意义

作者：彭燕汕头大学

学位级别：硕士

背景与目的 ezh2基因是1996年发现的一种新的人类基因,初始发现该基因定位于人染色体21q22.2,与唐氏综合征的发病相关;但后来的研究表明ezh2基因实际定位于染色体7q35,而位于21号染色体上的核酸序列是一个假基因。ezh2基因是果蝇E(z... 详细信息

背景与目的 ezh2基因是1996年发现的一种新的人类基因,初始发现该基因定位于人染色体21q22.2,与唐氏综合征的发病相关;但后来的研究表明ezh2基因实际定位于染色体7q35,而位于21号染色体上的核酸序列是一个假基因。ezh2基因是果蝇E(z)基因的同源基因,与细胞生长调节相关,通过抑制染色质中的靶基因而促进细胞增殖。ezh2蛋白作为转录抑制因子,在基因水平上抑制多种基因的活性,尤其明显抑制肿瘤转移抑制基因,表现为ezh2蛋白促进肿瘤细胞的侵袭转移。食管癌是世界十大恶性肿瘤之一,约70%的病例发生在中国,占我国恶性肿瘤病死率的第4位,潮汕地区是我国食管癌高发区之一,目前ezh2蛋白在食管癌中的表达及功能尚未见报道。本实验通过对食管永生化细胞、恶性转化细胞和食管癌组织ezh2蛋白的检测,观察ezh2蛋白在食管癌发生、演变过程中的表达变化:探讨ezh2蛋白与食管癌分化、分期和浸润、转移的关系。材料与方法 1.采用免疫细胞化学染色、免疫印迹分析,流式细胞术等检测食管上皮永生化细胞(SHEE)和恶性转化细胞(SHEEC)ezh2蛋白的表达。 2.使用食管鳞癌组织芯片(14例正常组织,16例癌旁组织和42例鳞癌组织;其中鳞癌Ⅰ级10例, Ⅱ级12例,Ⅲ级20例),食管腺癌组织芯片(高分化腺癌10例,中分化13例,低分化20例,食管正常组织37例)以及我院病理外检室食管鳞癌存档标本(共52例,其中浸润到粘膜至肌层23例,浸润到外膜层 29例,发生转移的30例,未发生转移的22例),通过免疫组织化学方法研究 ezh2蛋白的表达情况,分析不同病理分级、分期及侵袭转移的食管癌与ezh2 蛋白的关系。进一步通过免疫印迹半定量检测12例食管癌组织、癌旁组织及周围正常组织ezh2蛋白的表达。

关键词： ezh2蛋白食管癌癌旁组织 SHEE细胞 SHEEEC细胞

ezh2蛋白在食管上皮永生化细胞系和恶性转化细胞系中的表达

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中国组织化学与细胞化学杂志 2006年第2期15卷 225-229页

作者：陈海滨彭燕石玉秀汕头大学医学院组织学与胚胎学教研室汕头51503 中国医科大学组织学与胚胎学教研室沈阳110001

目的研究ezh2蛋白在食管上皮永生化细胞系(SHEE)和恶性转化细胞系(SHEEC)中的表达。方法采用免疫细胞化学染色、免疫印迹分析和流式细胞术检测两种细胞系ezh2蛋白的表达。结果两种细胞ezh2蛋白染色均呈阳性,阳性反应定位于细胞核,部分... 详细信息

目的研究ezh2蛋白在食管上皮永生化细胞系(SHEE)和恶性转化细胞系(SHEEC)中的表达。方法采用免疫细胞化学染色、免疫印迹分析和流式细胞术检测两种细胞系ezh2蛋白的表达。结果两种细胞ezh2蛋白染色均呈阳性,阳性反应定位于细胞核,部分细胞胞浆也有阳性着色。免疫印迹分析表明SHEEC细胞和SHEE细胞的总蛋白、核蛋白在分子质量约90ku的位置均出现特异性印迹条带。SHEE细胞中ezh2蛋白的表达强于SHEEC细胞(Pezh2蛋白在两种细胞中均有表达,两者的平均荧光强度无明显差别;阳性细胞率均较高,其中SHEE细胞阳性率高于SHEEC细胞。结论ezh2蛋白在SHEE细胞和SHEEC细胞中高表达可能参与了它们的恶性改变;而ezh2蛋白在两种细胞系中的差异表达可能与细胞的分化程度及来源于胚胎食管上皮细胞相关。

关键词： ezh2蛋白食管上皮永生化细胞系恶性转化细胞系人

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结直肠癌组织中ezh2蛋白阳性表达及意义

山东医药 2016年第8期56卷 52-53,56页

作者：姚坤厚魏伦收马万里胡军红河南大学淮河医院河南开封475001

目的探讨果蝇zeste基因增强子同源物2（ezh2）蛋白在结直肠癌发生、发展中的作用。方法选择结直肠癌组织52例份（结直肠癌组）及远癌正常肠组织22例份（正常组）,采用免疫组化SP法检测两组ezh2蛋白表达,并分析其阳性表达与结直肠癌患者... 详细信息

目的探讨果蝇zeste基因增强子同源物2（ezh2）蛋白在结直肠癌发生、发展中的作用。方法选择结直肠癌组织52例份（结直肠癌组）及远癌正常肠组织22例份（正常组）,采用免疫组化SP法检测两组ezh2蛋白表达,并分析其阳性表达与结直肠癌患者临床病理参数及预后的关系。结果结直肠癌组ezh2阳性表达率为69.2%（36/52）,正常组为4.5%（1/22）,二者比较P〈0.05。结直肠癌组ezh2阳性表达与患者性别、年龄、肿瘤部位及临床分型无关（P均〉0.05）,与组织分化程度、Duke分期及肿瘤直径有关（P均〈0.05）。ezh2阳性者3年无疾病进展生存率为49.8%,ezh2阴性者为79.6%,ezh2阳性者疾病进展风险显著高于阴性者（HR=2.91,95%CI为1.23~3.66,P〈0.05）。结论 ezh2蛋白阳性表达变化与结直肠癌发生、发展密切相关,可作为判断预后不良的指标。

关键词：结直肠癌 ezh2蛋白免疫组化临床病理特征预后

ezh2蛋白对人结肠癌细胞HCT116生物学行为的影响

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现代肿瘤医学 2015年第6期23卷 765-768页

作者：龙雪梅郭新远利川市人民医院重症医学科湖北利川445400

目的:探讨泛素连接酶ezh2蛋白对人结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、转移等生物学行为的影响。方法:设计合成特异性干扰ezh2蛋白表达的小干扰RNA,通过QPCR、Western blot技术检测转染小干扰RNA后的干扰效果;MTT法检测沉默ezh2蛋白表达对结... 详细信息

目的:探讨泛素连接酶ezh2蛋白对人结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭、转移等生物学行为的影响。方法:设计合成特异性干扰ezh2蛋白表达的小干扰RNA,通过QPCR、Western blot技术检测转染小干扰RNA后的干扰效果;MTT法检测沉默ezh2蛋白表达对结肠癌细胞系增殖的影响;流式细胞仪测定ezh2蛋白对结肠癌细胞凋亡的影响;Transwell实验检测ezh2蛋白对结肠癌细胞侵袭转移的影响。结果:设计合成的小干扰RNA能有效沉默ezh2蛋白的表达,ezh2蛋白被沉默后,人结肠癌细胞HCT116的增殖明显受到抑制,细胞的凋亡明显增加,侵袭与转移能力降低。结论:ezh2蛋白参与人结肠癌细胞HCT116生物学行为的调控,可能在结肠癌的发生发展中发挥着重要的作用,有望成为结肠癌治疗的新靶点。

关键词： ezh2蛋白 HCT116 生物学行为结肠癌

ezh2、p53蛋白表达与TNBC患者病理特征的关系

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四川医学 2018年第2期39卷 144-148页

作者：赵戈樊菁巫姜崔风强孟慧敏凌瑞王廷西安第四军医大学西京医院甲乳血管外科陕西西安710032

目的探讨果蝇zeste基因增强子同源物2(ezh2)、p53肿瘤蛋白在三阴性乳腺癌(TNBC)肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法选取我院收集的TNBC肿瘤标本120例(收集时间:2015年6月至2016年6月)作为TNBC组,同期收集的40例良性乳腺疾病切除组织(... 详细信息

目的探讨果蝇zeste基因增强子同源物2(ezh2)、p53肿瘤蛋白在三阴性乳腺癌(TNBC)肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法选取我院收集的TNBC肿瘤标本120例(收集时间:2015年6月至2016年6月)作为TNBC组,同期收集的40例良性乳腺疾病切除组织(良性组),采用免疫组化染色检测各组标本中ezh2、p53蛋白,探讨二者表达水平与患者临床病理学特征的关系。结果 NBC组的ezh2蛋白、p53蛋白阳性表达水平分别为56.67%、50.83%,良性组分别为20.00%、17.50%,两组比较差异有统计学意义(Pezh2蛋白阳性表达与患者的肿瘤直径、TNM分期有关(P蛋白阳性表达与患者的组织学分级、淋巴结转移有关(Pezh2蛋白、p53蛋白阳性表达水平显著高于乳腺良性病变组织,并且与肿瘤的病理特征有一定的相关性。

关键词： ezh2蛋白 p53蛋白三阴性乳腺癌临床病理特征

乳腺癌组织中钙结合蛋白S100A4和ezh2的表达水平及临床意义

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中国妇幼保健 2015年第32期30卷 5662-5664页

作者：吕巧妹金春英张红娟荆雷辽宁省丹东市中心医院肿瘤科 118000

目的探讨乳腺癌组织钙离子结合蛋白S100A4、ezh2蛋白的表达变化及与患者临床病理特征的关系。方法选择该院2008-2014年收治的87例诊疗、随访资料完整的乳腺癌患者作为病例组,选取该院病理科收集的30例健康妇女乳腺组织标本作为健康组,... 详细信息

目的探讨乳腺癌组织钙离子结合蛋白S100A4、ezh2蛋白的表达变化及与患者临床病理特征的关系。方法选择该院2008-2014年收治的87例诊疗、随访资料完整的乳腺癌患者作为病例组,选取该院病理科收集的30例健康妇女乳腺组织标本作为健康组,采用免疫组化法检测两组标本中S100A4、ezh2蛋白表达情况;统计分析S100A4、ezh2蛋白表达与患者临床病理特征的关系。结果病例组的S100A4阳性率为80.46%、ezh2阳性率为78.16%均显著高于健康组的19.54%、21.84%,且差异均具有统计学意义(Pezh2的阳性表达与患者的是否发生淋巴结转移、组织学分级程度、TNM分期具有显著的关系(Pezh2蛋白的表达增强,同时与患者的淋巴结转移、临床分析、组织学分级具有一定的关系。

关键词：乳腺癌钙离子结合蛋白S100A4 ezh2蛋白病理特征

ezh2和P27蛋白在前列腺癌及前列腺良性增生组织中的表达及其临床意义

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世界最新医学信息文摘 2015年第51期 31-31页

作者：蔡勇邓建松武汉市东西湖区人民医院华中科技大学同济医学院附属梨园医院

目的分析ezh2和P27蛋白在前列腺癌及前列腺良性增生组织中的表达及其临床意义。方法选择2012年1月份至2015年1月份期间在我院进行治疗的47例前列腺癌(30例)和前列腺良性增生组织(17例)患者的手术切除的病理组织标本为研究对象,采用免疫... 详细信息

目的分析ezh2和P27蛋白在前列腺癌及前列腺良性增生组织中的表达及其临床意义。方法选择2012年1月份至2015年1月份期间在我院进行治疗的47例前列腺癌(30例)和前列腺良性增生组织(17例)患者的手术切除的病理组织标本为研究对象,采用免疫组织二步检查法进行前列腺癌及前列腺良性增生组织中ezh2和P27蛋白表达情况,分析其临床意义。结果 ezh2蛋白在前列腺癌及前列腺良性增生组织中的表达阳性者分别为26例和7例,阳性率为86.7%和41.2%,P27蛋白前列腺癌及前列腺良性增生组织中的表达阳性者分别为12例和13例,阳性率为40.0%和76.5%,相比较,ezh2和P27蛋白的表达差异均具有统计学意义(Pezh2和P27蛋白在前列腺癌及前列腺良性增生组织中的表达对其诊断和预后具有重要的意义,使用ezh2和P27蛋白检测具有临床推广的应用价值。

关键词： ezh2蛋白 P27蛋白前列腺癌前列腺良性增生组织

下调ezh2表达促进卵巢癌细胞衰老的机制研究

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中国病理生理杂志 2019年第9期35卷 1565-1572页

作者：徐杨彭慧苏雪莲济南市第五人民医院妇产科

目的:探讨下调 ezh2 表达促进卵巢癌细胞衰老的分子机制。方法:采用real-time PCR、Western blot及免疫组化检测卵巢癌组织和正常组织及4种卵巢癌细胞和人正常卵巢上皮细胞IOSE80中ezh2的表达水平;运用脂质体2000转染法将 ezh2 小干扰RN... 详细信息

目的:探讨下调 ezh2 表达促进卵巢癌细胞衰老的分子机制。方法:采用real-time PCR、Western blot及免疫组化检测卵巢癌组织和正常组织及4种卵巢癌细胞和人正常卵巢上皮细胞IOSE80中ezh2的表达水平;运用脂质体2000转染法将 ezh2 小干扰RNA转染,或将GSK126作用于卵巢癌细胞和IOSE80细胞,siRNA转染的IOSE80细胞经5 Gy电离辐射照射,以阴性对照siRNA为对照。MTT法、集落形成实验、流式细胞术和SA-β-Gal染色法检测细胞增殖、凋亡率和细胞衰老情况;Western blot检测ezh2、p53、p21、p16、caspase-3、cleaved caspase-3、PARP、cleaved PARP、H3K27me3、H3K27me2和H3K27me1的蛋白水平。结果: ezh2在卵巢癌组织和4种卵巢癌细胞中的表达水平均显著高于正常组织和IOSE80细胞( P ezh2 表达显著抑制卵巢癌细胞的增殖,促进电离辐射诱导的细胞衰老,其作用与GSK126处理的细胞表型相一致。Western blot检测发现敲减 ezh2 表达明显抑制H3K27me3的表达,促进p53、p21和p16的表达( P 蛋白的水平无影响。结论: ezh2在卵巢癌组织和卵巢癌细胞中高表达。敲减 ezh2 表达通过降低H3K27me3水平促进卵巢癌细胞衰老,从而抑制细胞增殖。

关键词：卵巢癌 ezh2蛋白电离辐射细胞衰老细胞增殖

凋亡蛋白酶活化因子-1基因在贲门腺癌中的甲基化状态及其临床意义

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中国肿瘤生物治疗杂志 2012年第5期19卷 526-530页

作者：马洪亮郭炜郭艳丽邝钢杨植彬董稚明河北医科大学第四医院麻醉科河北石家庄050011 河北医科大学第四医院河北省肿瘤研究所病理研究室河北石家庄050011

目的:探讨贲门腺癌(gastric cardiac adenocarcinoma,GCA)中凋亡蛋白酶活化因子-1(apoptosis protease activatingfactor-1,Apaf-1)基因启动子区甲基化状态及其与果蝇zeste基因增强子人类同源物2(enhancer of zeste homolog 2,ezh2)蛋白表达之间的相关性。方法:应用甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)检测GCA组织及癌旁组织中Apaf-1基因甲基化状态,应用免疫组织化学法检测GCA组织及癌旁组织中Apaf-1和ezh2蛋白的表达情况。结果:GCA组织中Apaf-1基因甲基化率显著高于癌旁组织[49.6%(62/125)vs 4.0%(5/125),P0.05)。GCA组织中Apaf-1蛋白表达阳性率显著低于相应癌旁组织(39.2%vs 96.0%,Pezh2蛋白表达阳性率显著高于相应癌旁组织(74.4%vs 11.2%,P蛋白的表达呈负相关。结论:GCA组织中Apaf-1基因启动子区呈高甲基化,Apaf-1和ezh2蛋白可能共同参与了GCA的发展。

关键词：贲门腺癌凋亡蛋白酶活化因子-1基因(Apaf-1) DNA甲基化 ezh2蛋白