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The Comparison of Genetic Variation in the Envelope Protein Between Various Immunodeficiency Viruses and Equine Infectious Anemia Virus

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Virologica Sinica 2012年第4期27卷 241-247页

作者： Qing Yuan Chang Liu Zhipin Liang Xueqing Chen Danhong Diao Xiaohong Kong Laboratory of Medical Molecular Virology School of MedicineNankai UniversityTianjin 300071China

The envelope protein(Env) of lentiviruses such as HIV,SIV,FIV and eiav is larger than that of other retroviruses.The Chinese eiav attenuated vaccine is based on Env and has helped to successfully control this virus,demonstrating that envelope is crucial for vaccine.We compared Env variation of the four kinds of lentiviruses.Phylogenetic analysis showed that the evolutionary relationship of Env between HIV and SIV was the closest and they appeared to descend from a common ancestor,and the relationship of HIV and eiav was the furthest.eiav had the shortest Env length and the least number of potential N-linked glycosylation sites(PNGS) as well as glycosylation density compared to various immunodeficiency viruses.However,HIV had the longest Env length and the most PNGS.Moreover,the alignment of HIV and SIV showed that PNGS were primarily distributed within extracellular membrane protein gp120 rather than transmembrane gp41.It implies that the size difference among these viruses is associated with a lentivirus specific function and also the diversity of env.There are low levels of modification of glycosylation sites of Env and selection of optimal protective epitopes might be useful for development of an effective vaccine against HIV/AIDS.

关键词：马传染性贫血病毒包膜蛋白免疫缺陷病毒遗传变异环境保护艾滋病毒 eiav 弱毒疫苗

High-Efficiency Rescue of Equine Infectious Anemia Virus from a CMV-Driven Infectious Clone

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Virologica Sinica 2019年第6期34卷 725-728页

作者： Xue-Feng Wang Bowen Bai Yuezhi Lin Ting Qi Cheng Du Mingxin Song Xiaojun Wang College of Veterinary Medicine Northeast Agricultural UniversityHarbin 150030China State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology Harbin Veterinary Research Institute of the Chinese Academy of Agricultural SciencesHarbin 150069China

Dear Editor,Equine infectious anemia virus(eiav)belongs to the macrophage-tropic lentiviruses family and infects mainly equines,including horses,donkeys and mules.eiav shares many similar characteristics in its viral biology and host-virus immune regulation with other lentiviruses,such as human immunodeficiency virus type 1(HIV-1)and simian immunodeficiency virus(SIV),and has been accepted as a model for the study of other lentiviruses,especially HTV-1(Craigo and Montelaro 2013).Specifically,in the 1970s,Chinese scientists developed an attenuated eiav vaccine and by using this vaccine,China has successfully controlled eiav prevalence.This vaccine provides a meaningful reference for lentivirus research(Wang et al.2016).

关键词： eiav Infectious Rescue

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eiav减毒疫苗诱导的特异性细胞免疫应答

细胞与分子免疫学杂志 2006年第1期22卷 115-118页

作者：张晓燕李红梅梁华沈弢马燕相文华沈荣显邵一鸣中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心病毒与免疫研究室北京100050 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150001

目的研究马传染性贫血病毒(eiav)减毒疫苗株接种动物体内诱导的细胞免疫学反应。方法选用健康没有eiav感染的马,接种eiav减毒疫苗株DLV,运用流式细胞术检测疫苗株诱导的马外周血单核细胞(PBMC)中CD4和CD8阳性淋巴细胞数量的变化,以及3H... 详细信息

目的研究马传染性贫血病毒(eiav)减毒疫苗株接种动物体内诱导的细胞免疫学反应。方法选用健康没有eiav感染的马,接种eiav减毒疫苗株DLV,运用流式细胞术检测疫苗株诱导的马外周血单核细胞(PBMC)中CD4和CD8阳性淋巴细胞数量的变化,以及3H测定特异性淋巴细胞增殖反应和51Cr释放实验测定淋巴细胞杀伤反应。结果eiav减毒疫苗株DLV免疫动物后,能够引起CD8+细胞明显增加,免疫马PBMC在eiav刺激下,引起eiav特异性淋巴细胞增殖反应(SI≥3),并能检测出eiav特异性CTL活性,靶细胞杀伤百分率高于30%。结论eiav减毒疫苗株DLV免疫动物能够引起特异性eiav细胞免疫反应,极有可能参与宿主的保护免疫作用。

关键词： eiav 减毒疫苗细胞免疫马

重组杆状病毒表达的eiavEnv蛋白与含有env基因重组痘苗病毒的联合免疫

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第4期20卷 410-414页

作者：代春铭张晓燕张然然邵一鸣沈荣显中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防与控制中心病毒免疫室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所疫病室黑龙江哈尔滨150001

目的 :构建新型的马传染性贫血病毒 (eiav)的候选疫苗。方法 :利用BAC To BAC杆状病毒表达系统 ,将中国马传贫驴白细胞弱毒疫苗 (eiavDLV)及其亲本株 (eiavLN)env基因导入到杆状病毒基因组中。转染昆虫细胞后 ,得到的重组病毒用SDS PAGE... 详细信息

目的 :构建新型的马传染性贫血病毒 (eiav)的候选疫苗。方法 :利用BAC To BAC杆状病毒表达系统 ,将中国马传贫驴白细胞弱毒疫苗 (eiavDLV)及其亲本株 (eiavLN)env基因导入到杆状病毒基因组中。转染昆虫细胞后 ,得到的重组病毒用SDS PAGE和Westernblot检测表达产物。以本实验室构建的含有eiavenv基因的重组痘苗病毒 ,单独或与重组杆状病毒表达的eiavEnv蛋白联合免疫小鼠。结果 :构建的重组杆状病毒能正确表达全长Env蛋白。与单独免疫组相比 ,联合免疫组免疫应答显著增强 ,其中中和抗体的滴度提高5～ 9倍。结论 :含有eiavenv基因的重组痘苗病毒与Env蛋白抗原联合免疫 ,能够诱导高滴度的中和抗体。

关键词： eiav Env蛋白重组杆状病毒重组痘苗病毒免疫应答

SCREENING ANTI-HIV CHINESE MATERIA MEDICA WITH HIV AND EQUINE INFECTIOUS ANEMIC VIRUS REVERSE TRANSCRIPT ASE

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Journal of Traditional Chinese Medicine 1994年第1期14卷 10-13页

作者：唐小山陈鸿珊张兴权权可久孙明 Institute of Medical Biotechnology CAMS Beijing 100050 Institute of Prevention and Treatment of Army Horse Diseases Logistics Deprtment of Beijing Military Region

The inhibitory activities of human immunodeficiency virus reverse transcriptase (HIV-RT) inhibitors PFA and Suramine against HIV-RT and equine infectious anemic virus reverse transcritptase (eiav-RT) were studied in this paper. The 50% inhibitory concentration (IC50) of HIV-RT and eiav-RT treated by PFA and Suramine were 0.2 μmol, 9.8 μmol and 17 μmol, 19.9 μmol, respectively. More than thirty Chinese medicines, including recipes, herbs, extracts of traditional materia medica and isolated compounds were tested using HIV-RT and eiav-RT as target enzymes. It was found that 5 crude extracts such as Rhizoma Polygoni Cuspidati, and Radix Notoginseng, 7 isolated compounds like Flavone of Ramulus Visci, Flavone of Ajuga Decumbens Thumb, and Aristolochic acid, as well as the extract of the complex prescription Xiao Chai Hu Tang (小柴胡汤) have shown various inhibitory actions on these two enzymes. The activities of the two enzymes were comparable, but HIV-RT was more sensitive, suggesting that HIV-RT can be used as index for the screening of anti-aids drugs.

关键词： extracts eiav prescription materia Radix screening transcriptase comparable Thumb medicines

马传染性贫血发病过程中细胞毒性T细胞的作用及其表位研究进展

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病毒学报 2007年第1期23卷 76-78页

作者：马建孔宪刚沈荣显周建华中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

马传染性贫血（Equine infectious anemia, EIA）是马属动物感染的一种主要经由虫媒传播的传染性疾病。该病的临床表征为反复发热、贫血、出血、水肿以及消瘦等，病理生理变化以血小板减少为主。EIA的致病原为马传染性贫血病毒（Equine... 详细信息

马传染性贫血（Equine infectious anemia, EIA）是马属动物感染的一种主要经由虫媒传播的传染性疾病。该病的临床表征为反复发热、贫血、出血、水肿以及消瘦等，病理生理变化以血小板减少为主。EIA的致病原为马传染性贫血病毒（Equine infectious anemia virus, eiav），该病毒与人类免疫缺陷病毒;（Human immunodeficiency virus, HIV），猴免疫缺陷病毒（Simian immunodeficiency virus, SIV）等同属反转录病毒科，慢病毒属。EIA与HIV引起的人艾滋病和SIV引起的猴艾滋病在疾病特征上具有一定的相似性。然而，感染eiav的多数马往往在经过一年左右的反复发热和与之相关联的病毒血症之后，最终能够控制住病毒在体内的复制（而非清除），转归为无明显临床症状的eiav隐性携带马。这与人在感染HIV8～10年后几乎100％转归死亡是有明显差别的。也正是由于这一差别，研究马与eiav之间相互作用的机理，可作为研究HIV等慢病毒致病机理和防治策略的良好动物模型。因此，人们对EIA发病及控制机理有了更多的关注和研究。其中，细胞毒性T细胞（Cytotoxic T lymphocyte，CTL）在病毒感染控制过程中起主要作用这一观点，随着相关研究的逐步深入，越来越得到人们的认同。[第一段]

关键词：马传染性贫血病毒细胞毒性发病过程 T细胞猴免疫缺陷病毒人类免疫缺陷病毒 virus eiav

eiav Rev蛋白拮抗eqTRIM5α介导的AP-1信号通路的机制研究

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中国预防兽医学报 2020年第1期42卷 12-17页

作者：宋丹丹那雷王晓钧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为探究马传染性贫血病毒(eiav)附属蛋白Rev负调控Tripartite motif-containing protein 5α(TRIM5α)介导的AP-1信号通路的机制,本研究将peiav-Rev-HA和pcDNA3.1质粒分别与含TRIM5α基因的质粒及pGL3-AP-1-Luc(AP-1报告质粒)共转染HEK 293T细胞,采用荧光素酶试验检测Rev对TRIM5α激活的AP-1信号通路的影响;将peiav-Rev-HA和pcDNA3.1质粒分别与含TAK1、TAB2、P38和c-Jun基因的质粒及pGL3-AP-1-Luc共转染HEK 293T细胞,采用荧光素酶试验检测Rev对TRIM5α下游转导分子(TAK1、TAB2、P38、c-Jun)激活的AP-1信号通路的影响;将peiav-Rev-HA和pcDNA3.1质粒分别与含TAK1、TAB2、P38基因的质粒共转染HEK293T细胞,利用western blot试验分别检测TAK1、TAB2、P38的表达水平;将peiav-Rev-HA和pcDNA3.1质粒分别与含P38基因的质粒共转染HEK 293T细胞后加入蛋白酶体抑制剂MG132,利用western blot检测P38蛋白的表达情况。结果显示,共转染eiav-Rev-HA实验组中TRIM5α对AP-1的激活倍数为0.4,而共转染pcDNA3.1对照组中相应的激活倍数为26.0;共转染peiav-Rev-HA实验组中,TAK1、TAB2、P38和c-Jun对AP-1信号通路的激活倍数分别为7.7、0.1、0.6、9.8,而共转染pcDNA3.1对照组中对AP-1信号通路的激活倍数分别为60.0、1.5、6.3、12.0;转染peiav-Rev-HA+pP38-Flag组与转染pcDNA3.1+pP38-Flag组相比,前者P38蛋白的表达量显著降低;加入蛋白酶体抑制剂组则恢复了P38蛋白的表达。上述结果表明,eiav Rev显著下调eqTRIM5α及其下游转导分子TAK1、TAB2、P38激活的AP-1信号通路,但不显著下调c-Jun激活的AP-1信号通路;eiav Rev通过蛋白酶体途径降解P38蛋白的表达而抑制eqTRIM5α激活的AP-1信号通路。本研究结果为理解eiav与宿主蛋白相互作用提供参考依据。

关键词： eiav TRIM5α Rev P38

eiav驴白细胞弱毒疫苗株减毒过程第61代毒前病毒全基因组DNA的克隆与分析

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中国预防兽医学报 2008年第9期30卷 705-710页

作者：赵薇薇王雪峰马建吕晓玲赵玉军周建华沈阳农业大学畜牧兽医学院辽宁沈阳110161 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

马传染性贫血病毒(eiav)弱毒株DLV是eiav驴强毒株DV在驴白细胞中传代125代减毒而成。为阐明eiav疫苗致弱及作用机理,本研究克隆和分析了减毒过程中第61代毒前病毒基因组DNA。以该代次毒基因组DNA为模板,设计了特异性引物,进行3次LA-PCR(... 详细信息

马传染性贫血病毒(eiav)弱毒株DLV是eiav驴强毒株DV在驴白细胞中传代125代减毒而成。为阐明eiav疫苗致弱及作用机理,本研究克隆和分析了减毒过程中第61代毒前病毒基因组DNA。以该代次毒基因组DNA为模板,设计了特异性引物,进行3次LA-PCR(Long accurate PCR)扩增,均获得了7941bp的DNA片段,并将PCR产物克隆至pMD18-T载体。经PCR鉴定、酶切鉴定及核酸序列测定,得到了16株DLV第61代的全基因组克隆及其基因组核苷酸序列。根据所测序列,对该基因组中各主要基因序列的多样性以及与已发表的我国eiav强毒辽宁株LV和疫苗株DLV等的相应序列进行了比较分析。本研究结果为进一步探讨马传贫疫苗的致弱机理及免疫保护机制提供了有益的参考数据。

关键词： eiav PCR 序列分析

eiav减毒疫苗克隆株诱导体液免疫反应的时相研究

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中国预防兽医学报 2009年第2期31卷 156-160页

作者：阳凯孟庆来陈新江马燕相文华张耀洲邵一鸣张晓燕中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心／传染病预防控制国家重点实验室北京100050 浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所浙江杭州310018 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150001

为研究马传染性贫血病毒病(eiav)减毒疫苗免疫动物后体液免疫反应的成熟时相,选用健康马4匹,2匹接种eiav感染性克隆减毒疫苗pLGFD3毒后,另2匹接种生理盐水做对照,接种后定期采集血样,采用ELISA方法检测各个时相点血清中gp90,p26的结合... 详细信息

为研究马传染性贫血病毒病(eiav)减毒疫苗免疫动物后体液免疫反应的成熟时相,选用健康马4匹,2匹接种eiav感染性克隆减毒疫苗pLGFD3毒后,另2匹接种生理盐水做对照,接种后定期采集血样,采用ELISA方法检测各个时相点血清中gp90,p26的结合抗体滴度,并采用细胞蚀斑染色检测病毒中和抗体滴度,分析抗体反应的规律。结果显示,感染性克隆pLGFD3毒免疫后,针对envgp90和gagp26蛋白均产生了特异性的体液免疫反应,gp90结合抗体在2个半月左右达峰值,随后尽管有轻微的波动,一直维持在较高的水平直至免疫后5～6个月,随后开始轻微回落,在免疫后32个月时仍能检测到抗体的稳定存在,而p26结合抗体在1～2个月左右达峰值后则呈明显回落,在4个月时降至检测水平以下。gp90诱导的特异性中和抗体的水平同样在2个月左右达峰值,在整个观测期内持续稳定存在。结果表明,eiav感染性克隆减毒疫苗免疫后,能诱导产生特异性的gp90,p26结合抗体以及中和抗体,而且gp90特异性抗体和中和抗体可持续稳定存在,这些抗体可能参与减毒疫苗诱导的免疫保护作用。

关键词： eiav 减毒疫苗体液免疫